En 1953, James Watson y Francis Crick publicaron el primer modelo estructural de la molcula de ADN, (Premio Nobel de Medicina en 1962)

Unidad bsica: nucletido

Los peldaos formados por los nucletidos son complementarios. La posicin de una A en una de las cadenas se corresponde con una T en la otra cadena...

De igual forma, la posicin de una G en una de las cadenas se corresponde con una C en la misma posicin de la otra cadena.

El esquema de este dogma ha sido encontrado repetidamente y se considera una regla general (salvo en los retrovirus)

Protena

Severo Ochoa descubre la ARN polimerasa y sintetiza por primera vez in vitro una molcula de ARN
(Premio Nobel de Fisiologa y Medicina en 1959)

Nirenberg y Khorana descifran el cdigo gentico (Premio Nobel de Medicina en 1968)

El cdigo gentico est compuesto por codones (codon= 3 bases nitrogenadas) que definen el proceso de traduccin

61 codones para aminocidos (existen 20 aminocidos diferentes) 3 codones de terminacin

El cdigo gentico es universal El cdigo gentico es redundante (varios codones para un mismo aminocido) Ejemplo: El aminocido glicina est codificado por GGU, GGC, GGA y GGG

Obtencin de organismos genticamente idnticos En el campo de la Ingeniera gentica consiste en aislar y multiplicar un gen, o en general, un trozo de ADN En Animales superiores consiste en obtener un individuo a partir de una clula o de un nucleo de otro individuo

Conjunto de tcnicas nacidas de la Biologa molecular que permiten manipular el genoma de un ser vivo

cromosoma

Homo sapiens

gen

Mediante la ingeniera gentica se pueden introducir genes Escherichia coli en el genoma de un individuo que carece de ellos

Aislamiento y manipulacin de fragmentos de ADN de un organismo para introducirlo en otro (ADN recombinante)

Nathans D., Arber W., y Smith H. (premio Nobel de Fisiologa y Medicina en 1978 por el descubrimiento de las enzimas de restriccin y su aplicacin en Gentica Molecular)

Molcula A

Molcula B

Digestin de ambas molculas con la misma enzima de restriccin, BamHI Extremos cohesivos Mezclar

Tratar con ADN-ligasa

ADN recombinante

En 1983 Kary Mullis da a conocer esta tcnica y en 1993 recibi el Premio Nobel de Qumica por este descubrimiento

Es un proceso cclico (cada ciclo consta de 3 pasos)

94C desnaturalizacin (separacin de las dos hebras de ADN) 50C Anillamiento de "cebadores"

72C copia de cada una de las hebras de ADN por la ADN polimerasa

35 ciclos

236= 68 billones de copias

Plsmido

Plsmidos
gen de resistencia a la ampicilina

2
Extremos cohesivos

Molcula de ADN recombinante

Plsmido

Virus

Ciclo lisognico

Ciclo ltico

(f)

(g)

(h)

Genoma de hongos: 44 millones de pares de bases Huesped: Escherichia coli Vector: Bacterifagos capacidad: 20 mil pares de bases

Genoma humano: 3000 millones de pares de bases Huesped: Saccharomyces cerevisiae Vector: YAC (cromosoma artificial de levadura) MegaYAC (capacidad: 1 milln de pares de bases)

ACTTTGTCCACGGCCTAAGCGTTTTTTGCCC

Secuenciacin de genomas

AGTGACTTTGTCCAAC GTCCAACAGTTACCAAGTGACTTTGTCCAC TTTTGCCC AGTGACTTTGTCCA ACGGCCTAAGCGTTTTTTTT

ALINEAMIENTO DE TODAS LAS SECUENCIAS Y RECONSTRUCCIN DEL CROMOSOMA

Deteccin de mutaciones

Mtodo de diagnstico rutinario (relacin entre enfermedad y mutacin puntual)

Secuenciacin de ADNs fsiles

Posibilidad de aislar secuencias de ADN a partir de unas pocas copias (la mayora estn daadas o degradadas)

Diagnstico de enfermedades genticas

Diagnstico prenatal / Diagnstico preimplantacin de enfermedades hereditarias o determinacin del sexo del feto previamente a su implantacin en procesos de fecundacin in vitro

