UNIVERSIDADE DO EXTREMO SUL CATARINENSE UNESC PROGRAMA DE PS GRADUAO EM CINCIAS DA SADE PPGCS MESTRADO EM CINCIAS DA SADE LABORATRIO DE NEUROCINCIAS

INTERAO ENTRE O SISTEMA ADENOSINRGICO E O NEUROPEPTDEO S (NPS)

Mestrando: Robson Pacheco Orientadora: Prof. Dra. Carina Boeck
CRICIMA, MAIO DE 2009

ADENOSINA
O nucleosdeo purinrgico adenosina est presente nos meios intra e extracelular e desempenha um papel fundamental como neuromodulador e na homeostase
(Cunha, 2001).

Alm disso, a adenosina pode limitar o dano causado pela excitotoxicidade de alguns neurotransmissores (glutamato, por exemplo), exercendo assim uma ao protetora no sistema nervoso (Zimmermann et al., 1998;
Dunwiddie & Masino, 2001).

Atualmente sabe-se que a adenosina tambm est envolvida na formao e regulao da sinaptognese, plasticidade neuronal, proliferao de clulas gliais, e na diferenciao de clulas progenitoras de oligodendrcitos (Cicarelli et al., 2001; Stevens et al., 2002;
Wink et al., 2003, Agresti et al., 2005).

PRODUO DE ADENOSINA
A adenosina produzida no meio intracelular por duas formas: (1) pela clivagem as S-adenosil-homocistena (Dunwiddie E Masino, 2001), e (2) pela degradao do nucleotdeo monofosfatado (AMP) pela enzima 5nucleotidase (Brundege E Dunwiddie, 1997). Os nucleotdeos de adenina extracelulares so hidrolisados por enzimas conhecidas como ectonucleotidases. Dentre estas destaca-se a NTPDase (EC 3.6.1.5, apirase, CD39, ATP difosfoidrolase) e a 5nucleotidase (EC 3.1.3.5), duas enzimas capazes de controlar a disponibilidade de ligantes como, ATP e adenosina seus receptores especficos (Zimmermann,
2001).

ADENOSINA E ECTO-ENZIMAS
A funo geral da ATP difosfoidrolase tm sido atribuda hidrlise extracelular dos nucleotdeos ATP e ADP e portanto, dependendo da localizao tecidual a atividade enzimtica possui diferentes papis fisiolgicos (Sarkis et
al., 1995; Zimmermann, 1999; Bonan et al., 2001).

J a ecto-5-nucleotidase catalisa a desfosforilao de vrios nucleotdeos 5-monofosfatados como CMP, IMP, UMP, GMP e AMP seus respectivos nucleosdeos (Zimmermann, 1996). No entanto, foi demonstrado que hidrolisa mais eficientemente o AMP, sendo por isto considerada a principal enzima responsvel pela formao de adenosina extracelular (Zimmermann, 1996; Zimmermann et al., 1998; Zimmermann, 2001).

FORMAO DE ADENOSINA NO MEIO EXTRACELULAR

ATP
ATP difosfoidrolase

ADP
ATP difosfoidrolase ATP difosfoidrolase

AMP
Ecto-5-nucleotidase

ADENOSINA

RECEPTORES DE ADENOSINA
A adenosina executa seus efeitos atravs da ativao de receptores de membrana especficos, denominados receptores purinrgicos P1 (Burnstock, 1972). Estes receptores podem ser divididos em quatro subtipos: A1, A2A, A2B e A3, os quais so diferentes quanto afinidade pela adenosina, estruturas moleculares, distribuio tecidual e perfil farmacolgico. Os receptores A1 e A2A apresentam alta afinidade pela adenosina, enquanto os receptores A2B e A3 so de baixa afinidade (Ribeiro et al., 2003).

RECEPTORES DE ADENOSINA

RECEPTORES DE ADENOSINA A1
Receptores A1: exibem a maior abundncia no sistema nervoso central, com alta concentrao no crtex cerebral, hipocampo, cerebelo, tlamo, tronco cerebral e medula espinhal (FREDHOLM ET AL., 2001), possuindo alta afinidade pela adenosina e localizando-se celularmente na regio pr-sinptica, ps-sinptica e no axnio A ativao destes receptores promove efeitos inibitrios na neurotransmisso; sendo que a via de sinalizao mais conhecida a inibio da enzima adenilato ciclase atravs da ativao da ativao da protena G inibitria (Gi/G0).

RECEPTORES DE ADENOSINA

RECEPTORES DE ADENOSINA A2A

Receptores A2A: so tambm considerados receptores de alta afinidade. A distribuio tecidual destes receptores bastante restrita no sistema nervoso central, ocorrendo basicamente no estriado, ncleo accumbens e tubrculo olfatrio (Ongini e Fredholm, 1996). A ativao dos receptores adenosinrgicos do tipo A2A desencadeia uma resposta antagnica quela dos receptores A1 pela ativao da protena G estimulatria (Gs).

RECEPTORES DE ADENOSINA

RECEPTORES DE ADENOSINA A2B E A3

Os receptores adenosinrgicos A2B e o A3 possuem uma baixa afinidade pela adenosina e seriam ativados em situaes que houvesse um aumento extracelular de adenosina. Os receptores do tipo A2B possuem baixa expresso no sistema nervoso central, e assim como os receptores A2A, os receptores A2B so acoplados a protenas G estimulatrias, promovendo o aumento dos nveis de AMPc (Brundege e Dunwiddie, 1997) Os receptores A3 foram os ltimos receptores adenosinrgicos descritos, sendo expressos de forma moderada no cerebelo e hipocampo e com baixa expresso no restante do crebro (Fredholm et al., 2001). A ativao destes receptores inibe a produo de AMPc, atravs da ao de uma protena Gi.

