Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
CONTENIDO
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Revisin de los cidos nucleicos: organizacin, estructura y funciones. ARN : transcripcin y sntesis de protenas El gen: naturaleza y propiedades. El cdigo gentico nuclear, propiedades. El ADN mitocondrial: Caractersticas y propiedades. Mapa del ADNm. Variacin en la expresin de los genes : penetrancia y expresividad, pleitropa, heterogeneidad gentica y expresividad de los genes y otros. Mtodos y tcnicas del ADN : * Tcnicas de Southern Blood, PCR, * El ADN recombinante : aplicaciones 8. El Genoma humano : Mapeo de cromosomas, mapa gentico y mapa fsico 9. Las mutaciones : Tasa de mutacin, mutaciones a nivel molecular, clasificacin de las mutaciones
B. PIRIMIDICAS
TIMINA (5-metio-2,4-dioxipiridina)
URACILO (2,4-dioxipirimidina)
CITOCINA 2-oxi-4-aminopirimidina
AZUCARES
RNA SPLICING
3. Es lineal
4. La unin de bases es especfica 5. Es un cdigo de tripletes 6. El codn que inicia un gen el AUG (metionina) 7. Los codones de terminacin de un gen son: UUA, UAG, UGA. 8. Es variable 9. Es estable 10. Es una estructura totalmente decifrada (se basaron en la snteiss de cadenas de polinucltidos desiguales, ej. UUU- Phe-.
EL GEN: PROPIEDADES
Capacidad de dirigir la formacin de una rplica exacta de s mismos.
Capacidad de mutar, esto es, de sufrir alteraciones sin perder la capacidad de reproducirse. Capacidad de dirigir la formacin de enzimas u otras protenas.
1.
2.
RETINOBLASTOMA
( Penetrancia reducida)
Pleitropa : (Un gen varios efectos). * Genes pleitrpicos: Efectos fenotpicos mltiples causados por un solo gen mutante o por un par de genes. - Sndrome de Marfn (mutacin de un solo gen produce patologa en ojos esqueleto y sistema cardio vascular) Cromosoma 15q (gen codificador de la fibrilina). - Fibrosis qustica: ( puede afectar glndulas sudorparas pulmones y pncreas).Cromosoma 7q31 - Anemia de clulas falciformes.(eritrocitos ,hueso y bazo)
PLEITROPIA : S. de Marfan
Fenotipo Calvicie
Hiperplasia suprarrenal congenita Hemocromatosis Hipogonadismo Miopa limitada a las mujeres Pubertad precoz
Genetica
AR en m AR AD AR
AD
AD
Nios afectados son mas altos que los de su edad, pero pronto interrumpen su crecimiento y son bajos). Difcil de diferenciar de la HR ligada a X.
AGA y AGG
AUA y AUU
A=ATPasa; CO=Citocromo oxidasa; Citb=Citocromo b, ND=NADH-coenzima Q reducasa; OH, OL=Orgen de la replicacin de las cadenas H y L; 12S, 16S=ARNr, N/C=Regin no codificadora, ll=ARNt.
ELECTROFORESIS DE ADN
Para amplificar cuanto se quiera, segmentos especficos de ADN situados entre los primers que se colocan a ambos lados de la zona que se quiera amplificar
ADN RECOMBINANTE
La tcnica del ADN recombinante son mtodos que permiten cartografiar los genes humanos sin necesidad de conocer la naturaleza del gen ni el producto del mismo. Consiste en la reunin artificial de molculas de ADN o parte de esas molculas que no se encuenran juntas en la naturaleza y provienen de diferentes organismos. Se agrupan en dos reas principales.
