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REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

UNIVERSITE MOHAMED BOUDIAF - M’SILA

FACULTE DES SCIENCES DOMAINE : SCINCES DE LA NATURE ET DE LA VIE

DEPARTEMENT DE MICROBIOLOGIE & BIOCHIMIE FILIERE : SCIENCE BIOLOGIQUE

N°: OPTION : BIOCHIMIE APPLIQUE E

Mémoire présenté pour l’obtention


Du diplôme de Master Académique

Par :KHELIFI HAYAT , SAADI LINDA ET TARAFI SARA

Intitulé

Effet des acides organiques sur La morphométrie intestinale et


Certains paramètres hématobiochimiques chez le poulet de chair
pendant la vie postenatale

Soutenu devant le jury composé de :


Dr. BOUDJELALAmel Université Mohamed Boud iaf M’sila Président

Dr.BELABBAS Hadj Université Mohamed Boudiaf M’sila Rapporteur

Dr. BENKHALED Abderrahim Université Mohamed Boudiaf M’sila Examinateur

Année universitaire : 2022 /2023


REMERCIEMENTS

D’abords on voudrait remercier Allah le tout puissant d’avoir éclairé notre chemin et nous
a donné la force et la patience d’accomplir ce Modeste travail.

Nos remerciements vont en premier lieu aux membres de jury :

En particulier, nous tenons à exprimer notre gratitude à notre directeur de mémoire Monsieur
Dr Belabbas de nous avoir donné la possibilité de réaliser ce travail. Nous la remercions pour
ses
Précieux conseils l’orientation et aide pour nous.

On voudrait remercier Dr Benkhaled, Me Dr Boudjelal d’avoir accepté de juger ce travail et


d’en présider le jury.
Nous remercions le chef des laboratoires MR Seghiri. K, et les ingénieurs du laboratoire 6 du
département de science de la nature et de la vie (SNV) pour l’accueil qu’ils nous ont donné
ainsi leur aide tout au long du travail.
Enfin un grand et chaleureux merci à Dr Rahali Abdellah,le chef du département de la
microbiologie et de biochimie,
MERCI, à toutes les personnes qui nous ont aidés à arriver à cette fin.
Hayat
Je dédie ce modeste travail :

Tout d’abord, a mes chères parents, ma source de force et de soutien, que dieu les protége

A mes chers frères : zino et abdo

A mes belles sœurs : Amel, maryem, bouchra et amina

A mes petites beautés : Israa et djana

A ma cousine proche : Amira

A mes meilleurs amis : maryem arioua et linda

A toute la famille khelifi et mekki

Linda
Je dédie ce travail à :
Mon père : Qui m’a soutenu sans relâche et m’a donné la force et la

Volonté de faire des efforts et ne Jamais baisser les bras

Ma mère : Pour toutes ses peines durant les années, Humble

Témoignage de ma grande affection, Qu’elle

Retrouve ici l’expression de mon profond amour

Mes sœurs : Surtout farida ma gentille et aimante sœur

A Mon frère : Sami unique et bien-aimé

Qui sont mes amies, elles sont mon bonheur, elles sont

Mon paradis dans monde, elles Sont comme mon Seigneur, aussi belles que l’eau et aussi
Pures que le miel surtout meryem arouia et hayte

Mes oncles et mes tantes.

Mes cousins et cousines.

Les mémoires de mes grands-parents.

Tout mes amis et camarades.

Tous ceux qui m’ont aidé de prés ou de loin à la réalisation de ce travail

Sara
Je dedié ce travail à :

A ma chère mère siyad w

Avec vos prières, je suis là, que dieu vous protège, mon amour
A mon cher père

Je dédie mon témoignage à l'âme de mon bien-aimé et ami, mon défunt père. Si Dieu le veut,
ton souhait s'est réalisé, mon amour, et je ne t'ai pas déçu pendant que tu étais dans ta tombe,
mon amour.

A mes frères : souffiane , adel , rabeh , imad et mon petit prince rayanne

A mes belles soeures : hannane et zoulikha

Pour ses soutiens moraux et leurs conseils prècieux tout au long de mes ètudes

A mes grands pére et mère et mes oncles et tantes

Qui je souhait une bonne santé


A mes amis proches :MohammedrNarmine,Ahlam ,chahra ,Sirine,Imane,Omaima

Merci pour tout le soutien apporté

Sommaire
Résumé.........................................................................................................................................

Liste des abréviations..................................................................................................................

Listes des tableaux......................................................................................................................iv


Introduction ..............................................................................................................................

I.1. Les acides organiques ...................................................................................................... 3

I.1.1. Définition .................................................................................................................. 3

I.1.2. Mode action ............................................................................................................... 3

I.1.3. Effets métaboliques et biologiques ........................................................................... 4

I.1.4. Effets connus et bien documentés ............................................................................. 4

I.1.5. Effets possibles nécessitant une enquête plus approfondie ....................................... 4

I.2. Effet des acides organiques chez les poulets de chair ..................................................... 4

Chapitre II. Rappel anatomique de l'appareil digestif du poulet ..................................................


7

II.1. Les organes de la digestion ............................................................................................. 7

II.1.1. Du bec au jabot ......................................................................................................... 8

II.1.2. Proventricule et le gésier ........................................................................................... 8

II.1.3. l’intestin grél et ses glandes annexes ........................................................................ 9

II.1.4. Caeca ....................................................................................................................... 10

II.1.5. colon au cloaque ..................................................................................................... 10

Chapitre III. Les paramétres hématobiochimiques .....................................................................


12

III.1. Les paramètres hématologiques ................................................................................... 12

III.1.1. Globules rouges ................................................................................................... 12

III.1.2. Les globules blancs ( leucocytes) ........................................................................ 12

III.1.3. Hémoglobine ....................................................................................................... 12

III.2. Les paramètres biochimiques ....................................................................................... 12

III.2.1. Le calcium ........................................................................................................... 12

III.2.2. Les protéines totales ............................................................................................ 13


III.2.4. Cholestérol .............................................................................................................
14
Le cholestérol est une graisse fabriquée aux deux tiers par le foie et apportée pour untiers par
l'alimentation (Stryer et al., 2003a). ........................................................................................
14

Chez les poulets, sa valeur de référence est comprise entre 129-297 mg/dl (Samour,2007).
Cette valeur de référence peut varier en fonction de plusieurs facteurs, notamment la qualité de
l’alimentation, l’âge, l’espèce, le mode d’élevage, et l’état de santé (Huston, 1974). .............. 14
Chapiter Ⅵ ............................................................................................ Erreur ! Signet non
défini. Protocol expérimental .......................................................................... Erreur ! Signet
non défini.

IV. 1.Protocol expérimental ...........................................................................................................


15

IV.2.Matriels .............................................................................................................................
15

IV.2.1. Acides organiques .....................................................................................................


15

IV.2. 2.Aliment .......................................................................................................................


15

IV.2.3. Animaux .........................................................................................................


........... 16

IV.2.3.1. Souches ...........................................................................................


................... 16

IV.2.3.2. Provenance des poussins et mise en


place ......................................................... 16

IV.2.4. Pratique géneral del’


élevage ........................................................................................ 16

IV.2.4.1. Batiment
d’élevage .........................................................................................
....... 16

IV.2.4.2.Température ............................................................................................................
17

IV.2.4.3. Eclairage .................................................................................................................


17

IV.2.4.4. Programme vaccinal ...............................................................................................


17
IV.2. 5.Traitments expérimentaux ..........................................................................................
18

IV.3. Méthodes ...........................................................................................................................


... 19

IV.3.1. Etude des paramétres histologiques ..............................................................................


19

IV.3. 1.Objectif .......................................................................................................................


19

IV.3.2. Prélevement et fixation .........................................................................................


19

IV.3. 3.Coloration ..............................................................................................................


20

IV.3. 4.Méthode histologique « Microdissection » ...........................................................

21 IV.3.

4.1.Technique ....................................................................................................... 21

IV.3 4.2.Traitement des

images ................................................................................................ 22

IV.3. 4.3. Description du logiciel ..........................................................................................


22

IV.3. 4.4. Etalonnage et Calibration ......................................................................................


23

IV.3. 4.5. Mesure des paramètres histologiques ...............................................................


25

IV.3.3. Etude hémato


biochimique ............................................................................................ 26

IV.3.3.1. Prélevement
sanguine ..........................................................................................
.. 26

IV.3.3.2. Choix des


analyses ...........................................................................................
.. 27
IV.3.3.3. Analyse
biochimique .....................................................................................
......... 27

IV.3.3.3.1. Cholesterol .......................................................................


............................... 27

IV.3.3.3.2. Protiénes
totaux ................................................................................
............... 27

IV.3.3.3.3.Phosphore .........................................................................................................
27

IV.3.3.3.4. Calcium ...........................................................................................................

28 calcium de l'échantillon (Henry et al.,

1974). ....................................................................... 28

IV.3.3.4.Analyse hématologique ...........................................................................................


28

V.1. Résultats ................................................................................................................................


29

V.1.1. Etude des paramétres histologiques ...............................................................................


29

V.1.2. Etude des paramétres hématologique .............................................................................


30

V.1. 3.Etude des paramétres biochimiques ................................................................................


31

V.2. DISSCUSSION .................................................................................................................


32

III.2.3. Etude des paramétres hémato biochimiques ........................................................ 34

Références bibliographiques .....................................................................................................


