Fisiologa bacteriana

METABOLISMO MICROBIANO DEFINICIN

Conjunto de reacciones qumicas catablicas y anablicas que ocurren en la clula bacteriana para desarrollar sus procesos vitales.

METABOLISMO MICROBIANO
Objetivos: Reconocer la utilidad del estudio metablico bacteriano en la identificacin de bacterias

Luz como fuente de energa

Todos los microorganismos

No usan CO2 como Fuente de carbono

Fotosintticos Auttrofos
CO2 como fuente de carbono

Hetertrofos

Saprfitos
Prottrofos: microorganismos que sintetizan sus propios factores de crecimiento.

Parsitos estrictos

Auxtrofos: microorganismos que requieren una fuente exgena de factores de crecimiento

debido a que son incapaces de sintetizarlos.

METABOLISMO MICROBIANO FASES

ANABOLISMO
Formacin o sntesis de compuestos qumicos (Biosntesis)

CATABOLISMO
Degradacin o descomposicin de compuestos (Biodegradacin)

METABOLISMO MICROBIANO FASES

CATABOLISMO
LIBERA ENERGIA Reacciones degradativas Catalizadas por enzimas Liberan energia Compuestos orgnicos complejos en simples.

ANABOLISMO
REQUIERE ENERGIA Reacciones biosintticas Catalizadas por enzimas Utilizan energa Compuestos simples a complejos

COFACTORES ENZIMTICOS

Vitamina B1 (Tiamina) Vitamina B2 (Riboflavina) Niacina (Ac. Nicotnico) Vitamina B6 (Pirodoxina) Vitamina B12 (Cianacobalamina) Acido Pantotnico Biotina Acido Flico Vitamina E Vitamina K

Decarboxilasa Coenzima en flavoproteinas Parte de la molcula del NAD Metabolismo de aminocidos Metabolismo de aminocidos Parte de la coenzima A Metabolismo de hidratos de carbono y lpidos Fijacin de CO2 y Ac. Grasos Coenzimas utilizadas en bases pricas y pirimidcas Macromolculas Transporte de electrones quinonas

ACTIVIDAD ENZIMTICA FACTORES QUE LA INFLUENCIAN

temperatura pH Substrato Producto final Gnetica

Secuencial
Enzimas intracelular Enzimas extracelular

Complejo multienzimtico

Fisiologa Bacteriana
* La accin de los microorganismos sobre toda clase de compuestos tiene un papel geoqumico importantsimo. * La energa procedente de estos combustibles adquiere utilidad al convertirse en ATP (transferencia de energa)

Fermentacin Respiracin Fotosntesis

(heterotrfico) (heterotrfico) (autotrfico)

Nutricin
Los

requerimientos bsicos de las bacterias son semejantes a las de las formas de vida superiores

Energa Carbono Nitrgeno

fuentes para la sntesis de protenas y cidos nucleicos

Vitaminas y sales inorgnicas

para otros factores accesorios de crecimiento

Carbono

Este elemento puede aportarse a los microorganismos en forma muy diversa dependiendo del tipo de metabolismo que posean. Es utilizado por los microorganismos para sintetizar los compuestos orgnicos requeridos para las estructuras y funciones de la clula.

Nitrgeno
El

nitrgeno es utilizado por las bacterias para formar aminocidos, pirimidinas, purinas, etc.

Oxgeno

TIPOS DE RESPIRACIN DE LOS MICROORGANISMOS

Aerobios obligados: requieren oxgeno para el crecimiento pues dependen de este elemento para cubrir sus necesidades energticas.
El oxgeno es el aceptor final de electrones en la cadena respiratoria.

Anaerobios obligados: crecen en ausencia

total de oxgeno porque necesitan un medio muy reductor.

Utilizan respiracin anaerobia donde los aceptores finales de electrones pueden ser generalmente SO42-, Fumarato2- o CO32-.

Anaerobios facultativos: pueden crecer en

presencia o ausencia de oxgeno.

Utilizan al oxgeno como aceptor final de electrones cuando est disponible, y en ausencia de oxgeno la energa la obtienen por fermentacin o respiracin anaerobia
(generalmente el NO3- es un aceptor final de electrones en las
enterobacterias).

Anaerobios aerotolerantes: pueden crecer en

presencia o ausencia de oxgeno, pero la energa la obtienen por fermentacin.

Microaerofilos: slo pueden crecer con bajas

tensiones de oxgeno porque las altas tensiones son txicas para este tipo de microorganismos.

La energa la obtienen por respiracin aerbica, cuando no hay aceptores electrnicos terminales alternativos, o anaerbica.

Capnoico o capnfilo: bacterias que desarrollan mejor en presencia de CO2

Azufre

El azufre puede ingresar en la clula reducido

(grupos sulfhidrilos), como sulfato (debe ser reducido dentro de la clula para

metabolizarse) o como aminocidos azufrados.

Es utilizado para la sntesis de aminocidos azufrados como la cistena o metionina, estructura terciaria de las protenas (formacin de puentes SS) y en el sitio cataltico de enzimas.

Factores de Crecimiento

Vitaminas, aminocidos, purinas, pirimidinas, etc.

Son compuestos orgnicos que el microorganismo es incapaz de sintetizar a partir de los nutrientes y son fundamentales para la maquinaria metablica de la clula.

