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Malcom Forbes

GENTICA BACTERIANA

GENETICA BACTERIANA
GENTICA HERENCIA Genotipo
Fenotipo SELECCIN

GEN

Expresin
replicn transposn

PROCESOS QUE REALIZA LA BACTERIA


REPLICACIN

MUTACIN
REPARACIN

Una sola clula

HOMOLGA
RECOMBINACIN HETERLOGA

Dos clulas INTERCAMBIO DE DNA

CONJUGACIN
TRANSFORMACIN TRANSDUCCIN

INFORMACIN DEL DNA

ESTRUCTURA DEL DNA


Carga negativa

ADN girasa

ATP

DNA BACTERIANO
Replicacin Bacteriana
40

continua

Divisin Celular

20

Tabique - Septo

Min C Min D

Min E

REPLICACIN
* INICIO
*ELONGACION *REVISIN PRODUCTO *TERMINACIN Caja Dna A Cromosoma Plasmidos Bacterifagos

Ori C

REPLICONES

REPLICACIN (Inicio)
Ori C Dna A + Protena Dna A + ATP

HELICASA Protena Dna B desenrosca SSBP

REPLICACIN (Inicio)
SSBP

DNA Girasa Primosa


Imprimador RNA Pol. DNA

I Cadena Retrasada II Reparacin III Sntesis DNA

REPLICACIN (Elongacin)

Pol DNA I

CADENA OKASAKI

Pol DNA III

REPLICACIN (Revisin del Producto)


Pol DNA III Dam Metilasa 5 - 3 Exonucleasa Metila Adeninas

REPLICACIN (Terminacin del Producto)


DNA

Ter D, A

Ori C

Ter C, B

tus

REPLICACIN

MUTACIONES

MUTACIONES
AT GC AT G-C Transicin G G G G C C -C -C G-C AT G-C A-T Pricas A - G

AT GC AT G-C

Transversin

TA G-C T-A G-C

T-A C-G T-A C-G

Pirimidicas C - T

CAUSAS DE LAS MUTACIONES


FSICAS

RADIACIONES ULTRAVIOLETA

DIMEROS DE PIRIMIDINA

CAUSAS DE LAS MUTACIONES


QUMICAS

Modificadores Covalentes

Ej: Nitrosoguanidina

Alquilan o Desaminan una Base

Agentes Intercalantes

Ej: Naranja de Acridina Bromuro de Etidio

Mayor enroscamiento del DNA

Anlogos de Bases

Ej: Ribavirina 5 Bromouracilo 2 - Aminopurina

Sustituyen la Base

MUTACIONES ANLOGAS DE BASE

CONSECUENCIAS DE LAS MUTACIONES


Silenciosa No cambia Estructura Secundaria y Terciaria de la protena aa

Letal

Modificacin de Actividad

Cambia la Respuesta

Actividad Enzimtica

Protena Alterada

Reaccin Cruzada

Proteus OX19 Salmonella Typhi

Pleiotrpica

Afecta ms de una Protena

SUPRESIN DE LAS MUTACIONES

AT GC AT G-C

Pricas A - G

Pirimidicas C - T

MUTACIN

IMPORTANCIA DE LAS MUTACIONES


RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS

Bacteria

Fragmento DNA Plsmido

Conjugacin Transferencia Transduccin

Enzima Inactiva A/B

A/B

Libera Opern

Codifica

Producto Resistente o inactiva el A/B

Mutacin

(Gen Codifica) Cambio estructura

Alteracin Sitio Blanco para el A/B

CAMBIO DE SITIO BLANCO

Bacteria

Bacteria

Antibitico

Antibitico

REPARACIONES
Reversin Directa (Fotorreactivacin) +
DNA 1 Luz UV

DNA Mutado Luz

+
FOTOLIASA

DNA 1

REPARACIONES
FISIN NUCLEAR (Excisin - Escisin) +
DNA 1 Luz UV A B A B

uvrA uvrB uvr C Reparosoma

DNA Mutado

Reparosoma

+ GLUCOSILASA DNA

DNA Mutado

+
Pol DNA II

DNA 1 Reparado

REPARACIONES
REPARACIN GLOBAL (Regulacin SOS)
Rec. A

Repara Proteasa Lex. A Detiene Degrada

lex

Operador

REGULACIN S O S
DNA
Rec A
Lex A

X X X

Ter D, A Ori C

Ter C, B

REPARACIONES

RECOMBINACIN DEL DNA


Combinaciones de genes que se originan en una sola clula, en que se renen los genes mutantes de dos clulas diferentes

