Biofilme - Uma Cidade de Microrganismos

Costerton et al. (1978)

Ambientes aquticos Corpo humano Ambientes terrestres

90% das bactrias, na natureza, encontram-se em BIOFILMES

Conceito de Biofilme
Comunidades microbianas complexas, e dinmicas, envoltas por uma matriz, geralmente polissacardica, que se formam seqencialmente e sofrem alteraes ao longo do tempo

Porque formar biofilmes?

Melhores condies de sobrevivncia nos ambientes naturais

Proteo contra Radiaes UV Fagocitose Desidratao Predadores Antimicrobianos Aproveitamento de nutrientes Sintrofia Troca de material gentico

Etapas no desenvolvimento de um biofilme

Mecanismos de comunicao intercelular Expresso diferencial de genes

1) Iniciao: Associao transiente Associao estvel

2) Maturao: Formao e estruturao de microcolnias Sntese de Exopolissacardeos Interaes metablicas e genticas 3) Disperso: Liberao de clulas

Etapas de formao de um biofilme

Biofilme artificial de V. cholerae

Watnick, P. & Kolter, R. (2000) Biofilm, city of microbes. J. Bacteriol., 182:2675-2679

A - Iniciao de um biofilme Associao transiente do organismo com superfcies ou outros organismos

- Flagelos, Pilus tipo IV, adesinas - Movimentao bidirecional

Associao estvel
- Reduo da motilidade (inibio do gene de flagelina) - Sntese de exopolissacardeos

B - Maturao do biofilme

Jenkinson, H.F. & Lappin-Scott, H.M. (2001) Biofilms adhere to stay. Trends Microbiol., 9:9-10.

Aumento da sntese de exopolissacardeo (alm de protenas e outras molculas)

Matriz
Celulose (Gluconoacetobacter, E. coli) Poli-N-Acetilglicosamina (S. aureus e S. epidermidis) Adesina intercelular polissacardica (PIA) (S. aureus e S. epidermidis) PIA-like (Yersinia, E. coli) cido colnico (E. coli) Alginato, PEL, PSL (Pseudomonas)

Definio dos nichos ecolgicos: Subpopulaes fisiologicamente

distintas em biofilmes de Pseudomonas aeruginosa

Clulas expressando pilus tipo IV formam os chapus, enquanto clulas no mveis formam a base do biofilme.
Webb, J.S.; Givskov, M.; Kjelleberg, S. (2003) Bacterial biofilms: prokaryotic adventures in multicellularity. Curr. Op. Microbiol., 6:578585.

Associao de atividades metablicas

Interaes metablicas nos biofilmes

Davey, M.E. & OToole, G.A. (2000) Microbial biofilms: from ecology to molecular genetics. Microbiol. Mol. Biol. Rev., 64:847-867.

Microcolnia de Lodo (Esgoto)

Interaes metablicas de Archaea metanognicas (verde) com bactrias oxidantes de propionato (vermelho), aceleram a degradao do lodo.
Davey, M.E. & OToole, G.A. (2000) Microbial biofilms: from ecology to molecular genetics. Microbiol. Mol. Biol. Rev., 64:847-867.

Comunicao intercelular

Importncia do Quorum sensing na resistncia de biofilmes de P. aeruginosa aos antimicrobianos. Em verde: clulas vivas Em vermelho: clulas mortas
Webb, J.S.; Givskov, M.; Kjelleberg, S. (2003) Bacterial biofilms: prokaryotic adventures in multicellularity. Curr. Op. Microbiol., 6:578585.

C - Disperso dos biofilmes 1 - Expansiva: liberao de clulas do interior das microcolnias

Morte celular - limitao nutricional, espcies reativas de oxignio, apoptose, lise por fagos Degradao da matriz por liases Restaurao da motilidade

2 - Fragmentao: foras mecnicas

S. aureus

3 - Superficial: migrao do biofilme

Exemplos de biofilmes de interesse humano

Doenas associadas a biofilmes: 65 a 80% das infeces tratadas,

em pases desenvolvidos. - Processos crnicos - Infeces de dispositivos implantveis

Epidemias virtuais crnicas

Placa dental

Overman, P.R. (2000) Biofilm: a new view of plaque. J. Contemp. Dent. Pract., 1:1-8.

Rickard, A.H.; Gilbert, P., High, N.J., Kolenbrander, P.E.; Handley, P.S. (2003) Bacterial coaggregation: an integral process in the development of multi-species biofilms. Trends Microbiol., 11:94-100.

Infeces de dispositivos implantveis

Catteres, Marca-passos, Vlvulas cardacas, Prteses

S. aureus, S. epidermidis P. aeruginosa

Endocardites: espcies de Streptococcus

Pneumonias em pacientes com fibrose cstica: P. aeruginosa

Biofilmes de S. aureus

Hall-Stoodley, L.; Costerton, J.W.; Stoodley, P. (2004) Bacterial biofilms: from the natural environment to infectious diseases. Nature Rev., 2:95-108.

Kelley, S.T.; Theisen, U.; Angenent,L.; Amand,A.S.; Pace, N.R. (2004) Molecular analysis of shower curtain biofilm microbes. Appl. Environ. Microbiol., 70:41874192.

Os microbiologistas levaram cerca de 100 anos para serem capazes de estudar as bactrias em culturas puras. Provavelmente, agora sero necessrios mais 100 anos, para que sejam capazes de estudar as bactrias como estas vivem na natureza, ou seja: em biofilmes!!!