Iones Inorgnicos

Son esenciales para el crecimiento porque estabilizan los compuestos biolgicos como enzimas, ribosomas, membranas, etc.

Son aportados en el medio a travs de sales que contienen K+ Mg2+ Mn2+ Ca2+ Na+ PO43Fe2+ Fe3+

y trazas de Cu2+

Co2+

Zn2+.

Requerimientos fsicos
Temperatura Todos los microorganismos tienen una temperatura ptima de crecimiento.

Esto significa que a determinada temperatura la velocidad de duplicacin de los microorganismos es mayor.

Clasificacin
Termfilos

Rango

Optima

25 - 80 C 50 - 60 C

Mesfilos
Psicrfilo

10 - 45 C 20 - 40 C
5 - 30 C 10-20 C

pH
La mayora de los microorganismos crecen en pH cercanos a la neutralidad, entre 5 y 9
existen microorganismos que soportan pH extremos

Clasificacin

pH externo pH interno

Acidfilos Neutrfilos Alcalfilos

1.0 - 5.0 5.5 - 8.5 9.0 - 10.0

6.5 7.5 9.5

Actividad agua aw

El agua es el solvente en donde ocurren las reacciones qumicas y enzimticas de la clula y es indispensable para el desarrollo de los microorganismos.

Potencial de Oxido-Reduccin

El Potencial de Oxido-Reduccin es una medida de la tendencia del medio a donar o recibir electrones.
Es crtico para el crecimiento de los microorganismos y

generalmente est asociado con la presencia de oxgeno molecular disuelto en el medio el cual es muy oxidante.

Fermentacin

La respiracin anaerobia es un proceso metablico que depende principalmente de un mecanismo respiratorio anaerobio.

El O2 se reemplaza por otro aceptor inorgnico de electrones como el: NITRATO o SULFATO

Fuentes de energa en la Fermentacin

Termodinmicamente: Los productos resultantes tienen un contenido energtico inferior al de los sustratos (debido al menor nivel energtico del grupo carboxilo -COOH) La fermentacin puede interpretarse como un reagrupamiento de tomos de H y O en molculas inorgnicas, para producir grupos carboxilos (lctica) o para dar lugar a CO2 (alcohlica)

Posibles vas metablicas del piruvato

Fermentacin lctica Fermentacin alcohlica Fermentacin propinica Produccin de gas Fermentacin butilengluclica (acetona) Fermentacin butrico-butlica Fermentacin aminocidas

Vas del Fosfogluconato

Transporte de electrones

Desde el punto de vista energtico:

la respiracin da lugar a 10 veces ms energa libre y 19 veces ms de ATP

Medios de Cultivo

Condiciones de un medio de cultivo

Humedad Psicrfilos Temperatura Mesfilos Termfilos Osmolaridad pH Nutrientes Ausencia de luz y radiaciones (mayora de las bacterias)

AGAR

El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se lica a 97 C Se solidifica a 40 C

Agar-agar Solieria robusta

Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado ellas.
1881, Fannie Hesse esposa de Robert Koch

Carragenina en alimentos

De acuerdo a su consistencia
Lquidos
Semi

slidos 0,7 % agar Blandos 1 % agar Slidos 2 % agar

Medio bsico para cultivo

Caldo peptonado
10 g 5g 1000 ml

Peptona Cloruro de Sodio Agua destilada csp.

Medios comerciales ya preparados

Medios de cultivo para preparar en el laboratorio.

Preparadores de medios automticos

De acuerdo a su destino

Uso general Especiales

De acuerdo a sus propiedades

Selectivos Diferenciales
Tpico crecimiento de los Escherichia coli verotoxignicos en un medio de cultivo selectivo Mc Conkey agar

Medio Kligler

Medios en tiras para identificacin de mltiples pruebas fisiolgicas

Crecimiento de las bacterias

Colonia

bacteria crece sobre un medio de cultivo slido, no puede moverse y al multiplicarse en forma geomtrica, las sucesivas generaciones de bacterias quedan ubicadas unas sobre otras hasta hacerse visibles macroscpicamente.

Poblacin

desarrollo bacteriano en medios de cultivo lquidos, en donde no pueden diferenciarse entre s los distintos microorganismos; las caractersticas ms importantes son: turbidez del medio; formacin de velo superficial (su consistencia, espesor y cantidad) y presencia de sedimento (aspecto, cantidad y coloracin).

Curva de crecimiento

Curva de crecimiento
Las bacterias se multiplican por fisin binaria. Entre 10 min y 24 h dependiendo del MO Mayora entre 20 min y 2 h. N0, al cabo de una generacin tendremos 2 x N0, en la siguiente generacin, 2 x 2 x N0 y as sucesivamente la poblacin aumenta con el exponente de 2, por lo que se expresa como crecimiento exponencial. Primera generacin: 2 x N0 Segunda generacin: 2 x 2 x N0 = 22 x N0 Tercera generacin: 2 x 2 x 2 N0 = 23 x N0

1. Fase de adaptacin o latencia 2. Fase de crecimiento exponencial o logartmico 3. Fase estacionaria 3. Fase de muerte

El cepillo de dientes no debe ser utilizado como medio de cultivo...

Cmbielo frecuentemente