Exercices - Cintique enzymatique

1. Que devient la valeur de v / Vmax quand [S ] = 4 K m ? 2. Si Vmax = 100 mol / ml / s et Km = 2mM, quelle est la vitesse de la raction quand [S]=20 mM ? 3. Dans une raction cintique de type Michaelis-Menten, k1 = 7 X 10 7 M 1 s 1 , k 1 = 1 X 103 s 1 , et k 2 = 2 X 10 4 s 1. Quelles sont les valeurs de Ks et de Km? La fixation du substrat atteint-elle lquilibre ou plutt ltat stationnaire? 4. Les rsultats suivants sont obtenus au cours dune raction enzymatique, (1) en labsence dinhibiteur, (2) et (3) en prsence de deux inhibiteurs diffrents la concentration 5 mM. [ET ] est le mme dans chaque exprience. [S] (mM) 1 2 4 8 12 (1)
v( mol / ml / s

(2)
v( mol / ml / s

(3)
v( mol / ml / s

12 20 29 35 40

4,3 8 14 21 26

5,5 9 13 16 18

a. Dterminez Vmax et Km de lenzyme. b. Dterminez le type dinhibition et le Ki pour chaque inhibiteur. 5. Lalcool dshydrognase hpatique (ADH) nest pas trs spcifique quant la nature de lalcool oxyd, thanol, mthanol, et dautres alcools. Loxydation du mthanol produit de laldhyde formique qui est toxique, provoquant divers troubles dont la ccit. Mon chien, Pitou, qui prfre gnralement le vin bon march, a par erreur ingr 50 ml dun produit lave glace (une solution 50% de mthanol). Sachant que le mthanol serait limin par voie rnale si son oxydation tait inhibe, et sachant que lthanol agit comme un inhibiteur comptitif de loxydation du mthanol par lADH, jai dcid doffrir du vin Pitou. Combien de litres de sa boisson favorite ( 12% dthanol) mon chien devra-t-il boire pour rduire lactivit de lADH sur le mthanol 5% de son activit normale si les Km de lADH pour lthanol et le mthanol sont respectivement 1mM et 10mM. (Le Ki de lthanol dans son rle dinhibiteur comptitif de lADH est le mme que son Km). Le mthanol et lthanol diffusent rapidement et uniformment dans les 15 l. de fluides du corps de Pitou. On supposera que les densits de la solution de lave glace et du vin sont les mmes, 0,9 g/ml.

Rponses - Cintique enzymatique

1. v / Vmax = 0,8 2. V = 91 mol ml 1 / s 1 . 3. K s = 1,43 X 10 M ;K m = 3 X 10 4 M . Comme k2 est 20 fois plus grand que k-1, le systme se comporte comme un systme ltat stationnaire. 4. Avec un graphe selon Lineweaver-Burke (double inverse) : Vmax = 51 mol ml 1 / s 1 et Km = 3,2 mM. Linhibiteur (2) agit par comptition, avec Ki = 2,13 mM. Linhibiteur (3) provoque une inhibition non comptitive, avec Ki = 4mM. 5. Pitou doit boire 694 ml de vin, soit prs dune bouteille (750 ml).
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