PCR POLIMERASA CHAIN REACTION

Clase: Biologia Molecular

Estudiante: Nathalie Cortez Archila

Profesor: Felix Garcia

QUE ES EL PCR?
La reaccin en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en ingls (Polymerase Chain Reaction), es una tcnica de biologia molecular desarrollada en 1986 por Kary Mullis cuyo objetivo es obtener un gran nmero de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mnimo; en teora basta partir de una nica copia de ese fragmento original, o

molde.
Esta tcnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su utilidad es que tras la amplificacin resulta mucho ms fcil identificar con una muy alta probabilidad virus o bacterias causantes de una enfermedad, identificar personas (cadveres) o hacer investigacin cientfica sobre el ADN amplificado. Estos usos derivados de la amplificacin han hecho que se convierta en una tcnica muy extendida, con el consiguiente abaratamiento del equipo necesario para llevarla a cabo.

PRINCIPAL FUNCION DEL PCR

La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) permite a los investigadores para producir millones de copias de una secuencia especfica de ADN en aproximadamente dos horas. Este proceso automtico evita la necesidad de utilizar bacterias para amplificar el ADN.

TRES PASOS DE LA PCR

1. Desnaturalizacin. Se conseguira elevando la temperatura del tubo de reaccin hasta 94oC, durante, por ejemplo, un minuto (este tiempo puede variar entre minuto y 2 minutos) 2. Alineamiento. Se desciende la temperatura hasta una temperatura que puede oscilar entre 40 oC y 60 oC (dependiendo de diversos parmetros como la secuencia de los primers, su especificidad,...). La duracin de este paso puede oscilar entre minuto y 2 minutos.


oC

3. Extensin. Se vuelve a aumentar la temperatura hasta los 72 y se deja actuar a la Taq polimerasa durante 1 2 minutos. Estos tres pasos constituyen un ciclo. La repeticin de este ciclo

unas 40 veces, por ejemplo, permite obtener, como resultado de un experimento de amplificacin, millones de copias del fragmento de inters. Todo esto, por supuesto, se realiza de forma automatizada. Para

ello, los tubos de reaccin se introducen en un termociclador que de

forma

automtica

realiza

los

40

ciclos

de

amplificacin.

IMPORTANCIA DEL PCR

Uno de los aportes fundamentales de la PCR a la investigacin bsica en biologa molecular consiste, precisamente, en la rapidez y eficiencia mediante la cual se realiza una tarea que antes requera largas y tediosas jornadas. El producto que se obtiene al finalizar la reaccin, favorece la tarea de los investigadores empeados en ampliar nuestros

conocimientos sobre la estructura y funcin de los genes.

 Ha facilitado: La tarea de identificacin de personas Nuevas estrategias de diagnstico Detectar agentes infecciosos como los virus de las hepatitis B y C o regiones del genoma del virus de la inmunodeficiencia humana (HIV) Diagnosticar la presencia o ausencia de HIV en recin nacidos de madres seropositivas Diagnstico de enfermedades tales como las hemofilias A y B, la distrofia muscular y la fibrosis qustica, e hizo posible reconocer mutaciones de genes vinculadas con enfermedades oncolgicas.