4. Un mtodo para identificar las clulas que contiene cualquier porcin deseada del ADN.
ENZIMAS DE RESTRICCION
Bacterias de donde se obtienen y secudncias de ADN que reconocn (incluye el sitio donde lo rompen)
ENZIMA
Alul Mspl Hinfl BamHl
BACTERIA
Athrobacter luteus Especies de Moraxella Haemophilus influenzae Rf Bacillus amyloliquefaciens H Escherichia coli RY13 Providencia stuartii
EcoRI Pstl
VECTORES DE CLONACIN
Agentes transportadores, son pequeas molculas de ADN con capacidad de autorreplicacin que se utilizan para transferir segmentos de ADN extraos entre clulas husped.
PRINCIPALES VECTORES DE CLONACION 1. 2. PLASMIDOS FAGICOS
3.
4.
COSMIDOS
CROMOSOMAS ARTIFICIALES (YACS)
PLASMIDOS
Son organismos muy sencillos que se encuentran en el citoplasma de las clulas bacterianas. Molculas de ADN circular de tamao menor que un cromosoma. Frecuentemente contienen 1 2 genes que codifican resistencia a los antibiticos.
Fueron los primeros vectores de donacin fciles de aislar y purificar, pueden ser reintroducidos en una bacteria por transformacin. El plsmido ms usado es el pBR322, contiene genes que codifican a la ampicilina y a la tetraciclina y muchos sitios de restriccin.
1. Transformacin
La clula capta molculas de ADN que se encuentra en el medio externo, las introduce en su interior y las incorpora a su genoma
Ocurre espontneamente en ciertos tipos de bacterias y se consigue artificialmente sometiendo a la clula bacteriana a tratamientos fsicos y qumicos.
2. Transduccin.
Consiste en introducir el ADN en una clula hospedadora mediante un virus Se observa: (1) El virus se aproxima a la bacteria llevando un genoma con el gen que le interesa donar. (2) El virus se pone en contacto con la bacteria donde se forma un poro. (3) El virus inyecta su ADN al interiror de la clula bacteriana.
El gen es insertado con una fina aguja fabricada por los cientficos.
CROMOSOMAS ARTIFICIALES
Transportan grandes cantidades de material gentico. Por esto son muy tiles en la secuenciacin del genoma.
Cromosoma artificial de levadura: (YACS)(Yeast artifitial chromom * Es uno de los ms utilizados. * Los segmentos de ADN contienen todos los elementos necesarios para propagar un cromosoma en levaduras. * Contienen fragmentos de ADN de 100 a 2000 kb de tama pueden introducirse en clulas de S. cereviciae y sern replicados juntos con los cromosomas verdaderos.
* Facil de reproducir y manipular, no sufre recombinacin con la misma faciliad de los YACS.
5. TERAPIA GENICA
PROCEDIMIENTO:
* Anlisis del rbol genalgico para averiguar el tipo de herencia del defecto gentico y para identificar a los afectados. * Pruebas a cada miembro de la familia para averiguar el modelo de herencia de los marcadores de RFLP especificos de cada cromoso. Ejm. DMD: Xp, HE: 4p, QF: 7q, NF1: 17q11.2 NF2: 22
EL GENOMA HUMANO
El mapa genetico humano como resultado del estudio conjunto de la investigacin pblica y privada con los 30,000 genes en los 23 pares de cromosomas
* Utilizacin de plantas desarrolladas mediante ingeniera gentica para producir vacunas orales.
* Vacunas sintticas (por ejm: vacunas contra el paludismo y la rabia) mediante tcnicas recombinantes.
1986: se autorizan las pruebas clnicas de la vacuna contra la hepatitis B obtenida mediante ingeniera gentica. 1987: propuesta comercial para establecer la secuencia completa del genoma humano (proyecto Genoma), compuesto aproximadamente por 100.000 genes. 1989:comercializacin de las primeras mquinas automticas de secuenciacin del ADN. 1994: se comercializa en California el primer vegetal modificado genticamente (un tomate) 1997: Clonacin del primer mamfero, una oveja llamada Dolly
cM
Marcadores genticos: Son variedades moleculares obtenidos por tecnicas de ADN recombinante
CROMOSOMA -1 1,995
MUTACION
Definicin: Es todo cambio en el material gentico que se debe a la variacin gentica de los seres humanos y de otros organismos. Tipos: Microscpica, Submicroscpica (mutaciones de punto) sustitucin de una base por otra en el DNA.
