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U.C.

O Bretagne Nord

Licence 2 BIOLOGIE
Anne 2008-2009

PHYSIOLOGIE ANIMALE

Compte-rendu des travaux pratiques

Auteur : GUILLARD Laurianne


CARPIER Jean-Marie

Encadrement : Madame C. GUILLAUME

Sommaire
Chapitre 1 : Histologie ............................................................................................................. 3
Introduction ............................................................................................................................ 3
I-Matriel et mthode ............................................................................................................. 3
A-Prparation des coupes histologiques ........................................................................... 3
B-Observation ................................................................................................................... 4
II-Observations et exploitations ............................................................................................. 5
A-Etude de la structure de glandes scrtrices.................................................................. 5
1-La glande thyrode ...................................................................................................... 5
a)Thyrode en hypoactivit......................................................................................... 5
b)Thyrode en hyperactivit ....................................................................................... 7
c)Activit et variation de structure ............................................................................. 8
2-Glande lacrymale ........................................................................................................ 9
3-Le pancras ............................................................................................................... 11
4-Exploitation............................................................................................................... 14
B-Etude histologique et pathologie ................................................................................. 14
1-Foie sain .................................................................................................................... 14
2-Foie cirrhos.............................................................................................................. 15
3-Exploitation............................................................................................................... 16
C-Etude de la structure dune artre et dune veine ........................................................ 17
1-Artre ........................................................................................................................ 18
2-Veine ......................................................................................................................... 19
3-Comparaison artre/veine ......................................................................................... 19
D-Etude de la structure de la moelle pinire et du cerveau ........................................... 20
1-Moelle pinire ......................................................................................................... 20
2-Cerveau ..................................................................................................................... 22
Conclusion............................................................................................................................ 24
Chapitre 2 : Etude des paramtres sanguins ....................................................................... 25
Introduction .......................................................................................................................... 25
I-Matriels et mthodes ........................................................................................................ 25
A-Etude quantitative des hmaties et des leucocytes...................................................... 25
1-Prparation des lames de Malassez........................................................................... 25
a)Description ............................................................................................................ 25
b)Mise en place de la lamelle et de la solution......................................................... 26
2-Prparation des dilutions........................................................................................... 27
a)Prparations des solutions de dilution................................................................... 27
b)Utilisation de lunopette........................................................................................ 27
3-Observation et lecture ............................................................................................... 29
B-Etude qualitative des leucocytes.................................................................................. 29
1-Reconnaissance des leucocytes................................................................................. 29
a)La ligne mylode ................................................................................................ 29
b)La ligne lymphode ............................................................................................. 30
2-Etablissement de la formule leucocytaire ................................................................. 30
a)Ralisation dun frottis sanguin ............................................................................ 30
b)Observation et tablissement de la formule leucocytaire...................................... 30
II-Observations et exploitations ........................................................................................... 31
A-Etude quantitative des hmaties et leucocytes ............................................................ 31
1-Numration des hmaties .......................................................................................... 31
a)Observation et numration des hmaties du sang dilu manuellement................. 31

b)Observation et numration des hmaties du sang dilu par lunopette................. 32


c)Comparaisons ........................................................................................................ 32
2-Numration des leucocytes ....................................................................................... 33
B-Etude qualitative leucocytes........................................................................................ 33
Conclusion............................................................................................................................ 34
Chapitre 3 : Rponse lectrodermale ................................................................................... 35
Introduction .......................................................................................................................... 35
I-Matriel et mthode ........................................................................................................... 35
A-Mthode dacquisition................................................................................................. 35
1-Dispositif dacquisition ............................................................................................. 35
2-Logiciel dacquisition ............................................................................................... 36
B-Enregistrement et stimulations .................................................................................... 37
1-Enregistrement et talonnage .................................................................................... 37
2-Enonc de mots ......................................................................................................... 37
3-Enonciation dun mensonge...................................................................................... 38
4-Stimulations brusques ............................................................................................... 38
II-Rsultats et discussion...................................................................................................... 39
A-Etalonnage................................................................................................................... 39
B-Enonc de mots ........................................................................................................... 40
1-Stimulus induisant une rponse lectrodermale........................................................ 40
2-Stimulus ninduisant pas de rponse lectrodermale ................................................ 41
C-Enonciation dun mensonge ........................................................................................ 42
D-Stimulations brusques ................................................................................................. 43
Conclusion............................................................................................................................ 44
Liste des figures ...................................................................................................................... 45
Bibliographie........................................................................................................................... 47

Chapitre 1 : Histologie
(TP n 1)

Introduction
La biologie est, en trs grande partie et par diffrents moyens, base sur lobservation
du vivant. Ainsi, lhistologie est ltude morphologique des tissus dun organisme. Ces tissus
sont composs de structures et cellules spcialises et sassemblent de manire variable pour
former des organes qui eux-mmes formeront des appareils ddis aux grandes fonctions de
lorganisme (respiration, digestion, etc.,).
Nous nous sommes alors intresss la structure de certains tissus et notamment :
- au tissu de glandes scrtrices,
- au tissu hpatique en sintressant une pathologie connue,
- certain tissu de lappareil circulatoire,
- au tissu nerveux de la moelle pinire et du cerveau.

I-Matriel et mthode
La structure prcise des tissus nest pas visible lil nu. Afin de bien les observer,
de bien caractriser les cellules, on utilise un microscope dit optique ou photonique .
Certaines prparations sont ncessaires avant lobservation.

A- Prparation des coupes histologiques


Lobservation au microscope ncessite la prparation de coupe histologique du tissu
observer.
Cette prparation se ralise principalement en quatre grandes tapes :
- fixation
- inclusion
- coupe
- coloration
La fixation sert stopper les ractions au sein du tissu ainsi qu durcir le tissu, ce qui
facilite alors la coupe. Diffrents fixateurs peuvent tre utiliss selon les molcules fixer
(fixation des lipides, pontage entre protines, etc.,). Le liquide de Bouin est par exemple un
fixateur trs utilis.
Linclusion est indispensable avant la coupe. Diffrentes techniques sont utilises. On
a notamment linclusion en paraffine qui rend au tissu, lorigine htrogne, une consistance
homogne, rigide et hydrophobe et pourra tre conserve de nombreuses annes.
La coupe se fait avec un microtome, sorte de lame anime dun mouvement vertical et
sous laquelle passe le bloc de tissu qui est alors coup tous les 4 6m environ. Les coupes
sont alors dposes sur des lames de verre. Le tissu peut aussi tre congel et coup par un
cryomicrotome.
La coloration est indispensable pour observer un matriel biologique transparent. Elle
ncessite de dparaffiner la coupe car les colorants sont en solution aqueuse. On utilise en
gnral des colorants qui ont une certaine affinit selon les pH.

Chapitre n 1 - Histologie

Les coupes histologiques qui ont t observes lors de ce TP taient fournies et pour la
plupart colores lhmalun-osine ; cette coloration topographique met la fois en valeur les
structures dites basophiles (hmatine), qui comportent donc des entits acides, et les
structures acidophiles (osine), qui prsentent des entits basiques.

B- Observation
Le microscope utilis est un microscope photonique classique (figure n1 et 2) et
lobservation du matriel biologique se fait par transparence. La lumire traverse la
prparation et est recueillie et dirige par un systme de deux lentilles convergentes (objectif
puis oculaire) jusqu lil de lobservateur (figure n1).
Figure n1 : Microscope photonique (vu de face).

Figure n2 : Microscope photonique (vu de profil).

Figure n3 : Schmatisation du systme


interne dun microscope photonique classique
Chapitre n 1 - Histologie

La mise au point se fait dabord au faible grossissement afin dobserver lorganisation


globale du tissu et aussi de choisir le champ intressant, le plus caractristique dessiner. En
fonction des tissus observer, des structures dessiner, on peut augmenter le grossissement,
de manire judicieuse.

II-Observations et exploitations
A- Etude de la structure de glandes scrtrices
Trois glandes scrtrices ont t observes : la glande thyrode, les glandes lacrymales,
et le pancras.
1- La glande thyrode
Dun point de vue anatomique la glande thyrode est une glande situe la base du cou
en avant de la trache et du larynx chez lhomme comme le montre la figure n4 :
Figure n4 : Schmatisation de la thyrode en place, chez lhomme.

(CASEY, 2007)
La glande thyrode scrte les hormones thyrodiennes T3-T4 qui jouent un rle
important dans le mtabolisme gnral.
Dun point de vue histologique, selon lactivit de la glande, les cellules thyrodiennes
nont pas le mme aspect.
a) Thyrode en hypoactivit
On schmatise sur la figure n5 des follicules thyrodiens en hypoactivit.

Chapitre n 1 - Histologie

Figure n5 : Observation au microscope photonique dune coupe de glande


thyrode colore lhmalun-osine (grossissement X400).

On observe trs nettement une structure en follicules assembls.


