\ Lite 2018-2019 UE2 — Cellules et Tissus Fiche de cours n°1 Partie 7 Trafic intracellulaire des macromolécules et des glycoprotéines o Notion tombée 1 fois au concours oo Notion tombée 2 fois au concours 2.00 Notion tombée 3 fois ou plus au concours MIEN Nouveauté au programme cette annéelitle 2018-2019 ‘= = mécanisme moléculaire de retour des protéines résidentes du réticulum endoplasmique = Permet de ramener au RE ses protéines résidentes qui peuvent s Etre échappées par le fax continu par défaut (vole antérograde) : © Protéines membranaires résidentes du RE qui portent le signal dilysine dans leur endodomaine 3: = Participe au recrutement:du manteau COP | (© Protéines luminales résidentes du RE qui portent ls séquence RDEL ~ Reconnuss par un récepteur KDEL qui porte une séquence ditysine * Dis ERGIC et tout ay long de Fappareil de Golgi * Vin des wésicules recouvertes d'un manteau COPIGO + Laffinité de Is séquence KDEL pour son récepteur augmente avec aciité = © Le pl du lumen du REest newtre ~ Laséquence KDEL na pas d’affinité pour son récepteur © Hexiste un gradient de pH dans le systéme endomembranaire : ~ LepH devient de plus en plus acide en passant duREa ERGIC et jusqu’’ apparell de Golgi ooo ~ affine oe a sequence KOE! pour son rcepteuraugmente + eaconséqvence (© Le séquance KDEL s‘associe & son récepteur dans I'appareil de Golgi @ Le séquence KDEL se dissocie de son récepteur dans le réticulum endoplasmique corm com "Systeme de reconnaissance permettant aux protiines résidentes du RE de former des agrégats ‘© Nempéchent pas Ia fonction des protiines ‘© Empéchent les protéines de partir par accidents pares vésicules®? : ~ Limite la fuite des protéines résidentes du RE parle traficantérogradetlle 2018-2019 Vapporel de Golgi, et en particulier le réseau transgolgien, est une plateforme de trides slycoprotéines avec ? voles majeures ‘© Lawoie vers la membrane plasmique, wla des vésicules de sécrétion © La vole vers les endosomes tardifs gui permet : ~ De retourner vers Fappareil de Golgi via un systéme de recapture = Daller vers les lysosomes ' Les endosomes précoces permettont d’allor vers les endosomes tardifs & parti de ls membrane plasmique + séerétion consti © Sécrétion contrBlée Beste dans toutes les exllules Voie par défaut Pormet-de fournirs © Us nouveaux composants de la membrane plasmique © Les protéagiycannes et les glycoprotéines de la matrice extracellutsire Bourgeonnent au niveau du réseau transgolgien Recouvertes d'un manteau COP-1 Leurs protéines transmembranaires deviendront les protéines de la membeane plasmnique OO Leurs protéines lurminales seront relarguées dans be milieu extracellulaire Leurs lipides, néosynthétisés,rejeignent Ia membrane plsersigue La fusion des wésicules avec la membrane plasmigue se fait, 2 De faren nen centrélée, © Defacon continue, par défautO- Wrexiste que dans des cellules spécialicéess> « ‘© Qui produisent les enzymes digestives ou les hormone: par example "= Pecmet la séerdtion rapide de produits mis on réserve dans les wésieules de séerétion contrslée Bourgeonnent de I'apparcil de Golgi Recouvertes d'un mamteau de clathrineOO Stockent les protdines 3 steréter Mises en attente sous Ia membrane La fusion de la vésieule avec la membrane plasmique est provoquée par une voie-de signalisation inteaceltulair © En réponse 3 un signal extracellulaire de type hormone ou neurotransmetteur GOO.Lille 2018-2019 Empacher les proteines du réseau trans-golgien de partir parla voie de sécrétion constitutive ou parla voie de séenétion ronteBlée ‘Maintient les protéines en les agrégeant: © Forment des agrégats trop volumineux pour partir dans les wésicules qui bourgeonnent Les radeaux lipidiques, ou rafts, sont des micro-damaines riches en lipides : (© Phospholipides & chaine hydrocarbonée langue et saturée © Riches en sphingomyéfine cten cholesterol Les protéines transmembranatres dont les séquences transmembranaires ne sont pas assez tongues sont excluas de ces domaines: fo Restent dans le réseau trans-golgien Par bourgeonnement du réseau transgolgien © Conséeutif a une concentration de la glycoprotiine a séeréter Recouverte d'un mantesu de elathrine disconting : © Nenglobe pas complétement