API20E

REF 20 100 / 20 160 07584E - FR - 2004/05
®
20 E IVD
Système d'identification des Enterobacteriaceae et autres bacilles à Gram négatif non fastidieux
INTRODUCTION ET OBJET DU TEST Matériel :

API 20 E est un système standardisé pour l'identification - Pipettes ou PSIpettes
des Enterobacteriaceae et autres bacilles à Gram négatif - Protège-ampoules
non fastidieux, comprenant 21 tests biochimiques - Portoir pour ampoules
miniaturisés, ainsi qu'une base de données. La liste - Equipement général de laboratoire de bactériologie
complète des bactéries qu'il est possible d'identifier avec
ce système est présente dans le Tableau d'Identification REACTIFS COMPLEMENTAIRES :
en fin de notice. - API OF Medium (Réf. 50 110) :
Test pour la détermination du métabolisme fermentatif
PRINCIPE ou oxydatif du glucose.
La galerie API 20 E comporte 20 microtubes contenant - API M Medium (Réf. 50 120) :
des substrats déshydratés. Les microtubes sont inoculés Test pour la détermination de la mobilité des bactéries
avec une suspension bactérienne qui reconstitue les aéro-anaérobies.
tests. Les réactions produites pendant la période
d'incubation se traduisent par des virages colorés PRECAUTIONS D'UTILISATION
spontanés ou révélés par l'addition de réactifs. • Pour diagnostic in vitro et pour contrôle micro-
La lecture de ces réactions se fait à l'aide du Tableau de biologique.
Lecture et l'identification est obtenue à l'aide du • Pour usage professionnel uniquement.
Catalogue Analytique ou d'un logiciel d'identification. • Ce coffret contient des composants d'origine animale.
La maîtrise de l'origine et/ou de l'état sanitaire des
PRESENTATION animaux ne pouvant garantir de façon absolue que ces
Coffret de 25 tests (réf. 20 100) produits ne contiennent aucun agent pathogène
- 25 galeries API 20 E transmissible, il est recommandé de les manipuler avec
- 25 boîtes d'incubation les précautions d'usage relatives aux produits
- 25 fiches de résultats potentiellement infectieux (ne pas ingérer; ne pas
- 1 barrette de fermeture inhaler).
- 1 notice • Les prélèvements, cultures bactériennes et produits
ensemencés doivent être considérés comme poten-
Coffret de 100 tests (réf. 20 160) tiellement infectieux et doivent être manipulés de façon
- 100 galeries API 20 E (4x25 galeries) appropriée. Les techniques aseptiques et les
- 100 boîtes d'incubation précautions usuelles de manipulation pour le groupe
- 100 fiches de résultats bactérien étudié doivent être respectées tout au long de
- 1 barrette de fermeture la manipulation ; se référer à "NCCLS M29-A, Protection
- 1 notice of Laboratory Workers from Instrument Biohazards and
Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids,
COMPOSITION DE LA GALERIE and Tissue; Approved Guideline - Révision en vigueur".
Pour informations complémentaires sur les précautions
La composition de la galerie API 20 E est reportée dans le
de manipulation, se référer à "Biosafety in
Tableau de Lecture de cette notice.
Microbiological and Biomedical Laboratories - CDC/NIH
- Dernière édition", ou à la réglementation en vigueur
REACTIFS ET MATERIEL NECESSAIRES MAIS NON dans le pays d'utilisation.
FOURNIS • Ne pas utiliser les réactifs après la date de péremption.
Réactifs : • Avant utilisation, s'assurer de l'intégrité de l'emballage
- API NaCl 0,85 % Medium, 5 ml (Réf. 20 230) ou des différents composants.
API Suspension Medium, 5 ml (Réf. 20 150) • Ne pas utiliser de galeries ayant subi une altération phy-
- API 20 E coffret de réactifs (Réf. 20 120) ou sique : cupule déformée, sachet déshydratant ouvert, …
réactifs individuels : TDA (Réf. 70 402) • Les performances présentées sont obtenues avec la
JAMES (Réf. 70 542) méthodologie indiquée dans cette notice. Toute dé-
VP 1 + VP 2 (Réf. 70 422) viation de méthodologie peut altérer les résultats.
NIT 1 + NIT 2 (Réf. 70 442) • L'interprétation des résultats du test doit être faite en
- Réactif Zn (Réf. 70 380) tenant compte du contexte clinique ou autre, de l'origine
- Oxydase (Réf. 55 635*) du prélèvement, des aspects macro et microscopiques
* référence non commercialisée dans certains pays : de la souche et éventuellement des résultats d'autres
utiliser un réactif équivalent. tests, en particulier de l'antibiogramme.
- Huile de paraffine (Réf. 70 100)
- Catalogue Analytique API 20 E (Réf. 20 190) ou
logiciel d'identification (consulter bioMérieux)
bioMérieux® SA Français - 1
api® 20 E 07584E - FR - 2004/05
CONDITIONS DE STOCKAGE Inoculation de la galerie

Les galeries sont présentes dans une poche en • Remplir tubes et cupules des tests CIT , VP et
aluminium avec sachets déshydratants. GEL avec la suspension bactérienne en utilisant la
Après ouverture de celle-ci (*), conserver les galeries pipette ayant servi au prélèvement.
restantes avec les déshydratants en refermant la poche à • Remplir uniquement les tubes (et non les cupules) des
l'aide de la barrette de fermeture (présente dans le autres tests.
coffret) : placer l'extrémité de la poche entre les deux • Créer une anaérobiose dans les tests ADH, LDC, ODC,
pièces de la barrette et les clamper soigneusement, à H2S, URE en remplissant leur cupule d'huile de
fond, sur toute leur longueur. Les galeries peuvent ainsi paraffine.
être conservées 10 mois après ouverture de la poche, • Refermer la boîte d'incubation.
à 2-8°C (ou jusqu'à la date limite d'utilisation indiquée sur • Incuber à 36°C ± 2°C pendant 18-24 heures.
l'emballage, si celle-ci est antérieure).
(*) Recommandation pour l'ouverture de celle-ci : couper LECTURE ET INTERPRETATION
juste en dessous de la soudure, en maintenant la poche Lecture de la galerie
droite, pour éviter d'endommager les sachets déshydra-
tants. • Après incubation, la lecture de la galerie doit se faire en
se référant au Tableau de Lecture.
ECHANTILLONS (PRELEVEMENT ET PREPARATION) • Si 3 tests ou plus (test GLU + ou –) sont positifs, noter
sur la fiche de résultats toutes les réactions spontanées
API 20 E ne doit pas être utilisé directement à partir des
puis révéler les tests nécessitant l'addition de réactifs :
prélèvements d'origine clinique ou autres.
- Test TDA : ajouter 1 goutte de réactif TDA. Une
Les microorganismes à identifier doivent dans un premier
couleur marron-rougeâtre indique une réaction
temps être isolés sur un milieu de culture adapté à la
positive à noter sur la fiche de résultats.
culture des Enterobacteriaceae et/ou des bacilles à Gram
- Test IND : ajouter 1 goutte de réactif JAMES. Une
négatif non fastidieux selon les techniques usuelles de
couleur rose diffusant dans toute la cupule indique
bactériologie.
une réaction positive à noter sur la fiche de résultats.
- Test VP : ajouter 1 goutte des réactifs VP 1 et VP 2.
MODE OPERATOIRE Attendre au minimum 10 minutes. Une couleur rose
Test oxydase ou rouge indique une réaction positive à noter sur la
Le test oxydase doit être réalisé selon les instructions du fiche de résultats. Une faible coloration rose
ème
fabricant, il constitue le 21 test d’identification à noter apparaissant après 10 minutes doit être considérée
sur la fiche de résultats. négative.
NOTE : Le test de la recherche de production d’indole
Préparation de la galerie doit être réalisé en dernier, car cette réaction libère des
• Réunir fond et couvercle d'une boîte d'incubation et gaz qui risquent d’altérer l’interprétation d’autres tests
répartir environ 5 ml d'eau distillée ou déminéralisée [ou de la galerie. Ne pas remettre le couvercle d’incubation
toute eau sans additif ou dérivés susceptibles de libérer après l’ajout du réactif.
des gaz (Ex : Cl2, CO2 ...)] dans les alvéoles pour créer • Si le nombre de tests positifs avant ajout des réactifs (y
une atmosphère humide. compris le test GLU) est inférieur à 3 :
• Inscrire la référence de la souche sur la languette - Réincuber la galerie 24 heures (± 2 heures) de plus
latérale de la boîte. (Ne pas inscrire la référence sur le sans rajouter les réactifs.
couvercle, celui-ci pouvant être déplacé lors de la - Révéler les tests nécessitant l'addition de réactifs (voir
manipulation). paragraphe précédent).
• Sortir la galerie de son emballage. - Pour compléter l'identification, il peut être utile de
• Placer la galerie dans la boîte d'incubation. réaliser des tests complémentaires (se reporter au
NOTE : API 20 E doit être utilisé avec des paragraphe Identification).
Enterobacteriaceae et/ou des bacilles à Gram négatif non
fastidieux. Les microorganismes fastidieux, exigeants et Interprétation
nécessitant des précautions de manipulation particulières L'identification est obtenue à partir du profil numérique.
(ex. Brucella et Francisella) ne font pas partie de la base • Détermination du profil numérique :
de données API 20 E. Il convient d'utiliser d'autres Sur la fiche de résultats, les tests sont séparés par
techniques pour exclure ou confirmer leur présence. groupes de trois et une valeur 1, 2 ou 4 est indiquée
Préparation de l'inoculum pour chacun. La galerie API 20 E comportant 20 tests,
en additionnant à l'intérieur de chaque groupe les
• Ouvrir une ampoule d'API NaCl 0,85 % Medium (5 ml) valeurs correspondant à des réactions positives, on
ou une ampoule d'API Suspension Medium (5 ml) obtient 7 chiffres ; la réaction de l'oxydase qui constitue
comme indiqué au paragraphe "Précautions" de la le 21
ème
test est affectée de la valeur 4 lorsqu'elle est
notice du produit, ou utiliser un tube contenant 5 ml positive.
d'eau physiologique stérile ou d'eau distillée stérile,
sans additif. • Identification :
• A l'aide d'une pipette ou d'une PSIpette, prélever une Elle est réalisée à partir de la base de données (V4.0)
seule colonie bien isolée sur milieu gélosé. Utiliser * à l'aide du Catalogue Analytique :
préférentiellement des cultures jeunes (18-24 heures). - Rechercher le profil numérique dans la liste des
• Réaliser une suspension bactérienne en homo- profils.
généisant soigneusement les bactéries dans le milieu. * à l'aide du logiciel d'identification :
Cette suspension doit être utilisée extemporanément. - Entrer manuellement au clavier le profil numérique à
7 chiffres.
NOTE : la plupart des espèces de Vibrio sont halophiles.
En cas de suspicion d'un Vibrio, réaliser la suspension
bactérienne dans API NaCl 0,85 % Medium.
api® 20 E 07584E - FR - 2004/05
Par ailleurs dans certains cas, le profil à 7 chiffres étant - Mobilité (MOB) : Inoculer une ampoule d'API M Medium
insuffisamment discriminant, les tests complémentaires (cf notice).
suivants sont nécessaires : - Culture sur gélose de MacConkey (McC) : Ensemencer
- Réduction des nitrates en nitrites (NO2) et en azote (N2) : un milieu de Mac Conkey (cf notice).
ajouter 1 goutte des réactifs NIT 1 et NIT 2 dans le tube - Oxydation du glucose (OF-O) : Inoculer une ampoule
GLU. Attendre 2 à 5 minutes. Une coloration rouge d'API OF Medium (cf notice).
indique une réaction positive (NO2). Une réaction - Fermentation du glucose (OF-F) : Inoculer une ampoule
négative (coloration jaune) peut être due à la production d'API OF Medium (cf notice).
d'azote (éventuellement signalée par la présence de Ces tests complémentaires, mentionnés dans
microbulles) : ajouter 2 à 3 mg de réactif Zn dans la l'introduction (Codage des profils) du Catalogue
cupule GLU. Après 5 minutes, un tube resté jaune Analytique, peuvent être utilisés pour constituer un profil à
indique une réaction positive (N2) à noter sur la fiche de 9 chiffres, identifiable avec le logiciel d'identification.
résultats. Si la cupule est orange-rouge, la réaction est
négative, les nitrates encore présents dans le tube ont
été réduits en nitrites par le Zinc.
Cette réaction est intéressante pour les bacilles à Gram
négatif oxydase positive. 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
NOTE : Pour les mêmes raisons que le test indole (se D’autres tests supplémentaires peuvent être proposés en
référer à la note du paragraphe "Lecture de la galerie"), le cas de faible discrimination. Se référer au logiciel ou
test de réduction des nitrates doit être réalisé en dernier. Catalogue Analytique.
CONTROLE DE QUALITE
Les milieux, galeries et réactifs font l'objet de contrôles de qualité systématiques aux différentes étapes de leur
fabrication. Un contrôle bactériologique des tests de la galerie est de plus réalisable par l’utilisateur avec la souche
1. Escherichia coli ATCC 25922 de préférence ou l’une des souches suivantes :
2. Stenotrophomonas maltophilia ATCC 51331 4. Proteus mirabilis ATCC 35659
3. Enterobacter cloacae ATCC 13047 5. Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae ATCC 35657
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
ONPG ADH LDC ODC CIT H2S URE TDA IND VP GEL GLU MAN INO SOR RHA SAC MEL AMY ARA NO2 N2*
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* Le stade N2 (+) peut être observé pour la souche ATCC 13047 et la souche ATCC 25922.
• Profil obtenu après 24-48 H d'incubation pour la souche ATCC 51331, à partir de colonies cultivées sur gélose Trypcase Soja + sang.
• Profils obtenus après 18-24 H d'incubation pour les autres souches, à partir de colonies cultivées sur gélose Trypcase Soja + sang.
• Suspension bactérienne préparée en API NaCl 0.85 % Medium.
Il est de la responsabilité de l'utilisateur de s'assurer que le contrôle de qualité est mis en oeuvre conformément à la
législation locale en vigueur.
LIMITES DU TEST • Les bacilles à Gram négatif non fermentants, isolés de

• Le système API 20 E est destiné à l'identification des patients atteints de mucoviscidose, peuvent générer des
Enterobacteriaceae et des bacilles à Gram négatif non profils biochimiques atypiques susceptibles d’altérer leur
fastidieux présents dans la base de données (voir identification.
Tableau d'Identification en fin de notice) et à eux seuls. • Seules des cultures pures contenant un seul type de
Il ne peut être utilisé pour identifier d'autres microorganisme doivent être utilisées.
microorganismes ou exclure leur présence.
• Des discordances par rapport aux techniques RESULTATS ATTENDUS
conventionnelles peuvent être observées. Elles sont Se référer au Tableau d'Identification en fin de cette
dues aux différences de principe des réactions utilisées notice pour les résultats attendus des différentes
en technique API. Des écarts de pourcentages peuvent réactions biochimiques.
également être observés et s'expliquent par des
variations de substrat. PERFORMANCES
• Pour certaines espèces (ex. Klebsiella ou Proteus), des • Enterobacteriaceae :
réactions du test glucose initialement positives peuvent 5514 souches de diverses origines et souches de
parfois devenir négatives (apparition d'une coloration collection appartenant aux espèces de la base de
bleu-vert). Dans ce cas, cette réaction doit être données ont été testées :
considérée comme négative. Les pourcentages indiqués - 92,80 % des souches ont été correctement identifiées
dans le Tableau d'Identification prennent en compte ce (avec ou sans tests complémentaires).
genre de phénomène. - 4,61 % des souches n'ont pas été identifiées.
• Dans le cas d’identification à Salmonella ou Shigella, - 2,59 % des souches ont été mal identifiées.
une identification sérologique doit être effectuée pour
confirmer l’identification bactérienne.
api® 20 E 07584E - FR - 2004/05
• autres bacilles à Gram négatif non fastidieux : ELIMINATION DES DECHETS

2386 souches de diverses origines et souches de Eliminer les réactifs utilisés ou non utilisés ainsi que les
collection appartenant aux espèces de la base de matériels à usage unique contaminés en suivant les
données ont été testées : procédures relatives aux produits infectieux ou
- 90,32 % des souches ont été correctement identifiées potentiellement infectieux.
(avec ou sans tests complémentaires). Il incombe à chaque laboratoire de gérer les déchets et
- 6,16 % des souches n'ont pas été identifiées. les effluents qu'il produit selon leur nature et leur
- 3,52 % des souches ont été mal identifiées. dangerosité, et d'en assurer (ou faire assurer) le
traitement et l'élimination selon les réglementations
applicables.
TABLEAU DE LECTURE
QTE RESULTATS
TESTS COMPOSANTS ACTIFS REACTIONS/ENZYMES
(mg/cup.)
NEGATIF POSITIF
ß-galactosidase
2-nitrophényl-ßD-
ONPG 0,223 (Ortho NitroPhényl-ßD- incolore jaune (1)
galactopyranoside
Galactopyranosidase)
ADH L-arginine 1,9 Arginine DiHydrolase jaune rouge / orangé (2)
LDC L-lysine 1,9 Lysine DéCarboxylase jaune rouge / orangé (2)
ODC L-ornithine 1,9 Ornithine DéCarboxylase jaune rouge / orangé (2)
CIT trisodium citrate 0,756 utilisation du CITrate vert pâle / jaune bleu-vert / bleu (3)
H2S sodium thiosulfate 0,075 production d'H2S incolore / grisâtre dépot noir / fin liseré
URE urée 0,76 UREase jaune rouge / orangé (2)
TDA / immédiat
TDA L-tryptophane 0,38 Tryptophane DésAminase jaune marron-rougeâtre
JAMES / immédiat
incolore rose
IND L-tryptophane 0,19 production d’INDole
vert pâle / jaune
VP 1 + VP 2 / 10 min
production d'acétoïne
VP sodium pyruvate 1,9 incolore rose / rouge (5)
(Voges Proskauer)
gélatine
GEL 0,6 Gélatinase (GELatine) non diffusion diffusion du pigment noir
(origine bovine)
fermentation / oxydation
GLU D-glucose 1,9 bleu / bleu-vert jaune / jaune gris
(GLUcose) (4)
MAN D-mannitol 1,9 bleu / bleu-vert jaune
(MANnitol) (4)
INO inositol 1,9 bleu / bleu-vert jaune
(INOsitol) (4)
SOR D-sorbitol 1,9 bleu / bleu-vert jaune
(SORbitol) (4)
RHA L-rhamnose 1,9 bleu / bleu-vert jaune
(RHAmnose) (4)
SAC D-saccharose 1,9 bleu / bleu-vert jaune
(SACcharose) (4)
MEL D-melibiose 1,9 bleu / bleu-vert jaune
(MELibiose) (4)
AMY amygdaline 0,57 bleu / bleu-vert jaune
(AMYgdaline) (4)
ARA L-arabinose 1,9 bleu / bleu-vert jaune
(ARAbinose) (4)
OX (voir notice du test oxydase) cytochrome-OXydase (voir notice du test oxydase)
(1) Une très légère couleur jaune est également positive.

