Principe de Dosage biochimique :

Glycémie , Hb glyquée ; fer sérique

La glycémie
 Définition
La Glycémie appelée aussi taux de sucre ou taux de
glucose dans le sang ou plus exactement dans le
plasma, elle est mesuré en générale par millimoles
de glucose par litre de sang, en milligrammes de
glucose par décilitre de sang ou encore en grammes
de glucose par litre de sang .
 Indication
Ce test est indiqué lors d’une suspicion d’une hyper ou hypoglycémie
ou pour la surveillance du diabète
La fréquence des dosages de la glycémie dépend des circonstances.
Généralement, en l'absence d'antécédents de diabète ou de facteurs de
risque, il est conseillé de vérifier la glycémie une fois par an, à
l'occasion d'une prise de sang.
En revanche, pour les personnes diabétiques ou celles présentant des
facteurs de risque de développer un diabète, la fréquence des dosages de
la glycémie est plus élevée.
 Facteurs influençant
Certaines substances comme l’insuline font
diminuer la glycémie, tandis que d'autres, comme
le glucagon, l’adrénaline ou l’hormone de
croissance, la font augmenter.
L'alimentation et l'activité physique influent
également sur la glycémie.
Démarche de dosage au niveau du laboratoire
 Prélèvement

Effectué à jeun sur tube hépariné, ce dernier doit être

centrifugé rapidement pour prévenir la glycolyse et être
ensuite décanté
Il est également possible de conserver le plasma ou
sérum hépariné 8h à 25 °C ou 72h a 2-8 °C.
 Principe de la méthode utilisé

Méthode de Trinder (méthode enzymatique des

hexokinases) le glucose est réduit par la GOD en acide
gluconique et H2O2.qui réagit en présence de POD
avec le chloro-4-phenol et le RAP (4-amino-antipyrine)
pour former une quinonéimine rouge.
L’absorbance du complexe coloré proportionnelle a la
concentration du glucose dans le spécimen et mesuré à
500 nm.
 Interprétation des résultats :

Hypoglycémie Inférieur à 0.60g/l

Glycémie normale A jeun : entre 0.70g/l et 1.10g/l
1h30 après un repas : inférieur à
 
1.40g/l
à jeun Supérieur à 1.10g/l
Hyperglycémie
L’hémoglobine glyquée : HbA1c
 Définition

L’hémoglobine glyquée ou glycosylée (que l’on note parfois

HbA1c) est une forme particulière d’hémoglobine. C’est une
hémoglobine sur laquelle s'est fixée une molécule de glucose.
Il existe un lien proportionnel entre le taux d’HbA1c et le
taux de glucose sanguin. Plus le pourcentage d’hémoglobine
glyquée dans le sang est élevé, plus la glycémie (taux de
glucose dans le sang) moyenne est élevée.
 Indication

le dosage de l’hémoglobine glyquée est donc utilisé

pour le suivi des personnes diabétiques, en
complément du dosage de la glycémie.
La glycémie reflète le taux de sucre instantané dans
le sang, alors que le taux d’hémoglobine glyquée
reflète l’équilibre global du diabète, c’est-à-dire son
degré de contrôle.
 Facteurs influençant

L’Hb1C est indépendante des variations journalière

de la glycémie et n’est pas affecté par le jeune ,
l’exercice physique ni par l’ingestion des récente des
sucres .
Démarche de dosage au niveau du laboratoire
 Prélèvement

Le dosage de l’hémoglobine glyquée s’effectue par

prise de sang sur tube EDTA . Il est préconisé à
intervalles réguliers, tous les 3 mois (120 jours
environ qui correspond a la duré de vie d’une
globule rouge ) (4 fois par an selon la Haute
Autorité de Santé en France).
Il n’est pas nécessaire d’être à jeun pour la prise
de sang.
 Principe de la méthode utilisé

La méthode utilisé par l’appareil bio-rad est une méthode

chromatographique HPLC.
Le sang est hémolysé automatiquement puis injecté a travers la
colonne qui est constitué d’une résine échangeuse d’ions.
L’appareil va effectuer une séparation des fractions de
l’hémoglobine en utilisant 3 tampons de concentrations salines
différentes .Ces fraction vont être détecté par une lecture
spectrophotométrique a 415 nm.
Dans un sang normal ( dont la structure de l’hémoglobine
n’est pas modifié ) 6 fractions sont identifiés et quantifiés :
HbA1a , HbA1b, HbF, HbA1c labile , HbA1c stable ,
HbA0
Le rapport entre les différentes fraction effectué par le
calcul de l’air des pics.
 Interprétation des résultats

La valeur de HbA1c doit être inferieur a 7 %.

Si l’HbA1c est trop élevée, c’est le signe que le
diabète est mal contrôlé et qu’il faut ajuster les
traitements.
Le fer sérique
 Définition

"Le fer est un constituant indispensable de l'hémoglobine,

qui permet aux globules rouges de transporter
l'oxygène dans l'organisme. Le statut en fer peut être évalué
par plusieurs examens dont la concentration en fer sérique" 
Le fer sérique désigne le taux de fer qui n'est pas fixé aux
globules rouges mais qui est en circulation dans le sérum
sanguin (ou plasma). 
 Indication
Lorsque l'hémoglobine ou l'hématocrite sont
anormaux, ou face à certains symptômes, le dosage
du fer sérique peut être prescrit pour mieux en
connaître les raisons. Le dosage du fer sérique
permet aussi, au cours du traitement d'une carence
en fer, de savoir si celui-ci est correctement
absorbé. 
 fer sérique est généralement indiqué en seconde
intention après ceux de la ferritine et de la transferrine,
 Facteurs influençant

La grossesse modifie les résultats, normalement à la

baisse. Une transfusion récente augmente le fer dans
le sang. Parmi les médicaments, l'utilisation des
contraceptifs oraux augmentent le fer dans le sang et
la capacité de fixation du fer.
A. Démarche de dosage au niveau du laboratoire
1. Prélèvement
Les examens sont basés sur un prélèvement de sang veineux
avec garrot enlevé le plus rapidement possible sur tube hépariné
Le prélèvement sera réalisé de préférence le matin (période de
la journée durant laquelle le fer est le plus élevé) mais il n'est
pas indispensable d'être à jeun. Il est demandé d’indiquer
d'éventuels traitements en cours.
 Principe de la méthode utilisé
L’acide ascorbique réduit le fer ferrique en fer ferreux (Fe2+). La
ferrozine forme avec le fer ferreux, un complexe coloré soluble,
mesurable de 560 à 580 nm.
Fer sérique = [ (DO Echant. - DO blanc Echant.) /DO Standard] x n
mg/l : n = 1
µmol / l : n = 17.9
 Interprétation des résultats

Le taux de fer dans le sang est normalement

compris entre 60 et 170 μg/dl (microgrammes
par décilitre) chez les hommes et entre 50 et
160 μg/dl chez les femmes.
Mercie pour votre attention