Sommaire

1. Introduction

Les salles blanches

Les salles propres

2. Arocontamination
3. Normes et classes dempoussirement
4. Matrise de la qualit de lair
5. Conception

M2 Sciences du mdicament
UE mthodes analytiques en contrle qualit
2015-2016

6. Hottes de scurit
7. Exemples

1. Introduction - Dfinitions

1. Introduction - Dfinitions
1960 : NASA "clean room"
=> outil de production qui permet de limiter les
risques de contamination grce la "matrise des
ambiances"

=> dnominations :
- Salle blanche
- Zone dEmpoussirement Contrl (ZEC)
- Zone Contamination Contrle
- Salle microbiologiquement matrise

Une des premires

salles propres aux EtatsUnis (1955) - Montage
de gyroscopes

1. Introduction - Dfinitions
Dfinition de l ASPEC (Association pour la Prvention et ltude
de la Contamination) :
Ensemble de volumes fractionns dans lesquels les paramtres
matriels et logistiques qui ont une influence directe ou indirecte sur
la qualit (particulaire ou microbiologique) de lactivit ou de la
production sont connus et matriss
Dfinition selon la norme NF EN ISO 14 644-1, juillet 1999 :

1. Introduction - Dfinitions

Contaminant : lment indsirable dans un fluide, sur une

surface ou dans un espace protg pouvant produire un
effet indsirable sur le produit ou le procd.

Autres notions :

Salle propre : salle dans laquelle la concentration des particules en

suspension dans lair est matrise et qui est construite et utilise de
faon minimiser lintroduction, la production et la rtention de particules
lintrieur de la pice et dans laquelle dautres paramtres pertinents,
tels que la temprature, lhumidit et la pression, sont matriss comme il
convient

- biocontamination (microorganismes = particules

viables)

Zone propre : espace clos ou ouvert, situ ou non lintrieur dune

salle propre, dans lequel ()

- contamination chimique ou molculaire (non

particulaire)

- contamination particulaire (poussires =

particules inertes)

1. Introduction - Dfinitions

2. Arocontamination

Secteurs concerns :
lectronique et secteurs de pointe : semi-conducteurs, micro technologies,
cartes puce, montages lectroniques
arospatial, optique de prcision, micromcanique, horlogerie, nuclaire ...
Industries de la sant : chimie fine, produits pharmaceutiques striles et non
striles, sang et drivs du sang, dispositifs mdicaux, produits de diagnostic,
cosmtique, animaleries protges ...
Hpital : Blocs opratoire, salles de ranimation, chambres aseptiques,
pharmacies hospitalires, laboratoires de recherche...
biotechnologies : Units de production, laboratoires de recherche...
Agroalimentaire : produits carns, plats cuisins, lait et produits laitiers,
produits de la mer, pain et ptisseries fraches, boissons, restauration
collective, levage industriel...

2.1. Caractristiques de l'air et arocontaminants

On peut caractriser lair par :
- des paramtres physiques (TC, P, humidit)

- un niveau de puret (micro-organismes, particules )

milieu fluctuant et htrogne

Autres secteurs : peinture automobile, transformation du plastique et

caoutchouc, verrerie, tous les laboratoires de recherche, ...

2. Arocontamination

2. Arocontamination

Matrise de la contamination ?
facteurs lorigine de la contamination
( sources, vecteurs, microorganismes )
mthodes de mesure dans lair, dans leau et sur
les surfaces
dmarche AQ base sur la prvention et le contrle

Sources et vecteurs de la contamination

Main-duvre
Matires
Mthodes

2.2. Les contaminants particulaires

a) Origine et nature des contaminants :
= exogne (milieu extrieur)
pollution automobile, flore
= endogne (dans le local lui-mme)
mcaniques (machines, surfaces, chauffage )
hommes +++

Milieu
Matriel

2. Arocontamination

La parole : gouttelettes de Flgge

Les squames cutans
Les cils, poils, cheveuxmaquillage
Les mouvements
nombre limit de personnes

2. Arocontamination

Gouttellettes de Flgge

Exemples de quantits de particules mises en fonction de

lactivit humaine ( /minute) :

Particules D 0,5 m
700 000
1 400 000

Activit
toux
ternuement

100

paroles: lettre P

180

parole: syllabe Pr

15 - 20 000

conversation: 1 min.

