Solution TD N7

[S]0 étudiée la plus faible = 8,3 10-5 M et [E]0 = 7,3 10-12 M, donc [S]0 >> [E]0 : on est
en conditions de substrat saturant.

Expression de de VMax

On passe de ΔA.min-1 à µM.min-1 avec la relation de Beer-Lambert :

Vmax (ΔA.min-1)
-1
VMax (µM.min ) = -------------------
εM . l

VMax = 23,5 µM.min-1

VMax = VMaxapp et KM ≠ KMapp , donc l'inhibiteur est compétitif.

kcat = VMax / [E]0 = 3,2 106 min-1 = 5,4 104 s-1

KI = (KM x [I]) / (KMapp - KM) = 6,7 µM

A λ = 248 nm : la fonction carbonyle conjuguée du produit (Δ4-androstene-3,17-
dione) absorbe alors que le substrat (Δ5-androstene-3,17-dione) n'absorbe pas.

Exercice3

Réponse
La forme de la courbe de saturation est caractéristique d'une

inhibition par excès de substrat : l'incurvation de la courbe de saturation

a lieu pour [pyruvate]0 = 4 mM >> [NADH]0 = 0,54 mM.

Il y a compétition entre les 2 substrats et formation du complexe

[pyruvate - E - pyruvate] au lieu de [pyruvate - E - NADH].

VMax = 0,34 UA.min-1 ===> VMax = 55 µmoles NADH oxydées.min-1

KMpyruvate = 0,36 mM