Candidature au Concours National

De maitrise d’Assistanat de
l’Enseignement Supérieur

Session: 2015

Discipline: Sciences Biologiques

Candidat: Sarra KLAI

 Diplômes
o Septembre 2000-Juin 2004
Maîtrise en Sciences de la Vie et de la Terre, FST

4/4; Passable

oSeptembre 2004 – Décembre 2006 :

Mastère de Génétique et Bioressources, FST
1er année de mastère: Assez Bien, 2ème année de mastère :
Très bien

o Avril 2008-Juillet 2011

Thèse de Doctorat en Biologie; Spécialité: Génétique et
Biologie moléculaire, FST
 I
Activités de recherche
 Mastère
Spécialité
Génétique et Bioressource

Laboratoires d’accueil

 Laboratoire de Biologie moléculaire, Hôpital Militaire de Tunis

 Laboratoire d’Immunologie, Hôpital Militaire de Tunis

Thématique de recherche
Thrombophilie et grossesse
 La Thrombophilie

• Thrombophilies héréditaires

• Thrombophilies acquises

• Thrombophilies mixtes
 La MTEV maternelle

5 fois plus importante que dans la population

générale.

0.5 à 3‰ de grossesses.

¾ des cas survinennent durant la grossesses et ¼

durant le post partum.
 La pathologie vasculaire
placentaire

PFTR RCIU PEC HRP

 OBJECTIF DE TRAVAIL

Détecter les différents polymorphismes génétiques:

La mutation du facteur V Leiden.

La mutation G20210A du gène de la prothrombine.
La mutation C677T du gène de la MTHFR.
 
 
La recherche des déficits en inhibiteurs de la coagulation
(déficits en Antithrombine, protéine C et S).

La recherche de SAPL.
 Matériels et méthodes
31 patientes

30 témoins

La mutation du facteur V Leiden

Le déficit en protéine S
Le SAPL
 Thèse de doctorat
Spécialité
Génétique et Biologie moléculaire

Laboratoires d’accueil
 Laboratoire de Biologie moléculaire, Hôpital Militaire de Tunis
 Laboratoire d’Immunologie, Hopital Militaire de Tunis

Thématique de recherche
Implication de la Thrombophilie dans la survenue de pathologies
Vasculaires Thrombotiques et Placentaires
 OBJECTIF DE TRAVAIL

Détecter les différents polymorphismes génétiques:

La mutation du facteur V Leiden.
La mutation G20210A du gène de la prothrombine.
La mutation C677T du gène de la MTHFR.
La mutation A1298C du gène de la MTHFR.
la recherche de la prévalence du groupe sanguin non O

La recherche des déficits en inhibiteurs de la coagulation

(déficits en Antithrombine, protéine C et S).

La recherche de SAPL.
Dépistage de l’hyperhomocytéinémie.
PATIENTES, MATERIELS ET
METHODES
 TVP (N=54)

MTEV maternelle
EP (N=30)
(N=99)
◘ Un groupe patholoique
TPC (N=15)
(N=302)
PVP (N=203)

PFTR (N=63) RCIU (N=50) PEC (N=44) HRP (N=46)

◘ Un groupe témoin
(N=100)
 Etude des polymorphismes
génétiques 

Extraction d’ADN.

Amplification multiplex.

Hybridation inverse.

Révélation chromogénique.
 Extraction d’ADN
«
 DNA Blood Mini Kit® » (QIAGEN
GmbH, Hilden)
PCR multiplex
Hybridation inverse (Reverse Dot Blot)
Etapes de l’hybridation inverse
et révélation chomogénique
(kit ThromboType®plus.)
Evaluation et interprétation des
résultats 
 Analyse statistique
L'équilibre de Hardy-Weinberg a été vérifié pour chaque polymorphisme.

Un test t-Student : les variables quantitatives.

Un test Chi² ou un test exact de Fisher: les variables qualitatives .

Calcul de l’Odds ratio (OR).

Une probabilité p<0.05 a été considérée comme statistiquement
significative.