Deteccin: Cmo se produce una mutacin? 1.- En organismos inferiores se pueden disear experimentos. 2.- En el genoma humano son indirectos y deducibles por inferencia (basndose en el Arbol Genealgico)
TASA DE MUTACIN
Definicin: Nmero de veces que se producen alelos mutantes encada locus y en cada generacin. Frecuencia: En humanos es de 10-5 10-6 gametos por generacin Se deben diferenciar : 1.- Mutaciones recientes , 2.- Mutaciones pre-existentes que se producen en el pasado, y permite un fenotipo normal porque: 2.1- Existen genes mutates al fenotipo normal heredado por uno de los padres. 2.2- Las mutaciones dominantes no siempre tienen el 100% de penetrancia, por tanto algunas veces no se expresan. 2.3- Las mutaciones dominantes se detectan fcilmente porque se expresan en estado heterocigoto.
2.4 - Las mutaciones que el propio individuo acumula durante su existencia: * Por mutacin expontnea, debido a mecanismos normales en la duplicacin o reparacin del DNA. * Por mutgenos: fsicos, qumicos y biolgicos. Ejm. Radiaciones que producen transiciones o tranversiones, desaminacin y metilacin. Estudios realizados demuestran que las mutaciones son fenmenos raros en el GH observados en 1/ 1000,000 de copias que genera 6-7 millones de genes mutantes en cada generacin. Disminuye por factores como: * Naturaleza redundante del cdigo gentico, * Carcter recesivo de la mayoria de las mutaciones, * Tasa de muerte temprana que se asocia a muchas enfermedades hereditarias.
Acondroplasia Aniridia Retinoblastoma Osteogenesis imperfecta Neurofibromatosis Enfermedad poliquistica renal Sindrome de Marfan Sindrome de Von-Hippel-Landau Distrofia Muscular de Duchenne
Secuencia de los ocho primeros aminocidos de las cadenas b de la HbA y HbS. En posicin 6 la HbS tiene Val en lugar de Glu, lo que se debe al cambio de un nucletido del codn GGA en la HbA por GUA en la HbS.
Codn
HbA GUU CAU UUA ACU CCU GGA GAA AAA Valina Histidina Leucina Treonina Prolina Acido glutmico Acido glutmico Lisina
Aminocido
Codn
HbS GUU CAU UUA ACU CCU GUA GAA AAA
Aminocido
2. Respecto a su Expresin
2.1 Letales
2.2 Subletales
La preencia de la mutacin es incompatible con la vida. El cambio producido por la mutacin permite la vida pero se presentan alteraciones estructurales o funcionales.
2.3 Condicionales El efecto de la mutacin solo se observa en determinadas condiciones, es decir por exposicin a farmacos. 2.4 Somaticas El cambio por la mutacin afecta a algunas estructuras del organismo 2.5 Geneticas La mutacin altera la informacion genetica de los gametos y los descendientes.
3. Respecto al efecto que producen en el organismo que las presenta 3.1 Positivo Confieren al organismo una nueva ventaja respecto a su ambiente, una mayor facilidad de adaptacin o nuevas aptitudes respecto a otro. 3.2 Negativo Pueden restar capacidades de sobrivencia, de adaptacin o estructura. Son los ms frecuentes. Ej. Producen los padecimientos hereditarios (autosmicos recesivos). Pueden o no conferir cambios.
3.3 Neutro
MUTAGENOS
1. FISICOS
* RADIACIONES
- Radiaciones ionizantes (rayos X, rayos a, b, g, etc) - Luz ultravioleta
* Virus (retrovirus)