37
‫ملخص‬
‫الهدف من هذه الدراسة هو تقييم تأثير األحماض العضوية على القياس النسيجي ألمعاء الدجاج وكذلك بعض المعايير الدموية‬
‫والكيميائية الحيوية لـ ‪ 60‬دجاجة تسمين كوب ‪ 500‬تمت تربيتها في نفس الظروف البيئية‪.‬من اليوم األول إلى اليوم ‪.35‬‬

‫الحيوانات قسمت عشوائيًا إلى دفعتين ‪ ،‬دفعة تحكم وأخرى تجريبية مكملة بتركــيز ‪ /0.25ml‬من حمض عضــوي‪ .‬تم قيــاس‬
‫طول وعرض الزغابة وعمق القبو عند عمر ‪ 21‬يوًم ا‪ .‬في نهاية فترة التجربة التي استمرت ‪ 35‬يوًم ا ‪ ،‬تم اختيار ‪ 5‬دجاجات‬
‫من كل دفعة لتحديد المعـايير الدمويـة والكيميائيـة الحيويـة المختلفـة للـدجاج‪ .‬بالمقارنـة مـع مجموعـة التحكم ‪ ،‬في عمـر ‪21‬‬
‫يوًم ا ‪ ،‬كان لدجاج الدفعة المكملة بالحمض العضوي زغبات أطول (‪ ،) p <0.001‬واسعة (‪ ) p>0.05‬وعمق خبايا أكبر مع‬
‫(‪ ،) p> 0.001‬في عمر ‪ 21‬يوًم ا ‪ ،‬سجلنا زيادة في الطول وكذلك عرض الزغابات لحيوانات الدُفعة المعالجة مقارنًة بدفعة‬
‫التحكم‬
‫‪ ،‬ولكن في هذه الحالة يكون هذا االختالف مهًم ا للغاية‪ .‬بينما يكــون االنخفــاض معنوًي ا جــدًا عنــد (‪ )p>0.001‬بين الــدفعتين‬
‫فيما يتعلق بعمق وعرض القبو‪ .‬أظهرت نتائج التحليل المتعلق بالمعايير الكيميائية الحيوية للهيمــاتو المــأخوذة عنــد عمــر ‪35‬‬
‫يوًم ا من الدجاج انخفاًضا غير معنوي (‪ )p˃0.05‬لكولسترول الدجاج المضاف إليه حامض عضوي ‪ ،‬بينما أظهــرت النتــائج‬
‫فيمــا يتعلــق بالمعــايير الكيميائيــة الحيويــة الدمويــة األخــرى (الكالســيوم ‪ ،‬الفوســفور) كــانت معنويــة (‪ )p˃0.01‬ولكن كــان‬
‫االختالف معنويًا للغاية بالنسبة للفوسفور ‪.‬‬

‫الكلمات المفتاحية‪ :‬حمض عضوي ‪ ،‬قياس النسـج ‪ ،‬الزغابـات المعويـة ‪ ،‬الخبايـا المعويـة ‪ ،‬البـارامترات الكيميائيـة الحيويـة‬

‫الدموية‪ ،‬الفراريج‬
Abstract
The aim of this study was to evaluate the effect of organic acids on the histomorphometry of
the chicken intestine, as well as on certain hematological and biochemical parameters of 60
Cobb 500 broilers reared under the same environmental conditions from day 1 to day 35. The
animals were randomly divided into two batches: a control batch and an experimental batch
supplemented with 0.25ml/l organic acid. The length and width of the villus and the depth of
the crypt were measured at 21 days of age. At the end of the 35-day experimental period, 5
chickens from each batch were selected to determine the chicken's hematological and
biochemical parameters. Compared with the control batch, at 21 days of age, the chickens in
the organic acid supplemented batch had longer (p < 0.001), wider (p > 0.05) and deeper
crypte (p > 0.001). However, at 21 days of age we recorded an increase in both the length and
width of the villi in the treated batch compared with the control batch, but this difference was
highly significant. The decrease in crypt depth and width was highly significant (p > 0.001)
between the two batches. The results of analysis relating to the hematobiochemical parameters
that were sampled at 35 days of age of the chicken, show a non-significant decrease (p˃0,05)
for cholesterolof the chickens supplemented with organic acid, while, the deferences
concerning the other hematobiochemical parameters (calcuim, total protein) were significant
(p˃0,01) but the deference was highly significant for phosphorus .

Key words: Organic acid, histmorphometry, intestinal villi, intenstinal crypts,


hematobiochemical parameters, broiler chicken.
Résumé
L’objectif de cette étude est d’évaluer l’effet des acides organiques sur la morphométrie de
l'intestin du poulet ainsi que, certaines paramètres hématologiques et biochimiques de 60 poulets
de chair de race Cobb 500 élevées dans les mêmes conditions d’ambiance de jour 1 au jour 35.
Les animaux ont été répartis de manière aléatoire en deux lots, un lot témoin et un autre
expérimentale supplémenté dans l'eau de boisson en acide organique à raison de 0.25ml/l. La
longueur et la largeur des villosités et la profondeur des cryptes ont été mesurées à l’âge de
21jours. À la fin de la période expérimentale de 35 jours, 5 poulets de chaque lot ont été choisis
afin de déterminer les déférents paramètres hématologiques et biochimiques. Comparé au lot
témoin, à l’âge de 21 jours, les poulets du lot supplémentés par l'acide organique avaient des
villosités plus longues (p < 0,001), plus larges (p > 0,05) et des cryptes moins profondes. Les
résultats d’analyse relatifs aux paramètres hémato biochimiques qu’ont été prélevés à 35 jours
d’âge du poulet, montrent une diminution non significative (p˃0,05) pour le cholestérol des
poulets supplémentés avec l’acide organiques tandis que, cette déférences, concernant les autres
paramètres hémato biochimiques (calcuim ,protiénes totaux)étaient significative (p˃0,01)

Mots clés : Acide organique, histmorphométrie, villosités intestinales, cryptes intenstinales,


paramètres hématobiochimiques, poulet de chair.

i
Liste des abréviations
AO : Acides organiques

BA : bactercidalactivity

Ca : calcuim

FAO : organisation pour alimentation agriculure

GR : globules rouges

HB : hémoglobine

IGA : immunoglobuline A

IgG : immunoglobuline G

IGM : immunoglobuline M

INP6 : inositol hexaphosphorique

LA : lysozymeactivity

LTT : lymphocyte transformation

MCV :Mean cell volume

P : phosphore

PCV : Packed cell volume

PH : potentialhydrogéne

PKA : constant d’acidité

PP : phosphore non phytique

UO : Unioneuropéenne

WBC : white blood cell

ii
Liste des figures.
Figure 1:Tractus gastro-intestinal chez les poulets(Clavijo et Florez, 2017) .................................
3

Figure 2:prélevment et fixation des échantillons ........................................................................


20

Figure 3:échantillon coloré avant la dessection (vue sous une loup) ..........................................
21

Figure 4:Dissection des villositées et des cryptes intestinales. ....................................................


21

Figure 5:Vue microscopique des villosités avec leurs cryptes après dissection (Duodénum j21)
(Gx4) . ..........................................................................................................................................
24

Figure 6 :vue microscopique des cryptes après la dissection .......................................................


25

Figure 7:Création de l'échelle .....................................................................................................


26

Figure 8:Enregistrement de l'échelle crée ....................................................................................


26

Figure 9:Mesure des paramètres histologiques des villosités intestinales via le logiciel
"OpticaTM Vision Pro"L : largeur des villosités, H : hauteur des villosités, P :périmètre,S:
surface des
villosités. ........................................................................................................................................
26

Figure 10:Mesure des paramètres histologiques des cryptes intestinales via le logiciel
"OpticaTM Vision Pro"L : largeur des cryptes, P : profondeur des cryptes, Pr :périmètre,S:
surface des
cryptes. ..............................................................................................................................................
........... 27

iii
Listes des tableaux
Tableau 1: composition des aliments distribués durant l’expérimentation ...................................
16

Tableau 2: programme vaccinal pratiqué dans l’élevage ..............................................................


17

Tableau 3: l’effet des acides organiques sur les paramétres histologiques du villosité de la poulet
de chair à 21 jours d’age . .............................................................................................................
27

Tableau 4: l’effet d’acide organique sur les paramétres histologiques du cryptes de la poulet de
chair à 21jours d’age
. ......................................................................................................................................................
30

Tableau 5: l’effet d’acide organique sur les paramétres histologiques du cryptes de la poulet de
chair à 21jours d’age
. ......................................................................................................................................................
30

Tableau 6 :l’effet d’acide organique sur les paramétres biochimiques de la poulet de chair à 21
jours d’age . ...................................................................................................................................
31

iv
INTRODUCTION

INTODUCTION
INTRODUCTION

Introduction

Depuis une quarantaine d’années, la consommation mondiale des viandes de volaille a connu une
forte progression dépassant les 107 millions de tonnes en 2013. Il s’agit de la deuxième viande la
plus consommée après celle du porc et la première viande échangée dans le monde (Magdelaine,
2014). Les perspectives agricoles de la FAO tablent sur une croissance soutenue de la production
avicole de l’ordre de 1.8% par an entre 2015 et 2024, permettant à cette filière de ravir à
l’horizon 2030 la première place des viandes consommées (Rhliouch, 2013).

En Algérie, la filière avicole prend une place plus importante et les Autorités encouragent cette
activité par le financement et la recherche scientifique dans ce domaine.

Dans le passé, les antibiotiques ont été utilisés comme promoteurs de croissance pour améliorer
la production et équilibrer les forums intestinaux (Garcia et al. 2007)(Abudabos et al. 2016)
(Haulisah et al. 2021). Les bactéries résistantes aux antibiotiques pourraient facilement des
animaux à l'homme par le biais de la chaîne alimentaire (Chowdhury et al. 2009) (Khan et al.
2016a). L'utilisation de niveaux subthérapeutiques d'antibiotiques joue un rôle viable dans
l'amélioration de la production avicole depuis de nombreuses années. Cependant, cette pratique a
été découragée en raison de l'émergence de la résistance aux antibiotiques des pathogènes
animaux et humains. L'Union européenne a été la première organisation à faire part de son
intention de supprimer l'utilisation des antibiotiques en 2006. La recherche d'une alternative a
donc été suggérée pour de remplacement qui pourrait maintenir la croissance et l'efficacité
alimentaire des animaux d'élevage (Scicutella et al. 2021). Comme les acides organiques.