2. Arocontamination

2. Arocontamination

b) Taille des contaminants particulaires :

Exemple en lectronique :

Particule ultrafine : < 0,1 m ; Macroparticule : > 5 m

2. Arocontamination

2. Arocontamination

c) Concentration des contaminants

= trs variable suivant le milieu considr
= varie selon la finesse des particules (+/- sdimentation )
Diamtre
100 m
10 m
1 m
0.1 m
0.01 m

Temps de chute (1
m)

Longvit

qq secondes
5 min
9h
38 j
10 ans

Arosol
temporaire

0.001 m

Arosol
permanent
Arosol
permanent

2. Arocontamination

Comparaison du nombre de poussires (> 0,5 m) en

fonction de l'environnement

Milieu
Campagne, temps calme
Petite ville, temps calme
Centre urbain, forte activit
Site industriel lourd
Atelier mcanique
Bureaux
Salle blanche microlectronique

Concentrations
particulaires
(nombre / m3)
10 000 000
20 000 000
200 000 000
400 000 000
100 000 000
25 000 000
4 000

2. Arocontamination

2.3. Les biocontaminants

Bactries

Organismes unicellulaires
Taille : m
Concentrations usuelles 200-1500 UFC / m3

Champignons
Micromyctes

Organismes pluricellulaires
Taille : m
Spores
Concentrations usuelles 2000 spores / m3

Virus

Macromolcules
Taille : nm
Prsence dans lair non quantifie

Biocontamination :
prsence de microorganismes vivants pouvant
entraner, chez lhomme ainsi que sur les produits de
fabrication, des perturbations qualitatives ou
quantitatives, immdiates ou diffres.

3. Normes - classes dempoussirement

Pourquoi des normes ? Pour dfinir des niveaux (= classe)
dempoussirement maximums selon les activits

3.1. Anciennes normes (ne sont plus utilises)

3. Normes - classes dempoussirement

3.2. Norme ISO 14644 "Salles propres et

environnements apparents" juillet 2009
remplace les normes franaises et amricaines

- normes franaises (NF X 44 101 et NF X 44 102) qui

dfinissaient 3 classes : 4 000, 40 000 et 4 000 000)
- normes amricaines (FS209 Federal Standard) qui
dfinissaient les classes 1, 10, 100, 1000, 10 000 et 100 000
exemples :
Classe 100 (FS209) : un pied cube dair (environ 28dm3)
comporte au max. 100 particules (de 0,5 5 m de diamtre)
Classe 4 000 (NF) : au max. 4 000 particules /m3

3. Normes - classes dempoussirement

Partie 1: Classification de la propret de l'air (1999)

Partie 2 : Spcifications pour les essais et la surveillance en vue de dmontrer le
maintien de la conformit avec l'ISO 14644-1 (2000)
Partie 3 : Mthodes d'essai (2005)
Partie 4 : Conception, construction et mise en fonctionnement (2001)
Partie 5 : Exploitation (2004)
partie 6 : Vocabulaire (2007)
Partie 7 : Dispositifs sparatifs (postes air propre, botes gants, isolateurs et minienvironnements) (2004)
Partie 8 : Classification de la propret chimique de lair (2006, rvise 2013)
Partie 9 : Classification de la propret chimique des surfaces par la concentration en
particules (2012)
Partie 10 : Classification de la propret chimique des surfaces (2013)

3. Normes - classes dempoussirement

En projet :

Equivalences de classification ISO14644 / FS209

Partie 12: Classification de la propret de l'air en fonction de la concentration des
nanoparticules