(2) Une couleur orange apparaissant après 36-48 H d'incubation doit être considérée négative.
(3) Lecture dans la cupule (zone aérobie).
(4) La fermentation commence dans la partie inférieure des tubes, l'oxydation commence dans la cupule.
(5) Une légère coloration rose apparaissant après 10 minutes doit être lue négative.
• Les quantités indiquées peuvent être ajustées en fonction des titres des matières premières.
• Certaines cupules contiennent des composants d’origine animale, notamment des peptones.
api® 20 E 07584E - FR - 2004/05
TESTS COMPLEMENTAIRES
RESULTATS
QTE
TESTS COMPOSANTS ACTIFS REACTIONS/ENZYMES
(mg/cup.) NEGATIF POSITIF
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min
Réduction
des production de NO2 jaune rouge
potassium nitrate 0,076
nitrates Zn / 5 min
tube GLU
réduction au stade N2 orange-rouge jaune
API M Medium ou
MOB mobilité immobile mobile
microscope
McC milieu de MacConkey culture absence présence
OF-F fermentation : sous huile vert jaune
glucose (API OF Medium)
OF-O oxydation : à l'air vert jaune
METHODOLOGIE p. I
TABLEAU D'IDENTIFICATION p. II
BIBLIOGRAPHIE p. IV
TABLE DES SYMBOLES p. V
bioMérieux® SA bioMérieux, Inc

au capital de 11 879 045 € Box 15969,
673 620 399 RCS LYON Durham, NC 27704-0969 / USA
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REF 20 100 / 20 160 07584E - GB - 2004/05
®
20 E IVD
Identification system for Enterobacteriaceae and other non-fastidious Gram-negative rods
SUMMARY AND EXPLANATION Material :

API 20 E is a standardized identification system for - Pipettes or PSIpettes
Enterobacteriaceae and other non-fastidious, Gram- - Ampule protector
negative rods which uses 21 miniaturized biochemical - Ampule rack
tests and a database. The complete list of those - General microbiology laboratory equipment
organisms that it is possible to identify with this system is
given in the Identification Table at the end of this package POSSIBLE ADDITIONAL REAGENTS :
insert. - API OF Medium (Ref. 50 110) :
Test for the determination of fermentative or oxidative
PRINCIPLE metabolism.
The API 20 E strip consists of 20 microtubes containing - API M Medium (Ref. 50 120) :
dehydrated substrates. These tests are inoculated with Test for motility of facultative anaerobic bacteria.
a bacterial suspension that reconstitutes the media.
During incubation, metabolism produces color changes WARNINGS AND PRECAUTIONS
that are either spontaneous or revealed by the addition of • For in vitro diagnostic use and microbiological
reagents. control.
The reactions are read according to the Reading Table • For professional use only.
and the identification is obtained by referring to the • This kit contains products of animal origin. Certified
Analytical Profile Index or using the identification software. knowledge of the origin and/or sanitary state of the
animals does not totally guarantee the absence of
CONTENT OF THE KIT transmissible pathogenic agents. It is therefore
Kit for 25 tests (ref. 20 100) recommended that these products be treated as
- 25 API 20 E strips potentially infectious, and handled observing the usual
- 25 incubation boxes safety precautions (do not ingest or inhale).
- 25 result sheets • All specimens, microbial cultures and inoculated
- 1 clip seal products should be considered infectious and handled
- 1 package insert appropriately. Aseptic technique and usual precautions
for handling the bacterial group studied should be
Kit for 100 tests (ref. 20 160) observed throughout this procedure. Refer to "NCCLS
- 100 API 20 E strips (4x25 strips) M29-A, Protection of Laboratory Workers from
- 100 incubation boxes Instrument Biohazards and Infectious Disease
- 100 result sheets Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue;
- 1 clip seal Approved Guideline - Current revision". For additional
- 1 package insert handling precautions, refer to "Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories - CDC/NIH
COMPOSITION OF THE STRIP - Latest edition", or to the regulations currently in use in
each country.
The composition of the API 20 E strip is given in the
• Do not use reagents past the expiration date.
Reading Table of this package insert.
• Before use, check that the packaging of the various
components is intact.
REAGENTS AND MATERIAL REQUIRED BUT NOT • Do not use strips which have been damaged : cupules
PROVIDED deformed, desiccant sachet open, etc.
Reagents : • The performance data presented were obtained using
- API NaCl 0.85 % Medium, 5 ml (Ref. 20 230) or the procedure indicated in this package insert. Any
API Suspension Medium, 5 ml (Ref. 20 150) change or modification in the procedure may affect the
- API 20 E reagent kit (Ref. 20 120) or results.
individual reagents : TDA (Ref. 70 402) • Interpretation of the test results should be made taking
JAMES (Ref. 70 542) into consideration the patient history, the source of the
VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422) specimen, colonial and microscopic morphology of the
NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442) strain and, if necessary, the results of any other tests
- Zn reagent (Ref. 70 380) performed, particularly the antimicrobial susceptibility
- Oxidase (Ref. 55 635*) patterns.
* reference not sold in certain countries : use an
equivalent reagent.
- Mineral oil (Ref. 70 100)
- API 20 E Analytical Profile Index (Ref. 20 190) or
identification software (consult bioMérieux)
bioMérieux® SA English - 1
api® 20 E 07584E - GB - 2004/05
STORAGE CONDITIONS Inoculation of the strip

The strips are supplied in an aluminum pouch with • Using the same pipette, fill both tube and cupule of
desiccant sachets. the tests CIT , VP and GEL with the bacterial
Once opened (*), the pouch should be re-sealed using the suspension.
clip seal (included in the kit) to preserve the remaining • Fill only the tube (and not the cupule) of the other tests.
strips with the desiccant sachets : place the open end of • Create anaerobiosis in the tests ADH, LDC, ODC, H2S
the pouch along the seal and carefully clamp between and URE by overlaying with mineral oil.
the two parts. The strips may then be kept for up to • Close the incubation box.
10 months after the pouch has been opened, at 2-8°C • Incubate at 36°C ± 2°C for 18-24 hours.
(or until the expiration date indicated on the packaging, if
this comes before). READING AND INTERPRETATION
(*) Recommended method for opening the pouches : cut Reading the strip
open the pouch just below the seal while holding the
pouch upright, in order to avoid damaging the desiccant • After the incubation period, read the strip by referring to
sachets. the Reading Table.
• If 3 or more tests (GLU test + or –) are positive, record
SPECIMENS (COLLECTION AND PREPARATION) all the spontaneous reactions on the result sheet and
then reveal the tests which require the addition of
API 20 E is not for use directly with clinical or other
reagents :
specimens.
- TDA Test : add 1 drop of TDA reagent. A reddish
The microorganisms to be identified must first be iso-
brown color indicates a positive reaction to be
lated on a culture medium adapted to the culture of
recorded on the result sheet.
Enterobacteriaceae and/or non-fastidious Gram-negative
- IND Test : add 1 drop of JAMES reagent. A pink color
rods, according to standard microbiological techniques.
developed in the whole cupule indicates a positive
reaction to be recorded on the result sheet.
INSTRUCTIONS FOR USE - VP Test : add 1 drop each of VP 1 and VP 2 reagents.
Oxidase test Wait at least 10 minutes. A pink or red color indicates
The oxidase test must be performed according to the a positive reaction to be recorded on the result sheet.
manufacturer's instructions for use. The result should be If a slightly pink color appears after 10 minutes, the
recorded on the result sheet as it is an integral part of the reaction should be considered negative.
final profile (21st identification test). NOTE : The indole production test must be performed
last since this reaction releases gaseous products which
Preparation of the strip interfere with the interpretation of other tests on the
• Prepare an incubation box (tray and lid) and distribute strip. The plastic incubation lid should not be replaced
about 5 ml of distilled water or demineralized water after the addition of the reagent.
[or any water without additives or chemicals which may • If the number of positive tests (including the GLU test)
release gases (e.g., Cl2, CO2, etc.)] into the honey- before adding the reagents is less than 3 :
combed wells of the tray to create a humid atmosphere. - Reincubate the strip for a further 24 hours (± 2 hours)
• Record the strain reference on the elongated flap of the without adding any reagents.
tray. (Do not record the reference on the lid as it may be - Reveal the tests requiring the addition of reagents
misplaced during the procedure.) (see previous paragraph).
• Remove the strip from its packaging. - To complete the identification, it may be necessary to
• Place the strip in the incubation box. perform supplementary tests (refer to Identification
NOTE : API 20 E should only be used with paragraph).
Enterobacteriaceae and/or non-fastidious Gram-negative
rods. Fastidious organisms having demanding nutritional Interpretation
requirements and requiring appropriate handling Identification is obtained with the numerical profile.
precautions (i.e., Brucella and Francisella) are not • Determination of the numerical profile :
included in the API 20 E database. Alternative procedures On the result sheet, the tests are separated into groups
must be used to exclude or confirm their presence. of 3 and a value 1, 2 or 4 is indicated for each. By
Preparation of the inoculum adding together the values corresponding to positive
reactions within each group, a 7-digit profile number is
• Open an ampule of API NaCl 0.85 % Medium (5 ml) or obtained for the 20 tests of the API 20 E strip. The
an ampule of API Suspension Medium (5 ml) as oxidase reaction constitutes the 21st test and has a
indicated in the paragraph "Warnings and Precautions" value of 4 if it is positive.
of the package insert for these products, or use any tube
containing 5 ml of sterile saline or sterile distilled water, • Identification :
without additives. This is performed using the database (V4.0)
• Using a pipette or PSIpette, remove a single well- * with the Analytical Profile Index :
isolated colony from an isolation plate. It is - Look up the numerical profile in the list of profiles.
recommended to use young cultures (18-24 hours old). * with the identification software :
• Carefully emulsify to achieve a homogeneous bacterial - Enter the 7-digit numerical profile manually via the
suspension. keyboard.
This suspension must be used immediately after
preparation.
NOTE : most Vibrio species are halophilous. If a Vibrio is
suspected, suspend the bacteria in API NaCl 0.85 %
Medium.
api® 20 E 07584E - GB - 2004/05
In some cases, the 7-digit profile is not discriminatory - Motility (MOB) : Inoculate an ampule of API M Medium
enough and the following supplementary tests need to be (see package insert).
carried out : - Growth on MacConkey agar medium (McC) : Streak a
- Reduction of nitrates to nitrites (NO2) and N2 gas (N2) : MacConkey agar plate (see package insert).
add 1 drop each of NIT 1 and NIT 2 reagents to the GLU - Oxidation of glucose (OF-O) : Inoculate an ampule of
tube. Wait 2 to 5 minutes. A red color indicates a API OF Medium (see package insert).
positive reaction (NO2). A negative reaction (yellow) - Fermentation of glucose (OF-F) : Inoculate an ampule of
may be due to the reduction to nitrogen (as sometimes API OF Medium (see package insert).
evidenced by gas bubbles) : add 2 to 3 mg of Zn These supplementary tests, indicated in the introduction
reagent to the GLU tube. After 5 minutes, if the tube section (Profile coding) of the Analytical Profile Index, may
remains yellow this indicates a positive reaction (N2) to be used to form a 9-digit profile. Identification is then
be recorded on the result sheet. If the test turns orange- obtained using the identification software.
red, this is a negative reaction : the nitrates still present
in the tube have been reduced by the Zinc.
This reaction is useful when testing Gram-negative,
oxidase positive rods.
NOTE : For the same reason as the indole test (see the 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
note in the paragraph "Reading the strip"), the nitrate
reduction test must be performed last. Further tests may be proposed in case of low
discrimination. Refer to the identification software or
Analytical Profile Index.
QUALITY CONTROL
The media, strips, and reagents are systematically quality controlled at various stages of their manufacture.
For those users who wish to perform their own quality control tests with the strip, it is preferable to use the strain
1. Escherichia coli ATCC 25922 or else one of the following strains :
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* The N2 (+) state may be observed for the strain ATCC 13047 and the strain ATCC 25922.
• Profile obtained after 24-48 hours of incubation for the strain ATCC 51331, using colonies grown on Trypticase Soy agar + blood.
• Profiles obtained after 18-24 hours of incubation for the other strains, using colonies grown on Trypticase Soy agar + blood.
• Bacterial suspensions prepared in API NaCl 0.85 % Medium.
It is the responsibility of the user to perform Quality Control in accordance with any local applicable regulations.
LIMITATIONS OF THE METHOD RANGE OF EXPECTED RESULTS

• The API 20 E system is intended uniquely for the Consult the Identification Table at the end of this package
identification of Enterobacteriaceae and those non- insert for the range of expected results for the various
fastidious, Gram-negative rods included in the database biochemical reactions.
(see Identification Table at the end of this package
insert). It cannot be used to identify any other PERFORMANCE
microorganisms or to exclude their presence. • Enterobacteriaceae :
• Discrepancies with respect to conventional methods 5514 collection strains and strains of various origins
may be observed. They are due to the different belonging to species included in the database were
principles of the reactions used in the API technique. In tested:
addition, substrate variations exist that also account for - 92.80 % of the strains were correctly identified
percentage differences. (with or without supplementary tests).
• On rare occasions, the glucose reactions for organisms - 4.61 % of the strains were not identified.
such as Klebsiella or Proteus may revert from positive - 2.59 % of the strains were misidentified.
to negative, in which instance a bluish-green color is
seen. This reaction will be recorded as a negative • Other non-fastidious Gram-negative rods :
reaction. Such occurrences are reflected in the 2386 collection strains and strains of various origins
percentages indicated in the Identification Table. belonging to species included in the database were
• If Salmonella or Shigella are identified, serological tested :
identification must be performed to confirm the bacterial - 90.32 % of the strains were correctly identified
identification. (with or without supplementary tests).
• Nonfermentative, Gram-negative rods, isolated from - 6.16 % of the strains were not identified.
patients with cystic fibrosis, may generate atypical - 3.52 % of the strains were misidentified.
biochemical profiles, which may affect identification.
• Only pure cultures of a single organism should be used.
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WASTE DISPOSAL WARRANTY

Dispose of used or unused reagents as well as any other bioMérieux disclaims all warranties, express or implied,
contaminated disposable materials following procedures including any implied warranties of MERCHANTABILITY
for infectious or potentially infectious products. AND FITNESS FOR A PARTICULAR USE. bioMérieux
It is the responsibility of each laboratory to handle waste shall not be liable for any incidental or consequential
and effluents produced according to their type and degree damages. IN NO EVENT SHALL BIOMERIEUX’S
of hazardousness and to treat and dispose of them (or LIABLITY TO CUSTOMER UNDER ANY CLAIM
have them treated and disposed of) in accordance with EXCEED A REFUND OF THE AMOUNT PAID TO
any applicable regulations. BIOMERIEUX FOR THE PRODUCT OR SERVICE
WHICH IS THE SUBJECT OF THE CLAIM.
READING TABLE
QTY RESULTS
TESTS ACTIVE INGREDIENTS REACTIONS/ENZYMES
(mg/cup.) NEGATIVE POSITIVE
ß-galactosidase
2-nitrophenyl-ßD-
ONPG 0.223 (Ortho NitroPhenyl-ßD- colorless yellow (1)
galactopyranoside
Galactopyranosidase)
ADH L-arginine 1.9 Arginine DiHydrolase yellow red / orange (2)
LDC L-lysine 1.9 Lysine DeCarboxylase yellow red / orange (2)
ODC L-ornithine 1.9 Ornithine DeCarboxylase yellow red / orange (2)
CIT trisodium citrate 0.756 CITrate utilization pale green / yellow blue-green / blue (3)
H2S sodium thiosulfate 0.075 H2S production colorless / greyish black deposit / thin line
URE urea 0.76 UREase yellow red / orange (2)
TDA / immediate
TDA L-tryptophane 0.38 Tryptophane DeAminase yellow reddish brown
JAMES / immediate
colorless
IND L-tryptophane 0.19 INDole production pink
pale green / yellow
VP 1 + VP 2 / 10 min
acetoin production
VP sodium pyruvate 1.9 colorless pink / red (5)
(Voges Proskauer)
GEL Gelatin
0.6 GELatinase no diffusion diffusion of black pigment
(bovine origin)
fermentation / oxidation
GLU D-glucose 1.9 blue / blue-green yellow / greyish yellow
(GLUcose) (4)
MAN D-mannitol 1.9 blue / blue-green yellow
(MANnitol) (4)
INO inositol 1.9 blue / blue-green yellow
(INOsitol) (4)
SOR D-sorbitol 1.9 blue / blue-green yellow
(SORbitol) (4)
RHA L-rhamnose 1.9 blue / blue-green yellow
(RHAmnose) (4)
SAC D-sucrose 1.9 blue / blue-green yellow
(SACcharose) (4)
MEL D-melibiose 1.9 blue / blue-green yellow
(MELibiose) (4)
AMY amygdalin 0.57 blue / blue-green yellow
(AMYgdalin) (4)
ARA L-arabinose 1.9 blue / blue-green yellow
(ARAbinose) (4)
OX (see oxidase test package insert) cytochrome-OXidase (see oxidase test package insert)
(1) A very pale yellow should also be considered positive.
(2) An orange color after 36-48 hours incubation must be considered negative.
(3) Reading made in the cupule (aerobic).
(4) Fermentation begins in the lower portion of the tubes, oxidation begins in the cupule.
(5) A slightly pink color after 10 minutes should be considered negative.
• The quantities indicated may be adjusted depending on the titer of the raw materials used.
• Certain cupules contain products of animal origin, notably peptones.
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SUPPLEMENTARY TESTS
RESULTS
TESTS ACTIVE INGREDIENTS QTY REACTIONS/ENZYMES
(mg/cup.) NEGATIVE POSITIVE
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min

Nitrate
reduction NO2 production yellow red
potassium nitrate 0.076
GLU tube Zn / 5 min
reduction to N2 gas orange-red yellow
API M Medium or
MOB - motility non-motile motile
microscope
McC MacConkey medium - growth absence presence
OF-F - fermentation : under green yellow
mineral oil
OF-O - oxidation : exposed to the green yellow
air
PROCEDURE p. I
IDENTIFICATION TABLE p. II
LITERATURE REFERENCES p. IV
INDEX OF SYMBOLS p. V

au capital de 11 879 045 € Box 15969,
69280 Marcy-l'Etoile / France Tel. (1) 919 620 20 00
Tel. 33 (0)4 78 87 20 00 Fax (1) 919 620 22 11
Fax 33 (0)4 78 87 20 90
http://www.biomerieux.com Printed in France
The logo is a registered and protected trademark of bioMérieux SA or one of its subsidiaries.
REF 20 100 / 20 160 07584E - DE - 2004/05
®
20 E IVD
System zur Identifizierung von Enterobacteriaceae und anderen gramnegativen, nicht anspruchsvollen Stäbchen
Materialien:
EINFÜHRUNG UND TESTERKLÄRUNG
- Pipetten oder PSIpetten
API 20 E ist ein standardisiertes System zur
- Schutzhülle für Ampullen
Identifizierung von Enterobacteriaceae und anderen
- Ampullenständer
gramnegativen, nicht anspruchsvollen Stäbchen anhand
- Allgemeine mikrobiologische Laborausrüstung
von 21 miniaturisierten biochemischen Reaktionen und
einer Datenbasis. Die komplette Liste der mit dem System
ERGÄNZENDE REAGENZIEN:
zu identifizierenden Mikroorganismen finden Sie in der
Prozenttabelle am Ende der Arbeitsanleitung. - API OF Medium (Best.Nr. 50 110): zur Untersuchung
des oxidativen oder fermentativen Glukoseabbaus.
PRINZIP - API M Medium (Best.Nr. 50 120): für die Beweglich-
keitsprüfung von aeroben/anaeroben Bakterien.
Der API 20 E Streifen besteht aus 20 Mikroröhrchen, die
dehydrierte Substrate enthalten. Die Röhrchen werden mit
VORSICHTSMASSNAHMEN
einer Keimsuspension beimpft, welche die Substrate löst.
Die Stoffwechselprodukte, die während der Inkubation • Für die in vitro Diagnostik und die mikrobiologische
entstehen, bewirken Farbumschläge, entweder direkt oder Kontrolle
nach Zugabe der Reagenzien. • Nur für die Verwendung durch Fachkundige bestimmt.
Die Ablesung der Reaktionen erfolgt anhand der • Dieser Kit enthält Bestandteile tierischen Ursprungs. Da
Ablesetabelle, die Identifizierung mit dem Analytischen durch die Kontrolle der Herkunft und/oder des Gesund-
Profil Index oder einer Identifizierungssoftware. heitszustandes der Tiere nicht völlig gewährleistet
werden kann, dass diese Produkte keine übertragbaren
PACKUNGSGRÖSSE pathogenen Agenzien enthalten, ist es empfehlenswert,
diese als potenziell infektiös zu betrachten und unter
Packung für 25 Tests (Best.Nr. 20 100)
Beachtung entsprechender Vorsichtsmaßnahmen zu
- 25 API 20 E Streifen behandeln (nicht einnehmen, nicht einatmen).
- 25 Inkubationswannen • Die Proben, Mikroorganismen und beimpften Produkte
- 25 Ergebnisblätter müssen als potenziell infektiös betrachtet und unter
- 1 Verschlussleiste Beachtung geeigneter Vorsichtsmaßnahmen sach-
- 1 Arbeitsanleitung gemäß behandelt werden. Während der gesamten
Packung für 100 Tests (Best.Nr. 20 160) Testdurchführung müssen aseptische Arbeitsbe-
dingungen und entsprechende Vorsichtsmaßnahmen für
- 100 API 20 E Streifen (4x25 Streifen) die zu untersuchende Keimgruppe eingehalten werden,
- 100 Inkubationswannen siehe „NCCLS M29-A, Protection of Laboratory Workers
- 100 Ergebnisblätter from Instrument Biohazards and Infectious Disease
- 1 Verschlussleiste Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue;
- 1 Arbeitsanleitung Approved Guideline – aktuelle Revision“. Weitere
diesbezügliche Informationen finden Sie in „Biosafety in
ZUSAMMENSETZUNG DES STREIFENS Microbiological and Biomedical Laboratories, CDC/NIH
Die Zusammensetzung des API 20 E Streifens finden Sie – Letzte Ausgabe" oder in den jeweils gültigen
in der Ablesetabelle dieser Arbeitsanleitung. Richtlinien.
• Die Reagenzien nach Ablauf des Verfallsdatums nicht
ZUSÄTZLICH ERFORDERLICHE REAGENZIEN UND mehr verwenden.
MATERIALIEN • Vergewissern Sie sich vor Gebrauch, dass die Verpackung
der verschiedenen Bestandteile nicht beschädigt ist.
Reagenzien:
• Streifen mit äußeren Anzeichen einer Beschädigung
- API NaCl 0,85 % Medium, 5 ml (Best.Nr. 20 230) oder (deformierte Vertiefungen, geöffnete Trockenmittel-
API Suspension Medium, 5 ml (Best.Nr. 20 150) beutel etc.) nicht verwenden.
- API 20 E Reagenzienkit (Best.Nr. 20 120) oder • Die angegebene Performance wurde gemäß dem
Einzelreagenzien: TDA (Best.Nr. 70 402) Verfahren der vorliegenden Arbeitsanleitung ermittelt.
JAMES (Best.Nr. 70 542) Jede Abweichung von diesem Verfahren kann die
VP 1 + VP 2 (Best.Nr. 70 422) Ergebnisse beeinflussen.
NIT 1 + NIT 2 (Best.Nr. 70 442) • Bei der Interpretation der Ergebnisse müssen der
- Zn Reagenz (Best.Nr. 70 380) klinische Hintergrund oder andere Zusammenhänge, die
- Oxidase (Best.Nr. 55 635*) Probenherkunft, Kolonie- und mikroskopische Morpho-
*Dieses Produkt wird in einigen Ländern nicht logie des Stammes sowie gegebenenfalls die Ergebnis-
vertrieben. Verwenden Sie ein gleichwertiges se anderer Tests, insbesondere das Antibiogramm,
Reagenz. berücksichtigt werden.
- Paraffinöl (Best.Nr. 70 100)
- Analytischer Profil Index API 20 E (Best.Nr. 20 190)
oder Identifizierungssoftware (bei bioMérieux
anfragen)
bioMérieux® SA Deutsch - 1
api® 20 E 07584E - DE - 2004/05
LAGERUNGSBEDINGUNGEN Beimpfung des Streifens

