REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT

SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

FACULTÉ DE MÉDECINE DÉPARTEMENT DE MÉDECINE

Thérapie Cellulaire

Focus sur la greffe de cellules souches hématopoïétiques

Pr Ag. N. YAFOUR

Service d’Hématologie et Thérapie Cellulaire .

EHU « 1er Novembre 1954 » d’Oran Faculté de Médecine d’Oran

Cours adressé aux externes en médecine

Plan du cours

I. Définition de la thérapie cellulaire

II. Définition des cellules souches

III. Les différents types de cellules souches

IV. Caractéristiques des Cellules souches

V. Différenciation/régénération cellulaire

VI. Greffe de cellules souches hématopoïétiques

A. Autogreffe de cellules souches hématopoïétiques

B. Allogreffe de cellules souches hématopoïétiques

VII. CONCLUSION

1
I. Définition de la thérapie cellulaire

La thérapie cellulaire est la transplantation de cellules humaines pour:

1.Remplacer ou réparer des tissus et/ou des cellules endommagés afin traiter une variété de maladies et
d'affections ; leucémie, parkinson, diabète etc…

2.Faciliter les greffes ou la restauration d'organe.

•Si les paramètres des cellules ont été modifiés génétiquement ex vivo , on parle de thérapie génique .

II. Définition des cellules souches

•Totipotentes : 3 feuiller embryonnaire ( ectoderme, mésoderme, endoderme) + cellules germinale

•Pluripotentes: 3 feuiller embryonnaire

•Multipotentes : plusieurs lignées cellulaires; ex: cellules souches hématopoïétiques

III. Les différentes types de cellules

• Cellules souches hématopoïétiques

• Cellules souches du muscle squelettique

• Cellules souches mésenchymateuses

• Lymphocytes

• Cellules dendritiques

• Cellules des îlots pancréatiques.

IV. Caractéristiques des Cellules souches

•Auto nouvellement

•Devison asymétrique vers :

1. Des cellules capables de se différencier et de se multiplier.

2. Une autres cellules souches capables de se auto renouveler.

•Tous les tissus disposent de cellules souches, avec un rythme d’auto renouvèlement différents :

1. Rapide et continu: moelle osseuse, intestins, peau.

2. Lents : pancréas, poumon, foie, épithélium rénal.

3. Minimal : cerveau.

2
V. Différenciation/régénération cellulaire

V. Différenciation/régénération cellulaire:

Exemple de l’Hématopoïèse

VI.Greffe de cellules souches hématopoïétiques

•Procédures dans lesquelles le patient est traité avec une chimiothérapie, une radiothérapie et ou les deux
(appelé « régime préparatoire / conditionnement »)

•Suivi de la perfusion de cellules souches hématopoïétiques / progéniteurs à partir de:

 moelle osseuse
 sang périphérique
 sang ombilical
•Pour reconstituer la moelle osseuse
3
1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

A. Définition

•L’autogreffe de CSH est la transfusion cellules souches/progéniteurs hématopoïétiques dérivés du sang

périphérique dérivé du même patient (même individu)

•La réinfusion de progéniteurs hématopoïétiques du patient permet la reconstitution hématopoïétique après

une pancytopénie profonde.

1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

B. Indications

Principales indications (recommandées):

•Myélome multiple

•Lymphomes de mauvais pronostic

• Autres indications peut fréquentes, ou en cours d’évaluations :

• Leucémies aigues

• Maladies auto-immunes et auto-inflammatoires

• Sclérose en plaques

• Polyneuropathies inflammatoire démyélinisante

• Sclérodermie systémique

• Maladies de crohn

1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

4
1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

1ere étape : Mobilisation de cellules souches périphérique:

 Injection en sous cutanée de facteurs de croissances hématopoïétiques (G-CSF) pendant 4 à 6 jours :

filgrastim, lenograstim
 Afin de mobiliser les CSH de la moelle osseuse vers la circulation sanguine.
1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

2eme étape :

- Cytaphérese : recueil de cellules souches périphérique à l’aide d’un séparateur de cellules