La correction de Bonferroni pour les tests multiples.

α = p/nombres de tests
 Prévalence du groupe sanguin non-O chez le groupe de MTEV, les
groupes de PVP et le groupe contrôle

MTEV PVP (n=303) Contrôles

PFTR RCIU PEC HRP

(n=99) (n=100)

(n=63) (n=50) (n=44) (n=46)

GS non-O (%) 66 (66.7) 22 (34.9) 28 (56) 15 (34.1) 18 (39.1) 31 (31)

OR (IC 95%) 4.4 (2.5-8.1) 1.2 (0.61–2.33) 2.8 (1.4-5.7) 1.15 (0.5- 1.43 (0.7-2.96)

2.45)
P <10-3 0.603 0.003 0.334

0.714
Etude des marqueurs
thrombophiliques 
Prévalences des polymorphismes, FVL et FII G20210A, chez le
groupe de MTEV et chez le groupe témoin

Génotypes MTEV Témoins OR (IC 95%) P

n=100 (%)
n=99 (%)

FV Leiden1 27 (27.27) 3 (3) 12.12 (3.4-41.5) <10-3

GA 22 (22.22) 3 (3) 9.2 (2.7-32) <10-3

AA 5 (5.05) 0 (0) 2 (1.8-2.4) 0.023

A 0.17 0.03 7.8 (2.3-26.6) <10-3

FII G20210A1 7 (7.1) 0 (0) 0.007

GA 7 (7.1) 0 (0) 0.007

AA 0 0 (0)

A 0.04 0 0.007
 Prévalences du polymorphisme FVL chez les différents
groupes de PVP et chez les témoins
PVP (n=203) PFTR vs T RCIU vs T HRP vs T
Témoins
PFTR RCIU HRP
(n=100)
n=63 (%) n=50 (%) n=46 (%)
P* OR ; P* OR ; P* OR ;

(CI 95%) (CI 95%) (CI 95%)

FV L1 6 (9.54) 5 (10) 9 (19.6) 3 (3)

0.54 1.65 0.118 3.59 0.002 7.9
(0.51-5.4) (0.82–15.7) (2-30.7)
GA 3 (4.77) 2 (4) 7 (15.22) 3 (3)
0.677 1.61 1 1.35 (0.22- 0.001 5.8
(0.32-8.3) 8.33) (1.4-23.6)
AA 3(4.77) 3 (6) 2 (4.35) 0
0.056 0.036 0.098

A 0.12
0.07 0.08 0.015
0.013 5 0.008 5.7 <10-3 8.8
(1.34-19) (1.8-22) (2.4-32.4)
 Prévalence des déficits en inhibiteurs de la
coagulation chez les patientes avec PVP et
chez les témoins
PVP n=203 Contrôles
n=100
PFTR RCIU PEC HRP

n=63 (%) n=50 (%) n=44 (%) n=46 (%)

Déficit en AT 0 (0) 1 (2) 1 (2.3) 2 (4.3) 1 (1)

OR (IC 95%) 1 2 (0.12–32.9) 2.3 (0.14–37.6) 4.5 (0.4–50.95)

0.519
*P 1 0.234

Déficit en PC 2 (3.2) 5 (10) 0 (0) 2 (4.3) 2 (2)

OR (IC 95%) 1.6 (0.22–11.7) 5.44 (1–29.14) 1 2.23 (0.3–16.33)

*P 0.641 X
0.041 0.59

Déficit en PS 0 (0) 3 (6) 2 (4.5) 0 (0) 3 (3)

OR (IC 95%) 0.284 2.06 (0.4–10.61) 1.54 (0.25–9.55) 0.552

*P 0.4 0.641
ARTICLE 1 :
ARTICLE 2 :
L’élévation du taux d'homocystéine et les
deux polymorphismes, C677T et A1298C,
de la MTHFR
 Moyenne et écart-type du taux d'homocystéine chez les
groupes de MTEV, de PVP et chez les témoins

