NIVELES DE ORGANIZACIÓN

DEL DNA
MARIA CRUZ BRICEÑO
DTPO ACADEMICO MORFOLOGIA HUMANA FFCCMM.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
 DNA HUMANO
•DNA NUCLEAR: 99.9995 %
•DNA MITOCONDRIAL: 0.0005 %
 DNA NUCLEAR
Pares de base:3,2x109 pb (≈1.5 cm)
DNA : 3 % Codifica 97% No codifica
Cromosom as: 22 - X - Y ( 50 – 263Mb)
juegos de cromosomas por célula (óvulo/espermatozoide/ eritrocitos)
Se visualizan por: Bandeo / hibridación con sondas fluorescentes
LOS CROMOSOMAS

Son albergados en núcleos de 6 µm

Son homólogos / no homólogos (XY)

Conforman el cariotipo

Revelan perdidas o desplazamientos

Contienen genes: 25000

 DNA NUCLEAR
Característica Genoma Humano
Longitud 3,2 x 109
Número de genes Aprox 25000
Gen mas grande 2,4 x 106

Tamaño medio de un gen 27000 pn

Nº mínimo de exones por gen 1

Nº máximo de exones por gen 176

Promedio de exones por gen 10,4

Tamaño de Exón mas grande 17,106 pn

Tamaño promedio de los exones 145 pb

Nº de pseudogenes Mas de 20000

% de DNA en exones 1,5 %

1 nt = mm
% de DNA altamente conservado 3,5 %
Genoma = 3200 Km
% de DNA altamente repetida 50 % aprox.
CARACTERISTICAS

Secuencias codificadoras en porcentaje pequeño

Secuencias No codificadoras; cortas , móviles ,
inestables en la evolución
 CARACTERISTICAS
Tamaño de los genes : 27000 pb en promedio
 Contienen:
Exones
Intrones
Secuencias reguladoras

Tienen miles de pn
Activa/desactiva genes en:
- Momento preciso
- Nivel apropiado
- Célula específica
CARACTERISTICAS
Presenta secuencias Conservadas
1/3 Secuencias Codifican proteínas
2/3 Secuencias conservadas no codificantes
Lugares de unión a proteínas reguladoras
Secuencias que producen ARN
De función desconocida
 NIVELES DE ORGANIZACIÓN DEL
DNA: CROMOSOMAS
INTERFASICO MITOTICO
 Se duplica  Se separa y reparte a
 Se empaqueta 500 veces células hijas
 Se empaqueta 10000
veces
ELEMENTOS DEL CROMOSOMA
EMPAQUETAMIENTO DEL
CROMOSOMA (DNA)
MODELO DE 15 cm.
EMPAQUETAMIENTO
1,5 cm
Proteínas
0,3 cm..
 Histonas
No histonas
50 μm
condensado
1/3000

CROMOSOMA 1
Condensado
1/10000
 CROMATINA 11 nm
NUCLEOSOMA

CROMATOSOMA DNA ESPACIADOR

80 pb
NUCLEO DEL
NUCLEOSOMA H1
DNA 147 pb
1,7 vueltas
Histonas: H2A ,

H2B, H3, H4
•DNA interfásico 147
30nm

Nucleosomas
11 nm
NUCLEOSOMA
HISTONAS: Proteínas pequeñas / Sec. Conservadas
Estructura: dominio de pliegue – colas terminales

PRINCIPALES PROTEINAS DE LAS HISTONAS

HISTONA PM N° DE % DE LISINA
AMINOÁCIDOS + ARGININA
H1 22500 244 30.8
H2A 13960 129 20.2
H2B 13774 125 22.4
H3 15273 135 22.9
H4 11236 102 24.5
EMSAMBLAJE DE LAS HISTONAS

- 142 enlaces de hidrogeno entre

esqueleto de aa
esqueleto fosfodiester ADN

- Interacciones hidrofóbicas

- Uniones salinas
NÚCLEO DEL
NUCLEOSOMA
POSICIÓN DE LOS NUCLEOSOMAS
ESTÁ DETERMINADO POR:
•Secuencia del DNA

