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AS MERAD (2014/15)
Bactries Anarobies
I- INTRODUCTION
1- Dfinition
Ces bactries sont hypersensibles lO2, dpourvues denzymes capables dinactiver les drivs toxiques de
lO2, lO2 nest jamais laccepteur terminal dlectron.
Lnergie est fournie par des ractions de fermentation, ou les donneurs et accepteurs dlectron sont des
composs organiques, qui aboutissent des produits finals de fermentation divers uniques ou mlangs.
La composition et la proportion de ces produits finals ont une action directe sur la valeur du pH et du
potentiel redox et caractrisent des groupes taxonomiques.
Chambre anarobie
Elle permet deffectuer toutes les manipulations et
lincubation des cultures en anarobiose.
Elle utilise un procd dvacuation- remplacement.
Elle contient un mlange gazeux H2, CO2, N2
recycl travers le catalyseur
au palladium grce un
ventilateur.
Elle ncessite une pompe vide.
Jarres anarobies
Ce sont des enceintes en polycarbonate ou mtalliques.
* Le systme physique est quivalent la chambre anarobie, mais les manipulations sont
ralises en arobiose. Il utilise un procd dvacuation- remplacement et ncessite une pompe vide.
Lanarobiose est obtenue trs rapidement.
Pour les Bacteroidaceae (bacilles Gram ngatif), lhmine 5g/ml et la vitamine K 0,5 g/ml sont
ajoutes pour favoriser leur croissance.
La dgradation de la lcithine en actyl choline et diglycride est objective par une opalescence sur
glose luf.
La dgradation des sucres est tudie sur TY additionn de 1% du sucre tudier.
Lidentification rapide est ralise sur galerie type API (API 20A, Rapid ID 32 Ana)
Elle hydrolyse la lcithine en diglycride et phosphoryl choline (la lcithine joue un rle stabilisant des
structures lipoprotiniques membranaires), elle a, donc, un rle important dans le dveloppement des
myoncroses chez lhomme.
Myoncrose du pied
Myoncrose de la main
c)- Entrotoxine
o
4- Diagnostic
-
Prlvements divers : sang, pus, tissus ncross, organes post mortem, selles, aliments.
Isolement : Columbia au sang additionne ou non dinhibiteurs
Incubation en anarobiose, 24 H, 37C, observation de colonies grises double hmolyse
Identification sur galerie API, et recherche lcithinase sur glose loeuf
A partir des selles ou aliments, chauffage 80C, 10mn, avant densemencer sur Columbia au sang
Recherche des gnes codant la toxine alpha et lentrotoxine.
5- Traitement
Pnicilline G
3- Signes cliniques
Le botulisme apparat 02H 08 jours aprs ingestion de laliment souill.
- Forme bnigne
Troubles oculaires (mydriase), dysphagie avec scheresse de la bouche, dysurie, asthnie physique et
sexuelle. La gurison est obtenue aprs 04 06 semaines et les signes disparaissent en sens inverse de leur
apparition.
Troubles respiratoires, paralysie flasque priphrique, tat comateux, atteinte cardiaque parfois et mort dans
10% des cas.
- Forme atypique
Mort subite de ladulte, forme pseudo appendiculaire ou pseudo GEU ou pseudo infarctus du myocarde
4- Diagnostic bactriologique
a)- Prlvements
Aliments contamins, srum des patients, organes post mortem.
5- Traitement
La srothrapie spcifique nest efficace que si elle est instaure avant la fixation de la toxine sur ses
rcepteurs.
Le traitement symptomatique consiste en une rquilibration hydro lectrolytique, une alimentation
parentrale et une assistance respiratoire. La prvention est base sur le respect des rgles dhygine
alimentaire.
III-Clostridium tetani
1- Introduction
Bacille Gram positif, trs mobile, spore ronde terminale en forme de tte dpingle, anarobie strict.
Spores trs rsistantes la chaleur (121C pendant 20mn en chaleur humide). Les formes vgtatives sont
rapidement tues par lO2.
Cultive en 48H dincubation en anarobiose sur Columbia + sang en donnant des colonies transparentes et
envahissantes.
Sur bouillon TGY, odeur de corne brle due lacroline.
Clostridium tetani est responsable du ttanos, toxi-infection du systme nerveux centrale due llaboration
dune toxine appele ttanospasmine et dterminant des paralysies spastiques.
4- Diagnostic
Il est essentiellement clinique (la porte dentre est souvent absente) et la recherche du germe est trs
difficile.
La recherche de la toxine dans le srum et le LCR est alatoire.
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Dtermination dun taux danticorps suffisant dans le srum par ELISA, limine le diagnostic du ttanos.
