HPLC

High-performance Liquid Chromatography CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA EFICACIA

QUE ES
TIPO DE CROMATOGRAFIA EN COLUMNA

INTERACCIONES ENTRE SUSTANCIAS Y LA COLUMNA CROMATOGRAFICA

UTILIZADA EN BIOQUIMICA Y QUIMICA ANALITICA

TECNICA UTILIZADA PARA SEPARAR LOS COMPONENTES DE UNA MUESTRA

CROMATOGRAFIA
tcnica de separacin de los componentes de una muestra por distribucin entre dos fases, una de ellas fija o estacionaria y la otra mvil. La fase estacionaria puede ser slida o lquida (soportada en un slido o gel) y la mvil puede ser gaseosa o lquida

FUNDAMENTOS HPLC
Muestra se disuelve en una fase mvil (FM) lquida que se hace pasar a travs de una fase estacionaria (FE) inmiscible, la cual se mantiene fija en una columna Los componentes de la muestra se distribuyen de modo distinto entre la FM y FE dependiendo de la afinidad por ambas fases, desplazndose a velocidad distinta Debido a la distinta movilidad, los componentes se separan en bandas discriminadas que pueden analizarse cualitativamente y/o cuantitativamente

FUNDAMENTOS HPLC
La fase mvil lquida (constituida por un disolvente adecuado que vehicula a la muestra) se bombea a travs de un sistema de separacin compuesto por un prefiltro y una columna, esta ltima conteniendo la fase estacionaria, a una elevada presin. Por su distinta interaccin entre las dos fases, la muestra es retenida con variable intensidad, eluyendo separada de la columna.

Diagrama Bsico de un sistema de HPLC