Ces vsicules thyrodiennes sont des structures plus ou moins sphriques constitues
en priphrie par un pithlium simple constitu en majorit par des cellules spcialises
(deux types cellulaires en ralit), les thyrocytes qui sont cubiques et aplatis. Au centre, ces
follicules thyrodiens prsentent une cavit, lespace collode, rempli du liquide collode.
Cet espace collode est relativement dvelopp, rendant les follicules thyrodiens
volumineux.
Cest ainsi que la taille du follicule, laspect de la collode ainsi que des thyrocytes
nous permettent daffirmer que ces follicules sont en hypoactivit.
De plus, chacun de ces follicules est tapiss par un tissu conjonctivo-vasculo-nerveux
plus ou moins dvelopp et visible entre deux follicules voisins ; ce dernier prsente du tissu
conjonctif, des capillaires sanguins et des lments nerveux.
Enfin, on note deux artfacts lis la prparation des coupes.
Ainsi, dans lespace collode un dcollement plus ou moins important (ici, sur tout le
pourtour) est visible. Cet artfact est li au fixateur qui lors de son application a induit une
rtractation de la collode.
Le second artfact dit de broutage est li la coupe qui cre toute une srie de
discontinuits dans la collode.
On peut voir ces artfacts sur les figures n5 et 6.

Chapitre n 1 - Histologie

Figure n6 : Observation au microscope photonique dune coupe de glande


thyrode colore lhmatine-osine-safran (fort grossissement).

Artfact li au fixateur
Artfact de broutage

(FACULTES UNIVERSITAIRES NOTRE-DAME DE LA PAIX, 2007)


b) Thyrode en hyperactivit
La structure histologique observe est schmatise sur la figure n7 :
Figure n7 : Observation au microscope photonique dune coupe de glande
thyrode colore lhmalun-osine (grossissement X400).

Chapitre n 1 - Histologie

On remarque trs clairement que les follicules thyrodiens ont une taille relativement
faible due la collode qui a un faible volume.
Les thyrocytes sont daspect plutt haut et prismatique.
La collode prsente sur tout son pourtour, lartfact caractristique li au fixateur.
On note galement un aspect caractristique de la collode dun follicule en
hyperactivit : elle prsente des vsicules de rsorption, normalement en regard des
thyrocytes.
Sur coupe histologique relle, laspect des vsicules de rsorption de la collode est le
suivant en 2, (en 1, un thyrocytes) :

(FACULTES UNIVERSITAIRES NOTRE-DAME DE LA PAIX, 2007)


Figure n8 : Observation au microscope photonique de lpithlium de follicule
thyrodien color lhmalun-erythrosine-safran (fort grossissement).
Des vaisseaux sanguins sont galement observables dans le tissu conjonctivo-vasculonerveux.
c) Activit et variation de structure
Acides amins et molcules diode prsents dans le sang, dans les capillaires sanguins
traversant le tissu conjonctivo-vasculaire, sont capturs par les thyrocytes des follicules
thyrodien. Ces lments sont transfrs vers lespace collode ; le volume de la collode
augmente alors. Le follicule est en hypoactivit.
Des ractions soprent dans la collode partir de liode stock et des drivs
dacides amins forms partir des acides amins capts dans le sang. Ces ractions
contribuent former les prcurseurs des hormones thyrodiennes.
Les cellules thyrodiennes entrent alors en activit et phagocytent la collode grce
des pseudopodes (excroissance temporaire de la membrane). Les vsicules de rsorption
dcrites sont en ralit les traces de cette phagocytose. Le volume de la collode diminue.

Chapitre n 1 - Histologie

Les dernires ractions conduisant la formation des hormones T3-T4 soprent dans
le cytoplasme. Ces hormones ainsi que les dchets de leur production sont librs dans le sang
et iront rguler lactivit de tissu-cibles.
Ainsi, les follicules les plus volumineux sont les moins actifs alors que les plus petits
sont les plus actifs.
2- Glande lacrymale
La glande lacrymale est une glande situe langle supro-externe du globe oculaire,
comme le montre la figure n9.

Figure n9: Glande lacrymale en place chez


lhomme.
(DARLING, 2008)

La structure observe est reprsente sur le


dessin suivant, figure n10 :
Figure n10 : Observation au microscope photonique dune coupe de glande
lacrymale (grossissement X400).

Chapitre n 1 - Histologie

La glande lacrymale est forme par un grand nombre dunits excrtrices qui sont les
tubulo-acinus.
Ces units sont constitues par des cellules scrtrices nombreuses situes entre la
basale et ce qui semble tre une membrane les sparant de la lumire centrale, lensemble
formant lacinus. Un acinus est un cul de sac de scrtion se poursuivant par un canal
lacrymal. La structure dune glande , dune unit excrtrice est donc celle-ci :
Figure n11 : Schma dune unit scrtrice de glande lacrymale.
Acinus

Canal lacrymal

Direction de lobservation

Sens de la coupe

Cellules scrtrices

Les cellules scrtrices sont dites acineuses car elles scrtent dans des acinus et
sreuses car leur scrtion est de type protique enzymatique. En effet, cette dernire est
compose de chlorure de sodium mais aussi de lysozyme. Le liquide lacrymal a donc un rle
de nutrition mais aussi protecteur de la corne.
Les units excrtrices sont spares entre elles par un tissu conjonctif plus ou moins
pais et peuvent sorganiser en lobules (Lo) comme le montre la figure n12 :
Figure n12 : Coupe histologique dune glande lacrymale de singe, incluse en
paraffine (grossissement X132).

Lgende :
Lo. Lobes
CT. Tissu conjonctif
SA. Acinus sreux
N. Noyaux au ple basal des cellules
Chapitre n 1 - Histologie

(GARTNER & HIATT, 2005)

10

3- Le pancras
Le pancras (figure n13) est une glande dite amphicrine. Elle prsente la fois des
units scrtrices exocrines et endocrines.

(FAIRVIEW HEALTH SERVICES, 2007)


Figure n13 : Schmatisation du pancras en place, chez lhomme.
La structure histologique gnrale est reprsente sur la figure n14.

(FACULTES UNIVERSITAIRES NOTRE-DAME DE LA PAIX, 2007)


Figure n14 : Observation au microscope photonique dune coupe de pancras
colore lhmalun-rythrosine-safran (faible grossissement)
Lgende
1. Unit exocrine
2. Unit endocrine

Chapitre n 1 - Histologie

11

Lobservation de la coupe de pancras est reprsente sur la figure n15 :


Figure n15 : Observation au microscope photonique dune coupe de pancras
(grossissement X400).

On distingue deux parties dans cette coupe.


En effet, dune part, on observe des groupes de cellules plutt volumineuses et
sombres (basophiles). Ce sont les cellules exocrines qui synthtisent les grains de zymognes,
enzymes pancratiques. Elles sont en ralit organises, comme pour la glande lacrymale, au
niveau dun acinus. Cependant, des cellules peuvent faire saillie dans la lumire de lacinus ;
ces cellules sont les cellules centro-acineuses, dont le rle est mal connu, peut-tre la
rgnration des cellules endocrines du pancras.
Des canaux volumineux sont prsents pour la collection du contenu des acini.
On peut observer un acinus sur la figure n16, suivante :

Lgende :
1. Cellule exocrine
2. Grains de zymogne
(FACULTES
UNIVERSITAIRES NOTREDAME DE LA PAIX, 2007)

Figure n16: Observation au microscope photonique dune coupe dacinus


pancratique colore lhmalun-rythrosine-safran (fort grossissement).
Chapitre n 1 - Histologie

12

Dautre part, on note la prsence damas de cellules, bien plus claires (figure n17, en
1 et 2). Ces lots constituent la portion exocrine du pancras, on parle des lots de
Langerhans. Ils comportent 4 types cellulaires endocrines diffrents chez lhomme :
- les cellules scrtant le glucagon, hormone hyperglycmiante,
- les cellules scrtant linsuline, hormone hypoglycmiante,
- les cellules scrtant le somatostatine dont le rle est vari
(essentiellement inhibiteur sur diffrentes scrtions comme celles
de linsuline, du glucagon, ou dhormone hypophysaire),
- les cellules PP scrtant le polypeptide pancratique qui a une
action hyperglycmiante.
Il existe, sur la coupe observe, une conjonctive autour des lots, ce qui nous pousse
nous dire que ce tissu a peut-tre t extrait dun pancras de rat.
Enfin, on notera que les lots de Langerhans ntaient pas aussi regroups que ce que
lon peut voir dans un pancras humain. Ces lots taient en effet beaucoup plus diffus dune
taille lgrement plus grande que celle des acini.
Figure n17: Observation au microscope photonique dun lot de Langerhans
colore lhmalun-rythrosine-safran (fort grossissement).

