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Fibrinogne
Mthode de Clauss
Dtermination quantitative de fibrinogne
IVD
Conserver 2-8C
PRINCIPE DE LA METHODE
Le fibrinogne, en prsence dun excs de thrombine, se transforme en fibrine.
Le temps de formation du caillot est inversement proportionnel la
concentration de fibrinogne prsent dans lchantillon de plasma.
La dtermination de fibrinogne par le temps de coagulation de thrombine
1
repose sur la mthode dcrite par Clauss . En prsence de fortes
concentrations de thrombine, le temps ncessaire la formation du caillot dans
le plasma dilu est inversement proportionnel la concentration de fibrinogne.
SIGNIFICATION CLINIQUE
Le fibrinogne (Facteur I), protine synthtis dans le foie, est un composant du
sang utilis pour former le caillot. Sa dtermination nous aide valuer les
altrations dans les mcanismes de la coagulation.
La concentration de fibrinogne augmente au cours des inflammations aigus et
lors de la grossesse ; au contraire, on observe des valeurs faibles dans le cas
des thrapies thrombolytiques, des maladies hpatiques, de la dysfibrinognie
congnitale, de la DIC (Coagulation intravasculaire dissmine) et la
pancratite1.
Le diagnostic clinique doit tre ralis en tenant compte de toutes les donnes
cliniques et de laboratoire.
RACTIFS
R1
Thrombine bovine
R2
Tampon imidazole
R3
Solution kaolin
Optionnel
COAGULATION CAL
CONTRLE NORMAL
CONTRLE PATHOLOGIQUE
Dilution du Calibrateur
1/40
1/30
1/20
1/10
1/5
3,9
2,9
1,9
0,9
0,4
COAGULATION
(mL)
0,1
0,1
0,1
0,1
0,1
Facteur
10/40*
10/30*
10/20*
10/10*
10/5*
Concentration (mg/dL)
0,25*
xc
1* x c
2* x c
Temps (s)
18,1
26,4
49,6
84,7
153
4.
04/03/14
0,5* x c
CALCULS
1. Calculer la moyenne des duplications des temps de coagulation, immdiatement
aprs la fin de la raction. Utiliser les cinq points du calibrateur pour crer une
courbe des temps obtenus (s) par rapport aux valeurs de concentration de
fibrinogne de chaque dilution du Calibrateur (mg/dL).
2. Tracer la meilleure courbe. Examiner la courbe et, si besoin, omettre les points non
linaires. La courbe finale doit comporter au moins trois points conscutifs. Crer la
courbe uniquement avec les points les plus linaires donnera la meilleure
rcupration des contrles et des chantillons de patient.
3. La courbe de calibration suivante a uniquement un caractre dorientation ; elle
varie en fonction du lot, de la concentration du calibrateur et de linstrument utilis.
RF. : 1709101
RF. : 1709104
RF. : 1709106
TRACABILITE
0,33* x c
(c = Valeur du Calibrateur)
3. Dans 0,2 mL de chaque dilution, ajouter 20 L de R3 et mettre temprature
ambiante 37C pendant 4-6 minutes.
4. Ajouter 0,1 mL de ractif R1 et chronomtrer la formation de caillots. Ne pas mettre
temprature ambiante la thrombine R1.
100 u NIH/mL
PRPARATION
R1 : Reconstituer ( ) dans 2,0 mL deau distille. Boucher et mlanger
doucement jusqu dissolution de son contenu. Stabilit : 7 jours 2-8C ou 1
mois 20C, si on le congle immdiatement et quon le conserve dans le
flacon original. Ne pas recongeler.
R2 : Agiter avant emploi.
R3 : Prt lemploi.
CAL
5.
Concentration (mg/dL)
608
304
152
76
38
Concentration (g/L)
6,08
3,04
1,52
0,76
0,38
CONTROLE DE QUALITE
Il convient danalyser avec les chantillons, les srums contrle valus :
CONTRLE NORMAL
RF. : 1709104
Cont.
R1 8 x 2 mL
R2 1 x 100 mL
R3 1 x 3.5 mL