Dans ce contexte, l’étude de l’effet d’un additif alimentaire « acide organique » comme un

antibactérienne chez le poulet de chair est d’un importance particulier Ce travail comprend deux

parties :

Dans la première partie, nous avons décrit une définition générale des acides organiques et
certaines de ses activités biologiques chez les volailles, le rappel anatomophysiologique de
l’appareil digestif du poulet de chair et, l’étude de certains paramètres hémato biochimiques.

Enfin, nous nous sommes intéressés dans la deuxième partie d’évaluer, l’effet de l’addition de
l’acide organique dans l’eau de boisson sur les paramètres histologiques, ainsi que sur le profil
hémato biochimique de poulet de chair pendant la vie postenatal.
Chapitre I
Les acides organiques
Partie bibliographique Chapitre I : Les acides
organiques

I.1. Les acides organiques

I.1.1. Définition

Les acides organiques sont l'un des nombreux additifs alimentaires qui peuvent être
ajoutés aux aliments pour animaux et à l'eau potable.

Il existe une grande variété d'acides organiques aux propriétés physiques et chimiques
différentes (Huyghebaert G et al,2010). Ils peuvent être utilisés individuellement, mais les
mélanges d'acides sont souvent préférés pour assurer un spectre d'action plus large (AllenHK,
LevineUY, 2013).

Les acides organiques sont des composés avec un ou plusieurs groupes fonctionnels ou
d'autres éléments structuraux qui subissent une réaction d'équilibre lors de la libération de
protons avec de l'eau ou d'autres solvants protonables. Chaque anion de chaque acide organique
est formé et le proton est absorbé par le solvant eau, qui agit comme un accepteur de proton
(base) pour former l'ion oxonium H3O+. La concentration des ions oxonium en solution devient
supérieure à celle des ions hydroxyde, de sorte que la solution devient acide.

Les acides organiques sont des composés organiques aux propriétés acides. Ceux-ci sont
produits notamment par des bactéries et des levures. Des exemples comprennent l'acide lactique,
l'acide formique, l'acide acétique, l'acide citrique et l'acide propionique. (Stein, 2007).

I.1.2. Mode action

Leur mécanisme d'action présumé comprend une diminution du pH interne des bactéries
après entrée d'acides non dissociés dans la cellule bactérienne, suivie d'une dissociation au sein
du cytoplasme des bactéries alcalines, entraînant la mort de la cellule bactérienne. Elle est causée
par l'épuisement des réserves d'énergie nécessaires au maintien de l'homéostasie interne (Van
Immerseel F, Russell JB, 2006 ; RickeSC, 2003).

Ces additifs pénètrent dans la paroi cellulaire bactérienne et affectent leur activité
intracellulaire. De plus, les acides organiques abaissent le pH dans l'estomac, réduisant ainsi la
croissance de certaines bactéries pathogènes (Suryanarayana et al., 2012 ; Huyghebaert et al.,
2011 ; Vondruskovaetal., 2010).

Par conséquent, chaque acide a sa propre sphère d'influence et peut avoir des effets
différents sur le microbiote intestinal. Par exemple, l'acide butyrique stimule la prolifération de
l'épithélium intestinal, a des effets anti-inflammatoires, augmente la production de peptides
antimicrobiens dans le mucus intestinal, et renforce la barrière muqueuse intestinale en stimulant
Partie bibliographique Chapitre I : Les acides
organiques

L’expression des protéines associées aux jonctions serrées. On pense également que cet acide
agit en modulant le microbiote intestinal et en influençant la colonisation des bactéries
pathogènes.

Lorsqu'il est utilisé comme promoteur de croissance alternatif, il est plus qu'antibactérien
(HuyghebaertG, et al.; 2010).

I.1.3. Effets métaboliques et biologiques

Plusieurs facteurs sont connus pour influencer l'activité antibactérienne des acides
organiques. Sa formule chimique, sa valeur de pKa, sa forme chimique, son poids moléculaire, la
sensibilité du micro-organisme cible, l'espèce animale impliquée, sa libération en un site
spécifique du tractus intestinal par le processus d'encapsulation et l'effet tampon de l'acide
alimentaire obligatoire.

I.1.4. Effets connus et bien documentés

 Abaisse le pH de l'estomac.
 Inhibe la croissance de certaines bactéries pathogènes.
 Les acides organiques contenus dans les aliments sont facilement digestibles et servent de
source d'énergie.
 Améliorer la biodisponibilité des minéraux grâce à la formation de complexes.
L'acidification stimule la sécrétion d'enzymes endogènes.

I.1.5. Effets possibles nécessitant une enquête plus approfondie

 L'acide caprylique réduira Salmonella enterica chez les poulets de chair (Sealetal., 2013).
 _Les performances de croissance des porcs seront améliorées (Suryanarayana et al.
2012 ;Vondruskova et al., 2010).
 Les performances de croissance des volailles seront améliorées (Fallah et al., 2013).

I.2. Effet des acides organiques chez les poulets de chair

Les études publiées sur les effets des acides organiques sur les performances de croissance
des poulets de chair sont parfois contradictoires (CaveNA, 1984 ; Samanta S et al. 2010).

En fait, l'étude de Chowdhury et al (2009) a rapporté que, l'ajout d'acide citrique aux
régimes alimentaires des oiseaux améliorait considérablement la croissance, la prise alimentaire,
l'efficacité alimentaire et le rendement en carcasse. L'ajout de cet acide organique est même
Partie bibliographique Chapitre I : Les acides
organiques

corrélé à l'amélioration de la fonction immunitaire, entraînant une augmentation du nombre de


lymphocytes dans les amygdales caecales et, dans la bourse de Fabricius (Chowdhury R et
al .2009).

Ils ont constaté aussi qu'un amincissement de la muqueuse intestinale était observé aussi bien
dans le groupe ayant reçu un traitement à base d'antibiotiques que dans le groupe ayant reçu
des mélanges d'acides ou des probiotiques. Cette observation peut être associée à une réponse
inflammatoire réduite au niveau intestinal, éventuellement liée à un nombre réduit de bactéries
Gram-négatives (GunalMetal. 2006).
Chapitre II

Rappel anatomique de
l'appareil digestif de poulet
Partie bibliographique Chapitre II. Rappel anatomique de l'appareil
digestif du poulet

L'anatomie et la fonction du tractus gastro-intestinal évoluent au cours du développement


de l'animal (Noy et al., 2001 ; Batal et Parsons., 2002 ; Suzuki et al., 2008) et dépendent de
nombreux facteurs tels que la génétique intestinale. Animaux ou leur alimentation (Rougeere,
2010). De plus, le délai entre l'éclosion et la première tétée influence le développement du tube
digestif. En effet, un accès retardé à la nourriture et à l'eau retarde la maturation gastro-intestinale
(Noy et al., 2001 ; Batal et Parsons, 2002 ; Suzuki et al., 2008).

II.1. Les organes de la digestion


Cette partie décrit l'anatomie du tractus gastro-intestinal, les rôles de divers organes et
certaines de leurs caractéristiques histologiques. La figure 2 montre l'anatomie du tube digestif
du poulet.

Figure 1 : Tractus gastro-intestinal chez les poulets (Clavijo et Florez, 2017)


1- L’osophage. 2-Jabot. 3- Foie. 4-Vésicule biliare. 5-Rate. 6- duodénum. 7- Jéjunum. 8-
Iléon. 9- Caecum. 10- Cloaque. 11-Colon. 12-Gros intestine. 13-Petit intestine. 14-
Gesier.
15-Proventricule.
Partie bibliographique Chapitre II. Rappel anatomique de l'appareil
digestif du poulet

II.1.1. Du bec au jabot

Le tube digestif du poulet commence dans le bec, à travers lequel la nourriture peut être saisie.
Ensuite, il est envoyé à la bouche, où la salive assure la lubrification. Il est sécrété par de
nombreuses glandes salivaires de la cavité buccale (Hodges, 1974).

Langue possède des récepteurs du goût. De plus, les poulets possèdent de nombreux récepteurs
tactiles dans leur bec et un système olfactif très développé (Gomez et Celii, 2008). La perception
des odeurs alimentaires prépare le tube digestif à la nourriture (Brenes et Roura, 2010). La
langue permet également aux aliments de pénétrer dans l'œsophage sans mastication préalable
(Klasing, 1998 ; Denbow, 1999).

La nourriture est ensuite transférée de l'œsophage au préestomac où elle est stockée dans des
cultures régulées par le taux de remplissage du gésier. Lorsque celui-ci est vidé, la nourriture est
transférée directement dans le préestomac (Klasing, 1998). Pendant l'alimentation et le stockage,
les aliments se ramollissent sous l'action du mucus et de l'eau ingérés par les oiseaux.
L'épithélium fourrager apparaît comme une épaisse couche d'épithélium stratifié et des glandes
muqueuses incomplètement kératinisées sont présentes dans la région de la jonction de
l'œsophage fourrager et de la culture, mais pas dans la culture elle-même (Hodges, 1974).

II.1.2. Proventricule et le gésier

Le préestomac est appelé "l'estomac glandulaire" des poulets. La muqueuse du


préestomac est en fait enrichie de deux principaux types de glandes.

Glandes gastriques avec des glandes tubulaires sécrétant du mucus et des cellules
acceptant l'acide qui sécrètent du HCl et de la pepsine (Klasing, 1998). Le préestomac est séparé
du gésier par un isthme appelé anneau gastrique intermédiaire (Klasing, 1998 ; Denbow 1999).
Les gésiers forment des "gésiers" de poulet. Sa structure musculaire proéminente lui permet de
réduire mécaniquement la taille des particules alimentaires.

Il permet également au HCL et à la pepsine mélangée aux aliments pendant le transit à


travers le préestomac d'exercer leurs effets protéolytiques. Le préestomac de la cuticule (kaolin)
est produit pour exercer son action protéolytique. Au niveau de cet organe, une cuticule (kaolin)
est produite qui permet la protection de l'épithélium. Le gésier se termine dans la zone pylorique,
qui le sépare du duodénum, permettant uniquement aux particules alimentaires inférieures à
environ 1 mm de passer dans l'intestin grêle (Klasing 1998 ; Denbow 1999).
Partie bibliographique Chapitre II. Rappel anatomique de l'appareil
digestif du poulet

II.1.3. L’intestin grêle et ses glandes annexes

Le rôle de l'intestin grêle est de poursuivre l'hydrolyse enzymatique des aliments initiée
dans l'estomac et d'assurer l'absorption des produits finaux de la digestion. Il est généralement
divisé en trois parties : le duodénum, le jéjunum et l'ilion.

