ENZIMAS

E + S

SE

E + P

Una enzima es un catalizador protenico.

Es una sustancia que altera la velocidad de una reaccin qumica SUBSTRATO PRODUCTOS

ENZIMA

ENZIMA

SUSTRATO:

COMPUESTO CUYA TRANSFORMACIN QUMICA ES CATALIZADA POR LA ENZIMA. (Molcula sobre la cual acta la enzima)

Caractersticas :
La mayora estn constituidas X+100 aa Disminuyen la energa de activacin; de tal forma que facilitan el inicio de la reaccin. Se requieren en cantidades mnimas. Alta especificidad Pueden ser regulables o alostericas. Susceptibles a ser inhibidas al disminuir o aboliar su actividad X1/2 de diversas sustancias. Modificar la estructura qumica del sustrato segn el tipo de reaccin que catalicen.

SITIO ACTIVO
Es una porcin pequea de la protena completa, El sitio activo es el responsable de la unin con el sustrato para catalizar su transformacin en productos.
Adems de sitio activo, cataltico o isostrico algunas enzimas poseen un sitio regulatorio o alostrico El cual no se encuentra en el sitio activo, sino en cualquier otra parte de la proteina

Caractersticas:
Tamao / relativamente pequeo. Forma / Tridimensional Unin / El S se une a las E por fuerzas dbiles. Interaccin / SA + S se forma un complejo muy compacto Especificidad

La porcin proteca Es inactiva

El cofactor
Actan como transportadores eventuales de tomos especficos o de grupos funcionales

S: PM 250, 0.8 nm

Cofactor
E: PM 100000, 7 nm Inorgnico: Fe2+, Mn2+, Zn2+,etc.

Orgnico: Coenzimas NAD, FAD, CoASH. Grupo Prosttico

Enzimas que requieren elementos inorgnicos

Citocromo oxidasa Catalasa, peroxidasa Citocromo oxidasa DNA polimerasa Anhdrasa carbnica Alcohol deshidrogensa Hexoquinasa Glucosa 6-fosfatasa Arginasa Piruvato quinasa Ureasa Nitrato reductasa Mg2+ Mn2+ K+, Mg2+ Ni2+ Mo2+ Fe2+, Fe+, Cu2+ Zn2+

 Las enzimas corresponden a 2 clases generales, algunas son PROTEINAS SIMPLES que solo contienen residuos de aa. ( ej. E. digestivas tripsina, quimiotripsina y elastasa); y otras son PROTEINAS COMPLEJAS que contienen residuos de aa y un cofactor no aa.

Clasificacin en basa a su funcin:

1. Oxidorreductasas 2. Transferasas 3. Hidrolasas 4. Liasas 5. Isomerasas 6. Ligasas

Enzimas:
No.

Clase

Tipo de reaccin que catalizan

Ejemplo
Deshidrogenasas Peroxidasa Oxidasas Oxigenasas Reductasas

Oxidorreductasas De xido reduccin (transferencia de e-)

Reduccin: ganancia de electrones (hidrgeno o prdida de oxgeno) Oxidacin: prdida de electrones (hidrgeno o ganancia de oxgeno). La Oxidacin y la Reduccin son reacciones acopladas (REDOX)

1. Oxido-reductasas ( Reacciones de oxido-reduccin).

Si una molcula se reduce, tiene que haber otra que se oxide

Enzimas:
No.
1

Clase
Oxidorreductasas

Tipo de reaccin que catalizan

De xido reduccin (transferencia de e-)

Ejemplo
Deshidrogenasas Peroxidasa Oxidasas Oxigenasas Reductasas

Transferasas

Transferencia de grupos

Kinasas Transaminasas

2. Transferasas
(Transferencia de grupos funcionales)

grupos aldehdos grupos acilos grupos glucosilos grupos fosfatos (kinasas)

Succinato Deshidrogenasa Citocromo c oxidasa.

