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LES MILIEUX D’ISOLEMENT DES COQUES GRAM +

La gélose trypticase soja


Composition

Peptone trypsique de caséine 15 g Source de C et N


Peptone papaïnique de soja 5g
Chlorure de sodium 5g Source minérale
Agar (gélose) 15 g
ED qsp 1 L

pH = 7,2

Milieu d’isolement riche qui convient à tous les microorganismes exigeants


La gélose COLUMBIA

Composition

Mélange de peptones 23 g Source de C et N


Amidon 1g Source glucidique de C
Chlorure de sodium 5g Source minérale
Agar (gélose) 15 g
ED qsp 1 L

pH = 7,1

Milieu d’isolement , servant de base pour la préparation


des géloses au sang.
Gélose riche qui peut être additionnée de nombreux
suppléments, et la rendre sélective à certains groupes
bactériens.
La gélose au sang frais
Composition
Base trypticase soja, Columbia
Peptones riches en acides aminés et vitamines
Amidon
NaCl
agar
A ce milieu de base, il faut ajouter 5% de sang frais de mouton ou de
chevald’isolement
Milieu défibriné etriche
stérile
qui convient à tous les microorganismes exigeants
ou non. Il permet aussi une orientation en fonction du caractère hémolytique
pour les streptocoques
Préparation du milieu

Pipette Pasteur
stérile

Couler par-dessus les


Déposer le volume de sang gouttes de sang la gélose
nécessaire en faisant des en surfusion à 45°C
gouttes séparées dans le Homogénéiser en faisant
fond de la boîte de pétri. des petits cercles
concentriques.
La gélose BEA (bile – esculine – azide de sodium)
Composition Source de C et N

Peptone 20 g Source de C, N, vitamines et


Extrait de levure 5g minéraux
Bile de boeuf 10 g Inhibiteur de croissance
Chlorure de sodium 5g
Citrate de sodium 1g
Esculine 1g Source glucidique
Citrate de fer ammoniacal 0,5 g Ind des produits d’hydrolyse
Azide de sodium 0,25 g de l’esculine
Agar (gélose) 13,5 g
ED qsp 1 L
Inhibiteur de croissance

pH = 7,1

Milieu d’isolement simple, sélectif et d’orientation

L’azide de sodium empêche la croissance des bactéries Gram


– et de tous les streptocoques sauf ceux du groupe D.
La bile inhibe les bactéries Gram + sauf les streptocoques du
groupe D.
L’azide de sodium et la bile sélectionnent la culture des
entérocoques et des streptocoques du groupe D.
Colonies d’ascpect variable, sans
Lecture noircissment du milieu:
ESCULINE –
Orientation vers d’autres germes
différents des Streptococcus D

Petites colonies
translucides entourées
d’un halo noir:
ESCULINE +
Orientation vers les
Streotococcus D dont fait
partie le genre
Enterococcus.
Lecture

Halo clair (éclaircissement autour


des colonies)
Hémolyse totale des globules
rouges : HEMOLYSE β

Halo verdâtre autour des colonies


Hémolyse partielle des globules
Milieu inchangé autour des rouges : HEMOLYSE α
colonies
Absence d’hémolyse.