Die Streifen sind in einem Aluminiumbeutel verpackt, der • Pipettieren Sie die Keimsuspension mit derselben
Trockenmittel enthält. Legen Sie nach dem Öffnen des Pipette, mit der Sie die Keime abgenommen haben, in
Beutels (*) die nicht benötigten Streifen zusammen mit die Mikroröhrchen.
dem Trockenmittel in den Aluminiumbeutel zurück und • Füllen Sie für die Reaktionen CIT , VP und GEL
verschließen Sie diesen mit der (mitgelieferten) Ver- Becher und Röhrchen.
schlussleiste: das offene Beutelende zwischen die beiden • Füllen Sie für die anderen Reaktionen nur die Röhrchen
Leisten legen und über die ganze Länge sorgfältig fest- und nicht die Becher.
klemmen. Die Streifen können auf diese Weise bis zu • Überschichten Sie bei den unterstrichenen Reaktionen
10 Monate nach dem ersten Öffnen des Beutels (oder ADH, LDC, ODC, H2S und URE die Becher mit
bis zu dem auf der Packung angegebenen Verfallsdatum, Paraffinöl, so dass anaerobe Bedingungen entstehen.
wenn dieses kürzer ist) bei 2-8°C gelagert werden. • Decken Sie die Inkubationswanne ab.
(*) Empfehlungen zum Öffnen des Beutels: Halten Sie • Inkubieren Sie für 18-24 h bei 36°C ± 2°C.
den Beutel gerade und schneiden Sie ihn direkt unterhalb ABLESUNG UND INTERPRETATION
der Schweißnaht auf, so dass das Trockenmittel nicht
Ablesung des Streifens
beschädigt wird.
• Lesen Sie nach der Inkubation den Streifen mit Hilfe der
PROBEN (ENTNAHME UND VORBEREITUNG) Ablesetabelle ab.
API 20 E darf nicht zur direkten Testung von klinischen oder • Wenn 3 oder mehr Tests (GLU + oder –) positiv sind,
anderen Untersuchungsmaterialien verwendet werden. notieren Sie auf dem Ergebnisblatt alle Spontan-
Die zu identifizierenden Mikroorganismen müssen zuerst reaktionen und prüfen Sie anschließend die Tests, die
gemäß den üblichen mikrobiologischen Verfahren auf Reagenzzugaben erfordern:
einem Kulturmedium isoliert werden, das für die Anzucht - TDA: Geben Sie 1 Tropfen TDA Reagenz zu. Eine
von Enterobacteriaceae und/oder gramnegativer, nicht rotbraune Farbe zeigt eine positive Reaktion an.
anspruchsvoller Stäbchen geeignet ist. Notieren Sie das Resultat auf dem Ergebnisblatt.
- IND: Geben Sie 1 Tropfen JAMES Reagenz zu. Eine
TESTDURCHFÜHRUNG
rosa Farbe, die im ganzen Becher diffundiert, zeigt
Oxidase-Test eine positive Reaktion an. Notieren Sie das Resultat
Der Oxidase-Test muss gemäß den Angaben des auf dem Ergebnisblatt.
Herstellers durchgeführt werden. Er stellt die 21. - VP: Geben Sie je 1 Tropfen VP 1 und VP 2 Reagenz
Identifikationsreaktion dar, die auf dem Ergebnisblatt zu. Warten Sie mindestens 10 min. Eine rosa oder
notiert wird. rote Farbe ist als positiv zu bewerten. Notieren Sie
Vorbereitung des Streifens das Ergebnis auf dem Ergebnisblatt. Eine nach 10 min
• Stellen Sie eine Inkubationswanne mit Deckel bereit und auftretende schwache rosa Verfärbung wird als
geben Sie zur Herstellung einer feuchten Kammer ca. negativ bewertet.
5 ml destilliertes oder demineralisiertes Wasser [oder HINWEIS: Die Indolbildung muss zuletzt geprüft
anderes Wasser ohne Zusätze bzw. Derivate, die Gase werden, da diese Reaktion Gase freisetzt, welche die
freisetzen können (z.B. Cl2, CO2...)] in die Wanne. Interpretation anderer Tests des Streifens beein-
• Notieren Sie die Referenznummer des Stammes auf trächtigen können. Decken Sie nach Zugabe dieses
dem dafür vorgesehenen seitlichen Abschnitt der Reagenzes den Streifen nicht wieder ab.
Inkubationswanne. (Die Referenznummer nicht auf dem • Wenn die Anzahl der positiven Tests (einschließlich der
Deckel notieren, da er während des Arbeitsablaufes GLUKOSE) vor der Reagenzienzugabe kleiner als 3 ist:
verwechselt werden oder abhanden kommen kann). - Inkubieren Sie den Streifen erneut für 24 h (± 2 h)
• Nehmen Sie den Streifen aus der Verpackung. ohne Reagenzienzugabe.
• Legen Sie den Streifen in die Wanne. - Lesen Sie anschließend die Reaktionen ab, für die
Reagenzien zugegeben werden müssen (siehe
ANMERKUNG: API 20 E ist nur zur Identifizierung von
vorheriger Abschnitt).
Enterobacteriaceae und gramnegativen, nicht anspruchs-
- Zur Ergänzung der Identifizierung kann es hilfreich
vollen Stäbchen bestimmt. Anspruchsvolle Keime, bei
sein, weitere Tests durchzuführen (siehe Abschnitt
deren Handhabung spezielle Vorsichtsmaßnahmen
Identifizierung).
erforderlich sind (z.B. Brucella und Francisella), sind nicht
in der API 20 E Datenbasis enthalten. Wir empfehlen, für Interpretation
den Ausschluss oder die Identifizierung dieser Keime Die Identifizierung erhält man anhand des numerischen
andere Tests zu verwenden. Profils.
• Erstellung des numerischen Profils:
Vorbereitung des Inokulums
Die biochemischen Reaktionen auf dem Ergebnisblatt
• Eine Ampulle API NaCl 0,85% Medium (5 ml) oder eine sind in 3-er Gruppen eingeteilt. Jede positive Reaktion
Ampulle API Suspension Medium (5 ml) öffnen, wie im erhält den Wert 1, 2 oder 4 je nach Position des Tests
Abschnitt "Vorsichtsmaßnahmen" der Arbeitsanleitung innerhalb der Gruppe (1., 2. oder 3. Test). Die
des Produktes beschrieben oder ein anderes Röhrchen Zahlenwerte jeder Gruppe werden addiert (negative
mit 5 ml steriler physiologischer Kochsalzlösung oder Reaktion = 0), so erhält man 7 Ziffern, welche das
sterilem Aqua dest. ohne Zusätze. numerische Profil ergeben. Die Oxidasereaktion stellt
• Nehmen Sie mit einer Pipette oder PSIpette eine gut den 21. Test dar, ihr wird bei positiver Reaktion der
isolierte Einzelkolonie vom Agar ab. Verwenden Sie Zahlenwert 4 zugeordnet.
vorzugsweise junge Kulturen (18-24 h).
• Identifizierung:
• Die Keime im Suspensionsmedium sorgfältig homogeni-
Die Identifizierung erfolgt anhand der Datenbasis (V4.0)
sieren. Diese Suspension muss sofort verwendet
* mit dem Analytischen Profil Index:
werden.
- Schlagen Sie das numerische Profil in der Profilliste nach.
ANMERKUNG: Die meisten Vibrio Spezies sind halophil. * mit der Identifizierungssoftware:
Bei Verdacht auf Vibrio-Spezies stellen Sie die - Geben Sie das 7-stellige numerische Profil über die
Keimsuspension mit API NaCl 0,85% Medium her. Tastatur ein.
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In den Fällen, in denen das 7-stellige Zahlenprofil keine - Beweglichkeit (MOB): Beimpfen Sie eine Ampulle API M
ausreichende Selektivität ergibt, müssen folgende Zusatz- Medium (siehe Arbeitsanleitung).
reaktionen durchgeführt werden: - Anzucht auf MacConkey (McC) Agar: Beimpfen Sie
- Nitratreduktion zu Nitrit (NO2) und Stickstoff (N2): einen MacConkey Agar (siehe Arbeitsanleitung).
Geben Sie je 1 Tropfen NIT 1 und NIT 2 Reagenz in das - Glukoseoxidation (OF-O): Beimpfen Sie eine Ampulle
GLU-Röhrchen. Warten Sie 2 bis 5 min. Eine rote API OF Medium (siehe Arbeitsanleitung).
Färbung zeigt eine positive Reaktion (NO2) an. Eine - Glukosefermentation (OF-F): Beimpfen Sie eine
negative Reaktion (gelbe Farbe) kann auf eine Ampulle OF Medium (siehe Arbeitsanleitung).
eventuelle Stickstoffproduktion (gelegentlich durch Diese Zusatztests, die im Abschnitt Einführung
Bildung kleiner Bläschen angezeigt) zurückgeführt (Codierung der Profile) des Analytischen Profil Index
werden: Geben Sie 2-3 mg Zn Reagenz in den GLU- aufgeführt sind, können auch für die Erstellung eines mit
Becher. Bleibt das Röhrchen nach 5 min gelb, ist die der Software identifizierbaren 9-stelligen Profils verwendet
Reaktion (N2) positiv, notieren Sie das Ergebnis auf werden.
dem Ergebnisblatt. Wird es orangerot, ist die Reaktion
negativ, da die im Becher noch vorhandenen Nitrate
durch Zink zu Nitrit reduziert wurden.
Diese Reaktion ist für gramnegative, Oxidase positive
Stäbchen wichtig. 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
HINWEIS: Der Nitratnachweis muss aus denselben Bei schwacher Selektivität können Zusatztests zur
Gründen wie die Indolbildung (siehe HINWEIS im Differenzierung vorgeschlagen werden. Siehe Identifizie-
Abschnitt «Ablesung des Streifens») zuletzt durchgeführt rungssoftware oder Analytischer-Profil-Index.
werden.
QUALITÄTSKONTROLLE
Die Medien, Streifen und Reagenzien unterliegen in den verschiedenen Stadien der Produktion systematisch
durchgeführten Qualitätskontrollen. Die mikrobiologische Qualitätskontrolle der API-Teststreifen im Labor kann
vorzugsweise mit dem 1. Stamm Escherichia coli ATCC 25922 oder einem der folgenden Stämme durchgeführt
werden:
ATCC: American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* Die Reduktion zu N2 (+) kann mit dem Stamm ATCC 13047 und dem Stamm ATCC 25922 nachgewiesen werden.
• Profile nach 24-48 h Inkubation für den ATCC Stamm 51331, nach Anzucht auf Trypcase-Soja-Agar mit Hammelblut.
• Profile nach 18-24 h Inkubation für die anderen Stämme, nach Anzucht auf Trypcase-Soja-Agar mit Hammelblut.
• Mit API NaCl 0,85% Medium hergestellte Keimsuspension.
Es liegt in der Verantwortung des Anwenders, die Qualitätskontrolle in Übereinstimmung mit den jeweils gültigen
Vorschriften durchzuführen.
• Gramnegative, nicht fermentierende Stäbchen, die von
LIMITIERUNGEN Patienten mit Mukoviszidose isoliert wurden, können zu
• API 20 E ist nur für die Identifizierung von atypischen biochemischen Profilen führen, die die
Enterobacteriaceae und in der Datenbasis enthaltener Identifizierung beeinträchtigen können.
gramnegativer, nicht anspruchsvoller Stäbchen • Es dürfen nur Reinkulturen verwendet werden.
bestimmt (siehe Prozenttabelle am Ende der
Arbeitsanleitung). Andere Mikroorganismen können ERWARTETE ERGEBNISSE
weder identifiziert noch ausgeschlossen werden. Die erwarteten Ergebnisse der verschiedenen
• Im Vergleich zu konventionellen Methoden können dis- biochemischen Reaktionen entnehmen Sie der Prozent-
krepante Ergebnisse einzelner Reaktionen beobachtet tabelle am Ende dieser Arbeitsanleitung.
werden. Dies ist durch Unterschiede im Reaktions-
prinzip bedingt. Außerdem können durch Substrat- PERFORMANCE
veränderungen abweichende Prozentwerte im Vergleich • Enterobacteriaceae:
zu konventionellen Methoden auftreten. 5514 Stämme unterschiedlicher Herkunft und Stämme
• Bei einigen Spezies (z.B. Klebsiella oder Proteus) kann aus Stammsammlungen, die zu den Spezies der
eine zunächst positive Reaktionen des Glukose-Tests Datenbasis gehören, wurden getestet:
negativ werden (Auftreten einer blau-grünen Färbung). - 92,80 % der Stämme wurden korrekt identifiziert (mit
In diesem Fall wird diese Reaktion negativ bewertet. oder ohne Zusatztests).
Dieses Phänomen ist in der Prozenttabelle - 4,61 % der Stämme wurden nicht identifiziert.
berücksichtigt. - 2,59 % wurden falsch identifiziert.
• Bei Erhalt des Identifizierungsergebnisses Salmonella
oder Shigella muss die biochemische Identifizierung
serologisch bestätigt werden.
api® 20 E 07584E - DE - 2004/05
• Andere gramnegative, nicht anspruchsvolle Stäbchen: BESEITIGUNG DER ABFÄLLE

2386 Stämme unterschiedlicher Herkunft und Stämme Entsorgen Sie alle gebrauchten und nicht gebrauchten
aus Stammsammlungen, die zu den Spezies der Reagenzien sowie kontaminierte Einwegmaterialien
Datenbasis gehören, wurden getestet: gemäß den für infektiöse oder potenziell infektiöse
- 90,32 % der Stämme wurden korrekt identifiziert (mit Materialien geltenden Bestimmungen.
oder ohne Zusatztests). Es liegt in der Verantwortung jedes Labors, die
- 6,16 % der Stämme wurden nicht identifiziert. entstandenen Fest- und Flüssigabfälle gemäß der
- 3,52 % wurden falsch identifiziert. jeweiligen Risikogruppe zu behandeln und deren
Entsorgung in Übereinstimmung mit den gültigen
gesetzlichen Bestimmungen sicherzustellen.
ABLESETABELLE
AKTIVE MENGE ERGEBNISSE

TESTS REAKTIONEN/ENZYME
BESTANDTEILE (mg/Vert.).
NEGATIV POSITIV
ß-Galaktosidase
2-Nitrophenyl-ßD-
ONPG 0,223 (Ortho-Nitrophenyl-ßD- farblos gelb (1)
Galaktopyranosid
Galaktopyranosidase)
ADH L-Arginin 1,9 Arginin DiHydrolase gelb rot / orange (2)
LDC L-Lysin 1,9 Lysin DeCarboxylase gelb rot / orange (2)
ODC L-Ornithin 1,9 Ornithin DeCarboxylase gelb rot / orange (2)
CIT Trinatriumcitrat 0,756 CITratverwertung hellgrün / gelb blau-grün / blau (3)
H2S Natriumthiosulfat 0,075 H2S-Bildung farblos / gräulich schwarzer Niederschlag

URE Harnstoff 0,76 UREase gelb rot / orange (2)
TDA / sofort
TDA L-Tryptophan 0,38 Tryptophan DesAminase gelb rotbraun
JAMES / sofort
farblos rosa
IND L-Tryptophan 0,19 INDol-Bildung hellgrün / gelb
VP 1 + VP 2 / 10 min
Acetoinbildung
VP Natriumpyruvat 1,9 farblos rosa / rot (5)
(Voges Proskauer)
GEL Gelatine Diffusion der schwarzen

0,6 Gelatinase (GELatine) keine Diffusion
(bovinen Ursprungs) Tusche
Fermentation / Oxidation
GLU D-Glukose 1,9 blau / blau-grün gelb / gelb grau
(GLUkose) (4)
MAN D-Mannit 1,9 blau / blau-grün gelb
(MANnit) (4)
INO Inosit 1,9 blau / blau-grün gelb
(INOsit) (4)
SOR D-Sorbit 1,9 blau / blau-grün gelb
(SORbit) (4)
RHA L-Rhamnose 1,9 blau / blau-grün gelb
(RHAmnose) (4)
SAC D-Saccharose 1,9 blau / blau-grün gelb
(SACcharose) (4)
MEL D-Melibiose 1,9 blau / blau-grün gelb
(MELibiose) (4)
AMY Amygdalin 0,57 blau / blau-grün gelb
(AMYgdalin) (4)
ARA L-Arabinose 1,9 blau / blau-grün gelb
(ARAbinose) (4)
OX (siehe Arbeitsanleitung des Cytochrom OXidase (siehe Arbeitsanleitung des Oxidase-Tests)

Oxidase-Tests)
(1) Auch eine nur ganz leichte Gelbfärbung ist als positiv zu bewerten.
(2) Eine orange Verfärbung nach einer 36-48-stündigen Inkubation wird als negativ bewertet.
(3) Ablesung im Becher (aerober Bereich)
(4) Die Fermentation beginnt im unteren Teil der Röhrchens, die Oxidation im Becher.
(5) Eine nach 10 min auftretende schwache rosa Verfärbung wird als negativ bewertet.
• Die angegebenen Mengen können je nach Konzentration der verwendeten Ausgangsmaterialien angeglichen werden.
• Einige Näpfchen enthalten Bestandteile tierischen Ursprungs, vor allem Peptone.
api® 20 E 07584E - DE - 2004/05
ZUSATZREAKTIONEN
ERGEBNISSE
AKTIVE MENGE
TESTS REAKTIONEN/ENZYME
BESTANDTEILE (mg/Vert.) NEGATIV POSITIV
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min
Nitrat-
reduktion NO2 Bildung gelb rot
Kaliumnitrat 0,076
GLU Zn / 5 min
Röhrchen
Reduktion zu N2 orange-rot gelb
API M Medium oder
MOB Beweglichkeit unbeweglich beweglich
Mikroskop
McC MacConkey Agar Wachstum auf McConkey kein Wachstum Wachstum
Agar
OF-F Fermentation: unter Öl grün gelb
Glukose (API OF Medium)
OF-O Oxidation: aerob grün gelb
METHODIK S. I
PROZENTTABELLE S. II
LITERATUR S. IV
SYMBOLE S. V

au capital de 11 879 045 € Box 15969,
Tél. 33 (0)4 78 87 20 00 Fax (1) 919 620 22 11
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REF 20 100 / 20 160 07584E - ES - 2004/05
®
20 E IVD
Sistema de identificación de Enterobacteriaceae y otros bacilos Gram negativos no exigentes
INTRODUCCIÓN Y OBJETO DEL ENSAYO Material:

API 20 E es un sistema estandarizado que permite la - Pipetas o PSIpettes
identificación de Enterobacteriaceae y otros bacilos Gram - Gradilla para ampollas
negativos no exigentes, que incluyen 21 tests bioquímicos - Protege-ampollas
miniaturizados, así como una base de datos. La lista - Equipo general de laboratorio de bacteriología
completa de las bacterias posibles de identificar con este
sistema se presenta en la Tabla de Identificación al final REACTIVOS COMPLEMENTARIOS
de la presente ficha técnica. - API OF Medium (ref. 50 110):
Ensayo para la determinación del metabolismo
PRINCIPIO fermentativo u oxidativo de la glucosa.
La galería del sistema API 20 E se compone de - API M Medium (ref. 50 120):
20 microtubos que contienen los substratos Ensayo para la determinación de la movilidad de las
deshidratados. Los microtubos se inoculan con una bacterias aero-anaerobias.
suspensión bacteriana que reconstituye los tests. Las
reacciones producidas durante el periodo de incubación PRECAUCIONES DE UTILIZACIÓN
se traducen en cambios de color espontáneos o • Para diagnóstico in vitro y control microbiológico.
revelados mediante la adición de reactivos. • Exclusivamente para uso profesional.
La lectura de estas reacciones se lleva a cabo utilizando • Este envase contiene componentes de origen animal.
la Tabla de Lectura, y la identificación se obtiene con la Dado que no se puede controlar el origen y/o el estado
ayuda del Catálogo Analítico o del software de sanitario de los animales, no es posible garantizar de
identificación. forma absoluta que estos productos no contengan
ningún agente patógeno transmisible, por lo que se
PRESENTACIÓN recomienda manipularlos con todas las precauciones de
Caja de 25 tests (ref. 20 100) uso relativas a los productos potencialmente
- 25 galerías API 20 E infecciosos, (no ingerir, no inhalar).
- 25 cámaras de incubación • Todas las muestras, cultivos bacterianos y productos
- 25 hojas de resultados inoculados deben ser considerados como
- 1 barra de cierre potencialmente infecciosos y deben ser manipulados de
- 1 ficha técnica modo apropiado. Durante toda la manipulación, deben
respetarse las normas de asépsia y tomar las
Caja de 100 tests (ref. 20 160) precauciones habituales de manipulación para el grupo
- 100 galerías API 20 E de bacterias estudiadas; consultar (NCCLS M29-A,
- 100 cámaras de incubación Protection of Laboratory Workers from Instrument
- 100 hojas de resultados Biohazards and Infectious Disease Transmitted by
- 1 barra de cierre Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline –
- 1 ficha técnica Revisión en vigor). Para información complementaria
sobre las precauciones de manipulación, consultar al
COMPOSICIÓN DE LA GALERÍA "Biosafety in Microbiological and Biomedical
Laboratories, CDC/NIH - última edición," o la
La composición de la galería API 20 E se puede consultar
reglamentación vigente en el país de utilización.
en la Tabla de Lectura de la presente ficha técnica.
• No utilizar los reactivos después de su fecha de
caducidad.
REACTIVOS Y MATERIAL NECESARIOS PERO NO • Antes de su utilización, asegurarse de la integridad del
SUMINISTRADOS embalaje y sus componentes.
Reactivos: • No utilizar galerías que hayan sufrido una alteración
- API NaCl 0,85 % Medium, 5 ml (ref. 20 230) o física: cúpula deformada, bolsa deshidratante abierta, ....
API Suspension Medium, 5 ml (ref. 20 150) • Los resultados presentados han sido obtenidos
- Caja de reactivos API 20 E (ref. 20 120) o mediante la metodología indicada en la presente ficha
reactivos individuales: TDA (ref. 70 402) técnica. Toda desviación de la metodología puede
JAMES (ref. 70 542) alterar los resultados.
VP 1 + VP 2 (ref. 70 422) • La interpretación de los resultados del test debe ser
NIT 1 + NIT 2 (ref. 70 442) realizada teniendo en cuenta un contexto clínico o de
- Reactivo Zn (ref. 70 380) otro tipo, el origen de las muestras, los aspectos macro
- Oxidasa (ref. 55 635*) y microscópicos de la cepa y, eventualmente, los
* referencia no comercializada en ciertos países: resultados de otros tests, en particular del
utilizar un reactivo equivalente antibiograma.
- Aceite de parafina (ref. 70 100)
- Catálogo Analítico API 20 E (ref. 20 190) o
Software de Identificación (consultar con bioMérieux)
bioMérieux® SA Español - 1
api® 20 E 07584E - ES - 2004/05
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Inoculación de la galería