(FACULTES UNIVERSITAIRES NOTRE-DAME DE LA PAIX, 2007)


Lgende
1.
2.
3.
4.

cellule
cellule
portion exocrine
capsule conjonctive

Chapitre n 1 - Histologie

13

4- Exploitation
Nous avons observ quen ce qui concerne la glande lacrymale et la portion exocrine
du pancras, les units scrtrices sont des structures en acinus ou en tubulo-acinus relies
des canaux qui se jetteront dans des canaux plus importants et pour finir dans des canaux
excrteurs terminaux.
Il sagit bien l de glandes exocrines qui dun point de vue physiologique excrtent
dans le milieu extrieur : les larmes sur la corne ensuite vacues dans les fosses nasales, les
grains de zymognes dans la lumire intestinale.
A linverse, les glandes endocrines sont dpourvues de canaux excrteurs.
Pour les lots de Langerhans du pancras et la thyrode, les structures cellulaires sont
respectivement des amas cellulaires et des follicules entours de capillaires sanguins (non
observs pour les lots de Langerhans).
Des prcurseurs sont capts dans le sang et servent synthtiser des molcules qui
retourneront dans le sang. Ainsi, dun point de vue gnral, la scrtion endocrine correspond
la scrtion de toute substance fabrique par une cellule dans le milieu intrieur.
Cependant, trs souvent cette notion est restreinte la scrtion dhormones comme
les hormones T3-T4 ou linsuline qui sont libres dans le sang (une condition sine qua non
pour qualifier une hormone) et rgulent lactivit dun tissu-cible.
Une glande amphicrine est la fois endocrine et exocrine.

B- Etude histologique et pathologie


1- Foie sain
Tout comme le pancras, le foie est un organe appartenant lappareil digestif, comme
on peut le voir sur la figure n13 ( liver ).
On schmatise les structures observes sur la figure n18 :

Figure n18 : Observation au microscope photonique dune coupe de foie sain


colore lhmalun-osine (grossissement X400)

Chapitre n 1 - Histologie

14

Une population cellulaire prdomine trs largement dans le foie ; ces cellules sont
regroupes sous le nom gnral dhpatocytes. On remarque que ces cellules sont assez
volumineuses, plutt polygonales avec un noyau bien visible.
Cependant, une deuxime population a t observe. Les cellules sont plus petites,
arrondies et regroupes en amas relativement volumineux mais ne sont pas obligatoirement
aux abords de vaisseaux sanguins comme le schma semble le suggrer. Deux hypothses
sont possibles.
Ces cellules sont peut-tre des prcurseurs dlments figurs du sang ; cette
hypothse nest possible que dans le cas dun foie ftal. Lhypothse la plus probable est
cependant quil sagit de population de cellules biliaires mais elles nont pas t observes sur
dautres coupes.
A noter que le foie a une structure lobule avec des cloisons interlobulaires, sauf chez
lhomme o les lobules sont plutt mis en valeur par des techniques de coloration mettant en
relief le glycogne.
2- Foie cirrhos
La cirrhose est une pathologie propre au foie.
Ses effets sur la structure histologique du foie ont t reprsents sur la figure n 19.
Figure n19 : Observation au microscope photonique dune coupe de foie
cirrhos colore lhmalun-osine (grossissement X400).

La structure du foie cirrhos est totalement bouleverse.


En effet, les membranes des hpatocytes disparaissent et laissent place des
syncitiums avec des noyaux libres entrecoups de zones ncroses. Le tissu cellulaire na plus
de structure vraiment cohrente.
On peut ainsi comparer deux structures histologiques saine et cirrhose (figure n20).

Chapitre n 1 - Histologie

15

Figure n20 : Observation au microscope photonique dune coupe de foie sain (a)
et de foie cirrhos (b) chez le lapin et colore lhmalun-osine (grossissement X100).

Ncrose
Un lobule

Syncitium
Un hpatocyte

(ALTER et al.,2008)
3- Exploitation
Le foie est une glande amphicrine et prsente ainsi une scrtion endocrine dans le
milieu intrieur et une scrtion exocrine, dans le milieu extrieur. Une chose particulire est
que les fonctions endocrine et exocrine sont assures par un seul et mme type cellulaire :
lhpatocyte.
La scrtion exocrine concerne la bile (acide) qui passe dans la lumire du duodnum
et joue un rle dans la digestion.
La scrtion endocrine nest pas du tout hormonale. Elle consiste en la libration dans
le sang dun certain nombre de protines mais aussi du glucose. Le foie produit galement du
cholestrol qui peut tre export dans le sang par les LDL (Low Density Lipoproteins) et
assure aussi le catabolisme du cholestrol apport par les HDL (High Density Lipoproteins).
Le foie constitue en trs grande partie la rserve de glucose. Il stocke le glucose
sanguin sous forme de glycogne par des ractions de glycognognse et le libre en
hydrolysant le glycogne par la voie mtabolique de la glycognolyse (sous linfluence de
linsuline et du glucagon).
Une cirrhose est une pathologie grave, multifactorielle.
Ainsi, comme nous lavons dcrit, une cirrhose hpatique est dun point de vue
histologique un vritable bouleversement de la structure du foie avec un ensemble de zones
ncroses et cicatricielles et de syncytiums.
Dun point de vue physiologique, on peut facilement imaginer que la cirrhose altre
les diffrentes fonctions hpatiques. Le glucose sanguin serait difficilement stock dans le
foie car dans le syncytium les ractions ncessaires ce stockage sopreraient difficilement
ou tout simplement parce que les hpatocytes sont altrs et ne prsentent plus les rcepteurs
linsuline. Il pourrait alors en rsulter une lvation de la glycmie pouvant engendrer un
diabte et invitablement une glycosurie.
De mme, on peut penser que le mtabolisme du cholestrol peut aussi tre atteint
avec srement une augmentation du taux de cholestrol apport par lalimentation dans le
sang et se dposant dans les artres pour former des plaques dathromes, do des risques

Chapitre n 1 - Histologie

16

daccidents cardio-vasculaires. Il serait aussi possible que le taux de cholestrol diminue


puisquil est en grande partie produit par le foie. Cela aurait srement un impact sur la fluidit
des membranes cellulaires, dans le sens dune rigidification.
Enfin, la cirrhose impacterait aussi sur la fabrication dacide biliaire et donc sur la
digestion. On observe dailleurs un amaigrissement en cas de cirrhose.

C-

Etude de la structure dune artre et dune veine

Artres et veines sont des conduits vhiculant le sang dans lorganisme et sont donc
des structures appartenant lappareil circulatoire. Les artres amnent le sang du cur aux
organes alors que les veines ramnent le sang au cur.
Les diffrences de structures entre veines et artres ont t observes sur coupe
histologique et reprsentes sur la figure n21 ;

Figure n21 : Observation au microscope photonique dune coupe dartre et de


veine (voisines) colores lhmalun-osine (grossissement X400).

Chapitre n 1 - Histologie

17

1- Artre
Lartre prsente trois parties plus ou moins visibles selon les coupes. On parle de
tuniques.
La plus interne est lintima forme par lendothlium et dun conjonctif sous-jacent.
Elle donne un aspect fris au pourtour de la lumire vasculaire dans laquelle on peut
distinguer des hmaties.
La tunique intermdiaire, et de loin la plus dveloppe, est la mdia. Elle est forme
par des cellules musculaires lisses ; la disposition des fibres musculaires semble plutt tre
annulaire sur cette coupe.
La tunique la plus externe est ladventice, du tissu conjonctif essentiellement.
On notera que selon les types dartres, limportance des diffrentes tuniques varie.
La structure en tuniques de lartre sobserve trs bien sur cette coupe :

(FACULTES UNIVERSITAIRES NOTRE-DAME DE LA PAIX, 2007)


Figure n22 : Observation au microscope photonique dune coupe dartre de
moyen calibre colore au trichrome de Masson (fort grossissement).
Lgende :
1. Intima
2. Mdia
3. Adventice

Chapitre n 1 - Histologie

18

2- Veine
La structure en tuniques de la veine est plus difficile voir que pour les artres
puisque chacune de ces tuniques est moins paisse. Cependant, elles sont bien prsentes
(intima, mdia, adventice).
On retrouve ainsi cette structure sur la figure n23.
Figure n23 : Observation au microscope photonique dune coupe de veine
colore au trichrome de Masson (fort grossissement).

Lgende :
1. Intima
2. Mdia
3. Adventice

(FACULTES UNIVERSITAIRES NOTRE-DAME DE LA PAIX, 2007)


On peut noter que les fibres musculaires de la mdia sont beaucoup moins denses que
pour lartre avec donc plus de tissu conjonctif.
3- Comparaison artre/veine
Il existe plusieurs diffrences significatives entre veines et artres outre le sens de
transport du sang dans lorganisme (figure n21 et 24).
En effet, dun point histologique, on note que la paroi des veines est plus fine que celle
des artres avec, notamment, une mdia prsentant des fibres musculaires moins denses,
moins dveloppes et plus de conjonctif que dans lartre. Il en rsulte invitablement une
diffrence de dformabilit : les veines sont beaucoup plus dformables que les artres et cela
se voit bien sur la coupe qui a t observe.
On note galement que le diamtre des veines est beaucoup plus important que le
diamtre de lartre lui correspondant. En fait, bien souvent, on associe une artre, une veine
qui suit le mme trajet.