Enzimas:
No.
1

Clase
Oxidorreductasas

Tipo de reaccin que catalizan

De xido reduccin (transferencia de e-)

Ejemplo
Deshidrogenasas Peroxidasa Oxidasas Oxigenasas Reductasas Kinasas Transaminasas

Transferasas

Transferencia de grupos

Hidrolasas

Desdoblan un enlace de una Pirofosfatasa molcula de agua (lisis por Tripsina agua) con la formacin de Aldolasa dos productos.

3. Hidrolasas (Reacciones de hidrlisis)

Transforman polmeros en monmeros. Actan sobre: enlace ster enlace glucosdico enlace peptdico enlace C-N

Enzimas:
No. Clase
1 Oxidorreductasas

Tipo de reaccin que catalizan

De xido reduccin (transferencia de e-)

Ejemplo
Deshidrogenasas Peroxidasa Oxidasas Oxigenasas Reductasas Kinasas Transaminasas Pirofosfatasa Tripsina Aldolasa

2 3

Transferasas Hidrolasas

Transferencia de grupos

Desdoblan un enlace de una molcula de agua (lisis por agua) con la formacin de dos productos. Cataliza el rompimiento de un enlace covalente o su formacin

Liasas

(Sintasas) Descarboxilasa pirvica

4. Liasas (Adicin a los dobles enlaces)

Entre C y C Entre C y O Entre C y N

Enzimas:
No.
1

Clase
Oxidorreductasas

Tipo de reaccin que catalizan

De xido reduccin (transferencia de e-)

Ejemplo
Deshidrogenasas Peroxidasa Oxidasas Oxigenasas Reductasas Kinasas Transaminasas Pirofosfatasa Tripsina Aldolasa (Sintasas) Descarboxilasa pirvica

2 3

Transferasas Hidrolasas

Transferencia de grupos Desdoblan un enlace de una molcula de agua (lisis por agua) con la formacin de dos productos. Cataliza el rompimiento de un enlace covalente o su formacin

Liasas

Isomerasas

Transferencia de grupos en el interior de las molculas para dar formas ismeras

Mutasas Epimerasas Racemasas

5. Isomerasas (Reacciones de isomerizacin)

Enzimas:
No.
1

Clase
Oxidorreductasas

Tipo de reaccin que catalizan

De xido reduccin (transferencia de e-)

Ejemplo
Deshidrogenasas Peroxidasa Oxidasas Oxigenasas Reductasas Kinasas Transaminasas Pirofosfatasa Tripsina Aldolasa (Sintasas) Descarboxilasa pirvica

2 3

Transferasas Hidrolasas

Transferencia de grupos funcionales de una molecula a otra. Desdoblan un enlace de una molcula de agua (lisis por agua) con la formacin de dos productos. Cataliza el rompimiento de un enlace covalente o su formacin

4 5

Liasas Isomerasas

Transferencia de grupos en el interior de las molculas para dar formas ismeras

Mutasas Epimerasas Racemasas Sintetasas

Ligasas

Formacin de enlaces C-C, C-S, C-O y C-N. Mediante reacciones de condensacin, acopladas a la ruptura del ATP

6. Ligasas (Formacin de enlaces, con aporte de ATP)

Entre C y O Entre C y S Entre C y N Entre C y C

CINETICA ENZIMATICA

 Es el estudio de las velocidades de las reacciones catalizadas por enzimas. Como las reacciones catalizadas por enzimas son saturables, la velocidad de catlisis no muestra un comportamiento lineal en una grfica al aumentar la concentracin de sustrato.

Mecanismo de unin de nico sustrato para una reaccin enzimtica. k1, k-1 y k2 son las constantes cinticas para cada una de las etapas de la reaccin.

 La velocidad de la reaccin va aumentando a medida que aumenta la concentracin de sustrato hasta que la enzima se satura. La reaccin catalizada por una enzima utiliza la misma cantidad de sustrato y genera la misma cantidad de producto que una reaccin no catalizada.

 Si la velocidad inicial de la reaccin se mide a una determinada concentracin de sustrato (representado como [S]), la velocidad de la reaccin (representado como V) aumenta linealmente con el aumento de la [S], Sin embargo, cuando aumentamos la [S], la enzima se satura de sustrato y alcanza su velocidad mxima (Vmax), que no sobrepasar en ningn caso, independientemente de la [S].

