LA SPECTROSCOPIE

RAMAN

Dr.I.ADOUANI
Maître-assistant en analyses pharmaceutiques
UFAS-1,Departement de pharmacie
 PLAN

Introduction

Principe

Avantages et limitations

Instrumentation

Applications
 INTRODUCTION
• Raman 1928 (Diffusion par les liquides)
• Phénomene physique
• Spectroscopie moléculaire vibrationnelle (200-
4000 cm-1)
• Caractérisation simultanée de la composition
chimique d'un matériau, de son
environnement ou encore de son degré
d'oxydation
PRNCIPE
• Le déplacement raman est caractéristique de
l`échantillon
 PROPRIETES
• Une méthode optique non destructive
• Compatible avec les échantillons biologiques
et in situ (Eau, très petite taille, aucun
prétraitement ....)
• les raies observées sont plus fines, plus
précises qu’en IR
 LIMITATIONS
• Effet intrinsèque faible  très inefficace
• Problème d’autofluorescence des molécules
org.
• Analyse quantitative : avec précaution.
• La bibliothèque incomplète
 Raman vs IR
Raman IR
Diffusion de la lumière Absorption des radiations
Changement de Changement du moment
polarisabilité dipolaire
H2O Compatible Non compatible
Aucun prétraitement Prétraitement de
nécessaire l`échantillon
Symétrique Antisymétrique
 Les règles de selection

• les groupes fonctionnels fortement sensibles

aux moments dipolaires réagissent bien aux
IR.
• les groupes fonctionnels faiblement sensibles
aux dipôles ou à haut degré de symétrie sans
modification nette aux moments dipolaires
réagissent mieux à la diffusion Raman.
 Préférez la spectroscopie Raman :
• les recherches où les liaisons carbone en cycles
aliphatiques et aromatiques ont un intérêt primordial ;
ou les liaisons difficilement identifiables en FTIR (0-0,
S-H, C=S, N=N, C=C) ;
• analyser des réactions en milieux aqueux ;
• lorsque les modes à faible fréquence sont importants
(oxydes inorganiques) ;
• l`étude du polymorphisme ;
• rechercher le déclenchement d'une réaction, son point
final
 Préférez la spectroscopie FTIR :
• Les réactions en phase liquide/ forment des
produits intermédiaires sensibles aux
infrarouges/ où les bandes de solvant
réagissent au Raman
• Les réactions avec des réactifs, des solvants et
des espèces réactionnelles fluorescents ; ou
faiblement concentrés
• Les liaisons où les modifications aux dipôles
sont importantes, ex. C=O, O-H, N=O
COMPOSITION DU SPECTROMÈTRE RAMAN 
 La source
• Fournit un faisceau incident focalisé sur
l’échantillon à analyser par une optique
appropriée
• Laser continus/pulsés
 Porte-échantillon 
• Tous types d`échantillons
• Récipients en verre ou en quartz
• Une platine de transfert comprend deux
systèmes optiques :
- L'un permet l'éclairement de l'échantillon,
- L'autre la concentration de l'effet Raman sur la
fente d'entrée du monochromateur.
 Monochromateur
Permet d'analyser la lumière diffusée et de
séparer efficacement l'effet Raman , peu
intense, de la raie Rayleigh
Quartz, oxide de nickel…etc
 Détecteur
• Collecte la lumière diffusée et analyse son
intensité.
• Doit être très sensible
Types: 
• Monocanal {photomultiplicateur ou CPM}
• Multicanal {PDA (barrettes photodiode),CCD
(charged couple devices)}
 Enregistreur
• Une électronique d’acquisition, d'amplification
et d'enregistrement et de traitement des
données spectrales.
 APPLICATIONS
• Détermination de la structure chimique.
• Configuration (cis, trans.).
• Conformation (arrangement planaire, en hélice ... etc).
• Détermination de la cristallinité et de l'épaisseur
lamellaire pour les polymères.
• Etude des forces intra et intermoléculaires.
• Etude de l'orientation des molécules (polarisation).
• Analyses de traces (police scientifique : drogues,
explosifs, sang, peinture dans les oeuvres d'art).
 Pharmaceutique
• Distribution des composants dans un cp
• Uniformité des mélanges
• Concentration en PA
• Verification de la matière première
• Identification des contaminants
• Formes polymorphiques et cristallines
 Biologie
• Caractérisation des bactéries
• Bio-compatibilité
• Analyse cellulaire, ADN , ARN
• Interactions médicament / cellule
• Thérapie photodynamique (PDT)
• Caractérisation des biomolécules
• Structure osseuse
• Diagnostic des maladies
 QUESTIONS?

MERCI POUR VOTRE ATTENTION