Chapitre n 1 - Histologie

19

Figure n24 : Observation au microscope photonique dune coupe dartre et de


veine colore au trichrome de Masson (fort grossissement).
Lgende :
1. Mdia veineuse avec
forte proportion de
conjonctif
2. Mdia artriel forte
proportion de
musculeuse
3. Adventice veineuse

(FACULTES UNIVERSITAIRES NOTRE-DAME DE LA PAIX, 2007)


Dun point de vue fonctionnel, les artres vhiculent un sang sous forte pression
confre au niveau des ventricules alors que les veines transportent un sang sous faible
pression.
On comprend donc mieux pourquoi les veines sont plus distensibles que les artres. Ce
phnomne sappelle la compliance et permet daugmenter le volume du vaisseau pour
rehausser la pression.
Dautres mcanismes entrent en jeu comme la pulsation des artres voisines, une
contraction des muscles environnants ou encore un systme de valvules et contribuent
galement au transport du sang subissant une faible pression dans les veines.

D- Etude de la structure de la moelle pinire et du cerveau


1- Moelle pinire
La moelle pinire fait partie du systme nerveux central. Sa structure globale a
laspect prsent par la figure n25.

Chapitre n 1 - Histologie

20

Figure n25 : Observation au microscope photonique dune coupe de moelle


pinire colore au Dominici (faible grossissement).
Lgende :
1. Substance grise
2. Substance blanche
(FACULTES
UNIVERSITAIRES NOTREDAME DE LA PAIX, 2007)

On observe une disposition particulire du tissu nerveux avec une substance claire en
priphrie et une substance sombre, interne.
La structure de la moelle pinire observe est reprsente sur ce schma :

Figure n26 : Observation au microscope photonique dune coupe de


moelle pinire de mammifre (grossissement X400).
Au niveau de la substance grise, on note la prsence de corps cellulaires trs
nombreux, visibles essentiellement grce aux noyaux. Ce sont des neurones.
Des cellules gliales sont galement prsentes, les oligodendrocytes.

Chapitre n 1 - Histologie

21

Au niveau de la substance blanche, on peut observer un trs grand nombre de fibres


nerveuses que ce soit en coupe longitudinale ou en coupe transversale. Certaines sont
mylinises, dautres non. Ainsi, on voit trs nettement, des fibres, en coupe transversale,
entoures par des lments blancs, arrondis : ce sont les oligodendrocytes formant la gaine de
myline. La spiralisation de ces cellules gliales ne sobservent quasiment pas, on note
seulement de toutes petites scissures internes de chaque ct de la fibre mylinise.
Cette structure est nettement observable sur la figure n27.
Figure n27 : Observation
au microscope photonique
dune coupe de moelle
pinire colore au
Dominici (fort
grossissement).
Lgende :
1. Fibre amylinique
2. Fibre mylinise (fibre
et oligodendrocytes)
3. Corps cellulaire de
neurone
4. Corps cellulaire
doligodendrocyte
5. Lumire dun capillaire
sanguin

4
3
5

On note sur cette


figure que laspect sur coupe
histologique de la substance
blanche est beaucoup moins
homogne que dans la
substance grise. Cela vient
du fait que les fibres de la
substance grise sont toutes
amyliniques, ce qui donne
dailleurs, en majeure partie,
cet aspect sombre.

(FACULTES UNIVERSITAIRES NOTRE-DAME DE LA PAIX, 2007)


2- Cerveau
La structure histologique du cerveau a t observe mais non reprsente. On
lobserve globalement sur la figure n28, en coupe longitudinale.

Chapitre n 1 - Histologie

22

Tlencphale (recouvrant
bulbe olfactif, diencphale et
une partie du msencphale)

Cortex (substance
grise externe)

Mesencphale
(avec les tuberculed
quadrijumaux) Rhombencphale
(bulbe rachiden et
cervelet)

Bulbe olfactif

(ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES, 2008)


Figure n28 : Coupe histologique dun cerveau de mammifre.
On note que la structure est inverse par rapport la moelle pinire ; en effet, la
substance blanche est interne alors que la substance grise est externe.
Cette structure semble de plus, plus complexe, plus dense mais on retrouve bien les
lments dfinis dans la moelle pinire.
Une structure, qui na pas t observe est celle forme par des astrocytes, autre type
de cellules gliales, mettant des pieds vasculaires comme on le remarque sur la figure n29.
Figure n 29 : Observation au microscope photonique de la relation entre astrocytes et
capillaire sanguin (imprgnation aux sels dargent)

Lgende :
1. Capillaire sanguin
2. Astrocyte
3. Pied vasculaire
(FACULTES
UNIVERSITAIRES NOTREDAME DE LA PAIX, 2007)

Chapitre n 1 - Histologie

23

Ces cellules ralisent ce que lon appelle la barrire hmatoencphalique ; cest par
elles que transitent les nutriments qui seront distribus aux neurones.

Conclusion
Ainsi, lhistologie, par un certain nombre de mthodes et de techniques, nous permet
dobserver des structures tissulaires et den comprendre de manire plus ou moins prcise
lorganisation.
Nous lavons vu, certaines pathologies comme la cirrhose engendrent un vritable
chamboulement structural altrant la fonction de lorgane en question, ce qui met clairement
en relief, le lien troit entre organisation tissulaire et fonctionnement dun organe.

Chapitre n 1 - Histologie

24

Chapitre 2 : Etude des paramtres sanguins


(TP n 2)

Introduction
Les analyses hmatologiques sont pratiques sur le sang pour permettre le diagnostic
ou le suivi de certaines maladies. Le sang est compos d'un liquide, le plasma, dans lequel
flottent des lments figurs (globules rouges, globules blancs et plaquettes) et un grand
nombre de substances (protines, hormones, vitamines, etc.).
Ainsi, l'hmatologie, qui tudie la physiologie et les pathologies du sang, regroupe
l'analyse des cellules du sang mais aussi d'lments dissous dans le plasma comme les
facteurs de la coagulation ou les anticorps. Elle en dgage des paramtres comme ceux de
lhmogramme ou bien dune formule leucocytaire, paramtres fluctuant selon les espces
mais aussi selon le sexe au sein dune mme espce.

I-Matriels et mthodes
Le sang tudi lors ce T.P. provenait dun rat (embranchement des vertbrs, classe
des mammifres, Rattus sp). Pour chaque tude, le sang provenait toujours du mme
chantillon.

A- Etude quantitative des hmaties et des leucocytes


Ltude quantitative des lments figurs du sang consiste tout simplement en un
comptage de ces cellules, mais cela par des techniques spcifiques.
Une technique simple est lutilisation dun hmatimtre. Nous avions notre
disposition un hmatimtre de Malassez.
1- Prparation des lames de Malassez
a) Description
Une lame ou cellule de Malassez est une lame de verre avec un espace, une chambre
dune certaine paisseur, au fond de laquelle est grave une grille contenant des carrs de
50m de cot (figure n30).

Lamelle de verre
Quadrillage
Cellule de Malassez
Chambre
(AMICE, 2007)
Figure n30 : Schma dune lame de Malassez.

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

25

Comme le montre la figure n31 suivante, une cellule de Malassez possde un


quadrillage spcifique comportant 100 rectangles au total, 10 rectangles en longueur et 10 en
largeur.

0,2 mm
2 mm

0,25 mm
2,5 mm

(Adapt et modifi de lACADEMIE DE ROUEN, 2008)


Figure n31 : Schma dune grille de Malassez.

Parmi les 100 rectangles, on trouve 25 rectangles qui sont subdiviss en 20 petits
carrs afin de faciliter le comptage.
Cette cellule est souvent utilise pour le comptage de cellules car le volume de la
chambre est connu (du fait de ses dimensions). Ainsi, la surface correspondante un rectangle
est connue (0,25mm par 0,2mm) et la surface de lensemble de la grille est 100 fois
suprieure. Lpaisseur de la chambre est galement connue (200m).
b) Mise en place de la lamelle et de la solution
Pour la mise en place de la lamelle, il est conseill dhumecter les deux plateaux
latraux et de faire adhrer parfaitement la lamelle.
Pour cela, il faut placer la lamelle tout en pratiquant un mouvement de va et vient
jusqu perception dune rsistance.
La chambre de comptage est remplie par capillarit laide dune micropipette, avec
la solution contenant les lments sanguins compter ; les lments sont alors laisss
sdimenter.
Enfin, les lments dposs sur le quadrillage par unit de surface et donc de volume
sont observs au microscope.
Cependant, pour un souci de visibilit au microscope, le sang prlev doit tre dilu.