INHIBICIN ENZIMTICA

Los inhibidores enzimticos son molculas que reducen o anulan la actividad enzimtica. Estos inhibidores pueden unirse a las enzimas de forma reversible (la desaparicin del inhibidor restaura la actividad enzimtica) o irreversible (el inhibidor inactiva permanentemente a la enzima).

Inhibidores reversibles
Los inhibidores reversibles se unen a las enzimas mediante interacciones no covalentes tales como los puentes de hidrgeno, las interacciones hidrofbicas y los enlaces inicos. Los enlaces dbiles mltiples entre el inhibidor y el sitio activo se combinan para producir una unin fuerte y especfica.

 Existen tres tipos de inhibidores reversibles. Se clasifican en base al efecto producido por la variacin de la concentracin del sustrato de la enzima en el inhibidor.

Inhibicin competitiva, Inhibicin mixta, Inhibicin no competitiva

INHIBICION COMPETITIVA
El sustrato y el inhibidor no se pueden unir a la misma enzima al mismo tiempo. Esto generalmente ocurre cuando el inhibidor tiene afinidad por el sitio activo de una enzima en el que tambin se une el sustrato; el sustrato y el inhibidor compiten para el acceso al sitio activo de la enzima. Este tipo de inhibicin se puede superar con concentraciones suficientemente altas del sustrato, es decir, dejando fuera de competicin al inhibidor. El sustrato supera el efecto del inhibidor y por eso se llama competitivo.

INHIBICION NO COMPETITIVA
Se produce cuando una molcula o un ion pueden unirse a un segundo lugar de una superficie enzimtica (no en el sitio activo). Un inhibidor no competitivo puede ser una molcula que no se perece al sustrato en lo absoluto, sino que tiene una fuerte afinidad por un segundo lugar de unin.

La presencia del inhibidor hace que la formacion del producto sea mas lenta

INHIBICION MIXTA
El inhibidor se puede unir a la enzima al mismo tiempo que el sustrato (E-S). Sin embargo, la unin del inhibidor afecta la unin del sustrato, y viceversa. Este tipo de inhibicin se puede reducir, pero no superar al aumentar las concentraciones del sustrato. Aunque es posible que los inhibidores de tipo mixto se unan en el sitio activo, este tipo de inhibicin resulta generalmente de un efecto alostrico donde el inhibidor se une a otro sitio que no es el sitio activo de la enzima. La unin del inhibidor con el sitio alostrico cambia la conformacin (es decir, la estructura terciaria o la forma tridimensional) de la enzima de modo que la afinidad del sustrato por el sitio activo se reduce.

Inhibidores Irreversibles
Algunas sustancias se combinan de forma covalente con las enzimas y las inactivan de manera irreversible. Un inhibidor enzimtico irreversible reacciona con una enzima y forma un complejo estable. Casi todos los inhibidores irreversible son sustancias toxicas, naturales sinteticas (cianuro, penicilina). En la mayoria de los casos estas sustancias reaccionana con algun grupo funcional del sitio activo para bloquear el lugar del sustrato o para dejarlo cataliticamente inactivo.

Aplicaciones de los inhibidores

Los inhibidores enzimticos pueden ser encontrados en la naturaleza, pero tambin son diseados y producidos como parte de la farmacologa y la bioqumica. Los venenos naturales son a menudo inhibidores enzimticos que han evolucionado para defender a una planta o animal contra sus depredadores. Estas toxinas naturales incluyen algunos de los compuestos ms venenosos conocidos hasta hoy. Los inhibidores artificiales son a menudo usados como medicamentos, pero tambin existen algunos utilizados como insecticidas (como el malathion), herbicidas (como el glifosato) o desinfectantes, (como el triclosn).

