Plus de 99% du calcium corporel se retrouve dans les os et les Sérum ou plasma: Calcium (mg/dl) dents. Le restant (1%) est présent dans le sang et dans les tissus = (Abs. Echant. / Abs. Standard) x 10 (Conc. Standard.) mous, où il sert de cofacteur à la coagulation, au métabolisme et à la Urine 24h: Calcium (mg/24h) physiologie neuromusculaire. = (Abs. Echant. / Abs. Stand. x 10 (Conc. Stand.) x vol (dl) urine 24h x f* De nombreux facteurs influencent le niveau du calcium. *f = facteur de dilution L’hypercalcièmie (taux de calcium élevé dans le sang) est observée Facteur de conversion: mg/dl x 0.25 = mmol/l. en cas d’hyperparathyroïdisme, d’hypervitaminose, de sarcoïdose, de myélome et de certains cancers des os. L’Hypocalcémie (taux de Contrôle de qualité calcium sérique bas) est rencontrée en cas d’hypoparathyroïdisme, Il est recommandé d’utiliser des contrôles pour contrôler le de rickettsiose, de néphrose, de néphrite, de stéatorrhée et de fonctionnement de la méthode. Si les valeurs de contrôle se situent pancréatite. en dehors de la plage définie, contrôlez si l’instrument, les réactifs et le calibreur ne présentent pas d’anomalies. Chaque laboratoire doit Principe élaborer son propre système de contrôle de la qualité et des Le Calcium en présence d’Arsenazo III [ Acide 1,8-dihydroxy-3,6- mesures correctives si les contrôles ne sont pas conformes aux disulpho-2,7-naphthalene-bis (azo)-dibenzenearsonique], au pH tolérances admissibles. neutre, produit un complexe coloré bleu, dont l’intensité est Sérums normale et pathologique humains (HBC01, HBC02) ou proportionnelle à la concentration du calcium. bovins (HBC04, HBC05) sont disponible.
Composition de réactifs Valeurs de référence
Réactif Imidazol Tampon pH.6,75………...….100 mmol/ Sérum ou plasma Arsenazo III Arsenazo III………………..……...….0,120 mmol/l Adultes 8,5 – 10,5 mg/dl ≅ 2,1 – 2,6 mmol/l Enfants 10 – 12 mg/dl ≅ 2,5 – 3 mmol/l Standard Calcium aqueux………….…………..…..10 mg/dl Nouveau-née 8-13 mg/dl ≅ 2 – 3,25 mmol/l Pour le diagnostic in vitro. Urine Adultes 50 – 300 mg/24h ≅ 1,25 – 7,5mmol/24h Préparation Enfants 80 – 160 mg/24h ≅ 2 – 4 mmol/24h Tous les réactifs sont prêts à l’emploi. Ces valeurs sont données à titre indicatif. Chaque laboratoire doit élaborer sa propre plage de référence. Conservation et stabilité Tous les réactifs sont stables entre 2 et 8°C jusqu'à la date de Caractéristiques de fonctionnement péremption indiquée, à condition d’être conservés dans un récipient Plage de mesure: de 0,404 mg/dl (limite de détection) jusqu’à 40 fermé hermétiquement et à l’abri de la lumière et d’éviter les mg/dl (limite de linéarité). Si les résultats obtenus sont supérieurs à contaminations lors de leur utilisation. Manipulez le standard très 40 mg/dl, diluez l’échantillon 1:2 avec une solution saline, répétez la soigneusement pour prévenir les contaminations. mesure et multipliez le résultat par le facteur 2. Le réactif doit se présenter sous l’aspect d’une solution limpide. Précision: Jetez le réactif, si vous constatez une turbidité ou une précipitation Intra-assai (n=20) Inter-assai (n=20) ou si l’absorbance à blanc à 620 nm est ≥ 0,80. Moyenne (mg/dl) 8.69 13.5 8.46 13.18 SD 0.33 0.51 0.26 0.33 Equipement supplémentaire CV (%) 3.85 3.79 3.10 2.52 - Spectrophotomètre ou colorimètre permettant des mesures à 620nm Sensibilité: 1 mg/dl = 0,02272 Abs - Cuvettes assorties (trajet optique 1,0 cm) Exactidute: les résultats obtenus à l’aide des réactifs CYPRESS - Équipement général de laboratoire (note 1-2) DIAGNOSTICS n’ont pas présenté de différence systématique par rapport aux autres réactifs disponibles dans le commerce. Echantillon Sérum ou plasma : séparé des cellules le plus vite possible. Des Interférences anticoagulants de sang avec de l'oxalate ou l'EDTA ne sont pas Aucune interférence n’a été observée avec bilirubine ou l’acide acceptables puisque ces produits chimiques forment des chélates ascorbique jusqu'à 20mg/dl. Une liste de médicaments et d’autres forts avec le calcium. substances interférant avec la détermination de calcium a été Urine : Collectez spécimens d'urine 24h dans des récipients libres de publiée par Young et al. calcium. Les bouteilles collectées doivent contenir 10 ml d'acide nitrique dilué (50% v/v). Enregistrez le volume. Diluez l’échantillon Notes 1 :2 avec l’eau distillée. Mélangez. Multipliez les résultats par 2 1. Il est recommandé d’utiliser du matériel à usage unique. En cas (facteur de dilution) d’utilisation de verrerie, le matériel doit être nettoyé Le calcium est stable 10 jours entre 2-8°C. soigneusement avec 1 :1 HNO3 dans l’eau et rincé ensuite à fond à l’eau distillée. Procédure 2. La plupart des détergents et des adoucisseurs d’eau utilise dans 1. Longueur d’onde 620nm (610-660nm); Température 37°C/15-25°C; les laboratoires contient des agents chélateurs. Un rinçage Cuvette trajet optique 1 cm. inadéquat invalide la méthode. 2. Ajustez le zéro de l’instrument avec de l’eau distillée. 3. L’étalonnage avec le standard aqueux peut provoquer une erreur 3. Pipetez dans une cuvette: systématique dans les systèmes automatiques. Dans ce cas, il est Blanc Standard Echantillon recommandé d’utiliser un calibreur de sérum (HBC03). Standard --- 10 µl. --- Bibliographie Echant. --- --- 10 µl. Farell E C.. Calcium. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Réactif 1 1,00 ml. 1,00 ml. 1,00 ml. Princeton 1984; 1051-1255 and 418. Mélangez et incubez 2 minutes à 37°C/15-25°C. Mesurez Kessler G. et al. Clin Chem 1964; 10(8); 686-706 Connerty H.V. et al. Am J Clin Path 1996 ; 45(3) ; 200-296 l’absorbance (abs) de l’échantillon et du standard versus le Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995 blanc. La couleur est stable au moins 1 heure. Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001 Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999 Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995. Langdorp, 12.2010. www.diagnostics.be Langdorpsesteenweg 160 • 3201 Langdorp • Belgium • Tel: ++ 32 16 44 63 89 • Fax: ++ 32 16 44 77 62 • e-mail: cypress@diagnostics.be
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