Le duodénum est défini comme la partie qui commence au niveau de la zone pylorique et
forme une boucle autour du pancréas, et le jéjunum est la dernière partie qui se termine au niveau
de la division Meckel (le reste du sac vitellin). L'iléon est défini comme le segment s'étendant du
diverticule de Meckel à la jonction iléo-colique (Klasing, 1998).

La muqueuse intestinale a de nombreuses villosités qui font saillie dans la lumière de la


muqueuse intestinale pour augmenter sa surface d'absorption (Hodges, 1974). A la base des
villosités se trouvent des cryptes de Liebercoon, formées par invagination de la muqueuse
intestinale.

L'épithélium intestinal est composé d'une seule couche de cellules qui sont
principalement des entérocytes mais contiennent également des cellules caliciformes et des
cellules entéroendocrines. Toutes ces cellules sont générées au niveau des cryptes et de la base
des villosités et soit migrent vers les villosités supérieures lors de la différenciation (Uni et al.
1998) soit sont éliminées à la lumière (yamauchi ; 2002).

Les entérocytes sont des cellules qui possèdent une bordure en brosse au niveau de leur
partie apicale et des enzymes et des transporteurs à ce niveau.

Les cellules caliciformes ou cellules du mucus sont responsables de la sécrétion des


principaux composants du mucus : les mucines.

Les cellules entéroendocrines produisent diverses hormones peptidiques. L'intestin grêle


contient également des glandes accessoires et des diverticules.

Foie et vésicule biliaire, pancréas, diverticule de Meckel.

In vivo, le foie entoure le gésier. Il reçoit du sang chargé de détoxification et des


molécules qui traversent la paroi intestinale. Certaines de ces molécules peuvent être modifiées
pour avoir des fonctions de détoxification particulières. Ils sont expulsés par deux voies soit
directement vers le duodénum soit vers la vésicule biliaire associée. Il en est de même à la fin du
duodénum (Klasing, 1998).
Partie bibliographique Chapitre II. Rappel anatomique de l'appareil
digestif du poulet

Le pancréas est une glande accessoire du tractus gastro-intestinal avec des fonctions
endocrines et exocrines. Il libère à la fois des hormones et des enzymes impliquées dans la
digestion. L'enzyme sécrétée pénètre dans le tractus gastro-intestinal par le tractus au niveau du
duodénum terminal (Denbow, 1999).

Le diverticule de Meckel est un vestige du sac vitellin. C'est la formation de l'embryon


qui répond aux besoins énergétiques de l'embryon et assure la transition alimentaire vers la
nutrition exogène qui s'effectue dans les premiers jours après l'éclosion. Le sac vitellin à
l'éclosion représente 15 à 25 % du poids corporel, mais chez la plupart des poussins de 10 jours,
il se réduit à moins de 1 % du poids corporel (Jamroz et al., 2004). Après l'éclosion, certains des
nutriments contenus dans le sac vitellin sont absorbés directement dans la circulation sanguine à
travers la membrane du sac vitellin, et certains sont excrétés dans la lumière de l'intestin grêle, où
ils sont ensuite hydratés de la même manière que le régime alimentaire des personnes âgées.
Animaux décomposés et absorbés.

II.1.4. Caeca

Le caecum de poulet forme deux diverticules de longueur égale situés à la jonction de


l'iléon et du gros intestin. A l'entrée de l'appendice se trouve un sphincter qui détermine son
ouverture. Vili qui forment une sorte de filtre. Par conséquent, seuls le liquide et les particules les
plus fines de l'intestin et du côlon traversent le péristaltisme postérieur pour atteindre le caecum,
empêchant l'entrée de particules fibreuses solides indigestes. Quatre-vingt-sept à quatre-vingt-
dix-sept pour cent du liquide de l'appendice provient de l'urine.

Leur rôle chez les oiseaux domestiques n'est pas bien connu, mais ils semblent être
impliqués dans l'absorption d'eau et d'électrolytes. Par la production d'acides gras volatils, il peut
également contribuer à l'apport d'acides aminés et d'énergie aux animaux par fermentation
bactérienne, bien que cette contribution n'ait pas été clairement élucidée (jozefiak et al 2004).

II.1.5. Colon au cloaque

Le gros intestin des poulets est très court, issu du gros intestin et s'ouvrant directement
dans le cloaque. Le gros intestin du poulet, contrairement à celui des mammifères et de certains
oiseaux herbivores comme les autruches, n'est pas complexe et ne forme pas de chambre de
fermentation comme ces derniers. Au contraire, il est hétéro. La cavité cloacale est composée de
trois chambres, d'avant en arrière : le tractus fécal, l'uretère et le tractus rectal. Ces deux
compartiments jouent un rôle important dans la réabsorption d'eau (Denbow, 1999).
CHAPITRE III
Les paramétres
hématobiochimiques
Chapitre III. Les paramétres
hématobiochimiques

III.1. Les paramètres hématologiques


III.1.1. Globules rouges

Contrairement aux mammifères, l’érythrocyte aviaire mature est de forme elliptique et possède
un noyau central ovale (Figure 1) (Sturkie&Griminger, 1986 ; Thrall, 2004). Son cytoplasme
est abondant et se colore rose-orangé aux colorations standards (Campbell, 1994 ; Thrall,
2004). Ces cellules sont également de plus grandes tailles que leurs homologues mammifères,
soit environ de 10,7 X 6,1 µm à 15,8 X 10,2 µm (Sturkie&Griminger, 1986) comparativement
à 7,0 et 5,8 µm de diamètre chez le chien et le chat respectivement (Reagan et al, 2008). Afin de
pallier à la grande demande en oxygène, les érythrocytes ont tendance à être plus petits chez les
oiseaux adaptés aux vols de longue distance, leur procurant ainsi une meilleure surface
d’échange gazeux (Armand, 1986 ; Hodges, 1974)

III.1.2. Les globules blancs (leucocytes)

Ce sont des cellules du système immunitaire et, sont classés en granulaires et en agranulaires, en
fonction de la présence ou de l'absence de granules cytoplasmiques spécifiques. Ils sont aussi
classés en mononucléaires et en polynucléaires, en fonction de la forme de leur noyau. Les
mononucléaires ont un noyau massif (les monocytes et les lymphocytes), les polynucléaires ont
un noyau multi lobulé (polynucléaires neutrophiles, basophiles et éosinophiles).

III.1.3. Hémoglobine

L'hémoglobine des poulets de chair fixe moins efficacement l’oxygène que celle de poulets à
croissance lente de type Leghorn (Julian et Wilson 1992). La saturation en oxygène du sang
artériel des poulets à croissance lente est inférieure à celle des poulets à croissance rapide.

De même des poulets atteints d'une insuffisance du ventricule droit associée à l'ascite ont un sang
moins saturé en oxygène (Julian et Mirsalimi 1992 ; tableau 3). D'autre part, le pourcentage de
saturation de l’hémoglobine en oxygène des poulets atteints d’ascite est moindre que celui des
poulets normaux (Wideman et al 1998)

III.2. Les paramètres biochimiques

III.2.1. Le calcium
L'ion calcium est un cation appartenant à la famille des alcalino-terreux. Le calcium est surtout
présent dans les os, mais aussi dans les cellules et dans le plasma. Le calcium plasmatique existe
Chapitre III. Les paramétres
hématobiochimiques

sous trois formes : en complexe avec des acides organiques, lié à des protéines et ionisé. La
fraction ayant une activité biologique est celle représentée par le calcium ionisé Ca2+ dont la
proportion par rapport au calcium plasmatique total est d'environ50 %, et qui joue un rôle
fondamental dans la transmission de l’influx nerveux ou de récepteur hormonal (Rosol et
Capen, 1997).
La proportion de calcium ionisé varie en fonction du pH sanguin et donc du statut acidobasique.
Le calcium et le magnésium sont les deux principaux ions bivalents de l'organisme. Le calcium
est très élevé dans le milieu extracellulaire, tandis que le magnésium est augmenté dans le milieu
intracellulaire.
Les ions calciques ont de nombreuses fonctions dans l'organisme telle (L'excitabilité
neuromusculaire, La formation d'os, La coagulation sanguine et Les processus de sécrétion).
L'excrétion du calcium est effectuée par le rein et 98% ou plus du calcium filtré par les
glomérules rénaux est réabsorbé. La concentration sérique en calcium est régulée par un système
endocrinien complexe faisant intervenir trois hormones (la parathormone, la calcitonine et la
vitamine D (Rosol et Capen, 1997).

III.2.2. Les protéines totales


Les protéines sont des polymères d'acides-aminés. Elles comprennent l’albumine, les globulines
et le fibrinogène. L’albumine, le fibrinogène, et les globulines α et β sont synthétisés par le foie,
et les γ globulines par les plasmocytes.

La protéinémie s'exprime en gramme par litre (g/L) ou en gramme par décilitre (g/dL); Toutefois
la protéinémie seule peut manquer de spécificité, et il est parfois nécessaire de coupler son
dosage à celui de l'albuminémie, afin de savoir si la modification de la protéinémie est dûe à une
variation de l'albuminémie, de la globulinémie ou des deux (Eckersall, 2008).

III.2.3. Le phosphore

Les sources de phosphore (P) utilisées dans les aliments monogastriques sont principalement
d’origine végétale, minérale et animale (ex. : farines de viande, d’os, de poisson). Le P dans les
sources végétales se présente sous deux formes : phosphore phytique (PP, forme organique) et
phosphore non-phytique (PNP, forme inorganique). Le P est majoritairement sous forme de PP
dans les produits végétaux (50 à 85% du P total). Par conséquent, dans les aliments destinés aux
monogastriques qui sont composés en grande partie de produits végétaux (65 à 75% du P total
consommé par l’animal provient des végétaux).
Chapitre III. Les paramétres
hématobiochimiques

L’acide phytique (phytate) ou acide myo-inositol hexaphosphorique (IP6) est composé d’un
radical inositol estérifié par six radicaux phosphates et contient ainsi 28,2% de P (Pointillart,
1994).