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

26

2- Prparation des dilutions


a) Prparations des solutions de dilution
En ce qui concerne les hmaties le sang prlev est dilu 200 fois avec un diluant
isotonique (conservation des hmaties), le liquide Marcano dont les caractristiques sont les
suivantes :
- 2,2g de sulfate de sodium cristallis (Na2SO4, 10 H20),
- 1 cm3 de mthanal 30%
- 100 cm3 deau distille.
Nous disposons de mthanal 37%. Le volume de ce mthanal prlever pour obtenir
1mL 30% est donc de :
30 1
= 0,81mL complts par 0,19 mL deau distille.
37
En ce qui concerne les leucocytes, le liquide de dilution devra tre hypotonique pour
lyser les hmaties. Ainsi, une dilution de 20 fois est ralise dans du liquide de Hayem dont
les caractristiques sont les suivantes :
- 0,25 g de bleu de mthylne,
- 5 cm3 dacide thanoque,
- 100 cm3 deau distille.
Le bleu de mthylne colore les leucocytes.
50 L de sang sont dilus dans 9.95 mL de Marcano et 50 autres dans 0,95mL de
Hayem.
Cependant, sachant quil y a eu une erreur dans la prparation du Hayem, certainement
trop de bleu de mthylne, 10 ml de chlorure de sodium 0,9% ont t rajouts au 1 ml de
solution. Le sang a donc t dilu 11 fois plus.
Les solutions dilues sont alors prtes tre places dans la chambre de la lame de
Malassez.

b) Utilisation de lunopette
Une unopette, reprsente sur la figure n32, est utilise pour faciliter les
manipulations de dilution.

Unopette

Hmatimtre

(ANIMAL REPRODUCTION SYSTEMS, 2008)


Figure n32 : Photographie dune unopette et dun hmatimtre.

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

27

Deux types dunopettes peuvent tre utiliss selon les lments compter ; en effet,
celles qui sont utilises afin de dnombrer les hmaties contiennent un volume connu dun
diluant isotonique ne dtriorant pas ces dernires. Au contraire, les unopettes utilises dans le
but de dnombrer les leucocytes doivent contenir un diluant hypotonique lysant les hmaties
et prservant les leucocytes.
Ltude qui a t faite en se servant dune unopette a t effectue dans le but de
compter des hmaties.
Comme indiqu sur le schma ci-dessous (figure n33), on perfore le diaphragme (A)
et on prlve lchantillon grce la pipette qui se remplie par capillarit (B) ;
Le remplissage est total et est stopp automatiquement lorsque le sang prlev atteint
le volume calibr.
On place la pipette dans la chambre contenant la solution diluante et on cre ensuite
une pression sur le rservoir pour ly verser grce au relchement de cette pression (C).
Aprs homognisation (D), du sang dilu est prlev et plac sur une lame de
Malassez (E).
A) Perforation
du diaphragme

B) Remplissage par
capillarit

C) Versement dans
la chambre

E) Mise en place du sang dilu sur


la cellule de Malassez
D) Agitation pour
homognisation

(INTEGRATED PUBLISHING, 2008)


Figure n33 : Protocole dutilisation de lunopette.

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

28

Nous avons donc prlev un volume prcis de sang que nous avons dilu dans un
volume connu.
3- Observation et lecture
Lobservation se fait au microscope photonique au faible grossissement, tout dabord,
afin de reprer le quadrillage de la cellule de Malassez. Une fois ce quadrillage repr,
lobservation peut se faire un grossissement de X400.
La numration des cellules peut alors se faire, sur plusieurs rectangles 20 carrs en
respectant la rgle de comptage. Nous avons compt les hmaties contenues dans 3 rectangles.

B- Etude qualitative des leucocytes


Cette tude qualitative rside dans la reconnaissance des diffrents leucocytes et
ltablissement de leurs proportions relatives, de la formule leucocytaire.
1- Reconnaissance des leucocytes
Les leucocytes ou globules blancs sont des cellules nucles spcialises dans la
dfense de l'organisme contre les agressions de l'extrieur. Ils sont beaucoup moins nombreux
dans le sang que les globules rouges.
Ce groupe de cellules est un groupe htrogne de cellules dont les fonctions et dure
de vie sont trs variables. Dune manire trs gnrale, on distingue deux familles de
leucocytes selon la manire dont ils sont produits et maturent :
- la ligne myelode (production et maturation dans la moelle
osseuse),
- la ligne lymphode (maturation dans les organes lymphodes).
Hmatie
a) La ligne mylode
La ligne mylode comporte quatre populations leucocytaires distinctes.
Les granulocytes neutrophiles sont facilement reconnaissables par leur noyau
polylob dont les lobes sont relis entre eux par de fins ponts nuclaires. Leur
cytoplasme est granuleux : il renferme des granulations (lysosomes) colores au MayGrnwald-Giemsa (M.G.G).

Les granulocytes osinophiles prsentent aussi un noyau polylob (deux lobes


en gnral) mais on les reconnat avant tout grce leurs granulations relativement
volumineuses, roses-oranges lorsquelles sont colore au M.G.G.

Les granulocytes basophiles, quant eux, prsentent des granulations


volumineuses, sombres cachant plus ou moins le noyau. Le noyau est en gnral
bilob.

Les monocytes, plus volumineux que les prcdents possdent un noyau


volumineux, sans lobe et rniforme.

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

29

b) La ligne lymphode

La ligne lymphode ne comporte quune seule population cellulaire (comprenant ellemme des sous-populations), il sagit de lymphocytes.

Leur taille est petite, quasiment comparable celle dune hmatie. Le rapport
nuclocytoplasmique est lev, et peu de cytoplasme est visible.

2- Etablissement de la formule leucocytaire


La formule leucocytaire est tablie en ralisant un frottis sanguin puis en comptant les
diffrentes populations leucocytaires.
Figure n34 :
Schma de la technique
de frottis sanguin

a) Ralisation dun frottis sanguin


La technique de frottis est une
technique
particulire
permettant
un
talement homogne du sang sur une lame de
verre (figure n34, ci-contre)
Une petite goutte de sang est dpose
environ 1 cm de lextrmit dune lame.
Une lamelle est approche de cette
goutte, incline 45 par rapport la lame et
mise son contact (A). Cette goutte adhre
par capillarit tout du long de la base de la
lamelle (B). La lamelle est alors pousse de
manire rectiligne (A) de faon taler le
sang en couche mince et uniforme (D).

(WILD LIFE CONSERVATION SOCIETY, 2008)


Pour lobservation au microscope la coloration au May-Grunwald est ncessaire.
Celui-ci colore de manire diffrentielle les diffrentes zones dune cellule sanguine en
fonction de son caractre acidophile, basophile, neutrophile ou osinophile.
b) Observation et tablissement de la formule leucocytaire
La technique dobservation et dtablissement de la formule leucocytaire consiste
observer la lame grossie 400 fois au microscope, dune manire rectiligne sur toute sa
longueur. Chaque leucocyte color au MGG est observ, dtermin et comptabilis.
Pour un nombre total suffisant de leucocytes compts, on dtermine les proportions de
chaque leucocyte en calculant leur rapport sur le nombre total de leucocytes comptabiliss.
Les proportions des diffrents globules blancs sont alors obtenues et la formule leucocytaire
tablie.

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

30

II-Observations et exploitations
A- Etude quantitative des hmaties et leucocytes
1- Numration des hmaties
a) Observation et numration des hmaties du sang dilu
manuellement
Lobservation au microscope de la cellule de Malassez a rvl la prsence dlments
arrondis, biconcaves, anucls : les hmaties (figure n35, ci-dessous). On peut galement
noter la prsence dlments de taille gale aux hmaties ou lgrement infrieure et de
structures irrgulires. Ces lments sont des hmaties qui soit ont subi un traumatisme
osmotique, soit sont des hmaties vieillies ; on parle dchinocytes.

Hmaties

Echinocytes

Figure n35 : Observation au microscope dun des 25 rectangles quadrills de la cellule


de Malassez utilise (grossissement X400)
La numration des hmaties sur trois rectangles quadrills est consigne dans le
tableau suivant:
Rectangles observs
Nombre dhmaties
N1
222
N2
271
N3
273
Figure n36 : Numration des hmaties dans les rectangles
quadrills de la cellule de Malassez.

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

31

Ainsi, sur un rectangle, on compte en moyenne 255 hmaties. Nous avons alors en
notre possession toutes les donnes pour calculer la concentration cellulaire en hmaties.
En effet, le volume dun rectangle dune lame de Malassez se calcule par la relation
fondamentale :
V = Longueur l arg eur paisseur
Soit,
V = 0,2(mm) 0,2(mm) 0,25(mm) = 0,01mm 3
Nous savons que le sang est dilu 200 fois et quil y a 100 rectangles au total. Ainsi, la
concentration cellulaire pour 1mm3 est de :

255 x 100 x 200 = 5,1.106 hmaties/mm3 de sang


Do, en litres :

5,1.106 x 106 = 5,1.1012 hmaties/L de sang


b) Observation et numration des hmaties du sang dilu
par lunopette
En observant au microscope, a vue dil, nous pouvons nous rendre compte que dune
part, la concentration est bien plus importante que pour la numration prcdente, et dautre
part, peu dchinocytes sont observs.
Le comptage du sang dilu par lunopette rvle, en effet, 462 hmaties par rectangles
en moyenne. La mthode de calcul tant tout fait similaire la prcdente, on obtient :

462 x 100 x 200 x 1000 x 1000= 9,24.1012 hmaties/Litre.


c) Comparaisons
Selon DESCAT (2002), les valeurs thoriques de la concentration sanguine en
hmaties sont variables selon lge du rat et vont de 5 12,5.1012 hmaties par litres de sang.
Nous constatons donc que nos rsultats concordent avec cette fourchette de valeur.
Cependant, pour un mme chantillon de sang, les valeurs obtenues pour une dilution
manuelle bien que du mme ordre de grandeur semblent significativement diffrentes. Cette
diffrence peut sexpliquer par une plus grande prcision de lunopette, dans le prlvement
du sang et dans la dilution.
On peut galement mettre lhypothse quil y a eu une erreur de manipulation lors de
la prparation de la solution de Marcano qui ntait pas isotonique. La prsence dun grand
nombre dchinocytes dans le premier cas semble tre en corrlation avec cette hypothse.
A noter que chez lhomme la concentration moyenne dhmaties par litre de sang est
du mme ordre de grandeur (4,2 et 5,2x1012 hmaties/litre).