Gen 1 Donadora

Gen 2

Receptora

Gen 1 + 2

Cromosoma Recombinante

Replicn

Transposn

Intercambio DNA Replicn Transposn


Cambian Caractersticas Genticas Cambian Caractersticas Morfolgicas

HETERLOGA

GENES NUEVOS

HOMLOGA

GENES PROPIOS

Replicn

RECOMBINACIN HETERLOGA (replicn)


GENERALIZADA

Rec. A

Pol DNA III

DNA

SEMEJANTE

DNA

REPLICON

Donador

Receptor

ESPECIFICA EN EL SITIO

DNA Escherichia coli gal bio

INSERCIN DE

TRANSPOSN

INSERCIN DE

TRANSPOSN

INSERCIN DE

TRANSPOSN

RECOMBINACIN HETERLOGA (transposn)


A

Secuencia de Insercin
Inactiva Elemento

SI

Gen gal E. coli

COMPUESTOS Tn

Virulencia Resisten

A/B
Tetraciclina

TIPO A
Gen RESISITENTE

Ampicilina Haemophylus Neisseria

Tn 3

Bact. Entricas E. coli

RECOMBINACIN HOMLOGA
Genes sobre el Replicn se ordena

RECOMBINACIN HOMLOGA

RECOMBINACIN HOMLOGA
INVERSIN ESPECFICA DE SITIOS
H1

Anti H1

PROTENA FIS

H2

Anti H1

RECOMBINACIN HOMLOGA
D C B A

Anti A

CONVERSIN GENTICA

Regin Inmunognica

A D C B

Anti A

Neisseria Borrelia

Re Fagocitosis

INTERCAMBIO DE DNA
CONJUGACIN

TRANSFORMACIN

TRANSDUCCIN

CONJUGACIN
TRANSFERENCIA DE PLSMIDOS
Bacteria Donadora

Gen Protena Tra D


Pili Sexual

Puente Conjugado

Expresar

F+ Pili Sexual F F+ + Bacterias Entricas

F + = No F= 2F+

CONJUGACIN
PLSMIDOS
DNA bicatenario circular Relacin G-C

F+

=
Cromosoma bacteriano

CLASES

Resistencia Colcinogena Penicilinasa Degradadores Crpticos

CONJUGACIN (Factor o Plsmido F)


R
Dos segmentos de DNA RTF = Factor de Transferencia de Resistencia
Genes para Replicacin y Transmisin Determinantes R = Determinantes de Resistencia Uno o ms sitios de Resistencia Metales Pesados Sulfanilamida Estreptomicina Cloranfenicol Tetraciclina Ampicilina Penicilinas Enzimas Mercurio Cadmio Nquel Cobalto

Antibiticos
Sitio Blanco

CONJUGACIN (Factor o Plsmido F)


FACTOR Col
Bacterias Liberan Toxinas Bacteriocinas Col B - Col E1 Col E2 - Col I Col V

Escherichia coli

Colicinas

DEGRADADORES
Plsmidos del Alcanfor Plsmidos del Octano Plsmidos del Salicilato

Capacidad para Catabolizar diferentes compuestos orgnicos, no corrientes en rutas Metablicas

Enzimas
Pseudomonas

CONJUGACIN (Factor o Plsmido F)


PENICILINASA
Plsmido de Staphylococcus aureus Enzima Penicilinasa

g
Hidrlisis anillo B. Lactmico
R. Iones Hg (Hgr)

Destruye Penicilina
R. Eritromicina (eror)

CRIPTICOS

Genes que no se podan detectar


DNA Plsmidico pequeo y circular obtenido por ultracentrifugacin Mayora de Cepas Bacterianas

CONJUGACIN
TRANSFERENCIA DE GENES CROMOSMICOS

Hfr
E. Coli K 12

Salmonella Yersinia pseudotuberculosis Erwinia Pseudomona aeruginosa Streptomyces Nocardia