Moyenne du taux P
d'homocystéine µmol/l ±
écart-type
MTEV (n=99) 6.12±3.28 0.052

PFTR (n = 63) 9,43±3,027 P < 10-3

RCIU (n = 50) 8,03±1,39 P< 10-3

PEC (n =44) 7,78±1,39 P=0.001

HRP (n =46) 9,59±2,35 P < 10-3

Contrôle (n = 100) 6,07±2,17

Etude des polymorphismes C677T et
A1298C de la MTHFR 
 Prévalences du polymorphisme A1298C de la MTHFR
dans les 4 groupes de PVP et chez les témoins
PVP (n=203)
MTHFR Témoins PFTR vs T RCIU vs T PEC vs T HRP vs T

PFTR RCIU PEC HRP n=100

n=63 (%) n=50(%) n=44( %) n=46(%) P* OR ; P* OR ; P* OR ; P* OR ;

(%)

(CI 95%) (CI 95%)

(CI 95%) (CI 95%)
0.001 4.52 0.001 4.7 0.73 1.33 <10-3 7.8
A1298C 16 (25.4) 13 (26) 4 (0.9) 18 (39.1) 7 (5)
(1.74-12.6) (1.72-11.5) (0.37-4.8) (2.94-20.6)

14(22.3) 12(24) 4 (0.9) 10 (21.7) 0.005 3.8 0.003 4.2 0.1mmmm 0.01 3.7
AC 7 (7)
(1.4-10) (1.5-11.5) mmm (1.3-10.4)
  0.333 0.008 NA < 10-3
CC 2 (3.1) 1(2) 0 8 (17.47) 0 (0)

C 0.14 0.14 0.27 < 10-3 4.6 0.001 4.5 0.741 1.3 < 10-3 10.9
0.05 0.03
(1.9-11.4) (1.7-11.5) (0.4-4.6) (4.5-26.2)
 Influence des polymorphismes C677T et A1298C de la
MTHFR sur l’élévation des taux plasmatiques
d’homocystéine
MTHFR C677T P
C/T(n=117) T/T(n=2)
C/C (n= 184)
Moyenne du taux 7.85±2.91 0.342
d'homocystéine 7.51±2.56
µmol/l ± écart-
type

MTHFR A1298C
A/C(n=25) C/C(n=28) 0.03
A/A (n=250)
Moyenne du taux 9.18±2.1
d'homocystéine 7.6±2.9
µmol/l ± écart-
type
ARTICLE 3 :
  Etude de SAPL
 Prévalence des anticorps aPL chez les patientes
avec MTEV, avec PVP et chez les témoins

MTEV PFTR RCIU HRP PEC Témoins

n=99 (%) n=63 (%) n=50 (%) n=46 (%) n=44 (%) (n=100)

aPL 9 (9.1) 26 (41.27) 7 (14) 4 (8.7) 7 (15.9) 1(1)

OR (IC95%) 1 (0.38–2.66) 16.87 (5.5–51.63) 3.9 (1.08–14.05) 2.28 (0.55–9.58) 4.54 (1.25–16.42)

P 0.98 <10−3 0.04 0.26 0.035  

 Prévalence des AL et d’aCL IgG chez les patientes avec MTEV,
les 4 groupes de patientes avec PVP et chez les témoins

aPL MTEV PFTR RCIU HRP PEC Témoins

n=99 (%) n=50 (%) n=46 (%) n=44 (%) n=100 (%)
n=63
(%)
AL 6(6.1) 7(11.1) 0(1) 1(2,2) 2(4.5) 1(1)

OR (IC95%) 6.39 (0,7554.1) 12.4 (1.48-103.1) 1 2.2 (0.13-35.9) 4.71 (0.42-53.42)

*P 0.065 0,006 0.532 0.22

aCL IgG (%) 1(1) 15(23.8) 6(12) 2(4.3) 3(6.8) 2(2)

OR (IC95%) 0.5 (0.045-5.1) 15.31 (3,37-69.7) 6.7 (1.30-34.4) 2.23 (0.3-16.33) 3.6 (0.58-22.26)

*P 1 <10-3 0.017 0.59 0.17

ARTICLE 4 :
ARTICLE 5 :
 Conclusion
La systématisation d’un bilan biologique complet de
thrombophilie chez toute femme enceinte.