Las galerías API 20 E se presentan en una bolsa de • Llenar los tubos y las cúpulas de los ensayos CIT ,
aluminio con bolsitas deshidratantes. VP , GEL con la suspensión bacteriana, utilizando la
Después de su apertura (*), conservar las galerías pipeta que se ha usado para la toma de muestras.
restantes con los deshidratantes, volviendo a cerrar la • Llenar únicamente los tubos (y no las cúpulas) de los
bolsa con la ayuda del Sistema de cierre (presente en la otros ensayos.
caja): Colocar la extremidad de la bolsa entre las dos • Crear una anaerobiosis en los ensayos: ADH, LDC,
piezas de la barra y cerrarlos cuidadosamente, a fondo, ODC, H2S, URE, llenado su cúpula de aceite de
en toda su longitud. Las galerías pueden conservarse de parafina.
este modo hasta 10 meses después de la apertura de • Cerrar la cámara de incubación.
la bolsa, a 2-8º C (o hasta la fecha de caducidad indicada • Incubar a 36ºC ± 2ºC durante 18-24 horas.
en el envase, si ésta fuese anterior).
(*) Recomendación para su apertura: Cortar justo por debajo LECTURA E INTERPRETACIÓN
de la soldadura, manteniendo la bolsa recta, para evitar que Lectura de la galería
las bolsitas deshidratantes puedan resultar dañadas. • Después de la incubación, la lectura de la galería debe
MUESTRAS (RECOGIDA Y PREPARACIÓN) hacerse remitiéndose a la Tabla de Lectura.
• Caso de que 3 o más ensayos (test GLU + o -),
La galería API 20 E no debe ser utilizada directamente a
resultasen positivos, anotar en la hoja de resultados
partir de muestras de origen clínico o de otro tipo.
todas las reacciones espontáneas y después revelar los
Los microorganismos a identificar deben aislarse en una
ensayos que necesitan la adición de reactivos:
primera fase sobre un medio de cultivo adecuado según
- Prueba TDA: agregar una gota del reactivo TDA.
las técnicas usuales de bacteriología.
Uncolor marrón-rojizo indica una reacción positiva
MODO DE EMPLEO que se anotará en la hoja de resultados.
Test de la Oxidasa - Prueba IND: agregar 1 gota del reactivo JAMES. Un
El test Oxidasa debe ser realizado según las color rosado que se difumina en toda la cúpula indica
instrucciones de utilización del fabricante, y constituye el una reacción positiva, que se debe anotar en la hoja
test de identificación n°21 a anotar en la hoja de de resultados.
resultados. - Prueba VP: agregar una gota de los reactivos VP 1 y
VP 2. Esperar un mínimo de 10 minutos. Un color
Preparación de la galería rosa o rojo indica una reacción positiva que se
• Reunir fondo y tapa de una cámara de incubación y anotará en la hoja de resultados. Una débil coloración
repartir aproximadamente 5 ml de agua destilada o rosa que aparece después de 10 minutos debe ser
desmineralizada [o cualquier agua sin aditivos o considerada como negativa.
derivados susceptibles de liberar gases (Ej.: Cl2, CO2...)] NOTA: La prueba de investigación sobre la producción
en los alvéolos para crear la atmósfera húmeda. de Indól debe ser realizada en último lugar, pues esta
• Inscribir la referencia de la cepa en la lengüeta lateral reacción libera gases que pueden alterar la
de la cámara (no inscribir la referencia sobre la tapa, ya interpretación de las otras pruebas de la galería. No
que ésta puede quedar desplazada durante la volver a colocar la tapa de la incubadora después de
manipulación). agregar el reactivo.
• Sacar la galería de su envase. • Si el número de pruebas positivas antes de añadir los
• Colocar la galería en la cámara de incubación. reactivos (incluyendo el ensayo GLU) es inferior a 3:
NOTA: La galería API 20 E debe ser utilizada con las - Reincubar la galería 24 horas (± 2 horas)
Enterobacteriaceae y/o los bacilos Gram negativos no suplementarias sin volver a añadir los reactivos.
exigentes. Los microorganismos exigentes y que - Revelar los ensayos que precisan adición de reactivos
necesiten precauciones de manipulación particulares (Ej.: (ver párrafo precedente).
Brucella y Francisella) no forman parte de la base de - Para completar la identificación, puede ser útil realizar
datos API 20 E. Conviene usar otras técnicas para excluir ensayos complementarios (consultar el párrafo
o confirmar su presencia. "Identificación").
Preparación del inóculo Interpretación

• Abrir una ampolla de API NaCl 0,85% Medium (5 ml) o La identificación se obtiene a partir del perfil numérico:
una ampolla de API Suspension Medium (5 ml), como • Determinación del perfil numérico:
se indica en el párrafo “Precauciones de utilización” de En la hoja de resultados, los tests están separados en
la presente ficha técnica o utilizar un tubo que contenga grupos de tres y se indica para cada uno un valor de 1,
5 ml de agua fisiológica estéril o de agua destilada 2 ó 4. Como la galería API 20 E comporta 20 ensayos,
estéril, sin aditivos. sumando al interior de cada grupo los valores que
• Con una pipeta o una PSIpipete, extraer una sola corresponden a reacciones positivas, se obtiene un
colonia bien aislada sobre medio agar. Utilizar perfil numérico de 7 cifras. (A la reacción de la oxidasa,
preferentemente cultivos jóvenes (18-24 horas). que constituye el test n° 21 se le asigna el valor 4,
• Realizar una suspensión bacteriana homogeneizando cuando resulte positiva).
cuidadosamente las bacterias en el medio. Esta • Identificación:
suspensión debe ser utilizada inmediatamente después Se realiza a partir de la base de datos (V4.0).
de su preparación. * Con la ayuda del Catálogo Analítico:
NOTA: La mayoría de las especies de Vibrio son -Localizar el perfil numérico en la lista de los perfiles.
halófilas. En caso de sospechar la presencia de un Vibrio, * Con la ayuda del software de identificación:
realizar la suspensión bacteriana en el API NaCl 0,85% - Introducir manualmente mediante el teclado el perfil
Medium. numérico de 7 cifras.
api® 20 E 07584E - ES - 2004/05
Como además, en ciertos casos, el perfil de 7 cifras - Movilidad (MOB): inocular una ampolla API M Medium
resulta insuficientemente discriminante, es necesario (ver ficha técnica).
realizar los siguientes ensayos complementarios: - Cultivo sobre agar MacConkey (McC: inocular un medio
- Reducción de los nitratos en nitritos (NO2) y en MacConkey (ver ficha técnica).
nitrógeno (N2): añadir una gota de los reactivos NIT 1 y - Oxidación de la glucosa (OF-O): inocular una ampolla
NIT 2 en el tubo GLU. Esperar de 2 a 5 minutos. Una API OF Medium (ver ficha técnica).
coloración roja indica una reacción positiva (NO2). - Fermentación de la glucosa (OF-F): inocular una
Una reacción negativa (coloración amarilla) puede de ampolla API OF Medium (ver ficha técnica).
verse a la producción de nitrógeno (eventualmente Estos ensayos complementarios mencionados en la
señalado por la presencia de micro-burbujas): agregar introducción (codificación de perfiles) del Catálogo
de 2 a 3 mg de reactivo Zn en la cúpula GLU. Después Analítico pueden ser utilizados para constituir un perfil de
de 5 minutos, si el color sigue siendo amarillo, indica 9 cifras, identificable mediante el software de
una reacción positiva (N2), que anotaremos en la hoja identificación.
de resultados. Si el color de la cúpula cambia a
naranja-rojo, la reacción es negativa, ya que los
nitratos aún presentes en el tubo han sido reducidos a
nitritos por el Zinc.
Esta reacción es interesante para los bacilos Gram
negativos y oxidasa positivos. 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
NOTA: Por las mismas razones que en el ensayo de Indól En casos de discriminación débil, pueden proponerse
(ver la nota del párrafo "Lectura de la galería"), el ensayo de otros ensayos suplementarios. Consultar el software o
reducción de los nitratos debe realizarse en último lugar. Catálogo Analítico.
CONTROL DE CALIDAD
Los medios, galerías y reactivos son sometidos a controles de calidad sistemáticos en las diferentes etapas de su
fabricación. Puede además realizarse un control bacteriológico de las diferentes pruebas de la galería por el usuario con
la cepa: 1. Escherichia coli ATCC 25922 de preferencia o una de las cepas siguientes:
ATCC: American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
1. + - + + - - - - + - - + + - + + - + - + + -
2. + - V - V - - - - - + - - - - - - - - - - -
3. + + - + + - - - - + - + + - + + + + + + + -
4. - - - + V + + + - - V + - - - - V - - - + -
5. + - + - + - V - - V - + + + + + + + + + + -
* El estado N2 (+) puede observarse para la cepa ATCC 13047 y la cepa ATCC 25922.
• Perfil obtenido después de 24-48 horas de incubación para la cepa ATCC 51331 a partir de colonias cultivadas sobre agar Trypcase
Soja + sangre.
• Perfiles obtenidos después de 18-24 horas de incubación para otras cepas, a partir de las colonias cultivadas sobre agar Trypcase
Soja + sangre.
• Suspensión bacteriana preparada en API NaCl 0,85% Medium.
El usuario es responsable de asegurarse de que el control de calidad ha sido realizado conforme a la legislación local
vigente.
LIMITACIONES DEL ENSAYO • Los bacilos Gram negativos no fermentadores, aislados
• El sistema API 20 E está destinado a la identificación de las en pacientes afectados de mucoviscidosis, pueden
Enterobacteriaceae y de los bacilos Gram negativos no generar perfiles bioquímicos atípicos susceptibles de
exigentes presentes en la base de datos (ver Tabla de alterar su identificación.
Identificación al final de esta ficha técnica) y sólo y • Sólo se deberán emplear cultivos puros que contengan
exclusivamente a estos gérmenes. No puede ser utilizado un sólo tipo de microorganismo.
para identificar otros microorganismos o excluir su presencia. RESULTADOS ESPERADOS
• Puede observarse discordancias con respecto a las Consultar la Tabla de Identificación que se incluye al final
técnicas convencionales. Esto se debe a los diferentes de esta ficha técnica para aclarar los resultados
principios utilizados en la técnicas API. También puede esperados en las diferentes reacciones bioquímicas.
observarse desviaciones en los porcentajes, hecho que
PRESTACIONES
se explica por las variaciones del substrato.
• Para algunas especies (Ej.: Klebsiella o Proteus), • Enterobacteriaceae
ciertas reacciones inicialmente positivas del ensayo de Han sido ensayadas 5.514 cepas de diversos orígenes,
glucosa pueden transformarse en negativas (aparición así como cepas de colección pertenecientes a especies
de una coloración azul-verde). En estos casos esta de la base de datos:
reacción debe considerarse como negativa. Los - 92,80% de las cepas han sido identificadas
porcentajes indicados en la Tabla de Identificación, correctamente (con o sin ensayos suplementarios).
toman en cuenta este tipo de fenómeno. - 4,61% de las cepas no han sido identificadas.
• En el caso de la identificación de Salmonella o Shigella, - 2,59% de las cepas se han identificado
debe realizarse una identificación serológica para incorrectamente.
confirmar la identificación bacteriana.
api® 20 E 07584E - ES - 2004/05
• Otros bacilos Gram negativos no perniciosos: ELIMINACION DE LOS RESIDUOS

Han sido ensayadas 2.386 cepas de diversos orígenes, Eliminar los reactivos utilizados o no utilizados, así como
así como cepas de colección pertenecientes a especies los materiales de un solo uso contaminados siguiendo los
de la base de datos: procedimientos relacionados con los productos
- 90,32% de las cepas han sido identificadas infecciosos o potencialmente infecciosos.
correctamente (con o sin ensayos suplementarios). Es responsabilidad de cada laboratorio la gestión de los
- 6,16% de las cepas no han sido identificadas. dresiduos y efluentes que produce, según la naturaleza y
- 3,52% de las cepas se han identificado peligrosidad, garantizando (o haciendo garantizar) su
incorrectamente. tratamiento y eliminación según las reglamentaciones
aplicables.
TABLA DE LECTURA
RESULTADOS
TESTS COMPONENTES QTE REACCIONES/ENZIMAS
ACTIVOS (mg/cúp) NEGATIVO POSITIVO
2-nitro-fenil-βD- β-galactosidasa (orto-nitrofenil-βD-
ONPG 0,223 incoloro amarillo (1)
galactopiranosida galactoprianosidasa)
ADH L-arganina 1,9 Arginina-dihidrolasa amarillo rojo/anaranjado (2)
LDC L-lisina 1,9 Lisina Decarboxilasa amarillo rojo/anaranjado (2)
ODC L-ornitina 1,9 Ornitina Decarboxilasa amarillo rojo/anaranjado (2)
CIT citrato trisódico 0,756 utilización del CITrato verde pálido/amarillo azul-verde/azul (3)
depósito negro/fin
H2S tiosulfato sódico 0,075 producción de H2S incoloro/grisáceo
liserado
URE urea 0,76 UREasa amarillo rojo/anaranjado (2)
TDA / inmediato
TDA L-triptófano 0,38 Triptofano DesAminasa amarillo marrón-rojizo
JAMES / inmediato
IND L-triptófano 0,19 producción de ÍNDole incoloro rosa
verde pálido/ amarillo
VP 1 + VP 2 / 10 min
producción de acetoína
VP piruvato sódico 1,9 incoloro rosa/rojo (5)
(Voges Proskauer)
Gelatina no difusión difusión pigmento
GEL 0,6 Gelatinasa (GELatina)
(origen bovino) negro
azul/azul verdoso amarillo/amarillo
GLU D-glucosa 1,9 fermentación/oxidación (GLUcosa) (4)
grisáceo
fermentación/oxidación azul/azul verdoso amarillo
MAN D-manitol 1,9
(MANitol) (4)
INO inositol 1,9
(INOsitol) (4)
SOR D-sorbitol 1,9
(SORbitol) (4)
RHA L-ramnosa 1,9
(RHAmnosa) (4)
SAC D-sacarosa 1,9
(SACarosa) (4)
MEL D-melibiosa 1,9
(MELibiosa) (4)
AMY amigdalina 0,57
(AMYgdalina) (4)
ARA L-arabinosa 1,9
(ARAbinosa) (4)
(ver ficha técnica
OX citocromo-OXidasa (ver ficha técnica del test de oxidasa)
del test de oxidasa)
(1) Un color amarillo muy ligero también implica resultado positivo.
(2) La aparición de un color naranja tras 36-48 H de incubación debe considerarse negativa.
(3) Lectura en la cúpula (zona aerobia).
(4) La fermentación comienza en la parte inferior de los tubos, mientras que la oxidación empieza en la cúpula.
(5) Una ligera coloración rosa, que aparece tras 10 minutos, debe ser leída como negativa.
• Las cantidades indicadas pueden ser ajustadas en función de los títulos de las materias primas.
• Ciertas cúpulas contienen componentes de origen animal, notablemente peptonas.
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ENSAYOS COMPLEMENTARIOS
RESULTADOS
TESTS QTE REACCIONES/ENZIMAS NEGATIVO POSITIVO
COMPONENTES (mg/cúp)
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min
Reducción producción de NO2 amarillo rojo
de nitratos nitrato potásico 0,076
tubo GLU Zn / 5 min
reducción al estado N2 naranja-rojo amarillo
MOB API M Medium o
microscopio movilidad inmóvil móvil
McC Medio de
MacConkey cultivo ausencia presencia
OF-F fermentación: bajo aceite Verde Amarillo

Glucose
(API OF Medium)
OF-O oxidación: al aire verde amarillo
METODOLOGÍA p. I
TABLA DE IDENTIFICACIÓN p. II
BIBLIOGRAFÍA p. IV
TABLA DE SÍMBOLOS p. V
bioMérieux, Inc
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au capital de 11 879 045 € Durham, NC 27704-0969 / USA
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20 E IVD
Sistema di identificazione delle Enterobacteriaceae e di altri bacilli Gram negativi non esigenti
INTRODUZIONE E OBIETTIVO DEL TEST Materiale :

API 20 E è un sistema standardizzato per l'identificazione - Pipette o PSIpette
delle Enterobacteriaceae e di altri bacilli Gram negativi - Proteggi-fiala
non esigenti, che comprende 21 tests biochimici - Porta-fiale
miniaturizzati, oltre ad una base dati specifica. L'elenco - Equipaggiamento generico per laboratorio di
completo dei batteri che possono essere identificati con batteriologia
questo sistema è riportato nella Tabella di Identificazione
alla fine di questa scheda tecnica. REATTIVI COMPLEMENTARI
- API OF Medium (cod. 50 110) :
PRINCIPIO Test per la determinazione del metabolismo fermenta-
La galleria API 20 E è costituita da 20 microprovette tivo ed ossidativo del glucosio.
contenenti substrati disidratati. Le microprovette sono - API M Medium (cod. 50120) :
inoculate con una sospensione batterica che ricostituisce i Test per la determinazione della motilità dei batteri aero-
terreni. Le reazioni prodotte durante il periodo di anaerobi.
incubazione si traducono in viraggi di colore spontanei o
rivelati dall'aggiunta di reattivi. AVVERTENZE E PRECAUZIONI
La lettura di queste reazioni si effettua servendosi della • Per diagnostica in vitro e per controllo micro-
Tabella di Lettura mentre l'identificazione si ottiene con biologico.
l'Indice Analitico o con il software di identificazione. • Esclusivamente per uso professionale.
• Questa confezione contiene dei componenti di origine
PRESENTAZIONE animale. Poiché i controlli sull’origine e/o sullo stato
Confezione da 25 test (cod. 20 100) sanitario degli animali non possono garantire in maniera
- 25 gallerie API 20 E assoluta che questi prodotti non contengano nessun
- 25 vaschette di incubazione agente patogeno trasmissibile, si raccomanda di
- 25 schede per la registrazione dei risultati manipolarli con le precauzioni d’uso relative ai prodotti
- 1 barretta di chiusura potenzialmente infettivi (non ingerire, non inalare).
- 1 scheda tecnica • I prelievi, le colture batteriche ed i prodotti seminati
devono essere considerati come potenzialmente infettivi
Confezione da 100 test (cod. 20 160) e devono essere manipolati in maniera appropriata. Le
- 100 galeries API 20 E (4 x 25) tecniche di asepsi e le precauzioni d’uso per il gruppo
- 100 vaschette di incubazione batterico studiato devono essere rispettate durante tutta
- 100 schede per la registrazione dei risultati la manipolazione; fare riferimento a "NCCLS M29-A,
- 1 barretta di chiusura Protection of Laboratory Workers from Instrument
- 1 scheda tecnica Biohazards and Infectious Disease Transmitted by
Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline -
COMPOSIZIONE DELLA GALLERIA Revisione in vigore". Per ulteriori informazioni sulle
precauzioni di manipolazione, consultare "Biosafety in
La composizione della galleria API 20 E è riportata nella
Microbiological and Biomedical Laboratories – CDC/NIH
Tabella di Lettura di questa scheda tecnica.
- Ultima edizione", oppure fare riferimento alla normativa
vigente nel Paese.
REATTIVI E MATERIALE NECESSARI MA NON • Non utilizzare i reattivi dopo la data di scadenza.
FORNITI • Prima dell’uso assicurarsi che gli imballaggi dei differenti
Reattivi : componenti siano integri.
- API NaCl 0,85% Medium, 5 ml (Cod. 20 230) o • Non utilizzare gallerie che abbiano subito una
API Suspension Medium, 5 ml (Cod. 20 150) alterazione fisica : cupole deformate, sacchetto del
- Kit dei reattivi API 20 E (Cod. 20 120) o disidratante aperto, …
reattivi: TDA (Cod. 70 402) • Le performance riportate di seguito sono state ottenute
JAMES (Cod. 70 542) seguendo il procedimento indicato nella scheda tecnica.
VP 1 + VP 2 (Cod. 70 422) Qualsiasi deviazione dal procedimento indicato può
NIT 1 + NIT 2 (Cod. 70 442) alterare i risultati.
- Reattivo Zn (Cod. 70 380) • L’interpretazione dei risultati del test deve tener conto
- Ossidasi (Cod. 55 635*) del contesto clinico o di altra natura, dell’origine del
* Prodotto non commercializzato in alcuni Paesi : campione, degli aspetti macro e microscopici del ceppo
utilizzare un reattivo equivalente ed, eventualmente, dei risultati di altri esami, in
- Olio di paraffina (Cod. 70 100) particolare dell’antibiogramma.
- Indice Analitico API 20 E (Cod. 20 190) o
Software di identificazione (consultare bioMérieux)
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CONDIZIONI DI CONSERVAZIONE Inoculo della galleria