Puede presentarse recombinacin

Gen Hfr semejante clula receptora


No se recombina Se Pierde Insercin especfica en sitio para ser frtil No recibe gen Tra D

CONJUGACIN
TRANSFERENCIA DE PLSMIDOS Y GENES CROMOSMICOS

a
DONADORA

F
a

RECEPTORA

PLSMIDO = VECTORES

P. Shutle = Bacteria , Clula Eucariota P. Cosmido = Sitios Cos, Cabeza de fago

CONJUGACIN
IMPORTANCIA
Factores de virulencia (Genes Toxinas)

Gram Positivas + Plsmido Gram Negativa


Bacillus Clostridium Streptomyces Staphylococcus Enf. Nosocomial Enterobacterias (FTR) No sntesis Pilina

Resistencia a Antimicrobianos (factor R)

Ingeniera Gentica (mapa gentico)

Segn orden de transferencia y tiempo de aparicin de los genes en cultivo de bacterias

TRANSFORMACIN
Consumo DNA por la Bacteria
DNA pasado por conjugacin DNA asa, no lo degrada DNA nunca fuera de la clula DNA pasado por transferencia DNA transformado

DNA sensible DNA asa

DNA lisis de bacterias

DNA del medio ambiente

TRANSFORMACIN
Ag. K

Frederick Griffith 1928

Neumococo cepa LISA (1)

Clulas (1)

(1) Muerto por calor

TRANSFORMACIN

Ag. O

Neumococos Cepa RUGOSA (2)

TRANSFORMACIN

+
(1) Muerto por calor
Neumococos Cepa RUGOSA (2)

Cepa LISA (1, 2)


Transformado

DNA

TRANSFORMACIN
Avery
G R A M P O S I T I V A S

Bacterias muertas liberan DNA Factor Competencia


Bacterias vivas toman restos de DNA Staphylococcus Streptococcus Bacillus

Cpsula

GRAM - NEGATIVAS
Bacteria

+ CaCl2

Aceptan DNA

Neisseriae - Haemophylus Pseudomona

TRANFORMACIN
Aplicaciones
Introducir Genes de Virulencia Corregir Genes de Virulencia Defectuosos

Penetra Transposones para Re. A/B


Induce la Bacteria para recibir Genes Eucariotes

Plsmidos (Vectores)

Bacteria Transformada, Produce Protenas Humanas

TRANSDUCCIN
Generalizada
Transmisin de DNA por Bacterifago

FAGO LISOGNICO FAGO LTICO

Genes introducidos en forma aleatoria

TRANSDUCCIN

TRANSDUCCIN LISOGNICA
Seal de excisin

Si es Incorrecta la insercin no da lectura

DNA recombinante
Cabeza funcional

Cabeza no funcional absorbido y no produccin de Fagos

TRANSDUCCIN LISOGNICA
DNA inyectado no posee Genoma Completo y por lo tanto no hay produccin de Fagos DNA Transformado en Recombinante

Cualquier GEN puede experimentar Transduccin por que el FAGO se inserta en cualquier sitio

TRANSDUCCIN LTICA
Insercin DNA del FAGO

En sitio Blanco DNA Bacteriano

Recombinacin

Produccin nuevos FAGOS con lisis Celular

TRANSDUCCIN ESPECIALIZADA
Profago Lambda
gal
att
N R mm A J

bio
att

att

gal
A att

gal

TRANSDUCCIN ESPECIALIZADA

Clula Eucariota 1

Escherichia coli

DNA Bacteriano + DNA Clula Eucariota

TRANSDUCCIN ESPECIALIZADA
DNA bacteriano

Conjugacin Hfr
1 DNA clula eucariota

1 2

TRANSDUCCIN ESPECIALIZADA

2 Bacterifago Lambda

gal

bio

Copiar la Informacin

Formacin de Fagos

TRANSDUCCIN ESPECIALIZADA
APLICACIONES Factor de Resistencia a Frmacos Staphylococcus aureus Genes Transferidos por transposicin b Corynebacterium diphtheriae

Produccin de Toxinas

Elaboracin de mapas genticos

Orden de Transferencia Momento en que aparece

Los datos obtenidos a partir de la secuenciacin y cartografiado del genoma humano