•Presencia y naturaleza de proteínas unidas al DNA

DINAMICA DE LOS NUCLEOSOMAS
Determinado por:
a. Complejos remodeladores de la cromatina
dependientes de ATP
b. Proteínas con carga negativa y chaperoninas

Consecuencia:
 Permite el acceso de otras proteínas al DNA
nucleosómico en especial los implicados en:
 Expresión de los genes
 Replicación
 Reparación del DNA
a. Complejos remodeladores de la cromatina dependientes
de ATP
b.Proteínas con cargas negativas – chaperoninas
Catalizan el recambio de H2A-H2B
 a. Complejos remodeladores de la cromatina
Mecanismo cíclico de rotura y la reorganización de los nucleosomas

Varios ciclos permiten el

desplazamiento del
nuclosoma
FIBRA CROMATINICA DE 30 nm
Los nucleosomas se empaquetan uno sobre otro y
adoptan posiciones en las que el DNA se encuentra
mas condensado : mosaico fluido
Modelos:
a. Zig-Zag depende de DNA espaciador y proteínas.
b. Solenoide
Las interacciones nucleosoma –nucleosoma
está dada por:
Colas de histonas del nucleosoma

Histona H1
Son histonas de enlace
Mas grandes y menos conservadas
Provocan cambio de sentido del DNA
La fibra de 30 nm es menos uniforme ------ es dinámica
Regiones que se despliegan y se vuelven a plegar
Son regiones en transcripción en forma extendida
REGULACION DE LA ESTRUCTURA DE LA CROMATINA

• Diversas estructuras de cromatina en diferentes

regiones del genoma
• Herencia de las estructura cromatínicas:
 Modelos de cromatina
HETEROCROMATINA EUCROMATINA
• Mas condensada • Menos condensada
• Concentrada en telómeros, – Mayormente en 30 nm
lazos de 50 – 100 kb
centrómeros
– 10 % se presentan en
• Mas del 10 % del genoma estado menos condensado
de una célula 10nm
• Pobre en genes
• Resistente a la expresión
génica
• Tipos; Constitutiva,
facultativa
b. Modificaciones covalentes de las histonas
Lugares de modificación:

• En las colas N- terminales de las histonas

Cambios:
Acetilación
Metilación
Fosforilación
Ubiquitinacón
Modificaciones en cadenas laterales en el núcleo nucleosómico

Enzima: transferasas
CONSECUENCIAS
Afectan la estabilidad de la fibra de 30 nm y estructuras
superiores
Atraer proteínas específicas que empaquetan / dan acceso
al DNA

Facilita el acceso de proteínas Facilita el acceso de DNA,

para empaquetar la cromatina facilita el ensamblaje de
•ARN polimerasas
•FT
 CROMATINA Y VARIANTES DE HISTONAS

•Histonas variantes
• Se sintetizan en interfase
•Se insertan en cromatina ya formada -- requieren de
complejo remodelador- chaperoninas

HISTONA VARIANTE FUNCION

H3 H3.3 Activación transcripcional
CENP-A Centromérica, ensamblaje del cinetocoro

H2A H2Av Reparación y Recombinación del DNA

H2Az Expresión génica, segregación cromosomica

macroH2A Represión transcripcional

Inactivación del cromosomas X
Modificaciones de variantes de Histonas produce
código de histonas
Señalizan: Complejo de lectura del
Cromatina recién sintetizada código
Cromatina dañada y que necesita repararse
Cuando y como debe darse la expresión génica

La modificaciones de H3 tiene significado

específico
 Complejo Lector-Escritor Barrera de expansión del complejo
Cambios expansivos en la lector-escritor
cromatina

HP1

9K-M

ATP

ADP

Onda expansiva de condensación de la cromatina

 HETEROCROMATINA CENTROMERICA
ADN satélite α (Sec. Repetidas de 171 pb)
PROTEINAS
Histonas: metiladas poco acetiladas : Variante H3 o CEN-P A
Proteínas específicas para el centrómero --- CINETOCORO
CROMATINA CENTROMERICA – VARIANTES DE HISTONAS

CENP-A : Variante de H3
Forma el nucleosoma específico del centrómero en levaduras
 Interacciona con proteínas específicas que lo unen al microtúbulo del
cinetocoro