Le gallerie sono contenute in una busta di alluminio • Riempire microprovette e cupole dei tests CIT , VP e
contenente dei sacchetti di disidratante. GEL con la sospensione batterica servendosi della
Una volta aperta (*), la busta può essere richiusa, pipetta utilizzata per il prelievo.
utilizzando la barretta di chiusura contenuta nella • Riempire solo le microprovette (e non le cupole) degli
confezione, permettendo la conservazione delle gallerie altri tests.
rimanenti insieme ai sacchetti del disidratante: inserire • Creare un'anaerobiosi nei tests: ADH, LDC, ODC, H2S,
l'estremità della busta tra le due parti della barretta e URE riempiendo le cupole con olio di paraffina.
bloccarla con cura per tutta la lunghezza. Le gallerie • Richiudere la vaschetta di incubazione.
possono essere conservate per 10 mesi, dopo l'apertura • Incubare a 36°C ± 2°C per 18-24 ore.
della busta, a 2-8° C (o fino alla data di scadenza
indicata sulla confezione, se anteriore). LETTURA E INTERPRETAZIONE
(*) Raccomandazione per l’apertura della busta di Lettura della galleria
alluminio: tagliare subito sotto la saldatura, mantenendo la
busta dritta, per evitare di danneggiare i sacchetti del • Dopo l’incubazione, la lettura della galleria deve essere
disidratante. effettuata servendosi della Tabella di Lettura.
• Se 3 o più test (test GLU + o –) sono positivi, annotare
CAMPIONI (PRELIEVO E, PREPARAZIONE) sulla scheda di registrazione dei risultati tutte le reazioni
spontanee, quindi procedere con i tests che necessitano
L’API 20 E non deve essere utilizzato direttamente su
dell'aggiunta di reattivi:
campioni clinici o di altra natura.
- Test TDA: aggiungere 1 goccia di reattivo TDA. Una
I microrganismi da identificare devono dapprima essere
colorazione marrone-rossastro indica una reazione
isolati su un terreno di coltura idoneo per la coltura delle
positiva da annotare sulla scheda di registrazione dei
Enterobacteriaceae e/o dei bacilli Gram negativi non
risultati.
esigenti con le normali tecniche batteriologiche.
- Test IND: aggiungere 1 goccia di reattivo JAMES. Una
colorazione rosa che si diffonde in tutta la cupola
PROCEDIMENTO indica una reazione positiva da annotare sulla scheda
Test Ossidasi dei risultati.
Utilizzare il test secondo le istruzioni d’uso del - Test VP: aggiungere 1 goccia dei reattivi VP 1 e VP 2.
fabbricante. Costituisce il 21° test di identificazione : Attendere almeno 10 minuti. Un colore rosa o rosso
annotare il risultato sulla scheda dei risultati. indica una reazione positiva da annotare sulla scheda
Preparazione della galleria dei risultati. Una debole colorazione rosa che appaia
dopo i 10 minuti deve essere considerata negativa.
• Riunire fondo e coperchio di una vaschetta di NOTA: Il test della ricerca di produzione dell’indolo deve
incubazione e distribuire circa 5 ml di acqua distillata o essere eseguito alla fine, poiché questa reazione libera
demineralizzata [o semplicemente dell'acqua senza gas che potrebbero alterare l’interpretazione di altri tests
additivi o derivati che potrebbero liberare gas (ad es. della galleria. Non rimettere il coperchio dopo l’aggiunta
Cl2, CO2 ...)] nei pozzetti per creare un ambiente umido. di questi reattivi.
• Annotare il riferimento del ceppo sulla linguetta laterale
della vaschetta. (Non annotare il riferimento sul • Se il numero di tests positivi (compreso il test GLU) è
coperchio, in quanto potrebbe essere spostato al inferiore a 3, non aggiungere i reattivi:
momento della manipolazione). - Incubare nuovamente la galleria per altre 24 ore
• Estrarre la galleria dal suo involucro. (± 2 ore) senza aggiungere i reattivi.
• Mettere la galleria nella vaschetta di incubazione. - Rilevare i tests che necessitano dell'aggiunta di reattivi
(vedere il paragrafo precedente).
NOTA: l’API 20 E deve essere utilizzata con - Per completare l’identificazione può essere utile
Enterobacteriaceae e/o con bacilli Gram negativi non eseguire dei test complementari (vedere il paragrafo
esigenti. I microrganismi esigenti che necessitano di Identificazione).
particolari precauzioni di manipolazione (ad es. Brucella e
Francisella) non fanno parte della base dei dati dell’API Interpretazione
20 E. Si consiglia di utilizzare altre tecniche per L'identificazione si ottiene partendo dal profilo numerico.
escluderne o confermarne la presenza.
• Determinazione del profilo numerico:
Preparazione dell’inoculo Sulla scheda dei risultati, i test sono separati in gruppi di
• Aprire una fiala di API NaCl 0,85% Medium (5 ml) o una tre e ad ognuno viene attribuito un valore pari a
fiala di API Suspension Medium (5 ml) come indicato al 1, 2 o 4. Poichè la galleria API 20 E è costituita da 20
paragrafo “Precauzioni” della scheda tecnica del test, aggiungendo all'interno di ogni gruppo i valori
prodotto o utilizzare una provetta contenente 5 ml di corrispondenti alle reazioni positive, si ottengono 7 cifre;
soluzione fisiologica sterile o di acqua distillata sterile, quando è positiva, alla reazione dell'ossidasi, che
senza additivi. costituisce il 21° test, si attribuisce il valore 4.
• Servendosi di una pipetta o di una PSIpetta, prelevare • Identificazione
una sola colonia ben isolata su terreno agarizzato. Si ottiene partendo dalla base dei dati (V4.0)
Utilizzare preferibilmente colonie giovani (18-24 ore). * utilizzando l’Indice Analitico:
• Mescolare accuratamente per realizzare una - Ricercare il profilo numerico nella lista dei profili.
sospensione batterica omogenea. Questa sospensione * tramite il software di identificazione:
deve essere utilizzata immediatamente dopo la - Digitare sulla tastiera il profilo numerico a 7 cifre.
preparazione.
NOTA: la maggior parte della specie di Vibrio sono alofile.
In caso si sospetti la presenza di Vibrio, eseguire la
sospensione batterica nell’API NaCl 0,85% Medium.
api® 20 E 07584E - IT - 2004/05
Tuttavia in alcuni casi il profilo a 7 cifre non è - Mobilità (MOB) : Inoculare una fiala di API M Medium
sufficientemente discriminante e si rendono quindi (vedere la scheda tecnica).
necessari i seguenti test : - Coltura su agar MacConkey (McC) : Seminare una
- Riduzione dei nitrati in nitriti (NO2) ed in azoto (N2) : piastra di Mac Conkey (vedere la scheda tecnica).
aggiungere una goccia dei reattivi Nit 1 e NIT 2 nel - Ossidazione del glucosio (OF-O) : Inoculare una fiala di
microtubo GLU. Attendere da 2 a 5 minuti. Una API OF Medium (vedere la scheda tecnica).
colorazione rossa indica una reazione positiva (NO2). - Fermentazione del glucosio (OF-F) : Inoculare una fiala
Una reazione negativa (colorazione gialla) può essere di API OF Medium (vedere la scheda tecnica).
dovuta alla produzione di azoto (eventualmente Questi test complementari, indicati nell’introduzione
segnalata dalla presenza di microbolle) : aggiungere (Codifica dei profili) dell’Indice Analitico, possono essere
2-3 mg di reattivo Zn nella cupola GLU. Se dopo utilizzati per costituire unprofilo a 9 cifre, identificabile con
5 minuti un tubo rimane giallo indica una reazione il software di identificazione.
positiva (N2) da annotare sulle scheda dei risultati. Se
la cupola è arancio-rosso, la reazione è negativa: i
nitrati ancora presenti nel tubo sono stati ridotti a nitriti
dallo Zinco.
Questa reazione è interessante per i bacilli Gram 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
negativi ossdasi positivi.
In caso di debole discriminazione possono essere
NOTA : Il test di riduzione dei nitrati deve essere proposti altri test supplementari. Far riferimento al
eseguito alla fine per le stesse ragioni del test indolo software di identificazione o all’Indice Analitico.
(vedere la nota del paragrafo "Lettura della galleria").
CONTROLLO DI QUALITA’
I terreni, le gallerie ed i reattivi sono sottoposti a controlli di qualità sistematici nelle diverse fasi del ciclo produttivo.
Inoltre l’utilizzatore può effettuare un controllo batteriologico dei test della galleria utilizzando il ceppo :
1. Escherichia coli ATCC 25922 di preferenza, oppure uno dei seguenti ceppi :
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* Lo stadio N2 (+) può essere osservato per il ceppo ATCC 13047 e per il ceppo ATCC 25922.
• Profilo ottenuto dopo 24-48 ore di incubazione per il ceppo ATCC 51331, partendo da colonie isolate su agar Tripticasi Soia + sangue.
• Profili ottenuti dopo 18-24 ore di incubazione per gli altri ceppi, partendo da colonie isolate su agar Tripticasi Soia + sangue.
• Sospensione batterica preparata nell’API NaCl 0.85 % Medium.
E’ responsabilità dell’utilizzatore assicurarsi che il controllo di qualità corrisponda a quanto previsto dalla legislazione
vigente.
LIMITI DEL METODO • I bacilli Gram negativi non fermentanti, isolati da pazienti
affetti da mucoviscidosi, possono generare profili
• Il sistema API 20 E è destinato all’identificazione delle
biochimici atipici che possono alterare la loro
Enterobacteriaceae e dei bacilli Gram negativi non
identificazione.
esigenti inclusi nella base dei dati (vedere la Tabella di
• Devono essere utilizzate unicamente colture pure
Identificazione alla fine della scheda tecnica) e solo di
contenenti un solo tipo di microrganismo.
questi. Non può essere utilizzato per identificare altri
microrganismi o per escluderne la presenza.
• E’ possibile osservare delle discordanze rispetto alle RISULTATI ATTESI
tecniche tradizionali a causa delle differenze di principio Per i valori attesi per le differenti reazioni biochimiche far
delle reazioni utilizzate con la tecnica API. Possono riferimento alla Tabella di Identificazione alla fine della
anche essere osservati degli scarti di percentuale che scheda tecnica.
dipendono da variazione di substrato.
• Per alcune specie (ad es. Klebsiella o Proteus), reazioni PERFORMANCE
del test glucosio inizialmente positive possono talvolta • Enterobacteriaceae :
diventare negative (comparsa di una colorazione blu- Sono stati testati 5514 ceppi di diversa origine e ceppi di
verde). In questi casi la reazione deve essere collezione appartenenti a quelli inclusi nella base dei
considerata negativa. Le percentuali indicate nella dati:
Tabella di Identificazione tengono conto di questo tipo di - il 92,80 % dei ceppi è stato correttamente identificato
fenomeno. (con o senza test complementari).
• Nel caso di identificazione di Salmonella o Shigella è - il 4,61 % dei ceppi non è stato identificato.
necessario effettuare un’identificazione sierologica per - il 2,59 % dei ceppi non è stato identificato correttamente.
confermare l’identificazione batterica.
api® 20 E 07584E - IT - 2004/05
• altri bacilli Gram negativi non esigenti : SMALTIMENTO DEI RIFIUTI

Sono stati testati 2386 ceppi di diversa origine e ceppi
Smaltire i reattivi utilizzati o non utilizzati ed i materiali
di collezione appartenenti a quelli inclusi nella base dei
monouso contaminati seguendo le procedure relative ai
dati:
prodotti infettivi o potenzialmente infettivi.
- il 90,32 % dei ceppi è stato correttamente identificato
E’ responsabilità di ogni laboratorio gestire i rifiuti e gli
(con o senza test complementari).
effluenti prodotti a seconda della loro natura e della loro
- il 6,16 % dei ceppi non è stato identificato.
pericolosità ed assicurarne (o farne assicurare) il
- il 3,52 % dei ceppi non è stato identificato correttamente.
trattamento e lo smaltimento conformemente alla
legislazione vigente.
TABELLA DI LETTURA
Q.TA’ RISULTATI
TEST SUBSTRATI REAZIONI/ENZIMI
(mg/cup.) NEGATIVO POSITIVO
ß-galattosidasi
2-nitrofenil-ßD-
ONPG 0,223 (Orto-NitroFenil-ßD- incolore giallo (1)
galattopiranoside
Galattopiranoside)
ADH L-arginina 1,9 Arginina Deidrolasi giallo rosso / arancio (2)
LDC L-lisina 1,9 Lisina DeCarbossilasi giallo rosso / arancio (2)
ODC L-ornitina 1,9 Ornitina DeCcarbossilasi giallo rosso / arancio (2)
CIT citrato trisodico 0,756 utilizzazione del CITrato verde chiaro / giallo blu-verde / blu (3)
H2S tiosolfato di sodio 0,075 produzione di H2S incolore / grigiastro deposito nero / orlo sottile
URE urea 0,76 UREasi giallo rosso / arancio (2)
TDA / immediato
TDA L-triptofano 0,38 Triptofano DeAminasi giallo marrone-rossastro
JAMES / immediato
incolore
IND L-triptofano 0,19 produzione di INDolo verde chiaro / giallo rosa
VP 1 + VP 2 / 10 min.
VP piruvato di sodio 1,9 produzione di acetoina incolore rosa / rosso (5)
(Voges Proskauer)
GEL gelatina diffusione del
0,6 GELatinasi nessuna diffusione
(origine bovina) pigmento nero
fermentazione / ossidazione
GLU D-glucosio 1,9 blu / blu-verde giallo / giallo grigio
(GLUcosio) (4)
fermentazione / ossidazione blu / blu-verde giallo
MAN D-mannitolo 1,9
(MANnitolo) (4)
INO inositolo 1,9
(INOsitolo) (4)
SOR D-sorbitolo 1,9
(SORbitolo) (4)
RHA L-ramnosio 1,9
(Ramnosio) (4)
SAC D-saccarosio 1,9
(SACcarosio) (4)
MEL D-melibioso 1,9
(MELibiosio) (4)
AMY amigdalina 0,57
(AMigdalina) (4)
ARA L-arabinosio 1,9
(ARAbinosio) (4)
OX (vedere scheda tecnica del test citocromo-Ossidasi (vedere scheda tecnica del test ossidasi)
ossidasi)
(1) Una leggerissima colorazione gialla è comunque positiva.

(2) Se dopo 36-48 ore di incubazione appare una colorazione arancione, la reazione deve essere considerata negativa.
(3) Lettura nella cupola (zona aerobia).
(4) La fermentazione comincia nella parte inferiore delle microprovette, mentre l'ossidazione comincia nella cupola.
(5) Una debole colorazione rosa che appaia dopo oltre 10 minuti deve essere considerata negativa.
• Le quantità indicate possono essere aggiustate in funzione dei titoli delle materie prime.
• Alcune cupole contengono dei componenti di origine animale, in particolare dei peptoni.
api® 20 E 07584E - IT - 2004/05
TEST COMPLEMENTARI
RISULTATI
TESTS SUBSTRATI Q.TA’ REAZIONI/ENZIMI
(mg/cup NEGATIVO POSITIVO
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min.

Riduzione
produzione di NO2 giallo rosso
dei nitrati
nitrato di potassio 0,076
provetta Zn / 5 min.
GLU
riduzione allo stadio N2 arancione-rosso giallo
API M Medium o
MOB - MOBilità MOBilità mobile
microscopio
McC Terreno di MacConkey - coltura coltura presenza
OF-F -- fermentazione : sotto olio fermentazione : sotto olio giallo
OF-O glucosio (API OF Medium)
ossidazione : all’aria ossidazione : all’aria giallo
PROCEDIMENTO p. I
TABELLA DI IDENTIFICAZIONE p. II
BIBLIOGRAFIA p. IV
TABELLA DEI SIMBOLI p. V

au capital de 11 879 045 € Box 15969,
Tel. 33 (0)4 78 87 20 00 Fax (1) 919 620 22 11
Fax 33 (0)4 78 87 20 90
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Il logo è un marchio depositato e protetto di proprietà esclusiva di bioMérieux SA o di una delle sue filiali.
REF 20 100 / 20 160 07584E - PT - 2004/05
®
20 E IVD
Sistema de identificação das Enterobacteriaceae e outros bacilos Gram negativos não fastidiosos
INTRODUÇÃO E OBJECTIVO DO TESTE Materiais :