5- Traitement et prvention
a)- Au niveau de la plaie : dbridement, dsinfection, antibiothrapie
- Traitement immunologique : Ig humaine anti ttani par IM (3000 5000 U) lors de plaie suspecte (les Ig
spcifiques neutralisent la toxine circulante mais pas la toxine fixe)
- Vaccination pour stimuler la rponse immunitaire
- Assistance respiratoire
- Antibiothrapie
- Antispasmodiques (benzodiazpine)
b)- Vaccination prventive 03 injection 01 mois dintervalle, 1er rappel un an aprs, puis rappel tous les
dix ans
cologie de C.difficile
2- Pouvoir pathogne
C difficile est responsable de
- 95 % des colites pseudo-membraneuses
- 15 25 % des diarrhes post-antibiothrapie
Premire cause de diarrhe infectieuse nosocomiale
Les facteurs favorisant linfection sont :
- lacquisition dune souche de C difficile
- lantibiothrapie qui favorise limplantation
- labsence de rponse immune
- la scrtion des toxines
Complications
- mgacolon toxique, perforation colique, choc
- rcidives (20 % des cas), rechutes ou rinfections.
4- Physiopathologie
Adhsion la muqueuse
Variable selon les souches, favorise par des facteurs locaux :
- altrations de la couche de mucus
- destruction de la flore commensale
Toxine A et toxine B encodes par les gnes dun locus de pathognicit tcdA et tcdB, et gnes accessoires
(rgulation)
Inhibent la polymrisation de lactine cellulaire
- destruction des jonctions serres des entrocytes
- libration de cytokines, recrutement de polynuclaires
- diffusion de la toxine B dans les tissus sous muqueux
- inflammation intense, formation des pseudomembranes
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Testsimmunoenzymatiques(ELISA)
dtectiondestoxinesAet/ouB,laidedanticorpsspcifiques
sensibilitvariable(5095%)
parfoiscouplladtectionduneenzymespcifiquedeC.difficile(GDH)
PCR:dtectiondesgnesdestoxines.
b)Miseenvidencedesbactries
Morphologie
assezgrosbacillesrguliersGram+
sporessouventvisibles(subterminales,dformantes)
mobilitdesbactriesnonsporules
Exigencesdecroissance
Anarobiestrict,culturedifficile
- Sur milieu slectif type CCFA (Cfoxitine, Cyclosrine, Fructose, Agar) (colonies jaunes),48h72h
dincubation37C
Sur Columbia au sang additionne dinhibiteurs (colonies grises, mates, opaques contour irrgulier
Caractres biochimiques
- Fermente le glucose, mannitol et lvulose, hydrolyse de lesculine, estrase C4 et leucine arylamidase
positives, produits terminaux de fermentation : AA, A iso butyrique, A iso valrianique et A iso caproque.
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Antibiogramme
rsistanceauxcphalosporines
sensibilitconstanteauxnitroimidazols,glycopeptidesetacidefusidique
sensibilitnaturelleauxmacrolides,maisrsistancesacquises
PCRribotypeO27,pulsotypeNAP1,toxinotypeIII
7Traitementetprvention
Miseencausedesfluoroquinolones
Arrtdelantibiothrapieinitiale
25%degurisondansles7872h
Persistancedessymptmes,arrtdelantibiothrapieimpossible
mtronidazole(2x500mg/j,10j,peros)
Vancomycine(4x125mg/j,10j,peros)
Rcidives
curesrptesMtronidazoleet/ouVancomycine
Etventuellement
rhydratation,soinsintensifs,chirurgie(colectomie)
Letraitementdesporteurssainsnestpasrecommand
Diagnosticetsignalement
casgroupsetinfectionssvres:rechercheactivedautrescas
culture,etexpertisedessouches
signalementdanslesunitsdesoins
Isolementgographique,dsinfectionetprventiondumanuportage
informationetsignalisationdespatients
hypochloritedesodium0,5%pourlessurfaces
lavagedesmains(Btadine),portdegants
Revuedespratiquesdantibiothrapie
B- Prevotella sp
- Commensale de la sphre oropharynge
- Besoin en hmine et vitamine K
- Culture lente sur Columbia au sang (5 7 jours), avec
colonies noires, brunes ou grises
- Glucidolytique
- Inhib par bile et vert brillant
- Protase : dgrade les Ig A, Ig M, Ig G et facteurs du
complment, donc
sensibilit de lorganisme aux infections
- Collagnase : destruction des tissus connectifs gingivaux et priodontaux, donc infections parodontales
- Fibrinolysine et fibrinognolysine
- Scrtion de cphalosporinase (id B fragilis)
C- Porphyromonas sp
-
D- Fusobacterium sp
- Commensale de la sphre oropharynge
- Certaines espces sont fusiformes (F nucleatum)
- Croissance en 72 H avec odeur ftide due la production dindole
par certaines espces
- Peu ou pas Glucidolytique
- Produit majeur de fermentation : acide butyrique
- Endotoxine
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