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Gabs

Ecole Nationale dIngnieurs de

Chromatograp
hie
en
phase gazeuse
Lenseignant :

Mr. Noomen Moussa


Elabor par :

Mayssam Dalhoumi
Mariem Abdelkader
Marwa Ben Hariz
Sabrine Chammem
Kawther Benamara

I. Introduction.
Chronologiquement, la chromatographie en phase gazeuse
est apparue aprs celle en phase liquide. En effet ; la CPG est
une transposition

de la chromatographie sur colonne dans

laquelle la phase mobile liquide a t remplace par un gaz.


Elle est ainsi une mthode de sparation des composs dun
mlange gazeux qui sont susceptibles d'tre vaporiss sous
leffet du chauffage sans tre dcomposs ce qui permet
analyser les mlanges complexes dont ses constituants se
diffrent surtout au niveau de leurs volatilits.
Ds 1962, cette technique d'analyse est utilise dans l'industrie
ptrolire pour contrler les fractions lgres des raffineries de
ptrole. Puis, cette technique s'est dveloppe et s'tend
aujourd'hui tous les domaines : chimie, biologie, astronomie,
pharmacie, industrie des matires plastiques, etc.
Compte tenu de ses nombreuses applications dans tous les
domaines des sciences, la chromatographie est considre
comme une volution majeure du XXe sicle dans le domaine de
la chimie analytique.

II. Aspect thorique.


1. Quest ce quil passe durant lanalyse?

La CPG est une chromatographie d'adsorption, dont la phase


stationnaire est ladsorbant. Les constituants du mlange

inject sont en quilibre entre la phase gazeuse et la surface de


la colonne o ils s'adsorbent.

Le gaz qui vhicule les

constituants du mlange constitue la phase mobile et est


appel gaz vecteur. A l'instant initial, le mlange sparer est
inject l'entre de la colonne o il se dilue dans la phase
mobile qui l'entrane le long de celle-ci. Si la phase stationnaire
a

bien

choisie,

les

constituants

du

mlange

sont

ingalement retenus par celle-ci lors de la traverse de la


colonne. De ce phnomne nomm rtention , il rsulte que
les constituants du mlange inject se dplacent tous moins
vite que la phase mobile et que leurs vitesses de migration
respectives sont ingales. De ce fait, les constituants du
mlange sortent de la colonne les uns aprs les autres au sein
de la phase mobile. A la sortie de la colonne se trouve un
dtecteur reli un enregistreur. Lorsqu'un constituant du
mlange arrive au niveau du dtecteur, un pic apparat sur
l'enregistreur. Le temps de sortie de chaque constituant t R,
nomm temps de rtention, caractrise de faon qualitative le
constituant. L'aire du pic permet de dterminer la concentration
massique de chaque solut dans le mlange inject. L'analyse
d'un mlange peut donc tre quantitative.

2. Description

de lappareil et du principe
de fonctionnement.

Le chromatographe comprend principalement ces modules :


Un four.
Un systme dinjection.

Une colonne.
Un dtecteur.
Enregistreur.

Schma de principe d'un


chromatographe gaz

a) Four.
Le four assure une programmation de temprature ajustable de
20 C 450 C.
La temprature du four peut tre :
Stable et identique durant lanalyse Conditions isothermes.
Programme par palierEn gradient.
Cest

pourquoi

le

four

est

quip

d'un

systme

de

refroidissement rapide pour quil puisse rpondre la consigne


de temprature donne par loprateur.

b) Le systme dinjection.
Le systme d'injection a ces trois rles:
- rle d'interface qui permet d'introduire l'chantillon dans le
chromatographe.
- rle de systme de vaporisation (dans le cas d'un chantillon
liquide ou solide)
- rle dentrainement
chromatographique.