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

32

2- Numration des leucocytes


Sur 19 rectangles, nous avons compt en moyenne 3,1 leucocytes ce qui reprsente
ainsi:

3,1 x 5,2 x 20 x 11 x 1000 x 1000= 3,5.109 leucocytes/Litre.

Les normes leucocytaires, chez le rat, indiques par DESCAT (2002) vont de 3 15
leucocytes/Litre. Mme sil est faible notre rsultat se situe donc dans la norme.
Chez lhomme, la valeur moyenne de leucocytes stend de 4 10.109 par litre de
sang. La valeur observe pour le rat est donc proche de celle de lhomme.

B- Etude qualitative leucocytes


Lobservation du frottis sanguin ralis est reprsente sur la figure n 37 ci-dessous :

Hmaties

Grand Lymphocyte ?

Lymphocyte

Figure n37 : Frottis sanguin observ au microscope photonique (grossissement X400)


aprs coloration au M.G.G., chez le rat.
Ltablissement de la formule leucocytaire ainsi que ses normes pour un rat mle de
15 mois (Rattus norvegicus) sont consignes dans le tableau suivant :
Systmes

Mononuclaire

Polynuclaire (granulocytes)

Lymphocyte

Monocyte

Neutrophile Eosinophile Basophile

Proportions
observes

59%

22,7%

18,18%

13/22

5/22

4/22

Normes
(DESCAT, 2002)

56%

5,2 %

35,4%

Populations
leucocytaires

0%

0%

3,1%

<1%

Figure n38 : Formule leucocytaire observe et normale chez Rattus sp

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

33

Ainsi, en ce qui concerne les lymphocytes, les osinophiles et les basophiles, les
proportions observes concordent relativement bien avec les normes. On constate que les
lymphocytes sont la population cellulaire la plus reprsente. Dailleurs, dune manire
globale, quelque soit le sexe et lge du rat, cette population sera toujours la plus importante
avec des variations allant de 50 95% (DESCAT, 2002)
Cependant, en ce qui concerne les monocytes et les neutrophiles, les rsultats ne
concordent pas avec les normes. Les monocytes semblent tre plus reprsents alors que la
formule leucocytaire normale rvle une proportion relativement faible.
La premire hypothse qui peut-tre formule est que le rat que nous avons tudi
prsente la fois une neutropnie (en tous les cas une diminution de la population) et une
monocytose. Cela est peu plausible car une monocytose rpond une infection au cours de
laquelle la population de neutrophile ne peut quaugmenter et non diminuer.
La seconde hypothse rside dans un problme de reconnaissance et de diffrenciation
entre les neutrophiles et les monocytes. En effet, parfois, les ponts nuclaires des neutrophiles
ne sont pas si troits quen thorie et laissent apparatre au grossissement auquel nous les
avons observs un noyau plutt rniforme, les confondant avec des monocytes.
On notera que chez lhomme, la population leucocytaire prdominante est celle des
granulocytes neutrophiles.

Conclusion
Lensemble de ces techniques (numrations et frottis sanguins) est trs largement
utiliss en hmatologie pour mettre un diagnostic en cas de pathologie : anmie,
polyglobulie, leucopnie, leucocytose voire mme infestation par un parasite.
Il faut bien comprendre quil existe de grandes variations du nombre dlments
figurs sanguins au sein dun mme individu (selon ltat physiologique, lge, laltitude,
etc.,) mais aussi selon les sexes et les espces.

Chapitre n2 Etude des paramtres sanguins

34

Chapitre 3 : Rponse lectrodermale


(TP n 3)

Introduction
Les multiples stimuli capts par les rcepteurs du systme nerveux peuvent induire
des effets psychiques variables qui peuvent avoir des effets parfois insouponnables au niveau
somatique. Nous nous sommes intresss ces rpercutions somatiques en essayant de mettre
en valeur le lien entre un tat affectif et la variation de la sudation au niveau de certaines
zones du corps ; on parle de rponse lectrodermale.

I-Matriel et mthode
Ltude de la rponse lectrodermale ncessite un appareillage lectronique et
informatique pour lacquisition des donnes.

A- Mthode dacquisition
1- Dispositif dacquisition
Ainsi, lappareillage lectronique prsente trois composantes :
-

les capteurs placs aux rgions palmaires de lindex et du majeur,


le boitier dacquisition raccord aux diffrents capteurs
lordinateur possdant le logiciel dacquisition et reli au boitier
dacquisition (figure n40).

On dispose de trois types de capteurs puisque la rponse galvanique na pas t la


seule avoir t mesure lors de lexprience :
- lamplificateur de la rponse lectrodermale (variation faible, en
microquantits) reli aux capteurs (figure n39),
les lectrodes pour llectrocardiogramme,
Figure n39 :
- la ceinture respiratoire.
Amplificateur de la
rponse lectrodermale
(gauche) et capteur de la
conductance pidermique
(droite et gauche)

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

35

Logiciel dacquisition
(Labscribe2)
Botier dacquisition
Entre pour le capteur
du rythme cardiaque
Entre pour le capteur
du rythme respiratoire

Entre pour le capteur


de la rponse
lectrodermale

Amplificateur de la
rponse
lectrodermale
Capteur de la rponse
lectrodermale

Figure n40 : Reprsentation de lensemble du dispositif dacquisition.

2- Logiciel dacquisition
Le logiciel dacquisition, Labscribe2, retranscrit les donnes en temps rel sous forme
de graphique. Concernant la rponse lectrodermale, ce graphique reprsente la conductance
(Siemens) en fonction du temps (secondes).
Il faut rgler lchelle pour que le signal soit visible lcran ; la mesure du temps et
de lamplitude se font grce aux curseurs.
Cependant, lors du T.P. le logiciel na pas t configur avant lenregistrement pour
traiter les donnes en siemens mais en volts. Cest pourquoi, par la suite nous parlerons en
units arbitraires.
De plus, nous avons eu quelques problmes lors de lanalyse de notre enregistrement,
surement cause dune mauvaise configuration du logiciel avant lenregistrement. En effet,
dune part les rsultats laissent apparatre des courbes atypiques et dautre part, les valeurs V1
et V2 permettant les mesures des amplitudes sont constamment nulles quelle que soit la
position des curseurs. Nous nous sommes donc procurs les rsultats de GIROT Ccile et
ANOTAUX Jennifer.

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

36

B- Enregistrement et stimulations
Etant donn que cette tude a pour objectif dtudier lactivit nerveuse et notamment
lactivit du systme nerveux vgtatif, il faut stimuler le cerveau et tudier les rponses, en
loccurrence, les rponses lectrodermales.
Trois types de stimulations ont t raliss au cours de ce T.P :
- lnonc de mots.
- lnonciation dun mensonge.
- des stimulations sensorielles brusques,
1- Enregistrement et talonnage
Une fois le sujet install correctement, dos lcran denregistrement pour ne pas
influencer la rponse, lavant bras et la main pour lesquels est enregistre la rponse
lectrodermale au repos (poss sur la table), lenregistrement peut dbuter en cliquant sur le
bouton
.
Pendant deux minutes, lenregistrement se fait sans stimulation afin de sassurer de la
stabilit des rythmes cardiaque et respiratoire mais surtout de la rponse lectrodermale.
De plus, il est important de noter que lors dune inspiration force, il existe une
rponse lectrodermale. Celle-ci constitue donc une rfrence, un talon pour ltude des
rponses aux stimulations et doit donc tre mesure.
Cest la raison pour laquelle, aprs deux minutes sans stimulation, il est demand
lindividu tudi de raliser une inspiration force et un maintien en apne durant quelques
secondes.
Les diverses stimulations peuvent alors dbuter.
Chaque stimulation doit tre marque sur lenregistrement au moment prcis de son
occurrence afin de pouvoir reprer cette stimulation sur lenregistrement lors de lanalyse et
de connatre la latence de la rponse. Pour cela, un marqueur est inscrit dans le champ de texte
(figure n41) et on clique sur le bouton marqueur lors de lnonciation.