 Le groupe sanguin soit pris en considération lors de

l’évaluation du niveau de risque pathologique des
patientes.
LIVRE :
Autre thématiques de recherche
ARTICLE 7 :
ARTICLE 8 :
ARTICLE 9 :
ARTICLE 10 :
 Communications scientifiques
Congrès internationaux

 2ème congrès International de l’AMB, 25-28 Mars 2007.

 37ème congrès Mondial de Médecine Militaire, 20-25 Mai 2007, Tunisie.

 XIth Pan Arab Union of Neurological Societies Meeting and XIIIth

Meeting of the Tunisian Neurological Society, 25-26 Octobre 2007, Tunis.

 3ème congrès International de Biotechnologie, 24-27 Mars 2008.

1er Congrès International Francophone de la FIFBCML, 28 Avril au 1er

Mai 2010.
 Communications scientifiques

Congrès nationaux

 17ème Congrès National de Gynécologie Obstétrique, 15-18 Novembre

2007.

 XXIIème Journées Nationales de Biologie Clinique, 12-13-14 Juin 2008.

 XIIème Congrès médical Militaire, 14-15 Décembre 2009.

 XXIIIèmes Journées Nationales de Biologies Cliniques, 14-15-16 Mai

2009.

 5ème Journée de Médecine d’Unité, 2 Avril 2010.

 26éme journées Nationales de Biologie Clinique, 24-25-26 Mai 2012.

 II
Stages
et expérience
pédagogique
 Stages
• Stage d’Initiation aux techniques de laboratoire : 6
mois (du 01 juin au 30 Novembre 2005) au service
d’Hématologie-Immunologie.

• Stage d’initiation à la vie professionnelle : un an (du

01 aout 2007 au 31 Juillet 2008) au Service
d’Hématologie de l’Hôpital Militaire de Tunis.

• Stages Postdoctoraux : 9 mois (du 01 août 2011

au 31 avril 2012 et du 15 mois (du 01 janvier 2013 au 31
Mars 2014) au laboratoire de biologie moléculaire de
l’Hôpital Militaire de Tunis.
ARTICLE 11 :
ARTICLE 12 :
ARTICLE 13 :
ARTICLE 14 :
 Activités pédagogiques

Enseignement de génétique formelle à l’Institut Supérieur

de Technologies Médicales de Tunis pour l’année
universitaire 2014-2015.
 Activités pédagogiques
(Encadrement et co-encadrement de recherche )

• 2009-2010
Projet de fin d’étude à l’Institut Supérieur des Technologies Médicales de
Tunis
Implication de la mutation du gène de facteur V dans l’insuffisance rénale 

• 2010-2011
Projet de fin d’étude à la faculté des sciences de Tunis
Thrombose de la fistule chez les patients hémodialysés, Implication du gène
de la MTHFR 

• 2010-2011
Projet de fin d’étude à la faculté des sciences de Tunis
Implication des allèles DRB1, HLA Classe II dans le diabète Type II 
2011-2012
- Projet de fin d’étude à l’Institut Supérieur des Technologies Médicales de Tunis
Implication des mutations du gène de la MTHFR dans les pertes fœtales tardives à
répétitions 

-Mastère de recherche en Génétique et Bioressources à la faculté des Sciences de

Tunis « Implication des mutations C677T et A1298C du gène méthylène tétra-
hydrofolate réductase (MTHFR) chez le diabète type 1

2013-2014

- Projet de fin d’étude à l’Institut Supérieur des Technologies Médicales de Tunis

L’impact de la mutation C677T de la MTHFR sur la survenue de  pertes fœtales
tardives à répétition  
MERCI POUR VOTRE
ATTENTION