Identificacin de especies y control de cruces entre animales

Para descubrir fraudes comerciales, tales como vender carne de una especie ms barata a los precios de otra ms cara, o el comercio ilegal de especies en peligro

Secuenciacin de genomas

Conocimiento bsico y aplicado de diferentes organismos (incluido el genoma humano)

16 de Febrero de 2001 Celera Genomics

Proyecto genoma humano

La secuencia del genoma es un atajo valioso: ayuda a los cientficos a encontrar los genes ms fcil y rpidamente y sienta las bases para averiguar la funcin de los genes identificados Beneficios mdicos tras el conocimiento de la estructura de cada gen humano 1. Diagnstico en individuos con riesgo de ser portadores del gen de alguna enfermedad Marco de trabajo para el desarrollo de nuevas terapias, adems de nuevas estrategias para la terapia gnica

2.

15 de Febrero de 2001 Consorcio pblico internacional

Obtencin de protenas de inters mdico, comercial, etc...

(insulina, hormona del crecimiento, factores de coagulacin antes se obtenan a partir de los tejidos que las producen o fluidos corporales)

Obtencin de vacunas recombinantes

Extraccin del ADN del virus

(aternativa al uso de organismos patgenos inactivos)

ADN plsmido bacteriano

Integracin del plsmido hbrido en el ncleo de una clula de levadura

La levadura fabrica las protenas vricas con poder inmunolgico

Inyeccin de protenas vricas en un chimpanc

Diagnstico de enfermedades de origen gentico

ADN sano ADN enfermo Conocimiento previo de la secuencia de ADN enfermo

Mediante ingeniera gentica se construye una sonda de ADN, marcada (marcaje fluorescente), con la secuencia complementaria del ADN enfermo

ADN complementario del ADN enfermo

DIAGNSTICO

Biochip Microarray DNAchip

Si aparecen bandas fluorescentes demuestra que la persona presenta la anomala Hibridacin? Renaturalizacin No hibridacin? del ADN con la sonda fluorescente Desnatura lizacin del ADN ADN de la persona que se quiere diagnosticar

Plantas transgnicas

Agrobacterium tumefaciens es patgena de plantas.Produce tumores

Agrobacterium Plsmido Ti

ncleo cromosoma

Transgnesis= introduccin de ADN extrao en un genoma, de modo que se mantenga estable de forma hereditaria y afecte a todas las clulas en los organismos multicelulares.
Ingeniero gentico natural tras sutitucin de genes onc por genes de inters

inductor de tumores contiene oncogenes (genes onc)

cromosoma clula vegetal tumores Proliferacin de hormonas crecimiento. Se forman tumores en las zonas de la lesin

Resistencia a herbicidas, insectos y enfermedades microbianas

El maz transgnico de Novartis es resistente al herbicida Basta y tambin es resistente al gusano barrenador europeo (contiene el Gen de resistencia a la toxina Bt de Bacillus thuringiensis) produce su propio insecticida Problemas:La toxina Bt en las plantas transgnicas tiene propiedades sustancialmente diferentes a la toxina Bt en su forma natural. La toxina puede ser transmitida a travs de la cadena alimenticia, un efecto que nunca ha sido observado en la toxina Bt en su forma natural. Larvas de especies de insectos predadores benficos (larvas verdes de crisopa) murieron cuando fueron alimentadas con el gusano barrenador europeo Gold rice de Monsanto con color amarillo por los altos niveles de vitamina A

Mejora de la calidad de los productos agrcolas

Produccin de aceites modificados

Sntesis de productos de inters comercial

Anticuerpos animales, interfern, e incluso elementos de un polister destinado a la fabricacin de plsticos biodegradables

Transgnesis en animales

(por microinyeccin de zigotos)

Gen humano

Secuencia promotora para la sntesis de una protena de la leche

Gen hbrido

humano Ovulos de cerda fecundados

rata

Desarrollo de una cerda transgnica

Clonacin de animales

(TRANSFERENCIA NUCLEAR DE CLULAS EMBRIONARIAS)

Clonacin de animales

(TRANSFERENCIA DEL NCLEO DE UNA CELULA SOMATICA: CLULA DIFERENCIADA)

Clonan terneros en EE UU para producir anticuerpos humanos

efe- Washington - agosto 2002

Terneros clonados y manipulados genticamente (fbrica de anticuerpos humanos) genes para anticuerpos humanos recombinantes clulas drmicas clonacin