ISO3 = classe 1 selon FS209

Partie 13: Nettoyage des surfaces afin d'obtenir des niveaux de propret par
rapport aux classifications particule et chimique

ISO4 = classe 10 selon FS209

ISO5 = classe 100 selon FS209

Partie 14: valuation de la compatibilit des quipements l'emploi en salle

propre en termes de propret particulaire

ISO6 = classe 1 000 selon FS209

ISO7 = classe 10 000 selon FS209
ISO8 = classe 100 000 selon FS209
ISO9 = classe 1 000 000 selon FS209

3. Normes - classes dempoussirement

3. Normes - classes dempoussirement

Classes de propret particulaire de lair spcifies dans la NF EN ISO 146441:1999

m 3)

Concentrations maximales admissibles ( particules /

particules de taille > celles donnes ci-dessous
Numro
de

0,1m

0,2m

0,3m

0,5m

1m

en

10

ISO3 et ISO4 (classe 1 et 10) : microlectronique

ISO5 (classe 100) : microlectronique, chimie fine,
pharmacie

5m

classification

ISO 1

Exemples de qualit exige selon lactivit :

ISO6 (classe 1 000) : lectronique, pharmacie,

agroalimentaire, optique

ISO 2

100

24

10

ISO 3

1 000

237

10

35

ISO 4

10 000

2 370

1 020

352

83

ISO 5

100 000

23 700

10 200

3 520

832

29

ISO 6

1 000 000

237 000

102 000

35 200

8 320

293

ISO 7

352 000

83 200

2 930

ISO 8

3 520 000

832 000

29 300

ISO 9

35 200 000

8 320
000

293 000

ISO7 (classe 10 000) : lectronique, pharmacie,

agroalimentaire, spatiale, horlogerie de prcision,
mcanique de prcision, biotechnologies

ISO8 ( classe 100 000) : lectronique, pharmacie,

agroalimentaire, spatiale, mcanique de prcision,
optique, biotechnologies...

3. Normes - classes dempoussirement

3.3 Norme ISO 14698 "Salles propres et environnements

apparents - Matrise de la biocontamination" 2003

3. Normes - classes dempoussirement

3.4. Classification de la qualit de lair selon les

BPF (2011) (bonnes pratiques de fabrication)
Au repos

Partie 1 : Principes gnraux et mthodes (2003)

Nombre maximal autoris de particules par m3 de taille

gale ou suprieure aux tailles prcises.

Partie 2 : valuation et interprtation des donnes de

biocontamination (2003, corr 2004)

autres normes : AFNOR, BPF, guides ASPEC...

3. Normes - classes dempoussirement

Exemples doprations qui doivent tre ralises

dans les diffrentes classes :

En activit

0.5 m

5 m

0.5 m

5 m

3520

20

3520

20

3520

29

352000

2900

352000

2900

3520000

29000

3520000

29000

ND

ND

3. Normes - classes dempoussirement

BFP : surveillance microbiologique durant la

production :
Limites recommandes de contamination microbiologique (air et
surfaces)

Classe

Oprations sur des prparations aseptiques

Prparation et remplissage aseptiques.

Prparation et remplissage aseptique (environnement

immdiat dune zone A)

C
D

Prparation de solutions destines tre filtres.

Classe Air ufc/m3

Boite Ptri
ufc/4h

Contact
ufc/plaque

Empreinte gant
ufc/gant

<1

<1

<1

<1

10

100

50

25

200

100

50

Prparations strilises dans leur rcipient final.

Dfinir seuils dalerte et daction, mesures correctives

3. Normes - classes dempoussirement

4. Matrise de la qualit de lair

3.5. Normes de propret bactriologique

4.1. Introduction
La norme NF S 90-351 prsente les classes de propret
bactriologique (tat doccupation au repos)
Classe bactriologique
B 100

Concentration maximale
en UFC /m3
100

B 10

10

B5

B1

Paramtres essentiels pour assurer la matrise de la

contamination :
Traitement de lair entrant : par filtration ou par cascade
de pressions
Matrise du systme de diffusion de lair : taux de
brassage et de renouvellement, systmes de captation
et vacuation de la contamination
Matrise de la temprature, hygromtrie et pression
...