de

lchantillon

dans

la

colonne

Les caractristiques des injecteurs, ainsi que les modes


dinjection, diffrent suivant le type de colonne auxquelles ils
sont relis.
On distingue 3 modes dinjections :
Injection split/splitless : Il sagit dinjecteurs pouvant

fonctionner suivant deux modes, avec ou sans division du


mlange chantillon-gaz vecteur. En mode split, le gaz
vecteur arrive avec un grand dbit dans la chambre de
vaporisation ; une vanne de fuite divise le courant gazeux en
deux parties dont la plus petite est la seule pntrer dans
la colonne. Ce mode est utilis dans le cas des colonnes
capillaires faible dbit. Le mode splitless est rserv aux
chantillons trs dilus.
Injection par vaporisation directe : Le plus courant est
l'injecteur septum. Il sagit dun tube mtallique, doubl
dun chemisage de verre, balay par le gaz vecteur et
chauff une temprature suprieure de 20 30 C au point
d'bullition du constituant le moins volatil du mlange

analyser ce qui garantit la vaporisation immdiate de tous


les constituants du mlange.
Lune des extrmits de linjecteur est obture par une
pastille

dlastomre

silicon

nomme

septum

pour

permettre le passage de laiguille de la seringue qui contient


lchantillon injecter et lautre est relie la colonne. Puis
le mlange est transfr par lintermdiaire dun gaz vecteur.
Le choix de ce denier est troitement li la sensibilit du
dtecteur ; hydrogne ou azote avec un dtecteur
conductibilit thermique (catharomtre), azote ou hlium
avec un dtecteur ionisation de flamme, azote ou mlange
argon-mthane avec un dtecteur capture d'lectrons. Le
gaz vecteur doit tre pur, inerte (il ne doit pas ragir avec les
constituants du mlange sparer) et le moins miscible
possible avec la phase stationnaire.

Le systme
dinjection

c) La colonne.
On distingue 3 types de colonnes:
Colonne remplissage.
Colonne semi-capillaire.
Colonne capillaire.
On va sintresser la colonne capillaire puisque notre
chromatographe est quip par ce type de colonne. Elle est en
acier lorigine (1970) mais maintenant en verre de silice, elle
a un diamtre interne variant entre 0,05 et 0,35 mm et une
longueur comprise entre 10 et 50 m. Elle se situe lintrieur

du four pour maintenir une temprature suffisante afin de


garder ltat gazeux des soluts lors de lanalyse. Elle est
revtue dune couche de polymre ou dun film daluminium et
enroule sur un support mtallique cylindrique lger, c e support
est

imprgn

chimiquement

d'un

produit

appel

phase

stationnaire dont l'affinit avec les composants du produit


analyser

est

la

plus

grande.

Aprs

la

vaporisation

de

lchantillon par un chauffage, le rle du gaz vecteur se termine


une fois il a entrain le mlange gazeux vers la colonne, l ou la
diffrence

d'affinit

des

composants

envers

la

phase

stationnaire permet de retenir plus ou moins longtemps certains


composants vis--vis des autres. La faible quantit de phase
stationnaire

permet

des

analyses

rapides

mais

impose

l'injection d'une quantit trs faible d'chantillon.

Voil quelques phases stationnaires utilises dans la CPG :

Le choix de la phase stationnaire utiliser pour sparer un


mlange donn est essentiel et dpend de la composition du
mlange, chaque cas posant souvent un problme particulier.

d) Le dtecteur.
Une fois les composs spars ont quitt la colonne ils sont
dtects par un dtecteur dont chacun entre eux a un temps de
rtention bien dtermin. Les principaux dtecteurs utiliss
sont :
Le FID dtecteur ionisation de flamme ; cest le dtecteur le
plus rpandu ; les composs gazeux qui sortent de la colonne
pntrent dans la flamme du dtecteur. Leur combustion
entraine la formation dions et de particules charges qui
sont alors collects par deux lectrodes. Le courant faible qui
en rsulte est fortement amplifi et transform en une
tension mesurable par un lectromtre. Lair du pic reflte la
quantit du compos lu.

Un TCD : dtecteur lectrique, bas sur le principe du pont de


Wheatstone : le passage des composants va faire varier la
tension,

cette

variation

est

due

conductibilit de chaque composant.

la

diffrence

de

Un ECD : dtecteur absorption lectronique : des lectrons


sont

mis,

en

gnral

par

une

source

radioactive

(rayonnement bta), et traversent le gaz ; lorsqu'un lectron


rencontre une molcule de gaz, il peut tre captur, ce qui
fait varier l'intensit du courant d'lectrons, cette intensit
tant mesure en continu.

e) Lenregistreur.