O API 20 E é um sistema padronizado para a - Pipetas ou PSIpetas
identificação das Enterobacteriaceae e outros bacilos - Suporte de protecção de ampolas
Gram negativos não fastidiosos, engloba 21 mini-testes - Suporte para ampolas
bioquímicos e uma base de dados. A lista completa das - Equipamento geral de laboratório de bacteriologia
bactérias possíveis de identificar com este sistema
encontra-se no Quadro de Identificação no final deste REAGENTES COMPLEMENTARES:
folheto informativo. - API OF Medium (Ref. 50 110):
PRINCÍPIO Teste para a determinação do metabolismo
fermentativo ou oxidativo da glucose.
A galeria API 20 E engloba 20 microtubos que contêm os - API M Medium (Ref. 50 120) :
substratos desidratados. Os microtubos são inoculados Teste para a determinação da mobilidade das
com uma suspensão bacteriana que reconstitui os testes. bactérias aero-anaeróbias.
As reacções produzidas durante o período de incubação
traduzem-se por viragens espontâneas de cor ou PRECAUÇÕES DE UTILIZAÇÃO
reveladas através da adição de reagentes. • Para diagnóstico in vitro e para controlo
A leitura destas reacções efectua-se consultando o microbiológico.
Quadro de Leitura e a identificação obtém-se com o • Unicamente para uso profissional.
Catálogo Analítico ou com um programa de identificação. • Este dispositivo contém componentes de origem animal.
APRESENTAÇÃO O controlo da origem e/ou estado sanitário dos animais
não podem garantir de maneira absoluta que estes
Embalagem de 25 testes (ref. 20 100) produtos não contenham nenhum agente patogénico
- 25 galerias API 20 E transmissível, é recomendado manipulá-los com as
- 25 caixas de incubação precauções de utilização relativas aos produtos
- 25 fichas de resultados potencialmente infecciosos (não ingerir; não inalar).
- 1 barra para fechar • As amostras, culturas bacterianas e produtos semeados
- 1 folheto informativo devem ser considerados potencialmente infecciosos e
manipulados de maneira apropriada. As técnicas
Embalagem de 100 testes (ref. 20 160)
assépticas e as precauções habituais de manipulação
- 100 galerias API 20 E (4x25 galerias) para o grupo bacteriano estudado devem ser
- 100 caixas de incubação respeitadas durante toda a manipulação; consultar o
- 100 fichas de resultados "NCCLS M29-A, Protection of Laboratory Workers from
- 1 barra para fechar Instrument Biohazards and Infectious Disease
- 1 folheto informativo Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue;
COMPOSIÇÃO DA GALERIA Approved Guideline – Revisão em vigor". Para
informações complementares sobre as precauções de
A composição da galeria API 20 E está indicada no manipulação, consultar o "Biosafety in Microbiological
Quadro de Leitura deste folheto informativo. and Biomedical Laboratories, CDC/NIH – Última edição"
REAGENTES E MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO ou a regulamentação em vigor no país de utilização.
FORNECIDOS • Não utilizar os reagentes após a data de validade.
• Antes da utilização, assegurar-se de que a embalagem
Reagentes :
dos diferentes componentes não está danificada.
- API NaCl 0,85 % Medium, 5 ml (Ref. 20 230) ou • Não utilizar galerias que tenham sofrido uma alteração
API Suspension Medium, 5 ml (Ref. 20 150) física: cúpula deformada, saqueta/sachet desidratante
- API 20 E embalagem de reagentes (Ref. 20 120) ou aberta, …
reagentes individuais: TDA (Ref. 70 402) • O comportamento funcional apresentado foi obtido com
JAMES (Ref. 70 542) o procedimento indicado neste folheto informativo.
VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422) Qualquer desvio ao procedimento pode alterar os
NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442) resultados.
- Reagente Zn (Ref. 70 380) • A interpretação dos resultados do teste deve ser
- Oxidase (Ref. 55 635*) efectuada tendo em conta o contexto clínico ou outro, a
* referência não comercializada em alguns países: origem da amostra, os aspectos macro e microscópicos
utilizar um reagente equivalente. e, eventualmente, os resultados de outros testes, em
- Óleo de parafina (Ref. 70 100) especial, do antibiograma.
- Catálogo Analítico API 20 E (Ref. 20 190) ou
programa de identificação (consultar a bioMérieux)
bioMérieux® SA Português - 1
api® 20 E 07584E - PT - 2004/05
Inoculação da galeria
CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO
• Encher os tubos e cúpulas nos testes CIT , VP e
As galerias apresentam-se numa bolsa de alumínio com
GEL com a suspensão bacteriana utilizando a pipeta
saquetas/sachets desidratantes.
que serviu para a colheita/coleta.
Depois da abertura da bolsa (*), conservar as galerias
• Encher unicamente os tubos (e não as cúpulas) dos
com os desidratantes fechando-a com a barra para fechar
outros testes.
(junta na embalagem) : colocar a extremidade da bolsa
• Criar uma anaerobiose nos testes ADH, LDC, ODC,
entre as duas peças da barra e pressioná-las H2S, URE enchendo as cúpulas com óleo de parafina.
cuidadosamente, em todo o seu comprimento. As galerias • Fechar a caixa de incubação.
podem ser assim conservadas durante 10 meses após a • Incubar a 36° C ± 2° C durante 18-24 horas.
abertura da bolsa, a 2º - 8° C (ou até à data de validade
indicada na embalagem, se esta for anterior).
LEITURA E INTERPRETAÇÃO
(*) Recomendação para abrir a bolsa: cortar mesmo por
baixo da soldadura, mantendo a bolsa direita para evitar a Leitura da galeria
danificação das saquetas/sachets desidratantes. • Após incubação, a leitura da galeria deve efectuar-se
consultando o Quadro de Leitura.
• Se 3 ou mais testes (teste GLU + ou –) forem positivos,
AMOSTRAS (COLHEITA/COLETA E PREPARAÇÃO) anotar na ficha de resultados todas as reacções
O API 20 E não deve ser utilizado directamente a partir espontâneas e em seguida revelar os testes que
de amostras de origem clínica ou outras. necessitam da adição de reagentes:
Os microrganismos a identificar devem primeiro ser - Teste TDA : adicionar 1 gota de reagente TDA. Uma
isolados num meio de cultura adaptado à cultura das cor castanha-avermelhada indica uma reacção
Enterobacteriaceae e/ou dos bacilos Gram negativos não positiva a anotar na ficha de resultados.
fastidiosos segundo as técnicas habituais de - Teste IND : adicionar 1 gota de reagente JAMES.
bacteriologia. Uma cor rosa difundida em toda a cúpula indica uma
reacção positiva a anotar na ficha de resultados.
PROCEDIMENTO - Teste VP : adicionar 1 gota dos reagentes VP 1 e
VP 2. Esperar, no mínimo, 10 minutos. Uma cor rosa
Teste oxidase
ou vermelha indica uma reacção positiva a anotar na
O teste oxidase deve ser efectuado segundo as ficha de resultados. Uma fraca coloração rosa depois
instruções do fabricante, constitui o 21º teste de de 10 minutos deve ser considerada negativa.
identificação a anotar na ficha de resultados. NOTA: O teste para detectar a produção de indol deve
Preparação da galeria ser efectuado por último, visto que esta reacção liberta
gases que podem alterar a interpretação de outros
• Juntar fundo e tampa de uma caixa de incubação e testes da galeria. Não colocar novamente a tampa de
distribuir cerca de 5 ml de água destilada estéril ou incubação depois da adição do reagente.
desmineralizada [ou qualquer água sem aditivos ou
derivados susceptíveis de libertarem gases (Ex : Cl2, • Se o número de testes positivos aos quais foram
CO2 ...)] nos alvéolos para criar uma atmosfera húmida. adicionados reagentes (incluindo o teste GLU) for
• Inscrever a referência da estirpe/cepa na lingueta lateral inferior a 3 :
da caixa. (Não inscrever a referência na tampa, esta - Reincubar a galeria durante mais 24 horas (± 2 horas)
pode ser deslocada durante a manipulação). sem adicionar os reagentes.
• Tirar a galeria da embalagem. - Revelar os testes que necessitem da adição de
• Colocar a galeria na caixa de incubação. reagentes (consultar o parágrafo anterior).
- Para completar a identificação, pode ser útil efectuar
NOTA : O API 20 E deve ser utilizado com as testes complementares (consultar o parágrafo
Enterobacteriaceae e/ou os bacilos Gram negativos não Identificação).
fastidiosos. Os microrganismos fastidiosos, exigentes e
que necessitam das precauções de manipulação Interpretação
especiais (ex. Brucella e Francisella) não fazem parte da A identificação obtém-se a partir do perfil numérico.
base de dados API 20 E. Convém utilizar outras técnicas
• Determinação do perfil numérico:
para excluir ou confirmar a sua presença.
Na ficha de resultados, os testes são separados por
Preparação do inóculo grupos de três e um valor 1, 2 ou 4 é indicado para
• Abrir uma ampola de API NaCl 0,85 % Medium (5 ml) cada um. A galeria API 20 E engloba 20 testes,
ou uma ampola de API Suspension Medium (5 ml) adicionando no interior de cada grupo os valores que
como indicado no parágrafo "Precauções" do folheto correspondem às reacções positivas, obtém-se 7
informativo do produto, ou utilizar um tubo contendo algarismos; a reacção da oxidase que constitui o 21º
5 ml de soro fisiológico estéril ou água destilada estéril, teste é assinalada com o valor 4 se for positiva.
sem aditivos. • Identificação:
• Com uma pipeta ou um PSIpeta, colher/coletar uma É efectuada a partir da base de dados (V4.0)
única colónia bem isolada no meio gelosado. Utilizar * com o Catálogo Analítico:
preferencialmente culturas recentes (18-24 horas). - Procurar o perfil numérico na lista dos perfis.
• Efectuar uma suspensão bacteriana homogeneizando * com o programa de identificação:
cuidadosamente as bactérias no meio. - Introduzir manualmente no teclado o perfil numérico
Esta suspensão deve ser utilizada extemporaneamente. com 7 algarismos.
NOTA: a maioria das espécies de Vibrio são halófilas. Se
se suspeitar de um Vibrio, efectuar a suspensão
bacteriana em API NaCl 0,85 % Medium.
api® 20 E 07584E - PT - 2004/05
Nalguns casos, pode haver necessidade de efectuar - Mobilidade (MOB) : Inocular uma ampola de API M
testes complementares por o perfil de 7 algarismos não Medium (cfr folheto informativo).
ser iuficientemente discriminativo: - Cultura em gelose MacConkey (McC): Semear um meio
- Redução dos nitratos em nitritos (NO2) e em azoto (N2) : de Mac Conkey (cfr folheto informativo).
adicionar 1 gota dos reagentes NIT 1 e NIT 2 no tubo - Oxidação da glucose (OF-O) : Inocular uma ampola de
GLU. Esperar 2 a 5 minutos. Uma cor vermelha indica API OF Medium (cfr folheto informativo).
uma reacção positiva (NO2). Uma reacção negativa - Fermentação da glucose (OF-F) : Inocular uma ampola
(coloração amarela) pode ser devida à produção de de API OF Medium (cfr folheto informativo).
azoto (eventualmente assinalada pela presença de Estes testes complementares, mencionados na
bolhas mínimas): adicionar 2 a 3 mg de reagente Zn na introdução (Código dos perfis) do Catálogo Analítico,
cúpula GLU. Após 5 minutos, se um tubo permanecer podem ser utilizados para constituir um perfil de 9
amarelo indica uma reacção positiva (N2) a anotar na algarismos, identificável com o programa de identificação.
ficha de resultados. Se a cúpula estiver laranja-
vermelha, a reacção é negativa, os nitratos ainda
presentes no tubo foram reduzidos a nitritos pelo Zinco.
Esta reacção é especialmente interessante para os
bacilos Gram negativos oxidase positiva. 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
NOTA: Pelas mesmas razões que as do teste indol Podem ser propostos testes suplementares se houver
(consultar a nota do parágrafo "Leitura da galeria"), o fraca discriminação. Consultar o programa ou o Catálogo
teste de redução dos nitratos deve efectuar-se por último. Analítico.
CONTROLO DE QUALIDADE
Os meios, galerias e reagentes são objecto de controlos de qualidade sistemáticos nas diferentes etapas do seu fabrico.
Além disso, o utilizador pode efectuar um controlo bacteriológico dos testes da galeria, preferencialmente com a
estirpe/cepa 1. Escherichia coli ATCC 25922 ou com uma das estirpes/cepas seguintes:
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* O estado N2 (+) pode ser observado para a estirpe/cepa ATCC 13047 e a estirpe/cepa ATCC 25922.
• Perfil obtido após 24-48 H de incubação para a estirpe/cepa ATCC 51331, a partir de colónias cultivadas em gelose Trypcase Soja +
sangue.
• Perfis obtidos após 18-24 H de incubação para as outras estirpes/cepas, a partir de colónias cultivadas em gelose Trypcase Soja +
sangue.
• Suspensão bacteriana preparada em API NaCl 0.85 % Medium.
É da responsabilidade do utilizador assegurar que o controlo de qualidade é efectuado em conformidade com a
legislação local em vigor.
LIMITES DO TESTE • Os bacilos Gram negativos não fermentadores, isolados
• O sistema API 20 E destina-se à identificação das de doentes com mucoviscidose, podem criar perfis
Enterobacteriaceae e dos bacilos Gram negativos não bioquímicos atípicos susceptíveis de alterar a sua
fastidiosos presentes na base de dados (consultar o identificação.
Quadro de Identificação no final do folheto informativo) • Devem apenas ser utilizadas as culturas puras que
e apenas a estes. Não pode ser utilizado para identificar contenham um único tipo de microrganismo.
outros microrganismos ou excluir a sua presença.
• Podem observar-se discordâncias em relação às RESULTADOS ESPERADOS
técnicas convencionais devidas às diferenças de Consultar o Quadro de Identificação no final deste folheto
princípio das reacções utilizadas em técnica API. informativo para saber os resultados esperados para as
Podem também observar-se desvios de percentagens diferentes reacções bioquímicas.
causados pelas variações de substrato.
• Para algumas espécies (ex. Klebsiella ou Proteus), as COMPORTAMENTO FUNCIONAL
reacções do teste glucose inicialmente positivas podem • Enterobacteriaceae :
tornar-se negativas (aparecimento de uma coloração Foram testadas 5514 estirpes/cepas de diversas
azul-esverdeada). Neste caso, esta reacção deve ser origens e estirpes/cepas de colecção pertencentes às
considerada negativa. As percentagens indicadas no espécies da base de dados:
Quadro de Identificação têm em consideração este - 92,80 % das estirpes/cepas foram correctamente
género de fenómeno. identificadas (com ou sem testes complementares).
• No caso de identificação de Salmonella ou Shigella, - 4,61 % das estirpes/cepas não foram identificadas.
deve efectuar-se uma identificação serológica para - 2,59 % das estirpes/cepas foram mal identificadas.
confirmar a identificação bacteriana.
api® 20 E 07584E - PT - 2004/05
• Outros bacilos Gram negativos não fastidiosos: ELIMINAÇÃO DE RESÍDUOS

Foram testadas 2386 estirpes/cepas de diversas Eliminar os reagentes utilizados ou não utilizados bem
origens e estirpes/cepas de colecção perctencentes às como os materiais descartáveis contaminados em
espécies da base de dados: conformidade com os procedimentos relativos aos
- 90,32 % das estirpes/cepas foram correctamente produtos infecciosos ou potencialmente infecciosos.
identificadas (com ou sem testes complementares). É da responsabilidade de cada laboratório gerir os
- 6,16 % das estirpes/cepas não foram identificadas. resíduos e os efluentes que este produz consoante a sua
- 3,52 % das estirpes/cepas foram mal identificadas. natureza e o seu perigo, e assegurar (ou fazer assegurar)
o tratamento e a eliminação em conformidade com as
regulamentações aplicáveis.
QUADRO DE LEITURA
COMPONENTES QTD RESULTADOS

TESTES REACÇÕES/ENZIMAS
ACTIVOS (mg/cúp.) NEGATIVO POSITIVO
ß-galactosidase
2-nitrofenil-ßD-
ONPG 0,223 (Orto Nitrofenil-ßD- incolor amarelo (1)
galactopiranosida
Galactopiranosidase)
ADH L-arginina 1,9 Arginina DiHidrolase amarelo vermelho / alaranjado (2)
LDC L-lisina 1,9 Lisina DesCarboxilase amarelo vermelho / alaranjado (2)
ODC L-ornitina 1,9 Ornitina DesCarboxilase amarelo vermelho / alaranjado (2)
Citrato de sódio 0,756 Utilização do CITrato verde pálido / amarelo azul-esverdeado / azul (3)
CIT
H2S Tiosulfato de sódio 0,075 Produção de H2S incolor / acinzentado depósito negro / orla fina
URE Ureia 0,76 UREase amarelo vermelho / alaranjado (2)
TDA / imediato
TDA L-triptofano 0,38 Triptofano DesAminase amarelo castanho-avermelhado
JAMES / imediato
incolor rosa
IND L-triptofano 0,19 Produção de INDol
verde pálido / amarelo
VP 1 + VP 2 / 10 min
Produção de acetoína
VP Piruvato de sódio 1,9 incolor rosa / vermelho (5)
(Voges Proskauer)
Gelatina difusão do pigmento
GEL 0,6 Gelatinase (GELatina) não difusão
(origem bovina) negro
fermentação / oxidação azul / azul-esverdeado amarelo / amarelo
GLU D-glucose 1,9
(GLUcose) (4) acinzentado
fermentação / oxidação azul / azul-esverdeado amarelo
MAN D-manitol 1,9
(MANitol) (4)
INO Inositol 1,9
(INOsitol) (4)
SOR D-sorbitol 1,9
(SORbitol) (4)
fermentação / oxidação Azul / azul-esverdeado amarelo
RHA L-ramnose 1,9
(RAmnose) (4)
SAC D-sacarose 1,9
(SACarose) (4)
fermentação / oxidação azul / azul esverdeado amarelo
MEL D-melibiose 1,9
(MELibiose) (4)
Fermentação / oxidação azul / azul-esverdeado amarelo
AMY Amigdalina 0,57
(AMIgdalina) (4)
fermentação / oxidação Azul / azul-esverdeado amarelo
ARA L-arabinose 1,9
(ARAbinose) (4)
OX (consultar o folheto informativo do Citocromo-Oxidase (consultar o folheto informativo do teste oxidase)
teste oxidase)
(1) Uma cor amarela muito ligeira é também positiva.

(2) Uma cor laranja após 36-48 H de incubação deve ser considerada negativa.
(3) Leitura na cúpula (zona aeróbia).
(4) A fermentação começa na parte inferior dos tubos, a oxidação começa na cúpula.
(5) Uma ligeira coloração rosa depois de 10 minutos deve ser considerada negativa.
• As quantidades indicadas podem ser ajustadas em função dos títulos das matérias-primas.
• Algumas cúpulas contêm componentes de origem animal, nomeadamente, peptonas.
api® 20 E 07584E - PT - 2004/05
TESTES COMPLEMENTARES
RESULTADOS
COMPONENTES QTD
TESTES REACÇÕES/ENZIMAS
ACTIVOS (mg/cúp.) NEGATIVO POSITIVO
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min
Redução
dos produção de NO2 amarelo vermelho
nitrato de potássio 0,076
nitratos Zn / 5 min
tubo GLU
redução ao estado N2 laranja-vermelho amarelo
API M Medium ou
MOB mobilidade imóvel móvel
microscópio
McC Meio de MacConkey cultura ausência presença
OF-F fermentação: em óleo verde amarelo
OF-O oxidação: no ar verde amarelo
PROCEDIMENTO p. I
QUADRO DE IDENTIFICAÇÃO p. II
BIBLIOGRAFIA p. IV
QUADRO DOS SÍMBOLOS p. IV
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REF 20 100 / 20 160 07584E - GR - 2004/05
®
20 E IVD
ȈȪıĲȘµĮ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ ȖȚĮ Enterobacteriaceae țĮȚ ȐȜȜĮ µȘ ĮʌĮȚĲȘĲȚțȐ Gram-ĮȡȞȘĲȚțȐ ȕĮțĲȘȡȓįȚĮ
ȆǼȇǿȁǾȌǾ Ȁǹǿ ǼȆǼȄǾīǾȈǾ ȊȜȚțȐ :

