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UNIVERSITE SAAD DAHLEB DE BLIDA FACULT DES SCIENCES AGROVETERINAIRES ET BIOLOGIQUES DEPARTEMENT DE BIOLOGIE

Mmoire de Fin dtudes

En Vue de Lobtention du Diplme dIngnieur dEtat Option: Contrle de Qualit et Analyse

Contribution ltude nutritionnelle du son de deux crales (orge ques chez le rat wistar et bl) sur les troubles mtabolique chez le rat wistar

Plan de travail
Introduction Objectifs

Matriel et Mthodes
Rsultats et Discussion

Conclusion et perspectives

le bl, orge, seiglenourriture fondamentale de lhomme pendant des millnaires, les crales ont progressivement perdu, dans les pays industrialiss, leur place privilgie dans lalimentation. Il ne reste prsent sur de nombreuse tables quun triste pain blanc sans intrt gustatif ou dittique, tout juste bon pousser la viande ou tartiner, eux, en revanche, toujours plus prsents.

Les crales, compltes et de bonne qualit, sont prsentes comme une solution naturelle, efficace et conomique pour retrouver une alimentation quilibre et combler ses carences. Mais le plus dur reste faire : changer ses habitudes, apprendre remplacer progressivement le riz et le bl raffin par toute la palette des crales compltes qui apporteront sant.(Garance leureux, 1999).

Limpact positif des fibres alimentaires sur la rponse glycmique/insulinmique de mme que sur le profil lipidique est un effet bien reconnu chez les scientifiques et les professionnels de la sant. Une augmentation de lapport en fibres alimentaires permet de diminuer la densit nergtique, lindice glycmique des aliments, le dbit de la vidange gastrique, et labsorption des macronutriments.ces effets ont tous le potentiel dinfluencer le niveau de satit, lapport nergtique et le poids corporel.

Objectifs
Nous avons entrepris ce travail afin de valoriser des sous produits de mouture savoir le son dorge et le son de bl, par une approche visant leffet de son incorporation dans les rgimes des rats de type Wistar un taux de 35 %. On sest intresse essentiellement : 1-une caractrisation du son savoir le son dorge et le son de bl sur le plan: physico-chimique, microbiologique et toxicologique. 2-confectionner trois types de rgimes alimentaires pour des ratsWistar:

Rgime standard pour le maintient et la croissance des rats. Rgime hypercalorique servant provoquer des dysfonctionnements mtaboliques glucido-lipidique (hypercholestrolmie, hyperglycmie, hypertriglycridmie et obsit). Rgime riche en son (dorge et bl) 35% de taux dincorporation afin de corriger ces dysfonctionnements. 3-Mener une exprimentation sur une population de 32 rats Wistar pendant 4 mois et les suivre sur le plan: pondral. biochimique: glycmie, cholestrol, triglycride. histologique: prlvement du tissu animal savoir le foie.

Ce travail a t ralis en collaboration avec les laboratoires suivants :

Laboratoire pharmaco- toxicologie du groupe SAIDAL antibiotical de Mdia qui nous a permis de ralis ltude toxicologique. A savoir levage et slection des lots des rats, pris de poids, administration des rgimes, ainsi que les prlvements sanguins. le laboratoire danalyses mdicales pour les analyses biochimiques: glycmie, cholestrol, triglycride, HDL, LDL Laboratoire danatomie pathologique du CHU de Hussein Dey Priode de stage : 4 mois Allant du mois de Mars au mois de Juillet 2011

Agitateur

Centrifugeuse
Spectrophotomtre Automate Leica de circulation

Matriels de chirugie Trousse pour dissection Des moules en mtale

Appareil dinclusion Microtome Leica Cassettes en plastique Tubes sec

Microscope optique

MTHODES

Les diffrentes tapes de prparation de laliment

32 rats mles, de souche wistar dont le poids moyen est de 190g

Les rats sont identifis par un marquage spcifique pour chaque animal.

32 rats males Lot tmoin (7 rats) recevant un rgime standard Lot recevant un rgime standard (25 rats)

Lot recevant un rgime hypercalorique (24 rats)

Lot recevant le poursuite rgime hypercaloriq ue Lot recevant le rgime standard (retour) Lot recevant des fibres de bl Lot recevant des fibres dorge

Ladministration a t faite jour par jour a une quantit de 15g/jr .

Prlvement de sang
Aprs 15 jours dadministration du rgime standard (J15) Au 45me ,75me jour (J45 ,J75)du rgime riche aux fibre.

Au 45me ,75me jour du rgime hypercalorique (J45, J75).

Aprs (15 jours, 45 jours, 60 jours, dadministration des rgimes standard, hypercalorique, riches aux fibres) Les animaux sont sacrifis . Aprs dissection un examen macroscopique est ralise sur le foie, Les organes prlevs dans des piluliers sont immdiatement fixs dans du formol 10 % pour ltude histologique.