Objetivo: Tratamiento de enfermedades inmunolgicas Futuro: Tratamiento de una amplia gama de enfermedades ocasionadas por bacterias y virus, como hepatitis, ntrax (utilizada como arma biolgica)

Clonan cerdos destinados a trasplantar sus rganos a humanos

La empresa escocesa PPL Therapeutics logra retirar de los cerditos el gen que provoca el rechazo en transplantes a humanos "alfa 1,3
galactosil transferasa"

Enero 2002. AP Photo/Roanoke Times, Gene Dalton (IDEAL-EFE)

Paso importante en favor del xenotrasplante (transferencia de clulas u rganos de una especie a otra)
Ayudar a superar la escasez de rganos humanos para hacer trasplantes de todo tipo

Un laboratorio de Texas clona al primer animal domstico

"Copycat" es el primer gatito nacido mediante clonacin" El experimento abre las puertas de la clonacin masiva de animales domsticos, un fin sin explorar cuya sola posibilidad haba desencadenado ya el almacenamiento de clulas de mascotas por parte de sus ricos propietarios

febrero 2002 Universidad College Station (Texas)

El sexto da El ataque de los clones

La clonacin humana ya se est intentando de forma clandestina por varios laboratorios en el mundo

La clonacin reproductiva no arroja los resultados suficientes, no existen garantas como para decir 'Vamos a clonar un ser humano'

Por cada intento de clonacin hay detrs miles de fallos, Para obtener a Dolly: 277 fusiones de abortos y malformaciones ovocitos con clulas mamarias, solo genticas 29 embriones fueron aptos. De estos solo uno result un xito

CREACIN DE UN EMBRIN ARTIFICIAL (con clulas adultas) -embrin somticoOBJETIVO LTIMO: TRATAMIENTO de ENFERMEDADES 1 Cultivo de blastocisto OBJETIVO LTIMO: AUTOTRASPLANTES (no hay rechazo) Fecundacin

2 Eliminacin de la capa externa Embrin temprano

3 Adicin de sustancias que disgregan la masa celular interna

Fusin de clula somtica y ovulo enucleado En caso de existir deficiencias a nivel gentico se puede hacer terpia gnica a nivel de clulas madre

4 Transferencia de los agregados celulares a un nuevo pozo

6 Adicin de factores de diferenciacin seleccionados

7 Administracin de clulas diferenciadas a tejidos daados 5 Formacin de clulas diferenciadas a tejidos daados

Las clulas madre abren la posibilidad a un nuevo mundo en las terapias de los trasplantes
Calificada como una tcnica "ineficaz e imperfecta" por cientficos como Iam Wilmut, "padre" de la oveja Dolly, la clonacin ha encontrado en las clulas "madre" su primera razn de ser. Retos tcnicos 1. Las clulas embrionarias de ratn originan teratomas y teratocarcinomas en animales adultos

2.
3.

Conocimiento de las seales implicadas en el desarrollo y diferenciacin

Asegurar la salud a largo plazo de las clulas a transplantar (edad biolgica de las clulas)

Declaracin Universal de Derecho Humanos y Genoma Humano de la UNESCO (1997), adoptada en 1998 por la Asamblea General de ONU (busca un balance entre una
continuacin en las investigaciones y la salvaguarda de los derechos humanos)

Frente a los mltiples beneficios de la ingeniera gentica pueden surgir algunos problemas

Problemas sanitarios nuevos microorganismos patgenos,

efectos secundarios de nuevos frmacos de diseo, etc...

Problemas ecolgicos

desaparicin de especies con consecuencias desconocidas, nuevas contaminaciones debidas a un metabolismo incontrolado, etc...

Problemas sociales y polticos en el campo de la produccin industrial, agrcola y ganadera,

pueden crear diferencias an ms grandes entre pases ricos y pobres. El sondeo gnico en personas puede llevar a consecuencias nefastas en la contratacin laboral, por ejemplo, y atenta contra la intimidad a que tiene derecho toda persona (empleo, agencias de seguros, discriminacin..).

Problemas ticos y morales

Poder conocer y modificar el patrimonio gentico humano puede ser una puerta abierta al eugenismo "Eugenesia: la ciencia del incremento de la felicidad humana a travs del perfeccionamiento de las caractersticas hereditarias".