4. Matrise de la qualit de lair

4.2. La filtration de lair

4. Matrise de la qualit de lair

b) Mcanismes de filtration

a) But :
Sparer au
moyen dun
filtre*, les
particules solides
ou liquides des
fluides (gaz ou
liquides) dans
lesquels elles
sont en
suspension.

a) Effet de tamisage : la particule

est arrte car son diamtre est
suprieur lespace libre entre 2
fibres
Rtention mcanique
Prfiltration de lair
Pas pour les zones sensibles

Les particules restent prises cause de leur taille

(quand particules de grande taille)

4. Matrise de la qualit de lair

b) Effet dinertie
Les particules avec une
masse importante ont une
inertie suffisante pour quitter
le flux dair et se fixer sur la
fibre

Les particules restent prises cause de leur inertie

de masse (quand masse des particules leve).

4. Matrise de la qualit de lair

d) Effet de diffusion
Filtration base sur la
probabilit de rencontre entre
une particule de petite taille et
la fibre ;
par effet du mouvement de
Brown (dplacement au
hasard), les particules les plus
fines entrent en collision avec
les fibres du filtre
Les particules restent prises cause de l'effet du
mouvement molculaire de Brown

4. Matrise de la qualit de lair

c) Effet dinterception
Particules lgres
"frlant" la fibre se fixent
dessus

Les particules restent prises par attraction (quand

les particules sont relativement petites).

4. Matrise de la qualit de lair

Lefficacit globale du filtre est le rsultat des 4

mcanismes de base de filtration : tamisage, inertie,
interception et diffusion
c) 3 grandes familles de filtres
a) Filtre de moyenne efficacit ( M E )
- pr-filtres, filtres gravimtriques* ou dgrossisseurs
- effet de tamisage et dinertie
- sparation particules > 5 m uniquement
- bureaux

4. Matrise de la qualit de lair

4. Matrise de la qualit de lair

b) Filtre de haute efficacit ( H E )

- filtres fins, filtres opacimtriques*
- effet dinterception et de diffusion++
- protgent les filtres absolus
- bureaux, ind. pharmaceutique et milieu hospitalier

Filtres (souvent succession de

filtres defficacit diffrente)

Ventilation
Air neuf

c) Filtres de trs haute efficacit ( T H E ) = filtres absolus

HEPA, ULPA
- fibres charges lectriquement
- effet dinterception et de diffusion++
- salles propres, blocs opratoires
HEPA : high efficiency particulate air
ULPA : Ultra-low penetration air

Salle banche

Reprise dair

4. Matrise de la qualit de lair

4. Matrise de la qualit de lair

4. Matrise de la qualit de lair

4. Matrise de la qualit de lair

d) Caractristiques dun filtre

I : quantit de
particules
incidentes

e) Mthodes dessai
E : quantit
de particules
mergentes

I-E : quantit de
particules retenues
par le filtre

Rsultat toujours suivie de la mthode avec laquelle on les a

valu (gravimtrique*, opacimtrique*)
Rendement en %
R = [ (I-E) / I ] x 100

Permance en %
P = (I / E) x 100

Mthode gravimtrique (masse) :

pour filtres M E
pese masse de poussire avant et aprs
efficacit pondrale

Mthode opacimtrique ou la tache (surface) :

pour filtres H E
comparaison de la tache forme par la pollution
sur papier filtre

Coefficient dpuration (sans dimension)

CE = I / E

4. Matrise de la qualit de lair

4. Matrise de la qualit de lair

Colonne de filtration :

Test DOP (dioctylphtalate) (nombre) :

pour filtres THE
gnrateur thermique de particules de DOP, arosol
mono dispers de 0,3 m.
Lecture photomtrique en amont et aval du filtre