ȉȠ API 20 E ĮʌȠĲİȜİȓ ȑȞĮ ʌȡȠĲȣʌȠʌȠȚȘµȑȞȠ ıȪıĲȘµĮ - ȆȚʌȑĲĲİȢ Ȓ PSIpettes
ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ ȖȚĮ Enterobacteriaceae țĮȚ ȐȜȜĮ µȘ - ȆȡȠıĲĮĲİȣĲȚțȒ ıȣıțİȣĮıȓĮ ĳȣıȓȖȖȦȞ
ĮʌĮȚĲȘĲȚțȐ Gram-ĮȡȞȘĲȚțȐ ȕĮțĲȘȡȓįȚĮ, ʌȠȣ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚİȓ - ǼıȤȐȡĮ ȖȚĮ ĳȪıȚȖȖİȢ
21 ȕȚȠȤȘµȚțȑȢ İȟİĲȐıİȚȢ ıİ µȚțȡȠȖȡĮĳȓĮ țĮȚ µȚĮ ȕȐıȘ - īİȞȚțȩȢ µȚțȡȠȕȚȠȜȠȖȚțȩȢ İȡȖĮıĲȘȡȚĮțȩȢ İȟȠʌȜȚıµȩȢ
įİįȠµȑȞȦȞ. ȅ ʌȜȒȡȘȢ țĮĲȐȜȠȖȠȢ İțİȓȞȦȞ ĲȦȞ
ȆǿĬǹȃǹ ȈȊȂȆȁǾȇȍȂǹȉǿȀǹ ǹȃȉǿǻȇǹȈȉǾȇǿǹ :
ȠȡȖĮȞȚıµȫȞ ʌȠȣ İȓȞĮȚ įȣȞĮĲȩȞ ȞĮ ĲĮȣĲȠʌȠȚȘșȠȪȞ µİ ĮȣĲȩ
ĲȠ ıȪıĲȘµĮ ʌĮȡĮĲȓșİĲĮȚ ıĲȠȞ ȆȓȞĮțĮ ȉĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ ıĲȠ - API OF Medium (Ref. 50 110) :
ĲȑȜȠȢ ĮȣĲȠȪ ĲȠȣ İıȫțȜİȚıĲȠȣ ȠįȘȖȚȫȞ. ǼȟȑĲĮıȘ ȖȚĮ ĲȠȞ țĮșȠȡȚıµȩ ĲȠȣ ȗȣµȦĲȚțȠȪ Ȓ
ȠȟİȚįȦĲȚțȠȪ µİĲĮȕȠȜȚıµȠȪ.
ǹȇȋǾ ȂǼĬȅǻȅȊ - API M Medium (Ref. 50 120) :
ǼȟȑĲĮıȘ ĲȘȢ țȚȞȘĲȚțȩĲȘĲĮȢ ʌȡȠĮȚȡİĲȚțȐ ĮȞĮİȡȩȕȚȦȞ
Ǿ ĲĮȚȞȓĮ API 20 E ĮʌȠĲİȜİȓĲĮȚ Įʌȩ 20 µȚțȡȠıȦȜȒȞİȢ ʌȠȣ
ȕĮțĲȘȡȓȦȞ.
ʌİȡȚȑȤȠȣȞ ĮĳȣįĮĲȦµȑȞĮ ȣʌȠıĲȡȫµĮĲĮ. ǹȣĲȑȢ ȠȚ
İȟİĲȐıİȚȢ İȞȠĳșĮȜµȓȗȠȞĲĮȚ µİ ȕĮțĲȘȡȚĮțȩ İȞĮȚȫȡȘµĮ ʌȠȣ ȆȇȅǼǿǻȅȆȅǿǾȈǼǿȈ Ȁǹǿ ȆȇȅĭȊȁǹȄǼǿȈ
ʌȡȠțĮȜİȓ ĮȞĮıȪıĲĮıȘ ĲȦȞ ȣȜȚțȫȞ. ȀĮĲȐ ĲȘ įȚȐȡțİȚĮ ĲȘȢ • īȚĮ in vitrȠ įȚĮȖȞȦıĲȚțȒ ȤȡȒıȘ țĮȚ µȚțȡȠȕȚȠȜȠȖȚțȩ
İʌȫĮıȘȢ, Ƞ µİĲĮȕȠȜȚıµȩȢ ʌȡȠțĮȜİȓ ȤȡȦµĮĲȚțȑȢ ȑȜİȖȤȠ.
µİĲĮȕȠȜȑȢ ʌȠȣ İȓĲİ İȓȞĮȚ ĮȣĲȩµĮĲİȢ Ȓ ĮʌȠțĮȜȪʌĲȠȞĲĮȚ µİ • ǹʌȠțȜİȚıĲȚțȐ ȖȚĮ İʌĮȖȖİȜµĮĲȚțȒ ȤȡȒıȘ.
ĲȘȞ ʌȡȠıșȒțȘ ĲȦȞ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȦȞ. • ǹȣĲȒ Ș ıȣıțİȣĮıȓĮ ʌİȡȚȑȤİȚ ʌȡȠȧȩȞĲĮ ȗȦȚțȒȢ
ȅȚ ĮȞĲȚįȡȐıİȚȢ įȚĮȕȐȗȠȞĲĮȚ ıȪµĳȦȞĮ µİ ĲȠȞ ȆȓȞĮțĮ ʌȡȠȑȜİȣıȘȢ. ȆȚıĲȠʌȠȚȘµȑȞȘ ȖȞȫıȘ ĲȘȢ ʌȡȠȑȜİȣıȘȢ
ǹȞȐȖȞȦıȘȢ țĮȚ Ș ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ ȖȓȞİĲĮȚ µİ ĮȞĮĳȠȡȐ ıĲȠȞ Ȓ/țĮȚ ĲȘȢ ȣȖİȚȠȞȠµȚțȒȢ țĮĲȐıĲĮıȘȢ ĲȦȞ ȗȫȦȞ įİȞ
ǹȞĮȜȣĲȚțȩ ȀĮĲȐȜȠȖȠ ȆȡȠĳȓȜ Ȓ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞĲĮȢ ĲȠ İȖȖȣȐĲĮȚ ʌȜȒȡȦȢ ĲȘȞ ĮʌȠȣıȓĮ µİĲĮįȚįȩµİȞȦȞ
ȜȠȖȚıµȚțȩ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ. ʌĮșȠȖȩȞȦȞ ʌĮȡĮȖȩȞĲȦȞ. īȚ’ ĮȣĲȩ ıȣȞȚıĲȐĲĮȚ ĮȣĲȐ ĲĮ
ʌȡȠȧȩȞĲĮ ȞĮ ĮȞĲȚµİĲȦʌȓȗȠȞĲĮȚ ȦȢ įȣȞȘĲȚțȫȢ
ȆǼȇǿǼȋȅȂǼȃȅ ȉǾȈ ȈȊȈȀǼȊǹȈǿǹȈ µȠȜȣıµĮĲȚțȐ țĮȚ µİ ĲȒȡȘıȘ ĲȦȞ ıȣȞȒșȦȞ µȑĲȡȦȞ
ȈȣıțİȣĮıȓĮ ȖȚĮ 25 İȟİĲȐıİȚȢ (ref. 20 100) ĮıĳĮȜİȓĮȢ (ȞĮ µȘȞ ȜĮµȕȐȞȠȞĲĮȚ Įʌȩ ĲȘȞ ʌİʌĲȚțȒ Ȓ ĲȘȞ
- 25 ĲĮȚȞȓİȢ API 20 E ĮȞĮʌȞİȣıĲȚțȒ Ƞįȩ).
- 25 țȣĲȓĮ İʌȫĮıȘȢ • ǵȜĮ ĲĮ įİȓȖµĮĲĮ, ȠȚ µȚțȡȠȕȚĮțȑȢ țĮȜȜȚȑȡȖİȚİȢ țĮȚ ĲĮ
- 25 ĳȪȜȜĮ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ İȞȠĳșĮȜµȚıµȑȞĮ ʌȡȠȧȩȞĲĮ șĮ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ șİȦȡȠȪȞĲĮȚ
- 1 ıĳȡȐȖȚıµĮ ĲȪʌȠȣ țȜȚʌ µȠȜȣıµĮĲȚțȐ țĮȚ ȞĮ ĮȞĲȚµİĲȦʌȓȗȠȞĲĮȚ țĮĲĮȜȜȒȜȦȢ.
- 1 İıȫțȜİȚıĲȠ ȠįȘȖȚȫȞ ǱıȘʌĲİȢ ĲİȤȞȚțȑȢ țĮȚ ȠȚ ıȣȞȒșİȚȢ ʌȡȠĳȣȜȐȟİȚȢ ȤİȚȡȚıµȠȪ
ȖȚĮ ĲȘ µİȜİĲȫµİȞȘ ȕĮțĲȘȡȚĮțȒ ȠµȐįĮ șĮ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ
ȈȣıțİȣĮıȓĮ ȖȚĮ 100 İȟİĲȐıİȚȢ (ref. 20 160) ĲȘȡȠȪȞĲĮȚ ıİ ȩȜȘ ĲȘȞ įȚȐȡțİȚĮ ĲȘȢ įȚĮįȚțĮıȓĮȢ.
- 100 ĲĮȚȞȓİȢ API 20 E (4x25 ĲĮȚȞȓİȢ) ǹȞĮĳİȡșİȓĲİ ıĲȠ ȑȖȖȡĮĳȠ "NCCLS M29-A, Protection of
- 100 țȣĲȓĮ İʌȫĮıȘȢ Laboratory Workers from Instrument Biohazards and
- 100 ĳȪȜȜĮ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids,
- 1 ıĳȡȐȖȚıµĮ ĲȪʌȠȣ țȜȚʌ and Tissue; Approved Guideline – ȉȡȑȤȠȣıĮ
- 1 İıȫțȜİȚıĲȠ ȠįȘȖȚȫȞ ĮȞĮșİȫȡȘıȘ". īȚĮ ʌȡȩıșİĲİȢ ʌȡȠĳȣȜȐȟİȚȢ țĮĲȐ ĲȠ
ȤİȚȡȚıµȩ, ĮȞĮĳİȡșİȓĲİ ıĲȠ "Biosafety in Microbiological
ȈȊȃĬǼȈǾ ȉǾȈ ȉǹǿȃǿǹȈ and Biomedical Laboratories – CDC/NIH – ȉİȜİȣĲĮȓĮ
Ǿ ıȪȞșİıȘ ĲȘȢ ĲĮȚȞȓĮȢ API 20 E įȓȞİĲĮȚ ıĲȠȞ ȆȓȞĮțĮ ȑțįȠıȘ" Ȓ ıĲȠȣȢ ȚıȤȪȠȞĲİȢ țĮȞȠȞȚıµȠȪȢ țȐșİ ȤȫȡĮȢ.
ǹȞȐȖȞȦıȘȢ ĮȣĲȠȪ ĲȠȣ İıȫțȜİȚıĲȠȣ ȠįȘȖȚȫȞ. • ȂȘȞ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚİȓĲİ ĮȞĲȚįȡĮıĲȒȡȚĮ µİĲȐ ĲȘȞ ȘµİȡȠµȘȞȓĮ
ȜȒȟȘȢ.
ǹȆǹǿȉȅȊȂǼȃǹ ȂǾ ȆǹȇǼȋȅȂǼȃǹ ǹȃȉǿǻȇǹȈȉǾȇǿǹ • ȆȡȚȞ Įʌȩ ĲȘ ȤȡȒıȘ, ȕİȕĮȚȦșİȓĲİ ȩĲȚ Ș ıȣıțİȣĮıȓĮ ĲȦȞ
Ȁǹǿ ȊȁǿȀǹ įȚĮĳȩȡȦȞ ʌİȡȚİȤȠµȑȞȦȞ İȓȞĮȚ ȐșȚțĲȘ.
• ȂȘȞ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚİȓĲİ ĲĮȚȞȓİȢ ȠȚ ȠʌȠȓİȢ ʌĮȡȠȣıȚȐȗȠȣȞ
ǹȞĲȚįȡĮıĲȒȡȚĮ: ĳșȠȡȑȢ: ʌĮȡĮµȠȡĳȦµȑȞĮ țȣʌȑȜȚĮ, ĮȞȠȚțĲȩȢ ĳĮțİȜȓıțȠȢ
- API NaCl 0.85 % Medium, 5 ml (Ref. 20 230) Ȓ ĮĳȣȖȡĮȞĲȒ, țȜʌ.
API Suspension Medium, 5 ml (Ref. 20 150) • ȉĮ įİįȠµȑȞĮ ĲȘȢ ĮʌȩįȠıȘȢ ĲȘȢ µİșȩįȠȣ ʌȠȣ
- API 20 E reagent kit (Ref. 20 120) Ȓ ʌĮȡȠȣıȚȐȗȠȞĲĮȚ İȜȒĳșȘıĮȞ ĮțȠȜȠȣșȫȞĲĮȢ ĲȘ
µİµȠȞȦµȑȞĮ ĮȞĲȚįȡĮıĲȒȡȚĮ: įȚĮįȚțĮıȓĮ Ș ȠʌȠȓĮ ʌİȡȚȖȡȐĳİĲĮȚ ıİ ĮȣĲȩ ĲȠ İıȫțȜİȚıĲȠ
TDA (Ref. 70 402) ȠįȘȖȚȫȞ. ȅʌȠȚĮįȒʌȠĲİ ĮȜȜĮȖȒ Ȓ ĲȡȠʌȠʌȠȓȘıȘ ĲȘȢ
JAMES (Ref. 70 542) įȚĮįȚțĮıȓĮȢ µʌȠȡİȓ ȞĮ İʌȘȡİȐıİȚ ĲĮ ĮʌȠĲİȜȑıµĮĲĮ.
VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422) • Ǿ İȡµȘȞİȓĮ ĲȦȞ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ ĲȘȢ İȟȑĲĮıȘȢ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ
NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442) ȖȓȞİĲĮȚ ȜĮµȕȐȞȠȞĲĮȢ ȣʌȩȥȘ ĲȠ ȚıĲȠȡȚțȩ ĲȠȣ ĮıșİȞȒ, ĲȘȞ
- Zn reagent (Ref. 70 380) ʌȡȠȑȜİȣıȘ ĲȠȣ įİȓȖµĮĲȠȢ, ĲȘ µȠȡĳȠȜȠȖȓĮ ĲȦȞ ĮʌȠȚțȚȫȞ
- Oxidase (Ref. 55 635*) țĮȚ ĲȘ µȚțȡȠıțȠʌȚțȒ İȚțȩȞĮ ĲȠȣ ıĲİȜȑȤȠȣȢ țĮȚ, ĮȞ
* țȦįȚțȩȢ İȓįȠȣȢ ʌȠȣ įİȞ ʌȦȜİȓĲĮȚ ıİ ȠȡȚıµȑȞİȢ ȤȡİȚȐȗİĲĮȚ, ĲĮ ĮʌȠĲİȜȑıµĮĲĮ Įʌȩ ȩʌȠȚİȢ ȐȜȜİȢ
ȤȫȡİȢ: ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȒıĲİ ȑȞĮ ĮȞĲȓıĲȠȚȤȠ ĮȞĲȚįȡĮıĲȒȡȚȠ. İȟİĲȐıİȚȢ ȑȤȠȣȞ ʌȡĮȖµĮĲȠʌȠȚȘșİȓ, ȚįȚĮȓĲİȡĮ ĲȚȢ İȟİĲȐıİȚȢ
- Mineral oil (Ref. 70 100) İȣĮȚıșȘıȓĮȢ ıĲĮ ĮȞĲȚµȚțȡȠȕȚĮțȐ.
- API 20 E Analytical Profile Index (Ref. 20 190) Ȓ
ȜȠȖȚıµȚțȩ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ (ıȣµȕȠȣȜİȣĲİȓĲİ ĲȘȞ
bioMérieux)
bioMérieux® SA ǼȜȜȘȞȚțȐ - 1
api® 20 E 07584E - GR - 2004/05
ȈȊȃĬǾȀǼȈ ĭȊȁǹȄǾȈ • ǵĲĮȞ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚİȓĲİ ʌȚʌȑĲĲĮ Ȓ PSIpette, ȜȐȕİĲİ µȓĮ

