Bilirubine totale

Test colorimétrique. DMSO.

Code HB0270 2 x 125 ml

Conserver entre 2-8°C. Liquide.

Principe Contrôle de qualité

La bilirubine, en présence de l’acide sulfanilique diazoté et dans Il est recommandé d’utiliser des contrôles pour contrôler le
un milieu alcalin, forme un composé coloré rouge. fonctionnement de la méthode. Si les valeurs de contrôle se
Des deux fractions présenté en sérum, bilirubine-glucuromide et situent en dehors de la plage définie, contrôlez si l’instrument, les
bilirubine libre lâchement liés à l'albumine, seulement bilirubine- réactifs et le calibreur ne présentent pas d’anomalies. Chaque
glucuromide réagit directement dans une solution aqueuse laboratoire doit élaborer son propre système de contrôle de la
(bilirubine directe), alors que la bilirubine libre exige de la qualité et des mesures correctives si les contrôles ne sont pas
solubilisation avec du diméthylsulfoxyde (DMSO) avant de réagir conformes aux tolérances admissibles.
(bilirubine indirecte). Sérums normale et pathologique humains (HBC01, HBC02) sont
L’intensité de la couleur formée est proportionnelle à la disponible.
concentration de bilirubine de l’échantillon.
Composition de réactifs Valeurs de référence
Réactif T Acide sulfanilique…….………....30 mmol/l Bilirubine Totale: jusqu’à 1,10 mg/dl (18,81 µmol/l)
Acide Hydrochlorique.…….…....50 mmol/l
Ces valeurs sont données à titre indicatif. Chaque laboratoire doit
Diméthyl sulfoxide….………….....7 mol/l
élaborer sa propre plage de référence.
Réactif N Nitrite de sodium….………..…....29 mmol/l
Pour le diagnostic in vitro.
Caractéristiques de fonctionnement
Plage de mesure: de 0,040 mg/dl (limite de détection) jusqu’à 20
Précautions mg/dl (limite de linéarité). Si les résultats obtenus sont supérieurs
Réactif N: Nocif (Xn) : R22 : Nocif en cas d'ingestion ; S45 : En cas à 20 mg/dl, diluez l’échantillon 1:2 avec une solution saline,
d’accident ou de malaise consulter immédiatement un médecin et répétez la mesure et multipliez le résultat par le facteur 2.
lui montrer l’emballage ou l’étiquette. Précision:
Préparation Intra-assai (n=20) Inter-assai (n=20)
Tous les réactifs sont prêts à l’emploi. Moyenne (mg/dl) 1,201 5,366 1,219 5,455
SD 0,043 0,116 0,05 0,116
Conservation et stabilité CV (%) 3,55 2,16 4,12 2,14
Tous les réactifs sont stables entre 2 et 8°C jusqu'à la date de
péremption indiquée, à condition d’être conservés dans un Sensibilité: 1 mg/dl = 0,034 Abs
Exactitude: les résultats obtenus à l’aide des réactifs CYPRESS
récipient fermé hermétiquement et à l’abri de la lumière et d’éviter
DIAGNOSTICS n’ont pas présenté de différence systématique par
les contaminations lors de leur utilisation.
rapport aux autres réactifs disponibles dans le commerce.
Le réactif doit se présenter sous l’aspect d’une solution limpide.
Jetez le réactif, si vous constatez une turbidité ou une
précipitation ou s’il y a un développement de couleur dans le Interférences
réactif N. Hémolyse cause des résultats de bilirubine diminués. Une liste de
médicaments et d’autres substances interférant avec la
Equipement supplémentaire détermination de bilirubine a été publiée par Young et al.
- Spectrophotomètre ou colorimètre permettant des mesures à
555 nm Notes
- Cuvettes assorties (trajet optique 1,0 cm) 1. Pour la détermination de bilirubine dans les nouveau-nés,
- Équipement général de laboratoire pipetez 50 µl de l'échantillon. Multipliez le résultat par 2.
2. Pour des systèmes automatiques, il est recommandé d’utiliser
Échantillons un calibreur.
Sérum ou plasma, libre d’hémolyse. Conservez à l’abri de la Bilirubine totale calibreur (HBS01) peut être utilisé pour le test
lumière. Stable 2 mois à -20°C ou 4 jours entre 2-8°C. Bilirubine totale. Il doit être reconstitué avec 2 ml de l’eau
Méthode distillée. Attendez 30 min avant l’utiliser. Conservez à l’abri de
1. Longueur d’onde 555 nm (530-580); Température 15-25°C; la lumière. Stabilité : 2 mois à –20°C.
Cuvette trajet optique 1 cm. Le calibreur de sérum (HBC03) peut être utilisé pour le test
2. Ajustez le zéro de l’instrument avec de l’eau distillée. Bilirubine totale et Bilirubine directe.
3. Pipetez dans une cuvette: ( Abs Echant. − Abs Echant.Blanc )
Bilirubine (mg / dl ) = x Conc. Calibreur
Echant/Cal ( AbsCalibreur − AbsCalibreurBlanc )
Echant/Cal
Blanc
Réactif T 1,5 ml 1,5 ml Bibliographie
Réactif N --- 50 µl Kaplan A. et al. Bilirubin. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis.
ÉchantillonNote1/CalibreurNote2 100 µl 100 µl Torronto. Princeton 1984; 1238-1241, 436, 650
Mixez et attendez exactement 5 minutes à la température Malloy H.T. et al. J.Biol. Chem. 1937, 112,2: 481-491
Martinek R. Clin. Chim. 1966: Acta 13:61-170.
ambiante. Mesurez l’absorbance (Abs.). Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995
Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001
Calcul Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.
Bilirubine (mg/dl) = (Abs Echant. – Abs Echant. Blanc) x facteur* Langdorp, 02.2011
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*Facteur théorétique: 33 29
Facteur de conversion: mg/dl x 17,1 = µmol/l.

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