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inmunoanalítico
s
MÉTODOS
INMUNOANALITICOS
• Características de un inmunoanálisis
• Marcadores de antígenos y anticuerpos
• Ensayos homogéneos y heterogéneos
• Clasificación
• Métodos inmunoanalíticos sin marcadores
• Analizadores automáticos para
inmunoanálisis nefelométrico y turbidimétrico.
MÉTODOS
INMUNOANALITICOS
Visión global
• Visualizar
(con instrumentos)
Visualización
• Marcador
• Homogéneos
Separación • Heterogéneos
• Competitivos
Reacción
• No competitivos
Clasificación
• Sin marcador
– Inmunoprecipitación
Inmunoturbidimetría e inmunonefelometría
– Aglutinación
Particuloinmunoanálisis
• Con marcador
– Enzimoinmunoanálisis
– Fluoroinmunoanálisis
– Radioinmunoanálisis
– Quimioinmunoanálisis
Inmunoprecipitación
• Precipitación (formación de un complejo
visible) resultante de la combinación de un
antígeno y un anticuerpo
– Simple - Radial
– Doble - Cohete
– Electroinmunodifusión
– Inmunoelectroforesis
soluble
insoluble
y = bx+a
y = (diametro)2
b = pendiente
Título
Inmunodifusión
doble
Identidad antigénica: Se fusionan las líneas
Identidad antigénica parcial: aparece “espolón”
Falta de identidad: Se cruzan
Electroinmunodifusión
Electroforesis
Inmunoelectroforesis
Inmunoelectroforesis
Inmunoelectroforesis en
cohete
Inmunoturbidimetría e inmunonefelometría
1 .-Inmunoprecipitación
2.- Detectarlo por métodos ópticos basados en la
dispersión de la REM
ID
λ
Región ID
UV
visible I0
IR
Dispersión de luz según el tamaño de
partícula
Partículas grandes
Rayleigh
Nefelometría
Turbidimetría
Nefelometría
Turbidimetría
Punto
final Segunda lectura
Señal Señal
Atg Ac
Tampón Atg+Ac
1ª lectura
Tiempo Tiempo
Lectura múltiple
Señal
Concentración de antígeno
Detecta el AC
en los
eritrocitos
Analiza el
suero para
buscar
anticuerpos lavado
Particuloinmunoanálisis
Determinación de antígenos
Determinación de
anticuerpos
Inhibición de la aglutinación
Compiten
Factor reumatoide
No se une al anticuerpo aislado,sí se une cuando cuando forma complejos
ELISA
WESTERN BLOT
CITOMETRIA D E FLUJO
Sensibilidad
Precipitación en gel 30
Precipitación en anillo 18
Inmunofluorescencia 0,005
ELISA 0,0005