On enregistre cette variation sur l'enregistreur en fonction du


temps de sortie du pic, dit temps de rtention. Les appareils
actuels sont coupls avec un ordinateur. La rponse du
dtecteur est enregistre dans un fichier stock sur le disque
dur et affiche simultanment en temps rel sur l'cran de
l'ordinateur. Cet enregistrement constitue le chromatogramme.

3. Les facteurs dont dpend la sparation.

La sparation des composs dun mlange complexe est trs


dlicate et est facilement influence par quelques facteurs, on
les cite :
La temprature

(la

temprature

de

linjecteur,

la

temprature du four)
Dbit du gaz vecteur.
Longueur de la colonne.
La nature de la phase stationnaire.

III. Aspect pratique.

1. Le but de la manipulation.

Le but de notre manipulation est de sparer les composs


dun mlange constitu de lhexane, de lheptane et de
loctane afin danalyser qualitativement ces trois soluts
partir de leurs temps de rtention, de plus on va agir sur la
temprature du four pour voir son influence sur la sparation.

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Dans une dernire tape, partir dune courbe dtalonnage


on dterminera la concentration dune solution non identifie
(analyse quantitative).

2. Le protocole exprimental.
Prcautions exprimentales pour effectuer la
CPG.
Ne jamais utiliser la colonne en dehors des limites de
tempratures indiques par le fabricant.
On doit rincer la seringue plusieurs fois par la solution
quon va analyser.
il faut injecter le mlange ds que laiguille est
enfonce dans le septum, le dbut de lanalyse et
linjection doivent tre en phase.
Lchantillon

analyser

doit

tre

limin

de

goudrons, de leau, et des particules en suspension.

Les conditions opratoires.


Le gaz vecteur est le N2, Qmobile = 1ml/min.
Colonne capillaire.
Injection par vaporisation directe.
Un dtecteur de type FID (H2, Air)
Le

mlange

traiter

constitu de :

lhexane,

lheptane, loctane ; leurs tempratures dbullition


sont

respectivement :

68 C,

lheptane est le moins volatil.

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98,42 C,

125 C

Tinject= 200 C.

Tfour: On va travailler en mode isotherme T four=150C,


puis en mode palier ; Tfour crot de 70C jusqu 150
C (20C/min).
Tdtecteur est proche de celle de Tinject.
La longueur de la colonne L= 30m.
Le diamtre de la colonne est d=0.5m.

3. Lexploitation des rsultats.


a)

Leffet de la temprature du four sur la

sparation du mlange.
Mode isotherme.
On

fixe

les

tempratures

des

diffrents

modules

en

particulier la temprature du four Tfour= 150 C puis on


prend par la micro-seringue 10 l du mlange analyser et
on linjecte ; cette opration demande une extrme rapidit.
Une fois on a appliqu les prcautions dj cites on sattend
voir 3 pics.
Le chromatogramme obtenu est le suivant :

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On a obtenu 3 pics mais ils ne sont pas bien spars et


mme dforms. On en rsulte que la temprature du four
est mal choisie. En fait un bon choix de la temprature
influe

dune

faon

flagrante

sur

lanalyse

chromatographique ce qui rend la fixation des conditions


opratoires,

une

fixation

dlicate

dpendant

principalement de la composition du mlange analyser


et surtout de leurs tempratures dbullition.

Mode non isotherme (mode palier).


On travaille dans les mmes conditions sauf cette fois la
temprature du four
dune

temprature

augmente progressivement en allant


gale

70C

jusqu

atteindre

une

temprature gale 150C. Cette variation est programme de


telle sorte la temprature croit de 20 C chaque minute. Dans
cette exprience on a remarque la mise en marche automatique
du ventilateur afin de refroidir le four jusqu 70C.

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Le chromatographe obtenu est le suivant :

On constate cette fois que les pics sont bien spars ce qui
permet daccorder chaque compos leur temps de
rtention do la bonne influence du mode palier sur la
sparation.
Pic N1 : Trtention 1 =3.131 min.
Pic N2 : Trtention 2 =2.885 min.
Pic N3 :

Trtention 3

= 2.754 min.