Le phytate est la réserve principale de P dans les grains (Kemme et al., 1999). La
déphosphorylation de l’IP6 engendre différents produits (inositol-X-phosphate, IPX) soit l’IP5,
l’IP4, l’IP3, l’IP2 et l’IP1 et ce sont les trois derniers qui sont les plus susceptibles de passer la
barrière intestinale (Pointillart, 1994). Quant au P provenant des sources minérale et animale, il
est sous forme non-phytique. Seules les formes inorganiques solubles sont absorbables dans
l’intestin, ainsi les molécules de PNP et de PP ne seront pas absorbées en quantités similaires.

Les groupements phosphates liés au PP ne peuvent être absorbés qu’à la suite de leur hydrolyse
par une enzyme, la phytase. En raison de la faible hydrolyse de PP par les monogastriques par
manque de phytase endogène (Humer et al., 2015), il est nécessaire de supplémenter les
aliments en PNP hautement disponible pour combler leurs besoins. Les phosphates de source
minérale principalement sous forme monocalciques, monocalciques et bi calciques sont utilisés
pour satisfaire les besoins. Chez le poulet de chair, la biodisponibilité relative de ces différents
phosphates par rapport au phosphate monosodique est la suivante : 91% pour le monocalcique,
85% pour le bi calcique hydraté, 80% pour le monocalcique et 76 % pour bi calcique anhydre
(Sauvant et al., 2004).

III.2.4. Cholestérol

Le cholestérol est une graisse fabriquée aux deux tiers par le foie et apportée pour un tiers par
l'alimentation (Stryer et al., 2003a).

Chez les poulets, sa valeur de référence est comprise entre 129-297 mg/dl (Samour,2007). Cette
valeur de référence peut varier en fonction de plusieurs facteurs, notamment la qualité de
l’alimentation, l’âge, l’espèce, le mode d’élevage, et l’état de santé (Huston, 1974).
Partie expérimentale
Chapitre IV matériels et
méthodes
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

IV.1. Protocol expérimental


L’expérience avait pour objectif d’étudier l’effet des acides organiques sur les paramètres
histomorphométriques de l’intestin ainsi que, certaines paramètres hématologiques et
biochimiques de poulet de chair éclos et élevés dans des conditions les plus représentatives
possibles des conditions commerciales. Pour y parvenir, des poussins de 1j ont été obtenus dans
un couvoir prévit « EURL COQ HODHNA »

Les paramètres morphométriques de l’intestin de poulet et le statut hémato biochimique


ont été étudié sur 5 animaux représentatifs choisis au hasard à j21 et à j35 respectivement.

L’expérience s’est déroulée de 1 à 35j sur 60 poulets de chair de souche Cobb 500.

IV.2. Matériels
IV.2.1. Le produit utilisé

Le produite utilisé au cours de l’expérimentation était une solution commercialisée sous


le nom : REEFTOX liquide, est un produit synthétique contient une combinaison distincte
d’acides organiques et chaque 1ml contient : Acide propionique 400 mg ; Propionate
d’ammonium 100 mg ; Acide acétique 52,5 mg ; Acide formique 125 mg.

IV.2.2. Aliment

Au cours de l’expérimentation, les animaux ont été nourris avec un régime équilibré à
base de mais et de soja, avec une composition adaptée à la période d’élevage, de démarrage, de
croissance et de finition et une granulométrie respectée. Les animaux étaient nourris adlibitum
pour l’eau et les aliments.

13
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

Tableau 1 : composition des aliments distribués durant l’expérimentation.

Composants (g/kg) Démarrage Croissance Finition

(1-11j) (11-20j) (21-35j)

Mais 610 620 670

Tourteaux de soja 297 260 180

Son de blé 50 85 120

Phosphate bi calcique 16.7 16 10

Complémentminiralo- 10 10 10
vitaminique
Calcaire 06 09 10

Energiemétabolisable 2900Kcal 2835Kcal 2847Kcal

Source : Office national des aliments de bétail.

IV.2.3. Animaux

IV.2.3.1. Souches

Dans notre étude, les animaux utilisés étaient des poulets de chair à croissance rapide de
souche Cobb 500.

IV.2.3.2. Provenance des poussins et mise en place

Les poussins utilisés sont issus de mêmes reproducteurs ; ils ont été obtenus auprès du
couvoir prévit « EURL COQ HODHNA ». Ils ont été vaccinés contre la maladie de Newcastle au
couvoir, puis transportés jusqu’à leur bâtiment d’élevage, situé dans le nord Est de la wilaya de
M'sila. Dès leurs arrivées, les poussins ont été placés au sol, avec une densité moyenne de 10
sujets par m2.

IV.2.4. Pratique général d’élevage

IV.2.4.1. Bâtiment d’élevage

Les animaux ont été élevés dans une salle préalablement aménager et préparer pour
l’élevage expérimental.
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

Il s’agit d’une salle avec un sol en béton, et en ventilation de type statique est assurée par
l’ouverture partielle des fenêtres. La litière des parquets était composée de copeaux de bois.

IV.2.4.2. Température

La température a été assurée par des radiants à gaz et contrôlée en fonction de l’Age des
poussins. Le programme de température utilisé lors de l’expérience était :34 °c à j1, puis 32°c à j
1et j2, 30°c de j3à j8, 29°c de j9 à j12, 28°c à j 13, 27°c à j 14 ,26°c de j 15 à la fin de
l’expérience.

IV.2.4.3. Éclairage

Durant toute l’expérimentation, l’éclairage était continu (24/24h), de 1j (jours de l’arrivée


du poussin) à 35j (jour de la fin de l’épreuve scientifique), pour stimuler la consommation
d’aliment et d’eau, avec une intensité lumineuse avoisinant 5 Watts / m2.

IV.2.4.4. Programme vaccinal

Le programme vaccinal appliqué par l’exploitation inclut les principales maladies du


poulet de chair, à savoir : la bronchite infectieuse, la maladie de Newcastle et la maladie de
Gomboro. Le tableau N°2 illustre les souches vaccinales utilisées, l’Age de vaccination et les
voies d’administration des vaccins.

Tableau 2 : programme vaccinal pratiqué dans l’élevage


Age (jours) Nom du vaccin et souche Maladie prévenue Voie d’administration
vaccinales

3 jours Nobilis Maladie de Eau de boisson


MA5+CLENE30(vivant Newcastle et la
Bronchite infectieuse
recombinant
Ma5+Clone E30)
10 jours Iba-vac (vaccin vivant) Maladie du Eau de boisson
Gumbororo
16 jours Nobilis IB 4-91(vaccin Bronchite infectieuse Eau de boisson
vivant, souche B1
21 jours Hipraviares(vaccin Maladie de Eau de boisson
vivant ,souche la sota Newcastle
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

IV.2.5. Traitements expérimentaux

Dans notre étude deux traitements ont été envisagées :

 Un groupe témoin (TEM) recevant un aliment standard.


 Un groupe expérimental (EXP) nourri avec le même aliment que le témoin avec la
solution commercialisée sous le nom de « REEFTOX » des acides organiques
administrer dans l’eau de boisson à raison de 0,15 ml /l d’eau de boisson de façon
continu.
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

IV.3. Méthodes

IV.3.1. Étude des paramètres histologiques

IV.3.1. Objectif

L’analyse histologique par microdissection (Goodland et al., 1991) permet de


déterminer la morphométrie des villosités et des cryptes intestinales (hauteur, surface de villosité
et profondeur de crypte).

IV.3.2. Prélèvement et fixation

Cinq poulets vivants ont été choisis au hasard, sacrifiés puis autopsiés à l’Age de 21jours.

Après la dissection, l’intestin grêle est prélevé dans sa totalité puis divisé en trois segments : le
duodénum (du gésier aux canaux pancréatiques), le jéjunum (des canaux pancréatiques au
diverticule de Meckel) et l’iléon (du diverticule de Meckel à la jonction iléo-caecal).

À partir des échantillons prélevés pour l'étude morphologique :

 Couper un morceau du segment digestif situé au milieu du segment étudié (duodénum,


jéjunum et l'iléon).
 -Prélever 0.5 cm du segment maximum, pour que le rapport “volume de tissus / volume
de formol" permet une fixation correcte, soit un rapport de 1/10
 Couper le segment digestif longitudinalement.
 Nettoyage de l’échantillon prélevé : Éliminer les contenus digestifs avec du sérum
physiologique (NaCl 9g/l) maintenu à température ambiante pendant les prélèvements :
 Prendre le morceau d’intestin avec une pince
 Secouer le morceau dans un bécher contenant du sérum physiologique pour éliminer les
contenus digestifs adhérents.
 Renouveler l’opération dans deux autres béchers.
 Fixation dans le tampon formol : Mettre le morceau de tissu dans le tube de tampon
formol prérempli (maintenu au froid dans la glace), l’échantillon doit rester entre 4h et
20h maximum dans le tampon formol au froid (à 4°C)
 Lavages avant stockage dans l’éthanol 70%
 Vider le tampon formol dans un récipient adéquat (pour retraitement des déchets) en
retenant l'échantillon avec une pince.
 Remplir le tube avec 4ml d’éthanol 70% à la pipette en le faisant couler doucement le
long de la paroi (pour ne pas abîmer l'échantillon)
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

 Faire des cycles d’aspiration-refoulement de l’éthanol, de manière à mettre l’échantillon


en suspension et favoriser le remplacement du tampon formol par l’éthanol

 Vider à nouveau dans le récipient pour retraitement des déchets et renouveler 2 autres
fois les opérations
 Laisser les échantillons dans le dernier bain d'éthanol 70%.  Conservation dans éthanol
70% (4°C) jusqu'à la coloration

Figure 2: prélevment et fixation des échantillons

IV.3. 3.Coloration

 Couper avec le bistouri un morceau de 0.5cm2 à partir des échantillons conservés dans
l'éthanol 70%.
 Introduire l'échantillon dans un tube de 5ml, dans lequel on fera la coloration et on
conserve le reste de l'échantillon original par sécurité dans son tube original avec la
solution d'éthanol 70%.
 Déposer les morceaux découpés dans des tubes de 5ml avec 2ml du mélange Acide
Acétique/Éthanol 25%/75%, laisser au moins 24 h.
 Réhydrater l'échantillon dans l'éthanol 50% pendant15mn à température ambiante.
 Laver le avec de l'eau distillée pendant10mn à température ambiante.
 Hydrolyser l'échantillon dans une solution de HCL 1N pendant 6mn à 60°C, en utilisant
un bain marie.
 Lavage avec l'eau distillée trois fois.
 Coloration de Schiff pendant 20à 40min (1.5ml) en obscurité.
 Lavage avec l'eau distillée deux fois (3ml), pour enlever l'excès du colorant.