3 Niveaux de Filtration possibles

- Filtration moyenne efficacit
filtre 95% gravimtrique (>5m)
- Filtration Haute efficacit
filtre 95% opacimtrique (>0.5m)
- Filtration absolue
filtre 99,99% DOP HEPA (>0,3m)

Autres tests pour filtres THE :

- Arosol de NaCl (0,02 2m) et spectromtrie de
flamme
- Arosols fluorescents d uranine (0,17m) et
dtection fluorimtrique

4. Matrise de la qualit de lair

4.3. La surpression
But : viter lentre dair incontrl
Rsultat : salles propres en SURPRESSION
En pratique : dbit de soufflage suprieur au dbit
dair repris
Ncessit dune tanchit parfaite, et de la
discipline du personnel :

4. Matrise de la qualit de lair

Exemple de conception : la cascade des pressions

(valeurs guides BPF : 10 15 pascals)

Extrieur 0 Pa
+ 15 Pa
+ 30 Pa

pas de porte ouverte !

Cration de sas*

+ 45 Pa

Sas : local ou zone intermdiaire qui est habituellement

ventil et utilis pour contrler le transfert dair
contamin dune zone lautre

4. Matrise de la qualit de lair

4. Matrise de la qualit de lair

4.4. Contrles de paramtres physiques

Dbit dair : mesure des vitesses de lair dans une
section de gaine
Taux de brassage :
dbit dair souffl / volume du local
(permet dliminer les contaminations particulaires
produites dans le local)
Taux de renouvellement :
dbit dair neuf souffl / volume du local
(dpend de ltanchit du local, de son volume, de
lactivit dans le local, ...)

Pression diffrentielle de lair :

valide les cascades de pression
Visualisation de lcoulement dair :
gnrateurs de fume pour suivre le
trajet de lair (mthodes proposes
dans ISO 14644-3)
Temprature : valuation du systme de rgulation
maintenir la temprature dans la plage fixe
Humidit (vapeur deau = contaminant molculaire)

4. Matrise de la qualit de lair

4. Matrise de la qualit de lair

4.5. Diffusion de lair

flux turbulent avec des

taux de brassage de 15
25 vol/heure = un des
principaux moyens de
traiter lair

Unidirectionnel (Laminaire) :
balayage rapide des contaminants
=> zone strile
utilis dans les classes de 1 100 (ISO3 ISO5)

Flux unidirectionnel
(essentiellement vertical)
avec des taux de
brassage de plusieurs
centaines de volumes par
heure = un des dispositifs
les plus efficaces
(attention linterposition
dobstacles entre le
plafond et le site
protger).
BPF : 0,36 0,54m/s

Turbulent :
mlange air propre, air contamin
=> dilution des contaminants
utilis dans les classes de 1 000 10 000 (ISO 6 & 7)

4. Matrise de la qualit de lair

5. Conception / fonctionnement
4.6. Contrles de lair
a) Contrles raliss dans diffrentes situations :
- lors de la conception, de travaux
- lors dune procdure de qualification,
- lors de surveillances (action qualit)
- lors denqutes pidmiologiques
- lors de formation du personnel

5.1. Conception et choix de la classe

Choix de la classe :

cart de qualit = cot

Fractionnement des zones dactivit en fonction

de la qualit requise.
On passe une salle ultra- propre en passant par
des zones intermdiaires.

b) Diffrents types de contrles :

- Contrles des particules
- Contrles de la biocontamination
- Contrles de paramtres physiques

5. Conception / fonctionnement

5.2. Les locaux, le matriel et les quipements

- matriel entrant propre
- toutes les surfaces de la salle et des quipements et
matriels nettoys rgulirement selon procdure
- minimum dencombrement de la salle

5. Conception / fonctionnement

- Matriaux de construction tanches, robustes, non

relargants, nettoyables, antistatiques,
- surfaces lisses, sans crevasse, fissures, trous,
- angles arrondis,
- luminaires et filtres encastrables,
- sol lisse sans joint,
- ...

