Vous êtes sur la page 1sur 43

INTERAO DA HISTOLOGIA E DA

PATOLOGIA
Prof. Gilberto G Facco,MS.c Patologista

Conceitos:
Histologia: estuda as clulas e o material extracelular que constituem os tecidos do corpo (Junqueira e Carneiro, 2004). A palavra tecido (do latim texere, tecer) foi primeiramente usada em contexto anotmico por bichat, um cirurgio francs que estava impressionado com as diferentes texturas encontradas em partes do corpo que ele dissecara.

Como resultado, ele descreveu o corpo como sendo formado por uma variedade de diferentes tecidos. Ao contrrio dos muitos tecidos diferentes que Bichat originalmente propusera, somente quatro tecidos bsicos so corretamente conhecidos, cada um com variaes (Cormack,2003).

Patologia: significa estudo das doenas (do grego pathos = doena, sofrimento, e logos = estudo, doutrina). No entanto, o conceito de Patologia no compreende todos os aspectos das doenas, que so muito numerosos e poderiam confundir a Patologia Humana com a Medicina (Brasileiro Filho, 2004).

Preparao dos cortes histopatolgicos


Grande parte de nosso conhecimento detalhado da estrutura corporal vem dos estudos de pequenas e representativas amostras cortadas em fatias muito finas, denominados cortes histolgicos.

Cortes para microscopia ptica precisam ser finos suficientes para transmitir bastante luz, a qual vem de baixo e deve passar atravs do espcime, da lente objetiva e, ento, da lente ocular, antes de atingir o olho.

Em geral, quanto mais fino o corte, menor a probabilidade de seus componentes celulares aparecerem sobrepostos.

A espessura mais adequada para cortes de microscopia ptica (de 5 a 8 m) menor do que o dimetro de uma clula tpica.

Cortes histolgicos so rotineiramente preparados pela tcnica de parafina. Procedimentos alternativos para a preparao dos tecidos so tambm descritos.

CORTES EM PARAFINA

A tcnica de parafina que serve de padro consiste nos estgios seguintes:

Coleta de material de Tecido


Fragmentos de tecidos (amostras de tecidos cortados < 1 cm em cada dimenso), podem ser obtidos atravs de bipsia (amostragem diagnstica), exciso cirrgica ou disseco aps a morte.

Para se evitar a deteriorao estrural inapropriada, as amostram post-mortem devem ser retiradas to logo possvel, e para minimizar a distoro dos tecidos, os instrumentos de dissecao devem ser extremamente afiados. Os fragmentos de tecido devem ser imersos em fixador imediatamente aps a remoo.

Fixao
A fixao qumica, requerida para se evitar a distoro desnecessria, promove a ligao cruzada de certas protenas e desnatura outras atravs de desidratao. A resultante coagulao das protenas teciduais tem um efeito endurecedor sobre os tecidos moles.

A fixao precisa ser rpida o bastante para diminuir a liberao, a partir das clulas mortas, de enzimas capazes de digerir os constituintes teciduais. Se a degradao por tais enzimas permitida continuar, ela arruna o detalhe microscpico, causando a degenerao post-mortem.

Os fixadores tambm imobilizam em suas posies um nmero de macromolculas de carboidratos e gorduras que, de outra maneira, poderiam ser perdidos durante o processamento do tecido. Alm do mais, a fixao mata bactrias e outros agentes causadores de doenas, e sua ao anti-sptica diminui o risco de contaminao quando tecidos infectados so manipulados.

Desidratao
A incluso em parafina substitui a gua dos tecidos por cera de parafina, permitindo que o bloco seja facilmente cortado. Devido parafina no ser solvel em gua, a gua removida do tecido fixado, submentendo-o a solues sucessivamente mais fortes de lcool etlico, deixando tempo suficiente para a cuidadosa penetrao do reagente a cada tempo.

Pelo fato de a parafina ser insolvel em lcool, o prximo estgio, a clarificao, envolve a substituio do lcool por um solvente de parafina que miscvel com lcool.

Clarificao
O xileno rotineiramente usado para a clarificao dos tecidos. O fragmento impregnado com lcool submetido a vrias passagens neste solvente, para substituir o lcool pelo xileno.

Incluso
O fragmento impregnado com xileno submetido a vrias passagens em cera de parafina quente, a qual solvel em xileno. Uma vez os tecidos ficando completamente saturados, a cera derretida ocupa os espaos anteriormente ocupados por gua. Ao esfriar, a cera endurece. Finas fatias podem ento ser obtidas dos tecidos includos.

Microtomia
A cera excedente desbastada e o bloco montado em um aparelho de cortar denominado de micrtomo. As bordas das finas fatias (cortes) que se obtm da navalha do micrtomo aderem umas s outras, produzindo uma longa fita da qual cortes isolados podem ser facilmente destacados.

Colorao e montagem
Solues aquosas so habitualmente usadas nas coloraes. Antes disso, a cera deve ser removida e substituda por gua. Para tanto, a lmina com o corte aderido submetida primeiramente ao xileno para remover a parafina, e depois a lcool absoluto para remover o xileno, seguido de lcoois de concentrao decrescente e, finalmente, gua.

Quando pronto para a colorao, o corte aparece claro. Aps a colorao, o corte submetido a solues de lcool de concentrao crescente, lcool etlico absoluto e xileno. O corte ento coberto com meio de montagem dissolvido em xileno. Este meio minimiza a refrao da luz que passa pelo corte.

Cortes de congelao
Se os cortes necessitarem ser examinados sem demora, a congelao dos tecidos tornan-se um meio prefervel de preparao. Nitrognio lquido e criostato.

Coloraes Histolgicas
Os componentes teciduais so difceis de distinguir com um microscpico ptico comum porque suas densidades pticas so muito semelhante. Entretanto, muitos deles podem tornar-se visveis atravs da seletiva absoro de corantes.

As coloraes histolgicas revelam os componentes teciduais ou por cor-los seletivamente ou por aumentar suas densidades pticas em diferentes propores.

Os cortes corados em H&E so corados com hematoxilina e eosina. A hematoxilina um corante denominado hematena (obtida da rvore do paucampeche) usado em combinao com ons Al3+. A eosina confere uma cor vermelha a rosa para a maioria dos componentes no corados numa tonalidade prpuro-azulado pela hematoxilina.

OBRIGADO PELO CONVITE E PARTICIPAO!!