 Conserver l'échantillon dans l'Acide Acétique 45% (2 ml) à 4°C.


Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

IV.3. 4.Méthode histologique « Microdissection »

IV.3. 4.1. Technique

 Disposer l'échantillon coloré sur une plaque de Pétri avec l'Acide Acétique (on évite qu'il
sèche)
 Couper un segment plat de 4x4mm et le déposer sur la lame numérotée (ajouter quelques
gouttes d'Acide Acétique sur l'échantillon pour éviter qu'il sèche.

Figure 3: échantillon coloré avant la dissection (vue sous une loup)


Disséquer les villosités une à une soigneusement à l'aide des aiguilles fines et sous une loupe
binoculaire, au moins dix villosités par sujet.

Figure4:Dissection des villosités et des cryptes intestinales.

 Pour fixer les villosités avec ses cryptes sur la lame, enlever l'excès d'Acide Acétique par
capillarité à l'aide d'un papier, ajouter 2-3 gouttes du liquide de montage Merck et couvrir
avec la lamelle.
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

IV.3 4.2. Traitement des images

Pour chaque prélèvement 10 villosités et 20 cryptes de Lieberkühn sont photographiées et


mesurées en utilisant un microscope doté d'une caméra et un logiciel d'acquisition et d'analyse
d'image (Optika™ Vision Pro Version 2.7).

Figure 5 : Vue microscopique des villosités avec leurs cryptes après dissection (Duodénum j21)
(Gx4)

Figure 6 : vue microscopique des cryptes après la dissection.

IV.3. 4.3. Description du logiciel

Le logiciel d'analyse d'image "Optika™ Vision Pro"est une application puissante orientée vers
les utilisateurs avancés. Le contrôle total de la capture d'image, une variété de mesures et
calibrations et de haute performance dans l'analyse de l’image font de ce logiciel un outil
capable de satisfaire les utilisateurs les plus exigeants.
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

IV.3. 4.4. Étalonnage et Calibration

Pour calibrer un objectif :

- Utiliser la lame micrométrique


- Capturer l’image et l’envoyée dans la mémoire tampon (FIELD GROUP)
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

- Double clic sur l’imagètte pour l’ouvrir

- Ouvrire l’onglet calibrate dans l’ongle “mesure”

Figure 7:Création de l'échelle

- Avec la souris, tirer un trait entre deux graduations (un clic droit, garder le doigt
enfoncé jusqu'à la deuxième graduation, relâché).
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

- Un clic droit : Une boite de dialogue apparaît.


- Modifier :
• Lengh : Introduire la valeur mesurée sur la lame de calibration
• Magnification : Introduire la valeur du grossissement (Soit la valeur de l’objectif soit
l’objectif
X l’oculaire). Pour ce logiciel, cela n’a pas d’importance, il traduit le nombre de pixels
mesurés en longueur.
- Ajuster LINEAR UNIT et SQUARE UNIT à l’unité de mesure de la lame
micrométrique
- Cliquer sur OK Pour que les modifications soient enregistrées il faut revenir sur la
page « CAPTURE CONTROL » ;soit créer un nouveau profil ;soit modifier un profil
existant. Sinon les modifications ne seront enrigistré .

Figure8:Enregistrement de l'échelle crée


IV.3. 4.5. Mesure des paramètres histologiques

- Capturer l'image et l'enregistrer dans la mémoire tampon


- Ouvrir l’imagette par double-clic
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

A partir de l'ongle " Mesure" en effectuant les différentes mesurent de paramètres histologiques
de l'intestin à savoir la hauteur, la largeur, le périmètre et la surface de villosités et de cryptes
intestinales.2.

Figure 9 : Mesure des paramètres histologiques des villosités intestinales via le logiciel
"OpticaTM Vision Pro"L : largeur des villosités, H : hauteur des villosités, P :périmètre, S:
surface des villosités.

Figure 10 : Mesure des paramètres histologiques des cryptes intestinales via le logiciel
"OpticaTM Vision Pro"L : largeur des cryptes, P : profondeur des cryptes, Pr :périmètre,S:
surface des cryptes.

IV.3.3.Etude hémato biochimique

IV.3.3.1. Prélèvement sanguine

Les prélèvements sanguins ont été effectués à partir de la veine jugulaire chez
tous les sujets, à l'âge de 35 jours (fin de l'expérimentation). Une quantité de 4
ml a été prélevée et répartie équitablement dans le tube sec pour les analyses
biochimiques et le tube à EDTA pour les analyses hématologiques. Les
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

échantillons sont ensuite conservés et transportés vers le laboratoire d’analyse


médicale.

IV.3.3.2. Choix des analyses

Un choix a été entrepris concernant les paramètres


recherchés. Les analyses sélectionnées pour cette étude ont été en fonction de la
disponibilité des réactifs de laboratoire, ainsi que de la faisabilité des techniques de dosage.

IV.3.3.3. Analyse biochimique

IV.3.3.3.1. Cholestérol

Technique de dosage

Le dosage de cholestérol total a été effectué par une méthode enzymatique


colorimétrique appelée aussi méthode de Trinder ou en point final. Le
cholestérol est mesuré après hydrolyse enzymatique puis oxydation.
L’indicateur quinone imine est formé à partir du peroxyde d’hydrogène et de
l’amino 4 antipyrines en présence de phénol et de peroxydase, déterminé selon
les réactions suivantes : Cholestérol estérase

Cholestérol estérase cholestérol + acide gras

Cholestérol oxydase

Cholestérol + O2 cholestérol -4- one -3 +H2O2

Peroxydase

H2O2+ phénol +4- AF quinone imine rose

Le lecteur se fait sur spectrophotomètre à longueur d’onde de 570 nm, La quantité de


quinone imine formée est proportionnelle à la concentration de cholestérol.

IV.3.3.3.2. Protéines totales

Technique de dosage :
Le dosage des protéines totaux a été effectué par une méthode enzymatique
colorimétrique appelée aussi méthode de Biuret. En milieu alcalin, les protéines
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes

donnent une couleur violette/bleue en présence de sels de cuivre ; ces sels


contiennent de l’iodure qui agit comme un antioxydant.

L’intensité de la couleur formée est proportionnelle à la concentration de protéines totales


dans l’échantillon testé.

IV.3.3.3.3. Phosphore

Le phosphate inorganique réagit avec le molybdate d'ammonium pour former un complexe


:
Le phospho-molybdate qui est réduit en bleu de molybdène. L'utilisation d'un surfactant
élimine la nécessité de préparer un filtrat exempt de protéines.

L'absorbance à 340 nm est directement proportionnelle à la concentration de phosphore


inorganique dans l'échantillon. (Fiske et Subbarow, 1925).

IV.3.3.3.4. Calcium

La mesure par spectrophotométrie de complexes calciums colorés est largement


utilisée. Comme colorant utilisé pour la mesure du calcium, on peut citer
l'ocresolphtaleine - complexion et l'arsenazo III, ce dernier étant utilise dans ce
dosage. Le colorant arsenazo-III réagit avec le calcium dans une solution acide
pour former un complexe bleu-pourpre. La couleur qui se développe est
mesurée à 660 nm. Elle est proportionnelle à la concentration en calcium de
l'échantillon (Henry et al., 1974).

IV.3.3.4.Analyse hématologique

Les paramètres hématologiques dont les globules rouges, les globules blancs et
l’hémoglobine ont été mesurées par l’analyseur d’hématologie swelabAlfa , numéro de
pièce 1400016.

IV.3.4. Analyses statistiques


Tous les résultats relatifs aux changements des paramètres histologiques, ainsi que
les paramètres hémato biochimiques sont exprimés en (moyenne ±SEM). Leur
comparaison a été traitée à l’analyse de variance à un facteur (ANOVA) au seuil de
signification a été fixé à (P < 0,05), en utilisant le logiciel GraphPadPrism version
7.
Partie experimentale Chapitre IV: materiels et méthodes
Chapitre Ⅵ
Résultats Et discussion

28
Chapitre Ⅵ Résultats Et desscusion

V.1. Résultats

Dans la présente partie, nous présentons les résultats relatifs à l’effet des acides organiques sur la
morphométrie intestinale ainsi que, le statut hémato biochimique chez le poulet de chair durant la
vie postnatale.

V.1.1. Etude des paramètres histologiques

Tableau 3 : Effet des acides organiques sur les paramètres histologiques du duodénum du poulet
de chair à 21 jours d’âge.
Paramètres histologiques du Lot (Témoin) Lot(traité) Valeur(p)
duodénum

Hauteur des villosités(x103µm) 1,25±0,07 1,81±0,05*** 0,0004

Largeur des villosités(x103µm) 0,5±0,03 0,5±0,02 0,5 (N.S)

Les valeurs représentent les moyennes ± écart-Type(n=5). *** : p< 0,001

Les variations des paramètres morphométriques des villosités intestinales du poulet (la
hauteur et, la largeur) à l’âge de 21jours post éclosion, sont résumées dans le tableau 3.