Medicina

Transaminasas

Industria Qumica Transformacin de Alimentos

Penicilina Fermentaciones Quesos Vinos

Agricultura

hyzobium

FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

Factores fsico
y Temperatura: las enzimas son sensibles a la temperatura pudiendo verse modificada su actividad por este factor. Los rangos de temperaturas ptimos pueden llegar a variar sustancialmente de unas enzimas a otras. Normalmente, a medida que aumente la temperatura, una enzima ver incrementada su actividad hasta el momento en que comience la desnaturalizacin de la misma, que dar lugar a una reduccin progresiva de dicha actividad.

y pH: el rango de pH ptimo tambin es muy variable entre diferentes enzimas. Si el pH del medio se aleja del ptimo de la enzima, esta ver modificada su carga elctrica al aceptar o donar protones, lo que modificar la estructura de los aminocidos y por tanto la actividad enzimtica.

Enzima Pepsina Tripsina Catalasa Arginasa Fumarasa

pH ptimo 1.5 7.7 7.6 9.7 7.8

Ribonucleasa 7.8

Enzima Mamferos

Temp. pt. (oC) 37

aprox. aprox.

Bacterias y algas Bacterias rticas

100 0

Bacterias en muestra de hielo antigua

y Concentracin salina: al igual que en los casos anteriormente mencionados, la concentracin de sales del medio es crucial para una ptima actividad enzimtica. Una elevada concentracin o una ausencia de sales en el medio pueden impedir la actividad enzimtica, ya que las enzimas precisan de una adecuada concentracin de iones para mantener su carga y su estructura.

Estructura globular  Hervir con HCl  Tripsina  Temperatura elevada  pH extremo Funcionalidad Inactiva

Factores qumicos:

CONTRIBUYEN A INCREMENTAR LA VELOCIDAD DE LAS ENZIMAS

MECANISMOS CATALITICOS
Catlisis es un proceso en el que aumenta la velocidad a la que una reaccin se aproxima al equilibrio. 1.- Acido-bsico 2.- Covalente 3.- Iones metlicos 4.- Electroesttico 5.- Orientacin y aproximacin 6.- Complejo en estado de transicin

1.- Catlisis Acido-bsico

En este proceso la transferencia de un donador de protones disminuya la energa libre del estado de transicin de una reaccin.
Utilizada por la mayora (esteres, pptidos, grupos fosfato, carbonilo)

2.- Catlisis Covalente

Consiste en la formacin de un enlace covalente de transicin sustrato-catalizador.

3.- Iones metlicos

Pueden actuar por unin al sustrato y orientacin de los mismos para la reaccin, y pueden estabilizar al sustrato en forma electrosttica. Los metales pueden interactuar con el agua promover la reaccin de grupos hidroxilo. Actan en gran medida igual que un protn. Los metales pueden tener cargas mayores y por eso a veces se llaman supercidos.

4.- Electroesttico
El sitio activo de la enzima se comporta como una constante dielctrica (solvente no polar), por lo que la interaccin electrosttica es mucho mas fuerte que la que se puede establecer en solucin acuosa.

5.- Orientacin y aproximacin

Si se utiliza la PROXIMIDAD y la ORIENTACION, los sustratos pueden unirse de tal manera que los residuos de aa catalticos de las enzimas estn cerca de los tomos y enlaces del sustrato que va a sufrir el cambio.

6.- Complejo en estado de transicin

La unin de los sustratos puede producir un cambio de conformacin en la enzima denominado AJUSTE INDUCIDO (una mano con guante son complementarios). Los cambios en la conformacin pueden TENSAR o DISTORSIONAR al sustrato y promover la formacin del estado de transicin.

REGULACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

La cantidad de una enzima puede alterarse si se aumenta o disminuye su sntesis o degradacin.

INDUCCION enzimtica se refiere a incremento de la biosntesis de la enzima, y REPRESION significa disminucin en la biosntesis de la enzima.

En funcin de su capacidad intrnseca para ser regulables o no, las enzimas se pueden dividir en dos grupos: A) Enzimas alostricas o regulables. B) Las enzimas isostricas.
1.- Activacin alostrica 2.- Inhibicin alostrica

A) Enzimas alostricas o regulables .

Presentan adems de un sitio activo o isostrico, otros sitios no catalticos o alostricos, capaces de aceptar molculas
interaccionantes que ejercen un efecto regulador sobre el sitio activo, al modificar las caractersticas esteroisomricas de la protena y como consecuencia del sitio activo.