- Comptage des CSH par Cytométrie en flux à la fin de la procédure

1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

3eme étape : préservation de CSH

3 méthodes : soit

-Congélation à l’azote liquide à -196°c (20 ans ou plus)

-Congélation électrique à - 80°c (durée 6 mois )

-Préservation à +4 °c : pendant 4 à 6 jours

•4eme étape : intensification thérapeutique : conditionnement

•Consiste à l’administration au patient de la chimiothérapie intensive (à haute dose) associée ou non à la

radiothérapie.
5
1. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

5 eme étape : Greffe : Perfusion de cellules souches au patient

Un à trois jours après la fin de la chimiothérapie intensive, les cellules souches sont décongelées (si elles
sont congelées ) puis transfusées au lit du patient par voie veineuse périphérique ou centrale.

Homing des cellules souches hématopoïétiques

Après quelques jours

Les CSH se greffent à l'intérieur des cavités de la moelle osseuse

par un mécanisme de homingInfect Dis 2017

6
2. AUTOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

B. Les différentes étapes de l’autogreffe de CSH

•6 eme étape : gestion de la période d’aplasie

 Le temps de récupération hématologique est d’environ de 2 à 3 semaines avec un greffon de

cellules souches périphériques.

Période d’aplasie de la greffe

 Précautions générales à l’unité d’allogreffe (isolement , prévention des infections, mesures

d’hygiène…)
 Support hématopoïétique
 Support nutritionnel et métabolique Reproduction de l’
hématopoïèse normale
 Support psychologique
 Prise en charge de la neutropénie fébrile

Caocci et al. Mediterr J Hematol Infect Dis 2017

2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

A. Définition

•L’allogreffe de CSH est la transfusion cellules souches/progéniteurs hématopoïétiques dérivés de la

moelle osseuse, du sang périphérique ou du cordon ombilical d'un individu à un autre, qui peut être :

-apparenté (frère , sœur…)

-non apparenté (donneur volontaire ou sang de cordon ombilical)

 Traitement immunologique curatif :

 Dans les hémopathies malignes : éradiquer une maladie clonale
 Dans les hémopathies non malignes : remplacer une moelle osseuse malade par une moelle
fonctionnelle

7
2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

B. Historique

En 1957, le Pr Edward Donnall Thomas du département de

greffe à Seattle (USA), rapporte pour la première fois le cas des
deux allogreffes syngéniques (receveur et donneur
jumeaux/jumelles) .

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06

8
1. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

C. Indications

LAM = 6281 pts

444 centres d’allogreffes Passweg et al. BMT. 2017

2.ALLOREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

D.Les différentes étapes de l’allogreffe de CSH

-La procédure de l’allogreffe de CSH peut être résumée en 5 étapes :

 Étape 1 : Identification d’un donneur ( typage HLA )

 Bilan prégreffe (receveur et donneur)
 Étape 2 : Conditionnement : chimiothérapie et/ou radiothérapie admirées au receveur
 Étape 3 : Transfusion des CSH
 Étape 4 : Gestion des complications aigues
 Étape 5 : Gestion des complications chroniques

Immunosuppresseurs

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022

9
1. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES
E.SÉLECTION DU DONNEUR POUR L’ALLOGREFFE DE CSH Immunosuppresseurs
• Un typage HLA est réalisé pour déterminer la compatibilité entre le receveur et le donneur.
• Le choix du donneur est selon l’ordre suivant :
1.Allogreffe de CSH à partir d’un donneur apparenté identique (génoidentique) (frères , sœurs).
2.Allogreffe de CSH à partir d’un donneur non apparenté (phénoidentique, ou avec mismatch).
3.Allogreffe de CSH haplo identique (semi-identique qui peuvent être les frères , sœurs ,père, mère,
les enfants , les cousins...

2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

F. LES DIFFERENTES SOURCES DES CSH

Thérapie Cellulaire, Pr. YAFOUR Nabil, 06 Mars 2022
•Prélèvement de moelle osseuse : la moelle osseuse est généralement aspirée à partir des crêtes iliaques
postérieures sous anesthésie générale.

•Prélèvement de CSP : injection en sous cutanée de facteurs de croissances hématopoïétiques (G-CSF)

pendant 4 à 6 jours : filgrastim, lenograstim.