Figure n41 : Champ de texte du logiciel Labscribe2


Pour chaque stimulation, il faut attendre que la rponse se soit stabilise. La rponse
lectrodermale tant connue pour tre une rponse de longue dure et un temps de latence
long, la dure entre deux stimulations peut parfois tre longue (en minutes).
2- Enonc de mots
Des mots dont certains ont priori une connotation motionnelle et dautres non, sont
successivement noncs la personne.
Chaque mot est une stimulation et fera donc lobjet dun marqueur.

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

37

La liste de mots et leur chronologie est la suivante :


Heure
10:53:44.966
10:54:32.451
10:55:17.421
10:56:15.086
10:56:59.931
10:58:02.031
10:59:02.531
10:59:58.596

Mot nonc
crayon
sandwich
thibault
fleur
burette
biscarosse
Mac Do
collier

Heure
11:03:14.946
11:08:04.226
11:08:49.601
11:09:17.701
11:10:19.246
11:11:07.436
11:11:40.866
11:12:13.271

Mot nonc
pops
pierre
crayon
mylne
burette
quitation
voiture
Biscarosse

11:01:00.101
Pops
11:13:26.806
pops
11:01:34.726
voiture
11:01:00.101
mylne
Figure n42 : Liste des mots noncs en tant que stimulation pour une rponse
lectrodermale
3- Enonciation dun mensonge
Il sagit dtudier la rponse lectrodermale de lindividu qui ment.
Quatre objets sont prsents la personne teste qui en choisi un secrtement.
Les quatre objets sont ensuite nouveau prsents dans un ordre diffrent que lors du
choix. Lindividu est alors interrog sur son choix pour chaque objet, chaque objet constituant
Heure

Occurrences et stimulations

11:16:34.704
11:16:50.769
11:17:30.854

Choix de l'objet
Prsentation de lobjet 1
Prsentation de lobjet 2

11:18:20.194

Prsentation de lobjet 3

11:18:53.839
Prsentation de lobjet 4
Figure n43 : Chronologie et liste des occurrences et stimulations pour
lnonciation dun mensonge lors de ltude de la rponse lectrodermale
une stimulation.
La chronologie de ces stimulations est consigne dans le tableau suivant :

4- Stimulations brusques

Les dernires stimulations sont des stimulations brusques au sens o il y a une


action agressive ralise sur le sujet.
Les trois stimulations brusques ralises sont retrouves dans le tableau suivant.

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

38

Heure

Stimulations brusques

11:21:27.073

bisou

11:22:13.238

tirer les cheveux

11:23:34.328
froid
Figure n44 : Chronologie et liste des stimulations brusques lors de
ltude de la rponse lectrodermale

II-Rsultats et discussion
A- Etalonnage
Linspiration force ralise est visible sur la figure n45, ci-dessous o sont
reprsentes les trois voies dacquisition du rythme cardiaque ( cardio ), du rythme
respiratoire ( pneumo ) ainsi que de la rponse lectrodermale ( RED ).

Perturbation du
ryhtme cardiaque

Amplitude de
linspiration force

Dbut de linspiration
force

Dure de la rponse lectrodermale lors de linspiration force


Figure n45 : Rponse lectrodermale (courbe rouge) lors de linspiration force (courbe
verte).

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

39

Lamplitude de la rponse lectrodermale lors de cette inspiration force est de 0,139


units.

B- Enonc de mots
Une bonne analyse des rsultats rside dans le choix des stimuli tudier.
1- Stimulus induisant une rponse lectrodermale
Nous nous intressons la stimulation biscarosse (10h58min02s). Le dcours de la
rponse lectrodermale est reprsent sur la figure n46, suivante.

Latence

Dure de la rponse

Figure n46 : Courbe reprsentative de la rponse lectrodermale lors de lnonc du


mot biscarosse .
On observe une relle rponse au stimulus tant donn le brusque changement dans le
dcours de la courbe.
Ainsi, cette courbe se caractrise tout dabord par un temps de latence qui peut tre
estim 3,22 secondes.
La courbe crot alors de manire significative puis dcrot pour peu prs retrouver
son niveau initial ; on peut estimer que cette rponse a une dure de 45,760 secondes.
0,305
Enfin, son amplitude est denviron 0,305 units, soit
2,19 = 219% ; ltalon
0,139
tant une vraie rponse lectrodermale, et lamplitude de cette rponse tant augmente
Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

40

environ 120% par rapport ltalon, on peut affirmer que la rponse induite par le stimulus
biscarosse est bien significative : le stimulus bien engendr une rponse lectrodermale
chez le sujet.
2- Stimulus ninduisant pas de rponse lectrodermale
Pour la stimulation MacDo (10h59min02s), comme le montre lvolution de la
courbe ci-dessous (figure n 47).

Figure n47 : Courbe reprsentative de lvolution de la conductance pidermique au


cours du temps aprs la stimulation MacDo .
On constate donc que pour une mme nature du stimulus, en loccurrence,
lnonciation de mots, il y a ou non une rponse lectrodermale. Ce nest donc pas, ici, la
nature du stimulus qui induit une rponse mais le mot en lui-mme, sa signification et donc
peut-tre sa connotation motionnelle.
Il est donc probable que le mot biscarosse voque des motions chez lindividu
test.

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

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C- Enonciation dun mensonge


Afin dventuellement dtecter le mensonge grce la rponse lectrodermale, nous
suivons la mme mthode que pour lexercice prcdent.
Lvolution de la conductance pidermique au cours du temps est reprsente sur la
figure n48 ci-dessous :

Figure n48 : Courbe reprsentative de la rponse lectrodermale lors du


questionnement du sujet sur lobjet choisi.
On observe que lors du choix de lobjet, il y a eu une perturbation de la conductance
cutane. De plus, la stimulation , ou en tout cas le fait de poser la question de lobjet
choisi, a t ralise lors de cette perturbation rendant lexploitation dune ventuelle rponse
lectrodermale impossible. Nous nous intressons donc quaux stimulations relatives aux
objets n2, 3 et 4.
Pour ces stimulations, nous ne constatons une perturbation de la rponse cutane que
pour la stimulation relative lobjet n2. A premire vue, cette perturbation ne semble pas
significative.
Sil sagissait dune rponse, on pourrait dire que sa latence est denviron 11,85
secondes et sa dure denviron 3,42 secondes. Cela nest pas cohrent car la latence est plus
longue que la rponse elle-mme.
De plus son amplitude est de 0,028 units, c'est--dire 20% de lamplitude de ltalon.
Tous ces lments nous indiquent que cette perturbation ne peut pas tre considre
comme une rponse lectrodermale.

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

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Ainsi, deux cas sont possibles ; soit lobjet n1 est lobjet choisi mais la rponse
lectrodermale est occulte par la perturbation lors du choix, auquel cas, le manipulateur
aurait d attendre une stabilisation avant de commencer questionner, soit le sujet na tout
simplement pas ragi la stimulation du mensonge.
Dans ce dernier cas, le mensonge ne serait donc pas source dmotion chez le sujet,
dans le contexte de lexprience.

D- Stimulations brusques
Cet exercice nous permet dtayer les hypothses mises pour les deux exercices
prcdents, savoir que la rponse lectrodermale est une rponse qui est la base induite par
une motion.
En effet, la stimulation brusque par dfinition va induire un tat de stress chez le
patient et donc par extension, une motion.
Nous nous intressons la stimulation tirer les cheveux (11h22min13s).
Lvolution de la conductance cutane au cours du temps suivant cette stimulation est
reprsente sur la figure n49.

Figure n49 : Courbe reprsentative de la rponse lectrodermale lors de la stimulation


tirer les cheveux .
La rponse sobserve par un pic de conductance trs franc. On note un temps de
latence long denviron 76,44 secondes. La dure de la rponse est difficile dterminer

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

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puisque quune autre stimulation a immdiatement suivi le pic qui en lui-mme a une
dure de 4,71 secondes. Lamplitude, quant elle, est de 2,713 units, soit 1951,8 % de
lamplitude de ltalon. Cette rponse est donc tout fait significative.
Ainsi, la stimulation brusque a entran chez le sujet une rponse lectrodermale
franche et massive. Ceci nous permet daffirmer que la rponse lectrodermale est trs lie
linduction dun stress, dune motion chez le sujet.
De plus, en comparant, les intensits des diffrentes rponses tudies, on saperoit
quelles sont proportionnelles lintensit du stress ou de lmotion provoque.