A) Enzimas alostricas o regulables .

La regulacin puede ser de dos tipos:

1.- Activacin alostrica: mecanismo por el cual la enzima

aumenta su actividad por el sustrato (disminuye su Km), as como su velocidad de catlisis.

2.- Inhibicion alostrica: en la que habla de efectos

negativos y el tipo de respuesta implica una modificacin en la protena que de cmo resultado una disminucin en la velocidad reaccin o en la afinidad por el sustrato (aumento de la Km).

B) Las enzimas isostricas

A diferencia de las alostricas, no son regulables por molculas diferentes de su sustrato o productos de la reaccin que catalizan. Tambin se conocen como enzimas de equilibrio, ya que mantienen un porcentaje dado de sustrato y producto, por lo que tienen una participacin importante en la regulacin de vas metablicas.

Funcin fundamental es mantener una concentracin dada de productos y de sustrato, lo que permite un aporte adecuado de productos a las enzimas subsecuentes.

Las enzimas de no equilibrio o alostricas catalizan una reaccin dada independientemente de la concentracin de sustratos o productos.

IMPORTANCIA CLINICA V DE LAS ENZIMAS

 La mayor parte de las enzimas encontradas en el suero no realizan una funcin fisiolgica en el mismo, sino que son liberadas a la circulacin durante el intercambio normal de los tejidos.

TRANSAMINASAS
La transaminasa glutmica (GOT), o Aspartato aminotransferasa (AST), cataliza la transferencia reversible del grupo amino del glutamato al oxalato para formar acetoglutamato y aspartato.
La SGOT se encuentra elevada en enfermedades del hgado y despus de infarto al miocardio. La concentracin en suero tiene valor diagnostico, puede estar elevada en pacientes con cirrosis y enfermedad heptica obstructiva (+5) o muy elevada en casaos de hepatitis viral (+25).

FOSFATASAS
La fosfatasa es una enzima clasificada dentro de las hidrolasas. Las fosfatasas alcalinas son enzimas que se encuentran presentes en casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente alta en huesos, hgado, placenta, intestinos y rin .
Tanto el aumento, as como su disminucin en plasma tienen significado clnico. Las causas de un aumento de FAL: Enfermedad sea de Paget, obstrucciones hepticas, hepatitis, hepatotoxicidad por medicamentos y osteomalacia.

Adems hay elevacin fisiolgica de la fosfatasa alcalina durante la adolescencia que se asocia a crecimiento del esqueleto. (Procedimientos odontolgicos)

 La fosfatasa acida (pH optimo 5-6)es una enzima lizosomica. La elevacin ocurre en carcinomas metastticos de la prstata.

AMILASA
Cataliza la hidrlisis del almidn y del glicgeno. La amilasa es producida por el pncreas y las glndulas salivales y se eleva durante la pancreatitis aguda.
El la pancreatitis ocurre dolor abdominal y elevacin de la amilasa. Puede haber elevaciones moderadas de la amilasa con inflamacin de las glndulas salivales como en las paperas.

DESHIDROGENASA
La lactato deshidrogenasa es una enzima catalizadora que se encuentra en muchos tejidos del cuerpo, pero su presencia es mayor en el corazn, hgado, riones, msculos, glbulos rojos, cerebro y pulmones. Corresponde a la categora de las oxidorreductasas, dado que cataliza una reaccin redox, en la que el piruvato es reducido a lactato gracias a la oxidacin de NADH a NAD+. Esta enzima puede estas elevada despus de infarto al miocardio y durante muchas enfermedades del hgado. Su actividad tambin puede aumentar durante la anemia hemoltica cuando los eritrocitos se degradan mas rpidamente que lo normal.

 Dado que la enzima tambin puede catalizar la oxidacin del hidroxibutirato, ocasionalmente es conocida como Hidroxibutirato Deshidrogenasa (HBD). La enzima parece en la mayor parte de las clulas humanas. La actividad de la HBD se eleva despus del infarto al miocardio y esta elevacin es posterior a la de CPK (Creatinfosfokinasa) y la SGOT (transaminasa glutmica).