•Sang de cordon ombilical : les cellules de sang de cordon ombilical non manipulées collectés à partir du
placenta directement après l'accouchement puis cryoconservées.

2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

G. L’allogreffe CSH
Perfusion simple du greffon au lit du
patient par voie veineuse périphérique ou
centrale

2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

I.Les principales complications de la l’allogreffe de CSH

A: maladie du greffon contre l’hôte

Graft versus host disease

Host vs Graft

10
CLASSIFICATION DE LA GVHD AIGUE ET CHRONIQUE

Filipovich AH et al .BBMT.2005

GVHD AIGUE PEAU

Aspect de nécrose kératinocytaires associée à une infiltration lymphocytaire

GVHD AIGUE DIGESTIVE

•50% des cas de la GVHD

•Nausées, vomissement, anorexie.

•Diarrhées, crampes et douleurs abdominales

•Endoscopies haute et rectosigmoïdoscopie, vidéocapsule : ulcérations, fragilité

de la muqueuse du tube digestif

Corps de nécrose apoptotique dans le fond des cryptes glandulaires de la

muqueuse colique, diminution du nombre de cellules de paneth, infiltration de
PNN, de éosinophile, macrophage

Przepiorka D. BMT.1995

11
 GVHD AIGUE HÉPATIQUE

• 50% des cas de la GVHD

• Choléstase , hyperbilirubinémie

• Dg différentiel difficile avec :toxicité hépatique, MVO, infections virales,

sepsis, hémochromatose.

• Histolologie: destruction des canaux intra-hépatiques de petit calibre et

(inflammation du tissu hépatique).

GRADE DE LA GVHD

TRAITEMENT INITIAL DE LA GVHD AIGUE

 GVHD aigue grade I

⇢CRT locaux

 GVHD > grade II

⇢CRT : 2 mg/Kg

(Martin et al. BBMT 2012)

⇢+ stéroïdes non absorbables si GVH digestive

(beclomethasone dipropionate , 8mg/j), augemente le taux de réponse jusqu’à 71 %

(Hockenbery DM et al . Blood. 2007)

⇢ +/- supplementation entérale

⇢ +/- Octréotide : hormone inhibe de la somatostatine

(Ippoliti C et al. J Clin Oncol 1997).

 Réponse globale 40 -50 %

(MacMillan ML et al. BBMT 2002)
12
 TRAITEMENT

TRAITEMENT DE 1ERE LIGNE

• cGVHD légère : traitement local

• cGVHD modéré et sévère: prednisone 1mg/kg/J

• Si Echec : autres traitements immunosuppresseurs

13
 2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

I. Les principales complications de la l’allogreffe de CSH

B. MALADIE VEINO-OCCLUSIVE HEPATIQUE

• La plus fréquente, occlusion non thrombotique des veines

centrolobulaires par atteinte des cellules endothéliales hépatiques.

• Facteurs de risques : chimiothérapies antérieurs, infections hépatiques, drogues

hépatotoxiques…

• Clinique = ICTERE+ POIDS + HEPATOMEGALIE ou

hépatalgie thrombopénie réfractaire + ascite.

syndrome hépatorénal dans les formes sévères

2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

I. Les principales complications de la l’allogreffe de CSH

C . COMPLICATIONS INFECTEIUSES

14
2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

I. Les principales complications de la l’allogreffe de CSH

D. COMPLICATIONS IMMUNO-HEMATOLOGIQES

1/ Transfusion du greffon (ABO compatibles ?)

2/ Changement des groupes du receveur

1. Passage des groupes du receveur aux groupes du donneur avec

problèmes de groupage pour le laboratoire et les infirmières !
2. Disparition progressive de l’alloimmunisation du patient (
remplacement par celle du donneur).

2. ALLOGREFFE DE CELLULES SOUCHES HÉMATOPOÏÉTIQUES

I. Les principales complications de la l’allogreffe de CSH

E. COMPLICATIONS A LONG TERME

Inamoto. Haematologica . 2017

15
2. RÉSULTATS DE L’ALLOGREFFE GENOIDENTQIUE : Exemple :
leucémie aigue myéloïde

16