is wésieule mai forme des ploques du cété cytoplasmique * Complitement recouverte de clathring + © Perd ensuite son manteau pour fusionner de nouveau avec le réseau transgelgion ~ Permet un recycioge de matériel pour msintenirlewolumedes différents compartiments du systéme endomembran: + Dépourvuede chargement + Dépourvue de manteau de elathrineS "| + Plus concentrée en chargement que la vésicule immature © Suite au retrait de membranes et de contenu luminat "= acidification du lumen augmente paraliélemant 2 Ia concentratien en chargementLille 2018-2019 Visualiser a elathrine ¢t son association aux compartiments du systéme endomembranaire Marquage dela athrine grdce 8 des anticorps maraués 8 For colloidal Observation en microscopie électronique a transmission des coupes vitra-fines Leréseau transgoigion présente de la cathrine du cde eytasolique Les vésicules de sécrétion immatures présentent dela clathrine du cété crtosolique > @ Leur contenu luminal est dense aux éleetrons Les vésicules de séerétion matures ne présentent plus de clathrine = © Le ceeur de a vésicule est encore plus dense aux électrons ‘On incube las eellules béta-paneréstiques avec un sce sming radioacti: © Penmet le maravane métabolique de Finsuline On observe en microscople électronique &transmissian es celluesincubées pendant diférents temps Dans una temps, a radlosetvité, done Finguline, oe trouve ay niveau de Fapparell de Gol Pré-pro-inguline = précurseur de insulin adressé au réticulum endoplasmique : © Le peptide signal d‘adressage au RE doit étre clive = Donne fa pro-insuline, dans le lumen du RE Us pro-insuline est maturée par elvages protdiques dans es wsicules de séerétion 2 Denne nsuline mature Les wésicules de sécrétion peemettent ‘© De concentrer ie matériel bséeréter, ‘9 De matures les produits de sécrétion, en particulier par clvage peptidiqueLille 2018-2019 = Le glucose en quantité importante dans le miley extracellulaie entre dans la cellule via les transporteurs GLUT2 © Conduit 3 la produetion & Are * augmentation ou rapport ATP/ADP permet la fermeture de canaux potassique sensibles 3 FATR - «© Entraine une dépolarisation membranaire {ta dépolarization de la membrane provoque Feuverture de canaux ealeiques woltage-dépendants: © Entratne une entrée massive de caleiurn dans le cytosol + _tecalein proveque la fusion des wésicules de séerétion avec la membrane plasmique * Envépanse un signal extracellulaire + © Cervest donc pas la formation des vésiules gu répond ausignaLille 2018-2019 fa | aa+® Participent la digestion intracellubare = ‘© Notamment dégradation de protéines 3 demi-vie longue = ~ Alors que le protéacome est néceseaire 3 ls dégvadstion de protéines & demivie courte ‘Organites intracellulaire délimités par une membrane simple Diamiétre : entre 0,2 et 0,5 wen Le pH du lumen lysosomal est maintenu tres acide, 3 pH'S: '© Grice une pompes proton : = Uilise Vénergie de Phydrolyse de FATP pour faire passer lesions i" du cytosol jusau’aulumen = enzymes lysosomales hydrolytiques = © Fanctionnent aun pH optimal des © = dégradent toutes les molécules complexes (protéases pour les protéines, nucléases pour les acides nucléiques, glycosidaces pour les glucides, ipaces pour les lipides.) ‘Transportent les produits de dégradation des hydrolaces aces : © Pour étre réutilsés par la celles © Pour tre relargués comme déchets dans le milieu extracelulaire Constitue une protection pour la cellule (© Réduit fortement activité des hydrolases acides i elles sont se déversent dans un milieu neutre ‘en cas de rupture des lysosomes Les protéines membranaires du lysosome cont tras glycosylées : © Du cbté luminal © Pratage la membrane Iysosomale du pH acide et de activité des hydrolasesLille 2018-2019 * Les enzymes lysosomales sont des protéines luminales : ‘© Elles sont traduites dans le cytosol et adressées.au RE ‘© Elles portent un peptide signal d'adressage au RE-qui est clive * Les précurseurs é'enzymes lysosomales sont glycosylées puis transportées par dos wésicules, via FERGIC, jusqu’s apparel de Golgi * Les précurseurs d'enzymes lysosomales portant un patch de signal © Acides amings qul, dans la conformation de Fenyme, sant recannus par une GleNAt