Les résultats que nous avons obtenus concernant les variations de la hauteur des villosités
intestinales du poulet sont comme suit ; (1,81±0,05x10 3µm), pour le lot (expérimental), contre
(1,25±0,07x103µm) pour le lot (témoin). Il en ressort clairement de ces résultats que, les acides
organiques ont un effet bénéfique sue la taille des villosités intestinales avec une différence très
hautement significative (p < 0,001) entre le lot « témoin » et le lot expérimentale.

Concernant la largeur des villosités intestinales, aucune différence significative n’a été
observée durant notre étude entre les poulets du lot (témoin) par comparaison à ceux du lot
expérimental.

Tableau 4 : Effet des acides organiques sur les paramètres histologiques du duodénum du poulet
de chair à 21jours d’âge
Chapitre Ⅵ Résultats Et desscusion

Paramètres histologiques du Lot (traité) Valeur p


Duodénum Lot (témoin)

Profondeur des cryptes (x103µm) 0,39±0,05** 0,24±0,02 0,0014

Largeur des cryptes (x103 µm) 0,05±0,005 0,05±0,004 0,43 (N.S)

Les valeurs représentent les moyennes ±Écart-Type (n=5). ** :(p< 0,01).

Dans le tableau ci-dessus sont, illustrées les données relatives au variations des
paramètres histologiques de l'intestin du poulet, à savoir la profondeur et la largeur des
cryptes, dans le premier segment intestinal chez des poulets soumis à des régimes
alimentaires supplémentés avec un mélange d’acides organiques dans l'eau de boisson.

D'après nos résultats, nous avons enregistré des profondeurs significativement (p < 0,01)
plus faible concernant les cryptes des poussins du lot expérimental (0.25ml/l) comparativement à
ceux du lot témoin.

Pour la largeur des cryptes au niveau du duodénum du poulet, notre étude n’a montré
aucune différence significative concernant ce paramètre histologique pour les deux lots. Nous
pouvons constater que, l’incorporation des acide organiques dans l’alimentation du poulet de
chair affect positivement et significativement que la profondeur des cryptes, alors que, la largeur
reste cotonner à des valeurs très rapprochées dans les deux lots.

V.1.2. Etude des paramètres hématologiques

Tableau 5 : Effet des acides organiques sur les paramètres hématologiques du poulet de chair à
21jours d’âge.
Paramètres hématologiques Lot (témoin) Lot (traité) Valeur p

Les globules blancs(103/mm3) 134,22±4,2 153,6±11,3* 0,02

Les globules rouges(106/mm3) 2,26±0,1 2,25±0,12 0,1(NS)

Hémoglobine (g/dl) 11,08± 0,16 11,41± 0,43 0,22 (N.S)

Les valeurs représentent les moyennes ±Écart-Type(n=5). * :(p <0,5) ; **(p < 0, 01)

Les résultats que nous avons obtenu concernant l’analyse des paramètres hématologiques
(globules blancs, globules rouges et, hémoglobine) du poulet de chair pendant la vie
postenatal sont présentés dans le tableau 5.
Chapitre Ⅵ Résultats Et desscusion

D'après nos résultats nous pouvons constater que, les globules blancs et, les hématies sont
remarquablement affectées par le produit utilisé, toute en signalons une augmentation
significative avec (p < 0,5) et (p < 0,01) du nombre de globules blancs et des globules rouges
respectivement, chez les animaux recevant (0.25ml/l) d’acide organique dans l'eau de boisson,
comparativement à ceux du lot témoin. Concernant le taux d'hémoglobine, ce paramètre
hématologique, ne montre pas des variations importantes et reste cantonner à des valeurs très
rapprochés dans les deux lots sans aucune différence significative signalée (p ˃ 0,5).

V.1.3.Etude des paramètres biochimiques

Tableau 6 : Effet des acides organiques sur les paramètres biochimiques du poulet de chair à 21
jours d’âge.
Paramètres biochimiques Lot (témoin) Lot (traité) Valeur

Cholestérol (g/l) 1,11± 0,18 0,95± 0,12 0,25 (N.S)

Protéines totales (g/l) 25,10± 1,06 32,26± 3,5* 0,013

Calcium (mg/dl) 10,41± 0,5 11,52± 0,55* 0,016

Phosphore (mg/dl) 6,12± 0,56 7,30± 0,41*** 0,0008

Les valeurs représentent les moyennes ±Écart Type(n=5). ***(p < 0,001) ; *(0,05 > p > 0,01)

Les résultats relatifs aux analyses des paramètres biochimiques


(cholestérol,protiénestotales, calcium et phosphore ) du poulet de chair pendant la vie postenatal
sont figurés dans le tableau 6 qui, montre une diminution non significative du taux de cholestérol
chez les animaux du lot supplémenté avec l’acide organique(0.25ml/l) par rapport au lot
(témoin).

De même, une augmentation significative du taux des protéines totales et le taux de


calcium dans le lot expérimental par rapport au lot témoin.

En fin, l’analyse statistique de nos résultats, a révélé un effet hautement significatif avec (p
<0,001) concernant le taux de phosphore chez les poulets du lot traité par comparaison à ceux du
lot (témoin).
Chapitre Ⅵ Résultats Et desscusion

V.2. DISSCUSSION

Les acides organiques font partie des stimulateurs de croissance, alternatifs aux
antibiotiques, utilisés pour stimuler les performances de croissance des volailles (Dibner et
Winter, 2002 ; Dibner, 2004 ; Adil et al., 2010 ; Hassan et al., 2010). De nombreuses études
ont démontré que, la supplémentation en acides organiques à des régimes alimentaires des
poulets de chair pouvait être augmenter les performances de croissance, réduire les maladies et,
surmonter certains problèmes de gestion (Gunal et al., 2006 ; Islam et al., 2008 ; Ao et al.,
2009 ; Hassan et al., 2010 ; Sayrafi et al., 2011Fascina et al. 2012;).

Etude des paramètres histologiques

Dans notre étude, nous avons démontré que, l'addition d'un mélange d'acides organique à
raison de (0.25ml/l) dans l'eau de boisson du poulet, durant la période d'essai affecte
positivement et, significativement ( p< 0,001) la hauteur des villosités duodénales, tout en
augmentant la surface d'absorption intestinale chez les poulets supplémentés en comparaison a
ceux du lot témoin; cependant, aucune déférence significative (p > 0,05) n'a été observée
concernant l'effet de cet aditif sur la largeur des villosités intestinales.

Nos résultats, sont en accord avec les travaux publier par Pelicano et al. (2005) qui ont
rapporté que, la hauteur des villosités iléales était plus élevée chez les poulets nourris avec des
régimes enrichis en acides organiques que, ceux nourris avec des régimes appauvris en mannose
oligosaccharide. Par contre, Owens et al. (2008) n'ont pas mis en évidence de différence
significative dans l'histologie de l'iléon en fonction de la supplémentation alimentaire en acides
organiques.

De plus Paul et al. (2007) ont observé que, certains sels d'acides organiques (formiate
d'ammonium et propionate de calcium à la dose de 3 mg/kg) amélioraient de manière
significative la hauteur des villosités intestinales.

Xia et al. (2004) ont également signalés que, la plupart des acidifiants organiques ajoutés au
régime alimentaire du poulet induisaient une augmentation significative de la hauteur des villosités
intestinales. De même, ils ont rapporté que, les modifications de la hauteur des villosités dans l'iléon
étaient différentes selon l'utilisation de probiotiques (additifs microbiens viables dans l'organisme
hôte) ou de prébiotiques (ingrédients alimentaires non digestibles stimulant la croissance et l'activité

Des bactéries bénéfiques dans le système digestif). Ces mêmes résultats ont été signalés dans notre
étude.
Chapitre Ⅵ Résultats Et desscusion

En revanche, Smulikowska et al. (2010) rapportent que, les acides organiques ont
diminué significativement la hauteur et la largeur des villosités ainsi que la profondeur de la
crypte (p < 0,001) ; ce qui n’a pas été preuve dans notre étude.

Ainsi que, Kum et al. (2010) ont constaté que, la supplémentation en acides organiques a
fortement augmenté la surface d’absorption intestinale en favorisant la croissance des villosités
en hauteur et en largeur à l'âge de 21 jours de vie dans les deux premiers segments intestinaux le
duodénum et le jéjunum avec (p< 0,05) et (p< 0,001) respectivement ; cet effet positif des acides
organiques a été signalé aussi au niveau de troisième portion intestinale du poulet à 42 jour d'âge.

Awad et al. (2009) ont conclu que, l'état des villosités est, un critère de mesure commun
pour l'étude des effets de la nutrition sur la physiologie de l’intestin ; des villosités plus longues
peuvent être considérées comme un indicateur du fonctionnement actif des villosités intestinales,
et par conséquence, l'augmentation de la hauteur des villosités offre une plus grande surface pour
l'absorption des nutriments. Par ailleurs, Vieira et al. (2008) ont signalé qu'aucune corrélation
significative n'a été observée entre les performances de croissance et, la hauteur des villosités ou
la profondeur des cryptes.

D'après Awad et al. (2008), l’augmentation de la hauteur et, de la surface des villosités
intestinales permettent une meilleure absorption des nutriments disponibles. Ces mêmes résultats
ont été soulignés par Yamauchi et al. (2010).

Les études menues par Loddi et al. (2004) et Pelicano et al. (2005) ont également
démontrés que, l'apport alimentaire des acides organiques améliorait à la fois la hauteur des
villosités et, la surface d'absorption intestinale. Ceci pourrait être expliquer par le fait que, les
acides organiques réduisent la croissance de nombreuses bactéries intestinales pathogènes,
diminuant la colonisation intestinale et, les processus infectieux, diminuant finalement les
réactions inflammatoires au niveau de la muqueuse intestinale, ce qui augmente la hauteur des
villosités et les fonctions de sécrétion, de digestion et d'absorption des nutriments par la
muqueuse. De même, Hassan et al. (2010) rapporte les mêmes résultats.