Interprtations.
si les constituants du mlange sparer ont des polarits
voisines, normalement le compos le plus volatil est le
plus susceptible sentraner. Si la temprature du four
(de la colonne) est trop basse, la vitesse d'change entre
la phase stationnaire et la phase mobile est lente, la

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diffusion devient importante, ce qui affecte le temps de


rtention de certains composs ; qui devient trop long et
les pics correspondants sont dforms.
Si la temprature du four est trop leve, on aura le risque
que tous les composs apparaissent simultanment la
sortie de la colonne car la phase stationnaire narrive pas
retarder la sortie des constituants lun par rapport aux
autres.
Si la temprature du four est constante, la sparation est
aussi mauvaise, en effet les pics sont trs rapprochs et la
distance qui les spare est trs rduite car la temprature
constante du four avec laquelle on a travaill (150 C) est
suffisante pour vaporiser les trois constituants en mme
temps.
Travailler

avec

une

variation

programme

de

la

temprature du four semble le meilleur choix car cette


variation

permet

de

balayer

successivement

les

tempratures dbullition des trois constituants. De telle


sorte la phase stationnaire peut retenir lun et laisser sortir
lautre.

b)

Lidentification de chaque compos.

Le compos le plus volatil est celui qui sort le premier ;


semble

un

raisonnement

impliquant

un

ensemble

dinterrogations. Car on peut rencontrer des problmes ou le

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compos le moins volatil est celui qui est rapidement


entrain donc lapproche de la volatilit reste incertaine.
Cela est expliqu par laffinit de la phase stationnaire
envers un tel compos ; dont leur rtention nest pas
seulement en fonction de la temprature dbullition.
Alors pour identifier chaque compos, on a analys chacun
des constituants sparment et aux mmes conditions.
Analyse de loctane : Trtention = 3.147 min

Analyse de lheptane : Trtention = 2.868 min


Par limination, Trtention = 2.754 min correspond lhexane.

c)Analyse quantitative.
Le temps de rtention est une identification qualitative, la
chromatographie peut aussi prendre un aspect quantitatif et

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celui-ci par lanalyse dun mlange constitu dun talon et


dun

solvant

dont

la

quantit

dtalon

est

connue

pralablement.
Dans ce tp on a utilis comme talon lalcool benzylique, le
solvant est lactonitrile.
On a introduit chaque fois une masse dtalon dans 3 ml de
solvant. L'aire du pic permet de dterminer la concentration
massique de chaque solut dans le mlange inject. Voil le
tableau qui rassemble les diffrents rsultats :
M(g)
0.3
0.5
1
4
4
A (pA/s)
2.6169.10 4.1454.10 8.0462.104
Remarque : Dans chaque chromatogramme on obtient 2
pics ; le pic qui est relativement grand correspond au solvant
et lautre au compos talon.
Temps de rtention du solvant=2.138 min
Temps de rtention de ltalon =3.856 min
Tinjection = 230 C
Tbu (alcool benzylique)= 205C
Tbu (actonitrile)=82C
Tfour= de 200 C jusqu 230 C (20C/3min)
La courbe dtalonnage :

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9.00E+04
8.00E+04
7.00E+04

f(x) = 77648.85x + 2772.36


R = 1

6.00E+04
5.00E+04
A 4.00E+04
A=f(m)

3.00E+04
2.00E+04
1.00E+04
0.00E+00
0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9

1.1

m(g)

On a inject un mlange dont il contient un compos avec une concentration inconnue.


Notre but est de dterminer C.
Daprs la courbe dtalonnage, m=0.8 g.

Conclusion

La

chromatographie est une technique de sparation trs

efficace mais aussi bien dlicate. En effet au cours de ce tp on a


juste tudi leffet de la temprature sur la sparation mais ce
nest pas suffisant car la CPG dpend de plusieurs paramtres
tels que : le dbit du gaz vecteur , la longueur de la colonne , la
nature de la phase stationnaire , lpaisseur de sa couche,
pression du gaz vecteur..Son efficacit se rvle par sa
rapidit de sparation qui ne prend que quelques secondes ou
quelques minutes, de plus une sensibilit de dtection, elle a

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lavantage de dtecter une substance mme si sa quantit est


de lordre de quelques l. La seule limitation de cette mthode
est que le solut doit tre volatil or ce qui n'est pas toujours le
cas pour des substances organiques. Toutefois, elle est trs
utilise pour des applications biochimiques, cause de leur
rapidit et de leur faible cot.

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