CROMATOGRAFIA

CROMATOGRAFIAS
La cromatografa es un mtodo fsico de separacin para la caracterizacin de mezclas complejas.

En todas las cromatografas hay 2 fases: un estacionaria y una mvil. La fase mvil consiste en un fluido (gas, lquido o fluido supercrtico) que arrastra a la muestra a travs de la fase estacionaria. La fase estacionaria se trata de un slido que puede ser slice, alumina o resina de intercambio inico o un lquido fijado en un slido.

TIPOS DE CROMATOGRAFAS
Las distintas tcnicas cromatogrficas se pueden dividir segn cmo est dispuesta la fase estacionaria: Cromatografa plana. La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales tcnicas son: Cromatografa en papel Cromatografa en capa fina Cromatografa en columna. La fase estacionaria se sita dentro de una columna. Segn el fluido empleado como fase mvil se distinguen: Cromatografa de lquidos Cromatografa de gases Cromatografa de fluidos supercrticos

CROMATOGRAFA LQUIDA
Es tambin conocida como Cromatografa de lquidos. Tcnica analtica ampliamente utilizada, la cual permite separar fsicamente los distintos componentes de una solucin por la absorcin selectiva de los constituyentes de una mezcla.

TIPOS DE CROMATOGRAFIA DONDE LA FASE

MOVIL ES UN LIQUIDO CROMATOGRAFA DE REPARTO Es til para compuestos polares, no inicos masa <3 000 . La diferencia entre ambas tcnicas (normal e inversa) radica en la polaridad de la fase estacionaria.

CROMATOGRAFA DE ADSORCIN
FASE ESTACIONARIA: Se utilizan la slice y la almina. Los dos adsorbentes tienen tiempos de retencin de: hidrocarburos armaticos,< FASE MVIL. Se podra utilizar el Hexano , la fuerza eluyente . Se eligen dos disolventes compatibles, uno de los cuales es fuerte(grande) y el otro dbil.

CROMATOGRAFA IONICA

Se utiliza para la separacin y determinacin de especies inicas

CROMATOGRAFA DE EXCLUSIN POR TAMAO O EN GELES

Es una tcnica que se aplica particularmente a especies de alto peso molecular. La fase estacionaria Son partculas polimricas y partculas de slice, con dimetros de partcula que oscilan de 5 a 10m (divinilbenceno). La fase movil Cloroformo, THF, alcoholes, agua Es til para la separacin de aminoacidos

CROMATOGRAFA DE AFINIDAD
Permite la separacin de mezclas proteicas . Resina tiene un ligando al cual se une especficamente una protena,las otras son lavadas, despus es eluida nuestra protena. La fase estacionaria es un slido como la agarosa o un lecho de vidrio poroso en el cual se inmoviliza el ligando de afinidad

CROMATOGRAFA QUIRAL

Utiliza fases estacionarias quirales para separar ismeros pticamente activos (enantimeros), de mezclas racmicas de aminocidos.

La fase estacionaria son soportes de gel de slice. Este material polimrico se le une un ismero pticamente activo.