Phosphatase acide (ACP)

Test colorimétrique.
α-Naphtyl phosphate.Hillmann
Code HBE01 18 x 2 ml

Conserver entre 2-8°C.

Principe Mixer et incuber 5 min. Lisez l’absorbance (abs) initiale,

Le dosage de l’activité de la phosphatase acide dans le sérum démarrez le chrono et lisez les absorbances toutes les
se fait suivant la méthode suivante: minutes pendant 3 minutes. Calculez la différence entre les
ACP absorbances et les différences d’absorbance moyenne par
α-naphtyl-phosphate + H2O−−−−⎯⎯⎯→ α-naphtol + phosphate minute (Δ abs./min).

α-naphtol + Fast Red T−−−−−−−−−⎯⎯⎯→ Diazo Dye Calculation

La vitesse de formation du composant colorant est déterminée ACP totale (U/l) = 750 x Δ Abs/min
photométriquement et est directement proportionnelle à la Phosphatase acide prostatique = ACP Totale – ACP non prostatique.
concentration catalytique de la phosphatase acide dans ACP non prostatique (U/l)
l’échantillon. = 750 x (Δ Abs/min ACP totale - Δ Abs/min ACP non prostatique)
Composition de réactifs Une unité internationale (UI) est la quantité d’enzyme qui
Réactif 1 Sodium citrate pH 5,2 50 mmol/l transforme 1 µmol de substrat par minute, dans des conditions
Tampon standard. La concentration est exprimée en unités par litre
d’échantillon (U/l).
Réactif 2 α-naphtylphosphate 10 mmol/l
Substrat Fast Red TR 6 mmol/l Contrôle de qualité
Réactif 3 Il est recommandé d’utiliser des contrôles pour contrôler le
Sodium tartrate 2 mmol/l
Tartrate fonctionnement de la méthode.. Si les valeurs de contrôle se situent
en dehors de la plage définie, contrôlez si l’instrument, les réactifs et
Réactif 4 Acide acétique 0.5 mmol/l le calibreur ne présentent pas d’anomalies. Chaque laboratoire doit
Pour le diagnostic in vitro. élaborer son propre système de contrôle de la qualité et des mesures
correctives si les contrôles ne sont pas conformes aux tolérances
Préparation admissibles.
Dissoudre une tablette R2 dans 2 ml du tampon R1. Couvrez
Sérums normale et pathologique humains (HBC01, HBC02) ou
d’un capuchon et mélangez doucement pour résoudre le
bovins (HBC04, HBC05) sont disponible.
contenu.
Cette solution de travail est stable 2 jours entre 2-8°C ou 6 Valeurs de référence
heures à la température ambiante. 30°C. 37°C.
R3 et R4 : prêt à l’emploie. Phosphatase acide totale:
Conservation et stabilité Hommes < 4,3 U/l < < 5,4 U/l
Tous les réactifs sont stables entre 2 et 8°C jusqu'à la date de Femmes < 3,1 U/l < 4,2 U/l
péremption indiquée, à condition d’être conservés dans un Phosphatase acide prostatique < 1,5 U/l < 1,7 U/l
récipient fermé hermétiquement et à l’abri de la lumière et Ces valeurs sont données à titre indicatif. Chaque laboratoire
d’éviter les contaminations lors de leur utilisation. N’utilisez pas doit élaborer sa propre plage de référence.
des tablettes s’ils sont cassées.
Le réactif doit se présenter sous l’aspect d’une solution Charactéristiques de fonctionnement (ACP Totale)
limpide. Jetez le réactif, si vous constatez une turbidité ou une Plage de mesure: de 0,13 U/l (limit de détection) jusqu’à 150 U/l
précipitation ou si l’absorbance à blanc à 450 nm est > 0,44. (limit de linéarité). Si les résultats obtenus sont supérieurs à
150 U/l, diluez l’échantillon 1 :2 avec une solution saline,
Équipment supplémentaire répétez la mesure et multipliez le résultat par le facteur 2.
- Spectrophotomètre ou colorimètre permettant des mesures à Présicion:
405 nm Intra-assai (n=20) Inter-assai (n=20)
- Bain thermostatique à 30°C ou 37°C (± 0,1°C) Moyenne (U/l) 23,67 2,56 23,6 2,6
- Cuvettes assorties (trajet optique 1,0 cm) SD 0,22 0,07 0,22 0,07
- Équipement général de laboratoire
CV (%) 0,95 2,90 0,96 2,76
Échantillon Sensibilité: 1 U/l = 0,0034 ΔAbs/min
Sérum clair, séparé du caillot le plus vite possible. N’utilisez Exactidute: les résultats obtenus à l’aide des réactifs CYPRESS
pas de plasma ou de sérum hémolysé. DIAGNOSTICS n’ont pas présenté de différence systématique
L’acide phosphatase est extrêmement labile : stabilisez en par rapport aux autres réactifs disponibles dans le commerce.
ajoutant 50 µl de l'acide acétique (R4) par ml de l'échantillon.
Stabilité : 7 jours entre 2 – 8°C. Interférences
L’hémolyse interfère à cause de concentrations élevées d’ACP
Méthode dans les cellules rouges. Une liste de médicaments et d’autres
1. Longueur d’onde 405 nm; Température 30°C/37°C; Cuvette substances interférant avec la détermination de la phosphatase
trajet optique 1 cm. acide a été publiée par Young et al.
2. Ajustez le zéro de l’instrument avec de l’eau distillée ou de
l’air. Bibliographie
3. Pipettez dans une cuvette: Abbott et al. Acid phosphatase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St
Louis. Torronto. Princeton 1984; 1079-1083
ACP Totale ACP non prostatique Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995
Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001
Sol. de travail 1,0 ml 1,0 ml Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999
Tartrate. R.3 --- 10 µl Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.
Échantillon 100 µl 100 µl Langdorp, 02. 2005.

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