ADENOSINA COMO NEUROMODULADOR

Pesquisas demonstram que a ativao de receptores de adenosina influencia a ao de neurotransmissores clssicos, como a dopamina e glutamato, ou sobre outros moduladores de funo neuronal, como o caso dos neuropeptdeos, promovendo uma ao reguladora fina sobre o funcionamento sinptico. Dentre estes neuropeptdeos, um chama a ateno pelo fato de estar relacionado a locomoo e a atividade ansioltica; o NEUROPEPTDEO S (NPS).

RECEPTORES ACOPLADOS PROTEINA G (GPCR)

Genoma humano: 1000 genes que codificam GPCR 700 receptores olfatrios e gustativos - 160 genes codificam receptores que possuem um ligante endgeno identificado - 140 genes codificam receptores que so rfos

300 ainda

Processo de desorfanizao dos receptores: descoberta de novos neurotransmissores e moduladores

NEUROPEPTDEO S
H mais de 30 anos se descobriu que os peptdeos atuam no sistema nervoso central como mensageiros e que comumente atuam modulando a funo de outros neurotransmissores clssicos. Devido estas caractersticas, os sistemas peptidrgicos tm sido considerados alvos farmacolgicos atrativos para o tratamento de diversos transtornos psiquitricos, pois abrem novas possibilidades de descoberta de frmacos com mecanismos de ao inovadores comparados aos frmacos disponveis no mercado (HOKFELT, T.; BARTFAI, T.; BLOOM, F., 2003). Atualmente, so conhecidos mais de 50 peptdeos endgenos, sendo que muitos destes possuem funo biolgica ainda pouco elucidada, dentre estes se destaca o neuropeptdeo S.

NEUROPEPTDEO S
Os receptores acoplados a protena G so uma superfamlia de receptores ativados por ligantes de diversas classes qumicas, como aminas, peptdeos, aminoacidos, lipideos, alm de ons inorgnicos como o clcio. Neuropeptdeo S (NPS) um transmissor recentemente identificado que modula estimulao e respostas de medo. O NPS ativa um receptor rfo acoplado a protena G, que expressado ao longo do sistema nervoso central, inclusive centros do crebro que regulam sono/viglia e ansiedade.

NEUROPEPTDEO S E O SEU RECEPTOR (NPSR)

Peptdeo constitudo de 20 resduos de aminocidos Existe uma grande homologia entre a seqncia de NPS humana e aquela de outros mamferos NPSR: receptor acoplato protena G (do tipo Gq)

(Sato et al., 2002)

DISTRIBUIO DO NPS E DE SEU RECEPTOR

glndula mamria glndula salivar glndula tireide crebro

(Xu et al., Neuron, 43:487-97, 2004)

DISTRIBUIO DO NPS
Elevada expresso de NPS no tronco cerebral: Locus coeruleus Moderada expresso: amgdala e hipotlamo NPS expresso na zona perifrica ao locus coeruleus Tirosina hidroxilase: marcador da sntese de NA

Cerebelo

DISTRIBUIO DO NPSR
- Maior distribuio no crebro comparado ao peptdeo endgeno
- Processo olfatrio: nucleo olfatorio endopiriforme nucleo e cortex piriform anterior, nucleo

- Resposta a anciedade: complexo amigdaloide e nucleo hipotalmico paraventricular - Neurocircuitos do sono: talamo, hipotalamo, regio pr-optica - Memoria: regio parahipocampal, crtex entorrinal lateral e cortex agranular retrosplenial

* No expresso na zona do locus coeruleus

(Xu et al., J Comp Neurol, 500(1):84-102, 2007)

INJEO I.C.V. DE NPS INDUZ HIPERATIVIDADE

Efeitos de hiperlocomoo do NPS em camundongos habituados e no habituados (os camundongos habituados foram colocados 1 hora antes da administrao de NPS no local do teste)

FUNO DO NPS

(Xu et al., Neuron, 43:487-97, 2004)

FUNO DO NPS

LIGHT-DARK BOX

ELEVATED PLUS-MAZE TEST

FUNO DO NPS

COMPARAES

CAFENA
Droga psicoestimulante mais utilizada no mundo; Consumo mundial em torno de 70 a 76 mg/dia/pessoa; Caf (40 a 180 mg/150ml), ch (24 a 50 mg/150ml), cola (15 a 20 mg/ 180ml) e chocolate (1 a 36 mg/28g); Aps 45 min, 99% da cafena foi absorvida (pico plasmtico entre 15 e 120 min aps a ingesto oral); Antagonista no-seletivo dos receptores A1 e A2A

NPS X CAFENA
Sabe-se que a cafena um inibidor dos receptores adenosinrgicos A2A e que estes receptores estimulam o AMPc intracelular, o que por sua vez desencadear uma cascata bioqumica para formao de ATP. Estudos prvios verificaram que a cafena inibe o efeito hiperlocomotor induzido pelo NPS, e este efeito via receptores A2A. Da a hiptese de que o sistema adenosinrgico est relacionado na regulao da ao do NPS.

INTERAO ENTRE NPS E CAFENA

Efeito do tratamento com cafena na expresso de NPS e NPSR Tratamento agudo com cafena: NPS RNAm: q tronco cerebral NPSR RNAm: o hipotlamo e tronco cerebral Tratamento crnico com cafena : NPS RNAm: nenhuma alterao NPSR RNAm: o hipotlamo Estes dados podem sugerir um possvel papel para o sistema NPS na mediao de alguns efeitos comportamentais da cafena
(Lage et al., Neurosci Lett, 410(1):47-51, 2006)

OBRIGADO!!!