Etude histologique Fixation

Une tude macroscopique est ralise, les organes sont coups en petits fragments et conserver dans du formol 10 % dans des cassettes sur lesquels est inscrit ltat de lanimal et lorgane

La circulation
1er tape la fixation par le formol 10% 2eme tape la dshydratation 3eme tape lclaircissement 4me tape limprgnation la paraffine

Enrobage
Lcoulement de la paraffine dans des moules mtalliques
orientation des pices dans la paraffine. Placement des cassettes, sur les quelles est inscrit ltat de lanimal

Microtomie et confection des coupes

Schage

Dparaffinage

Coloration HE

Le montage

La lecture

Rsultats et Discussion

Rsultat de lvolution pondrale

Masse pondrale (g) des diffrents types de rgime

200

180
160 140 120

100
80 60 40 20 0

rgime hypercalorique(poursuite) rgime standard (retour) rgime de fibre de bl rgime de fibre d'orge

lot tmoin
140 120 100 80 60 40 20 0 2me 4me 6me 8me 10me 12me 14me semaine semaine semaine semaine semaine semaine semaine lot tmoin

200

100 160 120

60

180

80

140

40

20

0 1ere semaine 2me semaine 3me semaine 4me semaine 5me semaine 6me semaine 7me semaine 8me semaine 9me semaine 10me semaine 11me semaine 12me semaine 13me semaine 14me semaine rgime hypercalorique(poursuite)

rgime hypercalorique (poursuite)

200

100 160 120

140

180

60

40

80

20

0 1ere semaine 2me semaine 3me semaine 4me semaine 5me semaine 6me semaine 7me semaine 8me semaine 9me semaine 10me semaine 11me semaine 12me semaine 13me semaine 14me semaine

rgime de fibre de bl

rgime de fibre de bl 200 160 100 180 40

80

140

120

60

20 0 1ere semaine 2me semaine 3me semaine 4me semaine 5me semaine 6me semaine 7me semaine 8me semaine 9me semaine 10me semaine 11me semaine 12me semaine 13me semaine 14me semaine

rgime de fibre d'orge

rgime de fibre d'orge

200

100 160 120

140

80

60

180

40

20

0 1ere semaine 2me semaine 3me semaine 4me semaine 5me semaine 6me semaine 7me semaine 8me semaine 9me semaine 10me semaine 11me semaine 12me semaine 13me semaine 14me semaine

rgime standard (retour)

rgime standard (retour)

Rsultats des paramtres biochimiques

tmoin
1.5 1 0.5 temoin

RSA j15
1.5 1 0.5 0 RSA j15 1.2 1 0.8

j45:R,HYPC

0.6
0.4 0.2 0 j45:R,HYPC

glycmie (g/l)
1.4 1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 glycemie

0
temoin le retour au RSA poursuit du RHYPC fibre de bl fibre d'orge

Nous avons constat que le type de rgime administr a influenc sur le taux de glycmie pour les quatre lots traits par une diminution. Les quatre lots ont montr des moyennes varie entre
Le rgime standard (retour) 1.14 Le rgime hypercalorique (poursuite) 1.13 Rgime de fibre de bl 0.97 Rgime de fibre dorge 1.16

Tmoin Glycmie (g/l)

1.23

trigycrides (g/l)
3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 tmoin le retour au RSA poursuit du RHYPC fibre de bl fibre d'orge trigycrides

Tmoin triglycrides (g/l)

Le rgime standard (retour) 1.56

Le rgime hypercalorique (poursuite) 3.19

Rgime de fibre de bl 2.14

Rgime de fibre dorge 0.97

0.58

cholestrol (g/l)
1.2
1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 tmoin le retour au RSA poursuit du RHYPC fibre de bl fibre d'orge cholestrol

Tmoin Cholestrol (g/l)

Le rgime standard (retour) 0.69

Le rgime hypercalorique (poursuite) 1.12

Rgime de fibre de bl 0.78

Rgime de fibre dorge 0.62

0.82

HDL (g/l)
0.45 0.4 0.35

0.3
0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 temoin le retour au RSA poursuit du RHYPC fibre de bl fibre d'orge HDL

Tmoin HDL (g/l) 0.44

Le rgime standard (retour) 0.06

Le rgime hypercalorique (poursuite) 0.09

Rgime de fibre de bl 0.09

Rgime de fibre dorge

0.06

LDL (g/l)
0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 tmoin le retour au RSA poursuit du RHYPC fibre de bl fibre d'orge LDL

Tmoin LDL (g/l) 0.34

Le rgime standard (retour) 0.37

Le rgime hypercalorique (poursuite) 0.35

Rgime de fibre de bl 0.3

Rgime de fibre dorge

0.4

Rsultats de lhistologie
Rsultats dhistologie de foie

Chez le rats du lot tmoin

Veine centro-lobulaire

Espace porte Veine artre Canal biliaire

Parenchyme hpatique normal sans aucune modification

Chez les rats recevant rgime Hypercalorique ( poursuite):

Vacuole de triglycride dans les hpatocytes

Statose hpatique

Chez les rats recevant le son (bl) :

Parenchyme hpatique avec statose modre

Chez les rats recevant le son (orge) :

Veine centro-lobulaire

Parenchyme hpatique normal

Ltude mene a t ralise dans le but de valoriser un sous produit de mouture savoir le son dorge et de bl. les rsultats des analyses effectues ont rvl que le son a une importance nutritionnelle considrable par rapport sa composition en lments nutritifs.