GOT (ast)

U.V. Cinétique. Selon IFCC

Code HBE06 15 x 15 ml

Conserver entre 2-8°C.

Significance clinique Calculation

L’aspartate aminotransférase (AST), également connue sous l’appellation AST (U/l)
de transaminase glutamique oxalo-acétique (GOT), est une enzyme = ΔAbs./min x 1750
tissulaire qui catalyse l’échange de la fonction aminée d’un alpha-amino-
acide contre la fonction cétone d’un alpha-céto-acide (transamination).
L’AST est largement distribuée dans les tissus, principalement le tissu Une unité internationale (UI) est la quantité d’enzyme qui
myocardique, hépatique, musculaire et rénal. La lésion de ces tissus transforme 1 µmol de substrat par minute, dans des conditions
entraîne la libération de l’enzyme AST (GOT) dans la circulation générale. standard. La concentration est exprimée en unités par litre
À la suite d’un infarctus du myocarde, les taux sériques d’AST (GOT) d’échantillon (U/l).
s’élèvent et atteignent un pic, 48 à 60 heures après la survenue de
l’infarctus. Les affections hépato-biliaires, telles que cirrhose, cancer Facteur de conversion de température.
métastatique et hépatite virale, provoquent également une élévation des Pour corriger les résultats pour d’autres températures,
taux sériques d’AST. multipliez par :
Principe Température de réaction Température désirée
Détermination cinétique d’activité de GOT (ast) selon le réaction suivant: 25°C 30°C 37°C
GOT 25°C 1,00 1,37 2,08
α-Ketoglutarate + Asparte ⎯⎯⎯→ Glutamate + Oxalacetate 30°C 0,73 1,00 1,54
MDH 37°C 0,48 0,65 1,00
Oxalacetate + NADH + H+ ⎯−−−⎯⎯→ Malate + NAD+
La vitesse de consommation de NADH est déterminée
Contrôle de qualité
photométriquement et est directement proportionnelle à l’activité de GOT Il est recommandé d’utiliser des contrôles pour contrôler le
(ast) dans l’échantillon. fonctionnement de la méthode.. Si les valeurs de contrôle se
situent en dehors de la plage définie, contrôlez si l’instrument,
Composition de réactifs
les réactifs et le calibreur ne présentent pas d’anomalies.
Réactif 1 Tampon TRIS pH 7,8………..….80 mmol/l Chaque laboratoire doit élaborer son propre système de
Tampon L –Aspartate…….........……......200 mmol/l contrôle de la qualité et des mesures correctives si les contrôles
ne sont pas conformes aux tolérances admissibles.
Réactif 2 NADH......................…..............0,18 mmol/l Sérums normale et pathologique humains (HBC01, HBC02) ou
Substrat LDH…...............................................800 U/l bovins (HBC04, HBC05) sont disponible.
MDH……………………………..…… 600 U/l
Valeurs de référence
α -oxoglutarate………………….12 mmol/l
Pour le diagnostic in vitro. 25°C. 30°C. 37°C.
Préparation Hommes < 19 U/l 26 U/l 38 Ul
Dissolvez une tablette R.2 dans 15 ml du tampon R.1. Couvrez Femmes < 16 U/l 22 U/l 31 U/l
d’un capuchon et mélangez doucement pour résoudre le Ces valeurs sont données à titre indicatif. Chaque laboratoire
contenu. doit élaborer sa propre plage de référence.
Cette solution de travail est stable 72 heures entre 15-25°C ou 21
jours entre 2-8°C. Charactéristiques de fonctionnement
Conservation et stabilité Plage de mesure: de 5,44 U/l (limit de détection) jusqu’à 260 U/l
Tous les réactifs sont stables entre 2 et 8°C jusqu'à la date de (limit de linéarité). Si les résultats obtenus sont supérieurs à 260
péremption indiquée, à condition d’être conservés dans un U/l, diluez l’échantillon 1 :10 avec une solution saline, répétez la
récipient fermé hermétiquement et à l’abri de la lumière et mesure et multipliez le résultat par le facteur 10.
d’éviter les contaminations lors de leur utilisation. N’utilisez pas Présicion:
des tablettes s’ils sont cassées. Intra-assai (n=20) Inter-assai (n=20)
Le réactif doit se présenter sous l’aspect d’une solution limpide. Moyenne (mg/l) 17,4 128 17,1 128
Jetez le réactif, si vous constatez une turbidité ou une SD 0,68 1,35 0,72 1,28
précipitation ou si l’absorbance à blanc à 340 nm est <1,00. CV (%) 3,91 1,05 4,20 0,99
Équipment supplémentaire Sensibilité: 1 U/l = 0,0017 ΔA/min
- Spectrophotomètre ou colorimètre permettant des mesures à Exactidute: les résultats obtenus à l’aide des réactifs CYPRESS
340 nm DIAGNOSTICS n’ont pas présenté de différence systématique
- Bain thermostatique à 25°C, 30°C ou 37°C (± 0,1°C) par rapport aux autres réactifs disponibles dans le commerce.
- Cuvettes assorties (trajet optique 1,0 cm) Interférences
- Équipement général de laboratoire Les anticoagulants couramment utilisés tels l’héparine, l’EDTA,
Échantillons l’oxalate et le fluorure n’affectent pas les résultats. L’hémolyse
Sérum ou plasma : stable 7 jours entre 2 – 8°C. interfère avec le dosage. Une liste de médicaments et d’autres
Méthode substances interférant avec la détermination de la transaminase
1. Longueur d’onde 340 nm; Température 25, 30, 37°C; Cuvette a été publiée par Young et al.
trajet optique 1 cm.
2. Ajustez le zéro de l’instrument avec de l’eau distillée ou de Bibliographie
Murray R. Aspartate aminotransferase. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO.
l’air. St Louis. Torronto. Princeton 1984; 1112-1116
th
3. Pipettez dans une cuvette: Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4 ed AACC Press 1995
Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001
Solution de travail 1,00 ml Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999
Échantillon 0,10 ml Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.
Mélangez et attendez 1 minute. Lisez l’absorbance (abs) initiale, démarrez Langdorp, 07.2004
le chrono et lisez les absorbances toute les minutes pendant 3 minutes.
Calculez la différence entre les absorbances et les différences
d’absorbance moyenne par minute (Δ abs./min).

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