hosphotransférase a GleniAc-phosphotransférase sjoute un groupement phosphate sur le carbone 6 du mannose ‘terminal de oligosaccharide des précurseurs enzymes lysosomales: © Dans lees gelgi © = signalmannose-phosphate Les elycoprotdines luminales portant wn signal mannose-6-phosphate échappent au remodelage des glycoprotéines dans Fappareil de Golgi Pessnayecape Gate Pegho Memcee siesta ai) > — Pacnoe soma Protéine transmembranaire ‘© Dans le réseau trans-golgion ‘= Exodomaine reconnait e signal mannose-6-phosphate © Endodomaine interagit avec les adaptines te récepteur au mannose-G-phosphate interagit avecles adaptines pour reeruter un mantesu de clavhrine = (© Permet le bourgeonnement d'une wésicule recouverte de clathrine > = Pard son manteau et fusionne avee Fendosome tardif@ Le lumen de Pendasome tardif est & pHs grice 3 une pompe 3 protons © (9 Plus acide que danse réseau trans-Goigien © le récepteur mannase-6-phosphate se dissocie de son ligand © ~ Récepteur recyelé par une vésicule qui re-fusionne avec le réseau trans-goleien ~_Ventyme perd le phasahate du mannose et devient une hydrolase lysosomale mature © 1. VOHE SIGNALITIOUELille 2018-2019 ANNALES CLASSEES CORRIGEES = [Notion non traitée dans ce chapitre et corrigée sur la base du cours de année précédente] "Item modifié pour correspondre au programme du concours de cette année 2018 7. Parmi les propositions suivantes relatives & la sécrétion, laquelle (lesquelles) est (sont) exacte(s) ? A. La voie de sécrétion constitutive existe dans toutes les cellules B. La voie de sécrétion contrélée existe dans toutes les cellules C. Les 2 voies de séorétion (constitutive et contrélée) débutent par la formation de vésicules qui ne sont pas recouvertes d’un manteau cytosolique , D. Les 2 voies de sécrétion (constitutive ct contrélée) partagent le méme mode de contr6le de fusion des vésicules a la membrane plasmique E, [Lavoie de séerétion constitutive apporte au milieu extracellulaire des enzymes lysosomales qui ont perdu leur signal M6P (Mannose-6-Phosphate)] 2017 17, Parmi les propositions (esquelles) est (sont) exacte(s) ? A. Si on enléve par génie génétique le signal de retour KDEL de la PDI (Proteine Disulfure Isomérase), on ne pourra pas observer de remodelage des ponts disulfures dans le réticulum endoplasmique parce que toute la PDI sera sérétée B. Si on ajoute par génie génétique le signal de retour KDEL & hormone de croissance, qui est normalement séerétée, "hormone sera encore séerétée C. La formation d'agrégats est un mécanisme général de rétention des proteines D. Les protéines membranaires résidentes du réticulum endoplasmique ont un motif di-phénylalanine dans leur domaine cytoplasmique pour leur retour vers ce compartiment E, Les vésicules recouvertes de COP II sont impliquées dans le transport rétrograde ntes relatives aux protéines résidentes du réticulum endoplasmique, laquelle 19. Parmi les propositions suivantes relatives & Pappareil de Golgi, laquelle (lesquelles) est (sont) exacte(s) ? ‘A. En interphase, l'appareil de Golgi est constitué dempilements polarisés de citernes non communicantes B. En interphase, l'appareil de Golgi est localisé prés du noyau grace aux filaments d'actine et aux protéines ‘motrices de type « dynéine » qui leur sont associées C. L’appareil de Golgi se fragmente en télophase D. Lest impossible de motire en évidence l'appareil de Golgi par microscope optique a fluorescence E. On observe une augmentation du pH quand on passe des citemnes du réticulum endoplesmique aux citernes Trans de Pappareil de Golgi 20, Parmi les propositions suivantes relatives & ’endosome tardif, laquelle (lesquelles) est (sont) exacte(s) ? A. Le pl de Vendosome tardif est acide B, (L’endosome tardif est un compartiment intermédiaire entre I'endosome précoce et le lysosome] C. L’endosome tardif egoit es enzymes lysosomales venant du réseau Trans Golgi D. L'endosome tardif est le lien de dissociation des enzymes lysosomales et des réceptcurs au mannose-6- phosphate E, Dans 'endosome tardif, les enzymes lysosomales perdent le groupement phosphate du signal mannose-6- phosphate uwSHS SS SS SS See SS ee SE SSE Sere eee eee a aaa eatin nna nn nnnnannmnnnmnee. 