Cependant, Smulikowska et al. (2010) ont soulignés que, la hauteur des villosités et la
profondeur des cryptes intestinale du poulet ont été négativement affectés par la supplémentation
en acides organiques (acides lactique, formique et citrique). Tout en signalant une diminution
remarquable de la hauteur des villosités (p < 0,001) et de la profondeur des cryptes intestinale (p
< 0,001) ; Par ailleurs, dans notre étude nous avons démontré que l’acide organique améliorait
significativement la surface d'absorption intestinale, suite à une augmentation significative de la
hauteur des villosités intestinales.
Chapitre Ⅵ Résultats Et desscusion

D'autre part, il a été démontré que la supplémentation en acides organiques des régimes
alimentaires des volailles augmente l'activité microbienne bénéfique dans l'intestin grêle (Cengiz
et al., 2012) et supprime la croissance de certaines espèces de bactéries telles que les
Salmonelles Abudabos et al. (2014), E. coli, Clostridium perfringens, Listeria monocytogenes et
Campylobacter (Van Immerseel, 2002 ; Hassan et al., 2010).

En ce qui concerne les cryptes ; ces derniers peuvent être considérées comme le site de
production des entérocytes où les cellules souches se divisent pour permettre le renouvellement
des villosités. Des cryptes plus profondes indiquent un renouvellement cellulaire rapide pour
permettre le renouvellement des villosités selon les besoins, en réponse de l'érosion normale ou
inflammatoire causée par des agents pathogènes ou par leurs toxines (Crosnier et al. 2006).

Dans la présente étude, les mesures morphométriques de l'intestin du poulet, indiquent


que, la profondeur de cryptes est positivement affectée chez les poussins du lot témoin par
rapport à ceux du lot supplémenté par les acides organiques, tout en signalant une différence
hautement significative avec (p < 0,001). Ces résultats sont en nette concordance avec les
travaux de Adil et al. (2010), qui ont trouvé que, la profondeur de ce paramètre dans le
duodénum, le jéjunum et l'iléon n'a pas été affectée dans les différents groupes de traitement avec
les acides organiques. Ces mèmes résultats ont été signalés par Agboola et al. (2015).

A propos de nos résultats, Adewole et al. (2021) ont indiqué que, la profondeur des
cryptes n’a pas été affecté par la supplémentation en acides organiques dans la ration alimentaire
du poulet. Ainsi, Hashemi et al. (2014) ont rapporté les mêmes conclusions. Cependant,
Frankel et al. (1994) ont trouvé que, les cryptes du jéjunum étaient plus profondes chez les
poulets nourris avec un régime supplémenté d'acide formique (1,0 %) par comparaison a ceux
nourris avec un régime d'antibiotiques.

Etude des paramètres biochimiques

Courament utilisés en médecine vétérinaire, les examens sanguins constituent un examen


complémentaire de choix dans de nombreuses situations.

Nos résultats, montrent une diminution non significative du taux de cholestérol chez les
animaux du lot supplémentés avec l'acide organiques par rapport à ceux du lot témoin, ces
résultats sont en accord avec ceux obtenus par Hashemi et al. (2014) qu'ont trouvé que, le taux
de cholestérol dans le sérum sanguin du poulet n’a pas été influencé par les traitements
alimentaires aux jours 21 et 42 d'âge.
Chapitre Ⅵ Résultats Et desscusion

Une étude antérieure menue par Yesilbag and Colpan (2006) montre que le profil
lipidique des oiseaux nourris avec des régimes supplémentés en acides organiques présentait un
niveau plus faible de lipides totaux, de cholestérol et de lipoprotéines de faible densité (LDL)
chez les animaux du lot expérimentale par rapport au lot témoin.

De plus, Gama et al. (2000) ont indiqué que, certains paramètres sanguins (cholestérol,
HDL, triglycérides, VLDL et concentrations de lipides totaux) n'ont pas été significativement
affectés par le traitement d'acides organiques, ce que nous avons démontré durant l'analyse de
nos résultats.

Contrairement à nos résultats Dehghani and Jahanian (2012) ont trouvé que, les
acidifiants (acide citrique et acide butyrique) ajoutés à l'alimentation du poulet de chair
augmentaient le taux cholestérol sérique chez les poussins de 21 jours d'âge. De même, Nezhad
et al. (2008) ; Vale et al. (2004) ont rapporté que, les différents acides, tels que l'acide lactique,
l'acide butyrique, l'acide formique, l'acide fumarique et l'acide citrique, ont des effets positifs sur
les paramètres lipidiques chez les volailles.

A propos du taux des protéines sériques totaux, nous avons souligné une augmentation très
hautement significative (p<0.001) concernant ce paramètre biochimique chez les poulets du lot
traité avec les acides organiques par comparaison à ceux du lot témoin.

Ces résultats sont en accord avec le travail de Yesilbag and Colpan (2006), qu’ils ont
rapporté que, la supplémentation en AO alimentaire à raison de (1,0 et 1,5 %) augmentait de
manière significative la concentration en protéines sériques totales et en albumine chez les poules
pondeuses.

De plus, Baruah et al. (2009) ont montré que, la supplémentation de l’acide citrique dans
le régime l'alimentaire des oiseaux améliorait significativement (p< 0,01) les taux des protéines
sériques totales, d''albumine et de globuline.

Par contre, Salgado-Tránsito et al. (2011) ont constaté que, l'ajout de différents niveaux
d'acide citrique aux rations du poulet de chair n'avait pas d'effet significatif sur les protéines
sériques totales ainsi que le taux d'albumine.

A propos des taux de calcium et des phosphates sériques, nous avons souligné une
augmentation hautement significative (p<0.001) concernant ces deux paramètres biochimiques
chez les poulets du lot traité avec les acides organiques par comparaison à ceux du lot témoin

Ces résultats sont, en accord avec ceux publier par Boling et al. (2001) qui ont rapporté
que, l'augmentation des niveaux de Ca et de P dans le sérum sanguin, peut être attribuée à
Chapitre Ⅵ Résultats Et desscusion

l'abaissement du pH du tractus digestif par l'utilisation des acides organiques qui, augmente
l'absorption de ces minéraux au niveau de l’intestin. De même, Abdo et Zeinb (2004) ont
observé une augmentation du taux de calcium sanguin chez les poulets de chair nourris avec un
acidifiant alimentaire. À cet égard, Abdel-Azeem et al. (2000) et Edwards et Baker (1999) ont
constaté que, l'anion acide se complexifier avec le Ca et, le P, ce qui améliore la digestibilité de
ces minéraux. En outre, (Kishi et al.,1999) ont rapporté que, l'acide acétique alimentaire
prévenait l'ostéoporose en réduisant le renouvellement des os, car il améliorait l'absorption
intestinale du Ca en améliorant la solubilité du Ca chez les rats ovariectomisés.

Etude des paramétres hématologiques

Nos résultats montrent une augmentation significative (p<0,001) du taux des globules
blancs dans le lot traité par apport au témoin. Ceci se concorde avec les travaux de
Nasiroleslami et Torki
(2010) ; ZARE et al. (2007) qu’ont signalés que, les globules blancs significativement
augmentés par la supplémentation en acides organiques à 21 et 42 jours d'âge, très probablement
en raison de leurs interactions antimicrobiennes et de la stimulation du système immunitaire
résultant en une meilleure immunité. De plus, les niveaux des globules blancs augmenté de
manière significative à 21 et 42 jours d'âge dans les groupes supplémentés en acides organiques
et en phytobiotiques, par rapport au groupe témoin (Gilani et al., 2018).

L'analyse de nos résultats concernant l'effet des acides organique sur la numération
érythrocytaire chez le poulet de chair, ne présente aucun effet significative (p ˃ 0,05) entre les
poussins traités avec les acides organiques et ceux du lot témoin, ceci est en accord avec les
publications de Baruah et al. (2009), qui ont montrés que, l’utilisation d'un additif alimentaire à
base d'acide citrique (3 %) n'a eu aucun effet sur la numération des globules rouges.

Dans notre étude, le taux d'hémoglobine diminue de manière non significative (p ˃ 0,05)
après l’ajoute des acides organique dans l'eau de boisson chez les poulets. Cependant Sattar et
al. (2023) ont soulignés que, le volume des cellules érythrocytaires et la concentration
d'hémoglobine ont augmenté de manière significative (p ˂ 0,01) chez poulets de chair du groupe
traités aux pro biotiques et à l'acide organique par rapport au groupe témoin.

De plus, nos résultats sont nettement différents de ceux obtenus par Baruah et al. (2009)
qu'ont constatés que, les taux d'hémoglobine et l'hématocrite ont été améliorés de manière
significative après l’utilisation d'un additif alimentaire à base d'acide citrique (3 %).
Chapitre Ⅵ Résultats Et desscusion
CONCLUSION
CONCLUSION

L'étude ayant porté sur l'effet d'un mélange des acides organique sur les mesures
histomorphométriques de l'intestin grêle du poulet ainsi que, sur le profil hématologique et
certains paramètres biochimiques durant la vie postnatale, a permis d'apporter les résultats
suivants :

Les résultats de notre étude ont montré que, la supplémentation en acides organiques chez
les le poulet de chair à raison de( 0.25ml/l) d'eau de boisson, durant la vie postnatale, a un impact
positif sur l'histologie de l'intestin grêle (duodénum); cet effet révélé par une augmentation
significative de la hauteur et de la largeur des villosités intestinales avec une diminution
remarquable de la profondeur des cryptes dans le même segment intestinal; ce que favorise
l'amélioration de la surface d'absorption des nutriment chez le poulet de chair.

De plus, nous avons démontrée que cet additif alimentaire, a un effet bénéfique concernant
les paramètres biochimiques, tout en agissant sur l'augmentation du taux des protéines totaux, de
calcium et de phosphate. Ainsi, nous avons pu souligner un effet spectaculaire des acides
organiques sur le nombre des leucocytes chez les animaux supplémentés avec 0.25ml/l.
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