Centrómero en eucariotas complejos: humano

DNA satélite ó si DNA sat
Heterocromatina

Forman espontáneamente

El centrómero está definido por

ensamblaje de proteínas
ORGANIZACIÓN DE LA CORMATINA DEL CENTROMERO HUMANO

Contiene
H3 Normal
Variante de H3

H3

CENP-A

CENP-A
H3

CENP-A
H3
MODELO DE LA HERENCIA DE CROMATINA CENTROMERICA
 El empaquetamiento de DNA
Secuencias tiene la capacidad de recordar el
se da en una amplia variedad
estado de un gen, y se transmite asi
de diferentes estructura de
Hetocromatina mantiene la proteina:polycomb
cromatina
que silencia a los genes
 CROMATINA 300 nm

50000 – 200000 pn

MAR o
SAR

DEPENDE DE:
•SECUENCIAS DE UNIÓN AL SCAFFOLD Ó SECUENCIAS DE UNIÓN A LA MATRIZ

•PROTEINAS NO HISTONAS
- Condensinas (familia SMC )
- Topoisomerasa II
CROMATINA INTERFASICA

Dominios cromosómicos La flourescencia revela

• Regiones ricas en genes
• Ocupan un territorio • Regiones sin genes
• Regiones intermedias
Distribución heterogénea
de la cromatina:
La posición de un gen en
el interior del núcleo
cambia cuando se expresa
intensamente

Los genes se desplazan

a regiones ricas en
proteína necesarias para
su expresión

Los genes se desplazan

a regiones de silencio
génico
 CROMATINA 700 nm y 1400 nm

Cada molécula de DNA

está organizada en
bucles de cromatina
(300 nmn) que procede
de un esqueleto central
 PROTEINAS DE LA CONDENSACION DEL
CROMOSOMA MITOTICO
Condensinas :
• Utilizan ATP
•Complejos proteicos de dímeros de SMC
•SMC forman bisagras que se une al DNA
•Un dímero por cada 10000 nt de DNA

Proteínas de unión al SAR o MAR: Regiones asociadas a la matriz

Funciones del empaquetamiento de la
cromatina
•Condensa el ADN individualizando las
cromátidas
•Protege las frágiles moléculas de DNA
cuando se separan
SECUENCIA DE NUCLEOTIDOS DEL ADN
•SEGÚN EL GRADO DE REPETICION
SECUENCIAS DE DNA
• SEGÚN EL GRADO DE REPETICIÓN
I DE ALTA REPETICIÓN:
II. DE MODERADA REPETICIÓN
III. DE SECUENCIA ÚNICA
I. SECUENCIAS DE DNA DE ALTA REPETICIÓN

1. ADN SATÉLITE: 106 repeticiones en tanden

ADNsat. Alfoide : >centrómeros, < disperso en el genoma
Cientos de Kb repetidas de: 4-171 pb
Motivo de 17 bases: CTTCGTTGGAAACGGGA, es
reconocido por proteínas CENP-B

ADN : 68 pb: Cromosomas: 13-15, 21,22,9,1, Y

ADN Sat -1: 42 pb pericentromérico
ADN Sat-2: 5 pb
DNA sat
II.SECUENCIAS DE DNA DE MODERADA REPETICION
1. Retroposones:10 – 102 LINES:(L1) 6.4 Kb , bandas G
SINES(Alu)150 Mb
Pseudogenes: en familia de Globinas
2. Transposones: 10 – 102 THE humano
3. Familias génicas: 102 copias F. clásicas: ARNr, ARNt, Histonas
Superfamilias: HLA, Receptores de
células T,  y  hemoglobinas
4. ADN telomérico: 104
5.ADN minisatélite (VNRT): 102 - 103
6. ADN microsatelite: 104
3. ADN DE SECUENCIA UNICA
Codifican polipéptidos para
Enzimas
Hormonas
Receptores
Proteínas estructurales
Proteínas reguladoras
DNA intergenico, no repetido, función desconocida
 El acido desoxirribonucleico es la molécula que almacena la
información de las células.

 La información contenida en ADN se expresa en proteínas.

Cuando se produce alteraciones en el ADN, aparecen proteínas

alteradas, con una función deficiente o nula, lo cual produce
enfermedades moleculares