11 Lille 2018-2019 tlle 2018-2019 2016 2011 18. Parmi les propositions suivantes relatives & appareil de Golgi, laquelle (lesquelles) est (sont) exacte(s) ? A. Vappareil de Golgi a une structure constante durant toute la durée du cycle cellulaire B. architecture de I’Appareil de Golgi est maintenue en partie gréce aux microtubules et aux protéines matrices de type « dynéine » qui leur sont associées C._Le pH est le méme dans Ia lumiere (ou cavité ou lumen) de toutes les saccules de Appareil de Golgi D. La glycosylation des protéines est entitrement réalisée dans V Appareil de Golgi E. Lamembrane de I'appareil de Golgi peut étre recouverte d'un manteau COPII 19. Parmi les propositions suivantes relatives & la sécrétion, laquelle (lesquelles) est (sont) exacte(s) ? A. Les protéines transmembraneires des vésicules de sécrétion constitutive deviendront les protéines transmembranaires de la membrane plasmique [Les protéines transmembranaires des vésicules de sécrétion constitutive interagissent avec des adaptines par leur exodomaine] C._[Parmiles protéines transmembranaires des vésicules de sécrétion constitutive on peut retrouver le récepteur au Mannose-6-Phosphate] D. La maturation des vésicules de sécrétion contrélée nécessite le recrutement d’un manteau de clathrine E. Des signaux de type « hormone » ou « neurotransmetteur » et les voles de signalisation intracellulaire qul leur sont associées contrdlent la formation des vésicules de sécrétion contréiée 2014 16, Parmi les propositions suivantes quel(s) est (sont) le (les) substrats de la signal peptidase, laquelle (lesquelles) est (sont) exacte(s) ? Les précurseurs protéiques de toutes les protéines polytopiques Les précurseurs protéiques des hydrolases acides Les précurseurs protéiques des protéines de Type Le précurseur protéique de la calréticuline Précurseur protéique de la clathrine mone 17, Parmi les propositions suivantes relatives a l'appareil de Golgi, laquelle (lesquelles) est (sont) exacte(s) ? A. Uappareil de Golgi a une structure constante durant toute la durée du cycle cellulaire B. Le pH est le méme dans ia lumiére (ou cavité ou lumen) de toutes les saccuies de I'Appareil de Golgi C. Dans l'appareil de Golgi, la recapture des protéines luminales résidentes du Reticulum Endoplasmique nécessite qu’elles portent le signal KDEL D. Dans l'appareil de Golgi, la recapture des protéines membranaires résidentes du Réticulum Endoplasmique nécessite qu’elles portent le signal KDEL Dans l'appareil de Golgi, la recapture des protéines résidentes du Réticulum Endoplasmique nécessite le bourgeonnement de vésicules recouvertes d’un manteau de COP! 18. Parmi les propositions suivantes relatives la sécrétion, laquelle (Iesquelles) est (sont) exacte(s) ? A. Les protéines transmembranaires des vésicules de sécr transmembranaires de la membrane plasmique B._ [Les protéines transmembranaires des vésicules de sécrétion constitutive Interagissent avec des adaptines par leur exodomaine] C. [Parmi les protéines transmembranaires des vésicules de sécrétion constitutive, on peut retrouver le récepteur au Mannose-6-Phosphate] D. Les vésicules de sécrétion controlée nécessitent le recrutement d'un manteau de clathrine &. Des signaux de type « hormone » ou « neurotransmetteur » et les voies de signalisation intracellulaire qui leur sont associges contrdlent la formation des vésicules de sécrétion contrélée constitutive deviendront les protéines 2 9. Parmi les propositions suivantes relatives au peptide signal dadressage au Reticulum Endoplasmique (ou Signal d’initiation de Transfert), quelle(s) est (sont) la (les) réponse(s) exacte(s) ? A. peut étre clivé par la SRP (Particule de Reconnaissance cu Signal) B._ Ilest présent dans les protéines transmembranaires de type I! C._ Cest une séquence protéique glycosylée organisée en hélice alpha D. lest absent des enzymes lysosomales matures E. Crest une séquence génégralement localisée & l'extrémité N-terminale du précurseur des protéines sécrétées B“stots ap eo too aps sqoe|Sa 9p aes my soup xan obansdpes aeons op us sap asd 9 poe ‘Sauer fala aacoe Sa es 9p Tama, Teransonarossomnapiy a 1a nb syetososs oun sp amy sonixa nym anode aanransto> won SaSNOdau roe ere