Conclusion
Ainsi, la sudation au niveau de cette rgion du corps, induite par lactivit du systme
nerveux vgtatif et plus prcisment par le systme sympathique cre une certaine
conductance cutane. Il existe des variations de ces conductances qui rpondent des stimuli.
Ces variations sont des rponses lectrodermales.
En ralit, ces stimuli sont perus par les organes des sens, traits, intgrs au niveau
de lencphale qui peut induire un tat affectif ou non, selon le stimulus.
Le systme vgtatif tant contrl par lencphale (aux niveaux bulbaire et cortical),
peut alors rpercuter des tats affectifs par des effets somatiques et notamment par une
augmentation de la sudation se traduisant par une rponse lectrodermale.
La rponse lectrodermale est un de ces effets somatiques possibles mais elle nest pas
la seule : augmentation de la frquence respiratoire,
cardiaque, etc.,Cependant,
contrairement ces autres effets, la rponse lectrodermale sobserve pour des variations
minimes de la conductance mais aussi pour des tats affectifs qui sont peut-tre mme non
dcels par le sujet lui-mme : le simple exercice des noncs de mots nous la prouv.
Enfin, noublions pas que les tats affectifs ont eu et ont trs souvent dune manire
gnrale un rapport troit avec lexprience et plus largement la mmoire ; cette dimension
prend forme lors de lintgration et du traitement de linformation au niveau du cerveau.
Ainsi, un individu percevant un signal est influenc lors de cette intgration et cette influence
de la mmoire a galement des effets sur la rponse apporte, en loccurrence, la rponse
lectrodermale. Ceci explique par exemple que certains mots prononcs engendrent une
rponse et dautres non : dans le cas dune rponse lindividu a fait appel sa mmoire, un
souvenir heureux ou malheureux provoquant un tat affectif influenant le systme nerveux
vgtatif qui a induit une rponse lectrodermale.

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

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Liste des figures


Figure n1 : Microscope photonique (vu de face).
Figure n2 : Microscope photonique (vu de profil).
Figure n3 : Schmatisation du systme interne dun microscope photonique classique
Figure n4 : Schmatisation de la thyrode en place, chez lhomme.
Figure n5 : Observation au microscope photonique dune coupe de glande thyrode colore
lhmalun-osine (grossissement X400)
Figure n6 : Observation au microscope photonique dune coupe de glande thyrode colore
lhmatine-osine-safran (fort grossissement).
Figure n7 : Observation au microscope photonique dune coupe de glande thyrode colore
lhmalun-osine (grossissement X400).
Figure n8 : Observation au microscope photonique de lpithlium de follicule thyrodien
color lhmalun-erythrosine-safran (fort grossissement).
Figure n9: Glande lacrymale en place chez lhomme
Figure n10 : Observation au microscope photonique dune coupe de glande lacrymale
(grossissement X400)
Figure n11 : Schma dune unit scrtrice de glande lacrymale
Figure n12 : Coupe histologique dune glande lacrymale de singe, incluse en paraffine
(grossissement X132)
Figure n13 : Schmatisation du pancras en place, chez lhomme.
Figure n14 : Observation au microscope photonique dune coupe de pancras colore
lhmalun-rythrosine-safran (faible grossissement)
Figure n15 : Observation au microscope photonique dune coupe de pancras
(grossissement X400)
Figure n16: Observation au microscope photonique dune coupe dacinus pancratique
colore lhmalun-rythrosine-safran (fort grossissement)
Figure n17: Observation au microscope photonique dun lot de Langerhans colore
lhmalun-rythrosine-safran (fort grossissement)
Figure n18 : Observation au microscope photonique dune coupe de foie sain colore
lhmalun-osine (grossissement X400)
Figure n19 : Observation au microscope photonique dune coupe de foie cirrhos colore
lhmalun-osine (grossissement X400)
Figure n20 : Observation au microscope photonique dune coupe de foie sain (a) et de foie
cirrhos (b) chez le lapin et colore lhmatine-osine (grossissement X400).
Figure n21 : Observation au microscope photonique dune coupe dartre et de veine
(voisines) colores lhmalun-osine (grossissement X40).
Figure n22 : Observation au microscope photonique dune coupe dartre de moyen calibre
colore au trichrome de Masson (fort grossissement).
Figure n23 : Observation au microscope photonique dune coupe de veine colore au
trichrome de Masson (fort grossissement).
Figure n24 : Observation au microscope photonique dune coupe dartre et de veine
colore au trichrome de Masson (fort grossissement).
Figure n25 : Observation au microscope photonique dune coupe de moelle pinire colore
au Dominici (faible grossissement).
Figure n26 : Observation au microscope photonique dune coupe de moelle pinire de
mammifre (grossissement X400).
Figure n27 : Observation au microscope photonique dune coupe de moelle pinire colore
au Dominici (fort grossissement).

Chapitre n3 : Rponse lectrodermale

45

Figure n28 : Coupe histologique dun cerveau de mammifre.


Figure n 29 : Observation au microscope photonique de la relation entre astrocytes et
capillaires sanguins (imprgnation aux sels dargent)
Figure n30 : Schma dune lame de Malassez.
Figure n31 : Schma dune grille de Malassez.
Figure n32 : Photographie dune unopette et dun hmatimtre.
Figure n33 : Protocole dutilisation de lunopette.
Figure n34 : Schma de la technique de frottis sanguin
Figure n35 : Observation au microscope dun des 25 rectangles quadrills de la cellule de
Malassez utilise (grossissement X400)
Figure n36 : Numration des hmaties dans les rectangles quadrills de la cellule de
Malassez.
Figure n37 : Frottis sanguin observ au microscope photonique (grossissement X400) aprs
coloration au M.G.G., chez le rat.
Figure n38 : Formule leucocytaire observe et normale chez Rattus sp
Figure n39 : Amplificateur de la rponse lectrodermale (gauche) et capteur de la
conductance pidermique (droite et gauche)
Figure n40 : Reprsentation de lensemble du dispositif dacquisition.
Figure n41 : Champ de texte du logiciel Labscribe2
Figure n42 : Liste des mots noncs en tant que stimulation pour une rponse
lectrodermale
Figure n43 : Chronologie et liste des occurrence et stimulations pour lnonciation dun
mensonge lors de ltude de la rponse lectrodermale
Figure n44 : Chronologie et liste des stimulations brusque lors de ltude de la rponse
lectrodermale
Figure n45 : Rponse lectrodermale (courbe rouge) lors de linspiration force (courbe
verte).
Figure n46 : Courbe reprsentative de la rponse lectrodermale lors de lnonc du mot
biscarosse .
Figure n47 : Courbe reprsentative de lvolution de la conductance pidermique au cours
du temps aprs la stimulation MacDo.
Figure n48 : Courbe reprsentative de la rponse lectrodermale lors du questionnement du
sujet sur lobjet choisi.
Figure n49 : Courbe reprsentative de la rponse lectrodermale lors de la stimulation tirer
les cheveux .

Liste des figures

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Bibliographie

Ouvrages
GARTNER L. P., HIATT J. L., 2005. Color atlas of histology. Lippincott Williams &
Wilkins, Philadelphia, 439p.

Rfrences lectroniques
ACADEMIE DE ROUEN, 2008. TP : la numration cellulaire. [en ligne].
< http://biotechno.ac-rouen.fr/blp/TPnumerationcellulaire.pdf> (Page consulte le 12 dcembre
2008).

ALTER H. J., CHENG L.-F., ESTEBAN J. M., JIN B., LIU X.-L., QIU Q., SHIH J. W.K., SUN T., WANG H.-D., YANG Y.-S., YAO L., ZHANG Z.-C., 2007. Reversibility of
experimental rabbit liver cirrhosis by portal collagenase administration. [en ligne].
<http://www.nature.com/labinvest/journal/v85/n8/fig_tab/3700304f5.html> (Page consulte
le 12 dcembre 2008).

AMICE J., 2007. Facult de mdecine et des sciences de la sant de


BREST. [CD-ROM]. UBO, Brest.
ANIMAL REPRODUCTION SYSTEMS, 2008. Hemacytometer/Unopette Kit. [en ligne].
< http://www.arssales.com/boar/html/b-hema_unopette.html> (Page consulte le 12 dcembre
2008).

CASEY C., 2007. Thyroid disease and new technology to test for it. [en ligne].
<http://www.associatedcontent.com/article/160506/thyroid_disease_and_new_technology.h
tml?cat=70> (Page consulte le 12 dcembre 2008).
DARLING D., 2008. The internet encyclopedia of science. [en ligne].
< http://www.daviddarling.info/encyclopedia/L/lacrimal_gland.html> (Page consulte le 12
dcembre 2008).

ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES, 2008. Histology and light microscopy. [en


ligne]. <http://www.emsdiasum.com/microscopy/products/digital/histology_scanner.aspx>
(Page consulte le 12 dcembre 2008).

FACULTES UNIVERSITAIRES NOTRE-DAME DE LA PAIX, 2007.


Histologie gnrale. [en ligne].
<http://webcampus.fundp.ac.be/courses/MMEDB151/document/HG/startHG.html> (Page
consulte le 19 dcembre 2008).

FAIRVIEW HEALTH SERVICES, 2007. Health library. [en ligne].


<http://www.fairview.org/healthlibrary/content/aha_pancreas_art.htm> (Page consulte le 12
dcembre 2008).

INTEGRATED PUBLISHING, 2008. Unopette procedure. [en ligne].


<http://www.tpub.com/corpsman/232.htm> (Page consulte le 12 dcembre 2008).
WILD LIFE CONSERVATION SOCIETY, 2008. Necropsie. [en ligne].
<http://www.wcs.org/swhigh_tech_tools/wildlifehealthscience/fvp/168570/guidelinesandpa
pers/necropsymanualfrench/169815> (Page consulte le 12 dcembre 2008).

Bibliographie

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