- flux de circulation (+/- passage par un sas) : pour les

hommes, les produits, les dchets (bon agencement pour
limiter les mouvements)
-Rseaux de fluides (eau, air, cbles lectriques ) non
apparents et rduits au minimum
-Plafonds bas et faciles nettoyer

* prvoir la gestion des dchets

* prvoir les sas personnel, matriel,
* prvoir les postes adapts au lavage des mains

5. Conception / fonctionnement

5.3. Le personnel

5. Conception / fonctionnement

b) les bonnes pratiques de travail

a) les bonnes pratiques dhygine

- supprimer les oprations de maintenance lors de lactivit

- Utiliser les vestiaires

- viter les visites et les dplacements inutiles

- respecter une tenue vestimentaire adquate

- sensibiliser le personnel aux contraintes des salles

blanches

- porter les protections spcifiques

- se laver les mains selon la procdure

- responsabiliser le personnel (nettoyage des postes de

travail)

- viter la nourriture, les cigarettes, et tout autre activit

gnratrice de particules dans la zone protge

-...

- viter de parler inutilement, de tousser,

dternuerpendant la production
- ...

6. Hottes de scurit

6. Hottes de scurit

PSM de classe I :

La norme NF X 44 201 dfini des postes de scurit

microbiologiques (PSM) qui protgent le manipulateur et
l environnement de la prparation (type I), dautres
protgent galement la prparation du manipulateur et de
lenvironnement (type II et III)
Non filtr

Non adapt pour un travail en conditions striles.

-Protge le manipulateur vis vis de la substance manipule,
-Protge contre une propagation des substances dans le local

6. Hottes de scurit

6. Hottes de scurit

PSM de classe II = hotte flux laminaire (les plus utilises)

PSM de classe III :

Air sortant
filtr par 2
filtres
minimum

P1

P2
P1 < P2

Adapte pour le travail en conditions striles.

-Protge le manipulateur vis vis de la substance manipule,
-Protge la substance manipule vis vis darocontaminants,
-Protge contre une propagation des substances dans le local

Adapte pour manipuler organismes et virus de classe 4 (dangereux).

-Protge le manipulateur vis vis de la substance manipule,
-Protge la substance manipule vis vis darocontaminants,
-Protge contre une propagation des substances dans le local

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6. Hottes de scurit

6. Hottes de scurit

Manipulation :
Prparation du PSM :

- Mettre la ventilation en marche 15 minutes minimum avant la

manipulation.
- Se laver les mains soigneusement.
- Nettoyer le plan de travail laide dun dtergent sans oxydant (pas
deau de Javel) en portant des gants de mnage.
- Introduire le matriel ncessaire aprs un nettoyage rapide l'aide
d'un papier imbib d'alcool.
- S'installer en laissant libre les bandeaux d'aspiration avant et arrire.

- Rgler la hauteur du sige et ne pas se tenir trop prs de la veine de

garde
- Utiliser des gants pour le travail des prlvements pathologiques et pour
le travail sur cultures cellulaires infectes par des virus.
- Ne jamais utiliser de becs chauffants dans l'enceinte (perturbation du
flux et risque d'altration du filtre HEPA).
- Manipuler au centre en vitant tout mouvement brusque et veiller ne
pas perturber le bon coulement du flux d'air (veine de garde libre).

- Dcontaminer immdiatement le plan de travail en cas de

contamination.

6. Hottes de scurit

Aprs la manipulation :

- Laisser le PSM en fonctionnement pendant 5 10 minutes pour purger

l'intrieur de tout arosol contaminant.
- Ranger le matriel sur le plan de travail.

- Nettoyer et dsinfecter le plan de travail avec gants de mnage et de

l'alcool ou un produit dtergent et dsinfectant (pas d'eau de Javel).
- Se laver les mains.
- Laisser en fonctionnement 15 minutes pour liminer les arosols gnrs
par le nettoyage.

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