ȅȚ ĲĮȚȞȓİȢ ʌĮȡȑȤȠȞĲĮȚ ıİ ĮȜȠȣµȚȞȑȞȚȠ ıĮțȠȣȜȐțȚ µİ µȩȞȠȞ țĮȜȐ ĮʌȠµȠȞȦµȑȞȘ ĮʌȠȚțȓĮ Įʌȩ ȑȞĮ ĲȡȣȕȜȓȠ
ĳĮțİȜȓıțȠȣȢ ĮĳȣȖȡĮȞĲȒ. ĮʌȠµȩȞȦıȘȢ. ȈȣȞȚıĲȐĲĮȚ ȞĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚİȓĲİ ȞȑİȢ
ǼĳȩıȠȞ ĮȞȠȚȤșİȓ (*), ĲȠ ıĮțȠȣȜȐțȚ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ țĮȜȜȚȑȡȖİȚİȢ (18-24 ȦȡȫȞ).
ȟĮȞĮıĳȡĮȖȚıșİȓ µİ ĲȠ ıĳȡȐȖȚıµĮ ĲȪʌȠȣ țȜȚʌ • ǹȞĮµȓȟĲİ ʌȡȠıİțĲȚțȐ ȖȚĮ ȞĮ İʌȚĲȪȤİĲİ ȑȞĮ ȠµȠȚȠȖİȞȑȢ
(ıȣµʌİȡȚȜĮµȕȐȞİĲĮȚ ıĲȘ ıȣıțİȣĮıȓĮ) ȖȚĮ ȞĮ įȚĮĲȘȡȘșȠȪȞ İȞĮȚȫȡȘµĮ.
ȠȚ İȞĮʌȠµȑȞȠȣıİȢ ĲĮȚȞȓİȢ µİ ĲȠȣȢ ĳĮțİȜȓıțȠȣȢ ǹȣĲȩ ĲȠ İȞĮȚȫȡȘµĮ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȘșİȓ ĮµȑıȦȢ
ĮĳȣȖȡĮȞĲȒ: ĲȠʌȠșİĲȒıĲİ ĲȘȞ ĮȞȠȚȤĲȒ ʌȜİȣȡȐ Įʌȩ ĲȠ µİĲȐ Įʌȩ ĲȘȞ ʌȡȠİĲȠȚµĮıȓĮ.
ıĮțȠȣȜȐțȚ țĮĲȐ µȒțȠȢ ĲȠȣ ıĳȡĮȖȓıµĮĲȠȢ țĮȚ ıĳȓȟĲİ ȈǾȂǼǿȍȈǾ : ĲĮ ʌİȡȚııȩĲİȡĮ İȓįȘ Vibrio İȓȞĮȚ ĮȜȩĳȚȜĮ. ǹȞ
ʌȡȠıİțĲȚțȐ ĲĮ įȪȠ µȑȡȘ. ȅȚ ĲĮȚȞȓİȢ µʌȠȡȠȪȞ ĲȩĲİ ȞĮ ȣʌȐȡȤİȚ ȣʌȠȥȓĮ ȖȚĮ Vibrio, İȞĮȚȦȡȒıĲİ ĲĮ ȕĮțĲȒȡȚĮ ıİ
įȚĮĲȘȡȘșȠȪȞ µȑȤȡȚ țĮȚ 10 µȒȞİȢ ĮĳȠȪ ĮȞȠȚȤĲİȓ ĲȠ API NaCl 0.85 % Medium.
ıĮțȠȣȜȐțȚ, ıĲȠȣȢ 2-8°C (Ȓ µȑȤȡȚ ĲȘȞ ȘµİȡȠµȘȞȓĮ ȜȒȟȘȢ
ʌȠȣ ĮȞĮȖȡȐĳİĲĮȚ ıĲȘȞ ıȣıțİȣĮıȓĮ, ĮȞ ĮȣĲȒ İțʌȞİȪıİȚ ǼȞȠĳșĮȜµȚıµȩȢ ĲȘȢ ĲĮȚȞȓĮȢ
ʌȡȫĲȘ). • ȋȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞĲĮȢ ĲȘȞ ȓįȚĮ ʌȚʌȑĲĲĮ, ȖİµȓıĲİ țĮȚ ĲȠ
(*) ȈȣȞȚıĲȫµİȞȘ µȑșȠįȠȢ ȖȚĮ ȞĮ ĮȞȠȓȖİĲİ ĲĮ ıĮțȠȣȜȐțȚĮ : ıȦȜȘȞȐȡȚȠ țĮȚ ĲȠ țȣʌȑȜȚȠ ĲȦȞ İȟİĲȐıİȦȞ CIT , VP
ĮȞȠȓȟĲİ țȩȕȠȞĲĮȢ ĲȠ ıĮțȠȣȜȐțȚ ĮțȡȚȕȫȢ țȐĲȦ Įʌȩ ĲȠ țĮȚ GEL µİ ĲȠ ȕĮțĲȘȡȚĮțȩ İȞĮȚȫȡȘµĮ.
ıĳȡȐȖȚıµĮ țȡĮĲȫȞĲĮȢ ĲȠ ȩȡșȚȠ ȖȚĮ ȞĮ ĮʌȠĳİȣȤșİȓ ȗȘµȚȐ • īİµȓıĲİ µȩȞȠ ĲȠ ıȦȜȘȞȐȡȚȠ (țĮȚ ȩȤȚ ĲȠ țȣʌȑȜȚȠ) ĲȦȞ
ıĲȠȣȢ ĳĮțİȜȓıțȠȣȢ ĮĳȣȖȡĮȞĲȒ. ȐȜȜȦȞ İȟİĲȐıİȦȞ.
• ǻȘµȚȠȣȡȖȒıĲİ ĮȞĮİȡȠȕȓȦıȘ ıĲȚȢ İȟİĲȐıİȚȢ ADH, LDC,
ǻǼǿīȂǹȉǹ (ȈȊȁȁȅīǾ Ȁǹǿ ȆȇȅǼȉȅǿȂǹȈǿǹ) ODC, H2S țĮȚ URE İʌȚțĮȜȪʌĲȠȞĲȐȢ ĲİȢ µİ
ʌĮȡĮĳȚȞȑȜĮȚȠ.
ȉȠ API 20 E įİȞ ʌȡȠȠȡȓȗİĲĮȚ ȖȚĮ ĮʌİȣșİȓĮȢ ȤȡȒıȘ µİ
• ȀȜİȓıĲİ ĲȠ țȣĲȓȠ İʌȫĮıȘȢ.
țȜȚȞȚțȐ Ȓ ȐȜȜĮ įİȓȖµĮĲĮ.
• ǼʌȦȐıĲİ ıĲȠȣȢ 36°C ± 2°C ȖȚĮ 18-24 ȫȡİȢ.
ȅȚ µȚțȡȠȠȡȖĮȞȚıµȠȓ ʌȡȠȢ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ ʌȡȑʌİȚ ʌȡȫĲĮ ȞĮ
ĮʌȠµȠȞȦșȠȪȞ ıİ țĮĲȐȜȜȘȜȠ țĮȜȜȚİȡȖȘĲȚțȩ ȣȜȚțȩ
ǹȃǹīȃȍȈǾ Ȁǹǿ ǼȇȂǾȃǼǿǹ
ʌȡȠıĮȡµȠıµȑȞȠ ıĲȘȞ țĮȜȜȚȑȡȖİȚĮ ĲȦȞ
Enterobacteriaceae Ȓ/țĮȚ µȘ ĮʌĮȚĲȘĲȚțȫȞ Gram- ǹȞȐȖȞȦıȘ ĲȘȢ ĲĮȚȞȓĮȢ
ĮȡȞȘĲȚțȫȞ ȕĮțĲȘȡȚįȓȦȞ, ıȪµĳȦȞĮ µİ ʌȡȩĲȣʌİȢ • ȂİĲȐ ĲȘȞ ʌİȡȓȠįȠ İʌȫĮıȘȢ, įȚĮȕȐıĲİ ĲȘȞ ĲĮȚȞȓĮ µİ
µȚțȡȠȕȚȠȜȠȖȚțȑȢ ĲİȤȞȚțȑȢ. ȕȐıȘ ĲȠȞ ȆȓȞĮțĮ ǹȞȐȖȞȦıȘȢ.
• ǹȞ 3 Ȓ ʌİȡȚııȩĲİȡİȢ İȟİĲȐıİȚȢ (İȟȑĲĮıȘ GLU + Ȓ -) İȓȞĮȚ
ȅǻǾīǿǼȈ ȋȇǾȈǾȈ șİĲȚțȑȢ, țĮĲĮȖȡȐȥĲİ ȩȜİȢ ĲȚȢ ĮȣĲȩµĮĲİȢ ĮȞĲȚįȡȐıİȚȢ ıĲȠ
ǼȟȑĲĮıȘ ȠȟİȚįȐıȘȢ ĳȪȜȜȠ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ țĮȚ ıĲȘ ıȣȞȑȤİȚĮ ĮʌȠțĮȜȪȥĲİ ĲȚȢ
İȟİĲȐıİȚȢ ʌȠȣ ĮʌĮȚĲȠȪȞ ĲȘȞ ʌȡȠıșȒțȘ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȦȞ :
Ǿ İȟȑĲĮıȘ ȠȟİȚįȐıȘȢ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ įȚİȟȐȖİĲĮȚ ıȪµĳȦȞĮ µİ ĲȚȢ
- ǼȟȑĲĮıȘ TDA : ʌȡȠıșȑıĲİ 1 ıĲĮȖȩȞĮ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȠȣ
ȠįȘȖȓİȢ ȤȡȒıȘȢ ĲȠȣ țĮĲĮıțİȣĮıĲȒ. ȉȠ ĮʌȠĲȑȜİıµĮ
TDA. Ǿ İµĳȐȞȚıȘ țȠțțȚȞȦʌȠȪ țĮĳȑ ȤȡȫµĮĲȠȢ
ʌȡȑʌİȚ ȞĮ țĮĲĮȖȡȐĳİĲĮȚ ıĲȠ ĳȪȜȜȠ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ
ȣʌȠįİȚțȞȪİȚ µȚĮ șİĲȚțȒ ĮȞĲȓįȡĮıȘ ʌȡȠȢ țĮĲĮȖȡĮĳȒ
țĮșȫȢ ĮʌȠĲİȜİȓ ĮȞĮʌȩıʌĮıĲȠ ĲµȒµĮ ĲȠȣ ĲİȜȚțȠȪ ʌȡȠĳȓȜ
ıĲȠ ĳȪȜȜȠ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ.
(21Ș İȟȑĲĮıȘ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ).
- ǼȟȑĲĮıȘ IND : ʌȡȠıșȑıĲİ 1 ıĲĮȖȩȞĮ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȠȣ
ȆȡȠİĲȠȚµĮıȓĮ ĲȘȢ ĲĮȚȞȓĮȢ JAMES. Ǿ İµĳȐȞȚıȘ ȡȩįȚȞȠȣ ȤȡȫµĮĲȠȢ ʌȠȣ
• ȆȡȠİĲȠȚµȐıĲİ ȑȞĮ țȣĲȓȠ İʌȫĮıȘȢ (įȓıțȠȢ țĮȚ țȐȜȣµµĮ) ĮȞĮʌĲȪııİĲĮȚ ıİ ȠȜȩțȜȘȡȠ ĲȠ țȣʌȑȜȚȠ ȣʌȠįİȚțȞȪİȚ µȚĮ
țĮȚ įȚĮȞİȓµİĲİ ʌİȡȓʌȠȣ 5 ml ĮʌİıĲĮȖµȑȞȠȣ Ȓ șİĲȚțȒ ĮȞĲȓįȡĮıȘ ʌȡȠȢ țĮĲĮȖȡĮĳȒ ıĲȠ ĳȪȜȜȠ
ĮʌȚȠȞȚıµȑȞȠȣ ȪįĮĲȠȢ [Ȓ ȠʌȠȚȠȣįȒʌȠĲİ ȪįĮĲȠȢ ȤȦȡȓȢ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ.
ʌȡȩıșİĲĮ Ȓ ȤȘµȚțȐ ʌȠȣ µʌȠȡİȓ ȞĮ ĮʌİȜİȣșİȡȫıȠȣȞ - ǼȟȑĲĮıȘ VP : ʌȡȠıșȑıĲİ 1 ıĲĮȖȩȞĮ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȠȣ
ĮȑȡȚĮ (ʌ.Ȥ. Cl2, CO2, țĲȜ.)] ıĲȚȢ țȣȥȑȜİȢ ĲȠȣ įȓıțȠȣ ȖȚĮ VP 1 țĮȚ 1 ıĲĮȖȩȞĮ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȠȣ VP 2. ȆİȡȚµȑȞİĲİ
ȞĮ įȘµȚȠȣȡȖȘșİȓ µȚĮ ȣȖȡȒ ĮĲµȩıĳĮȚȡĮ. ĲȠȣȜȐȤȚıĲȠȞ 10 ȜİʌĲȐ. Ǿ İµĳȐȞȚıȘ ȡȩįȚȞȠȣ Ȓ
• ȀĮĲĮȖȡȐȥĲİ ĲȠȞ țȦįȚțȩ ĲȠȣ ıĲİȜȑȤȠȣȢ ıĲȠ İʌȓµȘțİȢ İȡȣșȡȠȪ ȤȡȫµĮĲȠȢ ȣʌȠįİȚțȞȪİȚ µȚĮ șİĲȚțȒ ĮȞĲȓįȡĮıȘ
ʌĲİȡȪȖȚȠ ĲȠȣ įȓıțȠȣ. (ȂȘȞ țĮĲĮȖȡȐĳİĲİ ĲȠȞ țȦįȚțȩ ıĲȠ ʌȡȠȢ țĮĲĮȖȡĮĳȒ ıĲȠ ĳȪȜȜȠ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ. ǹȞ
țȐȜȣµµĮ, įȚȩĲȚ µʌȠȡİȓ ȞĮ ĲȠʌȠșİĲȘșİȓ ȜĮȞșĮıµȑȞĮ țĮĲȐ ȑʌİȚĲĮ Įʌȩ 10 ȜİʌĲȐ İµĳĮȞȚıĲİȓ ȑȞĮ İȜĮĳȡȫȢ ȡȩįȚȞȠ
ĲȘ įȚȐȡțİȚĮ ĲȘȢ įȚĮįȚțĮıȓĮȢ.) ȤȡȫµĮ, Ș ĮȞĲȓįȡĮıȘ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ șİȦȡȘșİȓ ĮȡȞȘĲȚțȒ.
• ǹĳĮȚȡȑıĲİ ĲȘȞ ĲĮȚȞȓĮ Įʌȩ ĲȘ ıȣıțİȣĮıȓĮ ĲȘȢ. ȈǾȂǼǿȍȈǾ : Ǿ İȟȑĲĮıȘ ʌĮȡĮȖȦȖȒȢ ȚȞįȩȜȘȢ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ
• ȉȠʌȠșİĲȒıĲİ ĲȘȞ ĲĮȚȞȓĮ ıĲȠ țȣĲȓȠ İʌȫĮıȘȢ. įȚİȟĮȤșİȓ ĲİȜİȣĲĮȓĮ, İĳȩıȠȞ Ș ĮȞĲȓįȡĮıȘ ĮȣĲȒ
ĮʌİȜİȣșİȡȫȞİȚ ĮİȡȚȠȪȤĮ ʌȡȠȧȩȞĲĮ ʌȠȣ ʌĮȡİµȕȐȜȜȠȞĲĮȚ
ȈǾȂǼǿȍȈǾ : ȉȠ API 20 E ʌȡȑʌİȚ ȞĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚİȓĲĮȚ ıĲȘȞ İȡµȘȞİȓĮ ȐȜȜȦȞ İȟİĲȐıİȦȞ ıĲȘȞ ĲĮȚȞȓĮ. ȉȠ
µȩȞȠȞ µİ Enterobacteriaceae Ȓ/țĮȚ µȘ ĮʌĮȚĲȘĲȚțȐ Gram- ʌȜĮıĲȚțȩ țȐȜȣµµĮ İʌȫĮıȘȢ įİȞ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ
ĮȡȞȘĲȚțȐ ȕĮțĲȘȡȓįȚĮ. ǹʌĮȚĲȘĲȚțȠȓ ȠȡȖĮȞȚıµȠȓ ʌȠȣ ȑȤȠȣȞ ĮȞĲȚțĮĲĮıĲĮșİȓ µİĲȐ Įʌȩ ĲȘȞ ʌȡȠıșȒțȘ ĲȠȣ
ȣȥȘȜȑȢ șȡİʌĲȚțȑȢ ĮʌĮȚĲȒıİȚȢ țĮȚ ĮʌĮȚĲȠȪȞ țĮĲȐȜȜȘȜİȢ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȠȣ.
ʌȡȠĳȣȜȐȟİȚȢ ȤİȚȡȚıµȫȞ (įȘȜ., Brucella țĮȚ Francisella)
• ǹȞ Ƞ ĮȡȚșµȩȢ ĲȦȞ șİĲȚțȫȞ İȟİĲȐıİȦȞ
įİȞ ʌİȡȚȜĮµȕȐȞȠȞĲĮȚ ıĲȘ ȕȐıȘ įİįȠµȑȞȦȞ ĲȠȣ API 20 E.
(ıȣµʌİȡȚȜĮµȕĮȞȠµȑȞȘȢ ĲȘȢ İȟȑĲĮıȘȢ GLU) ʌȡȚȞ Įʌȩ
ȆȡȑʌİȚ ȞĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȠȪȞĲĮȚ İȞĮȜȜĮțĲȚțȑȢ įȚĮįȚțĮıȓİȢ ȖȚĮ
ĲȘȞ ʌȡȠıșȒțȘ ĲȦȞ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȦȞ İȓȞĮȚ µȚțȡȩĲİȡȠȢ
ȞĮ ĮʌȠțȜİȚıĲİȓ Ȓ ȞĮ İʌȚȕİȕĮȚȦșİȓ Ș ʌĮȡȠȣıȓĮ ĲȠȣȢ.
Įʌȩ 3 :
ȆȡȠİĲȠȚµĮıȓĮ ĲȠȣ İȞĮȚȦȡȒµĮĲȠȢ - ǼʌĮȞİʌȦȐıĲİ ĲȘȞ ĲĮȚȞȓĮ ȖȚĮ ȐȜȜİȢ 24 ȫȡİȢ (± 2 ȫȡİȢ)
• ǹȞȠȓȟĲİ µȚĮ ĳȪıȚȖȖĮ API NaCl 0.85 % Medium (5 ml) Ȓ ȤȦȡȓȢ ȞĮ ʌȡȠıșȑıİĲİ ĮȞĲȚįȡĮıĲȒȡȚĮ.
µȚĮ ĳȪıȚȖȖĮ API Suspension Medium (5 ml) ȩʌȦȢ - ǹʌȠțĮȜȪȥĲİ ĲȚȢ İȟİĲȐıİȚȢ ʌȠȣ ĮʌĮȚĲȠȪȞ ĲȘȞ
ĮȞĮȖȡȐĳİĲĮȚ ıĲȘȞ ʌĮȡȐȖȡĮĳȠ «ȆȡȠİȚįȠʌȠȚȒıİȚȢ țĮȚ ʌȡȠıșȒțȘ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȦȞ (ȕȜȑʌİ ʌȡȠȘȖȠȪµİȞȘ
ȆȡȠĳȣȜȐȟİȚȢ» ĲȠȣ İıȫțȜİȚıĲȠȣ ȠįȘȖȚȫȞ ȖȚĮ ĮȣĲȐ ĲĮ ʌĮȡȐȖȡĮĳȠ).
ʌȡȠȧȩȞĲĮ, Ȓ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȒıĲİ ȠʌȠȚȠįȒʌȠĲİ ıȦȜȘȞȐȡȚȠ - īȚĮ ȞĮ ȠȜȠțȜȘȡȫıİĲİ ĲȘȞ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ, µʌȠȡİȓ ȞĮ
ʌȠȣ ʌİȡȚȑȤİȚ 5 ml ıĲİȓȡȠȣ ĳȣıȚȠȜȠȖȚțȠȪ ȠȡȠȪ Ȓ ıĲİȓȡȠȣ ȤȡİȚĮıĲİȓ ȞĮ įȚİȟȐȖİĲİ ıȣµʌȜȘȡȦµĮĲȚțȑȢ İȟİĲȐıİȚȢ
ĮʌİıĲĮȖµȑȞȠȣ ȪįĮĲȠȢ, ȤȦȡȓȢ ʌȡȩıșİĲĮ. (ĮȞĮĳİȡșİȓĲİ ıĲȘȞ ʌĮȡȐȖȡĮĳȠ ȉĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ).
api® 20 E 07584E - GR - 2004/05
ǼȡµȘȞİȓĮ ǹȞ ĲȠ ȤȡȫµĮ ĲȘȢ İȟȑĲĮıȘȢ ĮȜȜȐȟİȚ ıİ ʌȠȡĲȠțĮȜȓ-

Ǿ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ ʌȡȠțȪʌĲİȚ µİ ĲȠ ĮȡȚșµȘĲȚțȩ ʌȡȠĳȓȜ. İȡȣșȡȩ, ĲȩĲİ ĮȣĲȩ ȣʌȠįİȚțȞȪİȚ ĮȡȞȘĲȚțȒ ĮȞĲȓįȡĮıȘ :
ĲĮ ȞȚĲȡȚțȐ ʌȠȣ ȣʌȐȡȤȠȣȞ ĮțȩµȘ ıĲȠȞ ıȦȜȒȞĮ ȑȤȠȣȞ
• ȀĮșȠȡȚıµȩȢ ĲȠȣ ĮȡȚșµȘĲȚțȠȪ ʌȡȠĳȓȜ :
ĮȞĮȤșİȓ Įʌȩ ĲȠȞ ȌİȣįȐȡȖȣȡȠ.
ȈĲĮ ĳȪȜȜĮ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ, ȠȚ İȟİĲȐıİȚȢ ȤȦȡȓȗȠȞĲĮȚ ıİ
ǹȣĲȒ Ș ĮȞĲȓįȡĮıȘ İȓȞĮȚ ȤȡȒıȚµȘ ȩĲĮȞ İȟİĲȐȗȠȞĲĮȚ
ȠµȐįİȢ ĲȦȞ 3 țĮȚ ȖȚĮ țȐșİ µȓĮ įȓȞİĲĮȚ ĲȚµȒ 1, 2 Ȓ 4.
Gram-ĮȡȞȘĲȚțȐ, șİĲȚțȐ ıĲȘȞ ȠȟİȚįȐıȘ ȕĮțĲȘȡȓįȚĮ.
ȆȡȠıșȑĲȠȞĲĮȢ ĲȚȢ ĲȚµȑȢ ʌȠȣ ĮȞĲȚıĲȠȚȤȠȪȞ ıİ șİĲȚțȑȢ
ĮȞĲȚįȡȐıİȚȢ µȑıĮ ıİ țȐșİ ȠµȐįĮ, ʌȡȠțȪʌĲİȚ ȑȞĮȢ ȈǾȂǼǿȍȈǾ : īȚĮ ĲȠȞ ȓįȚȠ ȜȩȖȠ ȩʌȦȢ țĮȚ ıĲȘȞ İȟȑĲĮıȘ
7ȥȒĳȚȠȢ ĮȡȚșµȩȢ ʌȡȠĳȓȜ ȖȚĮ ĲȚȢ 20 İȟİĲȐıİȚȢ ĲȘȢ ĲĮȚȞȓĮȢ ȚȞįȩȜȘȢ (ȕȜȑʌİ ĲȘȞ ıȘµİȓȦıȘ ıĲȘȞ ʌĮȡȐȖȡĮĳȠ
API 20 E. Ǿ ĮȞĲȓįȡĮıȘ ȠȟİȚįȐıȘȢ ĮʌȠĲİȜİȓ ĲȘȞ 21Ș «ǹȞȐȖȞȦıȘ ĲȘȢ ĲĮȚȞȓĮȢ»), Ș İȟȑĲĮıȘ ĮȞĮȖȦȖȒȢ ĲȦȞ
İȟȑĲĮıȘ țĮȚ ȑȤİȚ ĲȘȞ ĲȚµȒ 4 İȐȞ İȓȞĮȚ șİĲȚțȒ. ȞȚĲȡȚțȫȞ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ įȚİȟȐȖİĲĮȚ ĲİȜİȣĲĮȓĮ.
• ȉĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ : - ȀȚȞȘĲȚțȩĲȘĲĮ (MOB) : ǼȞȠĳșĮȜµȓıĲİ µȓĮ ĳȪıȚȖȖĮ API M
ǼțĲİȜİȓĲĮȚ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞĲĮȢ ĲȘ ȕȐıȘ įİįȠµȑȞȦȞ (V4.0) Medium (ȕȜȑʌİ İıȫțȜİȚıĲȠ ȠįȘȖȚȫȞ).
* µİ ĲȠȞ ǹȞĮȜȣĲȚțȩ ȀĮĲȐȜȠȖȠ ȆȡȠĳȓȜ : - ǹȞȐʌĲȣȟȘ ıĲȠ ȣȜȚțȩ MacConkey agar (McC) :
- ǹȞĮȗȘĲȒıĲİ ĲȠ ĮȡȚșµȘĲȚțȩ ʌȡȠĳȓȜ ıĲȠȞ țĮĲȐȜȠȖȠ ǼµȕȠȜȚȐıĲİ ȑȞĮ ĲȡȣȕȜȓȠ MacConkey agar (ȕȜȑʌİ
ĲȦȞ ʌȡȠĳȓȜ. İıȫțȜİȚıĲȠ ȠįȘȖȚȫȞ).
* µİ ĲȠ ȜȠȖȚıµȚțȩ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ : - ȅȟİȓįȦıȘ ȖȜȣțȩȗȘȢ (OF-O) : ǼȞȠĳșĮȜµȓıĲİ µȓĮ ĳȪıȚȖȖĮ
- ǼȚıȐȖİĲİ ĲȠ 7ȥȒĳȚȠ ĮȡȚșµȘĲȚțȩ ʌȡȠĳȓȜ ȤİȚȡȠțȓȞȘĲĮ API OF Medium (ȕȜȑʌİ İıȫțȜİȚıĲȠ ȠįȘȖȚȫȞ).
ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞĲĮȢ ĲȠ ʌȜȘțĲȡȠȜȩȖȚȠ. - ǽȪµȦıȘ ȖȜȣțȩȗȘȢ (OF-F) : ǼȞȠĳșĮȜµȓıĲİ µȓĮ ĳȪıȚȖȖĮ
API OF Medium (ȕȜȑʌİ İıȫțȜİȚıĲȠ ȠįȘȖȚȫȞ).
Ȉİ țȐʌȠȚİȢ ʌİȡȚʌĲȫıİȚȢ, ĲȠ 7ȥȒĳȚȠ ʌȡȠĳȓȜ įİȞ İȓȞĮȚ
ĮȡțİĲȐ įȚİȣțȡȚȞȚıĲȚțȩ țĮȚ ȤȡİȚȐȗİĲĮȚ ȞĮ įȚİȟĮȤșȠȪȞ ȠȚ ǹȣĲȑȢ ȠȚ ıȣµʌȜȘȡȦµĮĲȚțȑȢ İȟİĲȐıİȚȢ, ʌȠȣ ȣʌȠįİȚțȞȪȠȞĲĮȚ
ʌĮȡĮțȐĲȦ ıȣµʌȜȘȡȦµĮĲȚțȑȢ İȟİĲȐıİȚȢ : ıĲȠ İȚıĮȖȦȖȚțȩ ĲµȒµĮ (ȀȦįȚțȠʌȠȓȘıȘ ʌȡȠĳȓȜ) ĲȠȣ
- ǹȞĮȖȦȖȒ ȞȚĲȡȚțȫȞ ıİ ȞȚĲȡȫįȘ (NO2) țĮȚ ĮȑȡȚȠ (N2) : ǹȞĮȜȣĲȚțȠȪ ȀĮĲĮȜȩȖȠȣ ȆȡȠĳȓȜ, µʌȠȡȠȪȞ ȞĮ
ʌȡȠıșȑıĲİ 1 ıĲĮȖȩȞĮ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȠȣ ȃǿȉ 1 țĮȚ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȘșȠȪȞ ȖȚĮ ĲȠȞ ıȤȘµĮĲȚıµȩ İȞȩȢ 9ȥȒĳȚȠȣ
1 ıĲĮȖȩȞĮ ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȠȣ ȃǿȉ 2 ıĲȠ µȚțȡȠıȦȜȒȞĮ ʌȡȠĳȓȜ. ȈĲȘ ıȣȞȑȤİȚĮ Ș ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ ʌȡȠțȪʌĲİȚ Įʌȩ ĲȠ
GLU. ȆİȡȚµȑȞİĲİ 2 ȑȦȢ 5 ȜİʌĲȐ. ȉȠ İȡȣșȡȩ ȤȡȫµĮ ȜȠȖȚıµȚțȩ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ.
ȣʌȠįİȚțȞȪİȚ șİĲȚțȒ ĮȞĲȓįȡĮıȘ (NO2). Ǿ ĮȡȞȘĲȚțȒ
ĮȞĲȓįȡĮıȘ (țȓĲȡȚȞȠ) İȞįȑȤİĲĮȚ ȞĮ ȠĳİȓȜİĲĮȚ ıĲȘȞ
ĮȞĮȖȦȖȒ ĲȠȣ ĮȗȫĲȠȣ (ȩʌȦȢ ĳĮȓȞİĲĮȚ µİȡȚțȑȢ ĳȠȡȑȢ Įʌȩ
ĲȚȢ ĳȣıĮȜȓįİȢ ĮİȡȓȠȣ) : ʌȡȠıșȑıĲİ 2 ȑȦȢ 3 mg
ĮȞĲȚįȡĮıĲȘȡȓȠȣ Zn ıĲȠ µȚțȡȠıȦȜȒȞĮ GLU. ǲʌİȚĲĮ Įʌȩ 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
5 ȜİʌĲȐ, ĮȞ Ƞ ıȦȜȒȞĮȢ ʌĮȡĮµİȓȞİȚ țȓĲȡȚȞȠȢ ĮȣĲȩ ǼȞįȑȤİĲĮȚ ȞĮ ʌȡȠĲĮșİȓ Ș įȚİȟĮȖȦȖȒ ʌİȡĮȚĲȑȡȦ İȟİĲȐıİȦȞ
ȣʌȠįİȚțȞȪİȚ șİĲȚțȒ ĮȞĲȓįȡĮıȘ (N2) ʌȡȠȢ țĮĲĮȖȡĮĳȒ ıĲȠ ıİ ʌİȡȓʌĲȦıȘ ȤĮµȘȜȒȢ įȚĮțȡȚĲȩĲȘĲĮȢ. ǹȞĮĳİȡșİȓĲİ ıĲȠ
ĳȪȜȜȠ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ. ȜȠȖȚıµȚțȩ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ Ȓ ıĲȠȞ ǹȞĮȜȣĲȚțȩ ȀĮĲȐȜȠȖȠ
ȆȡȠĳȓȜ.
ȆȅǿȅȉǿȀȅȈ ǼȁǼīȋȅȈ
ȉĮ ȣȜȚțȐ, ȠȚ ĲĮȚȞȓİȢ țĮȚ ĲĮ ĮȞĲȚįȡĮıĲȒȡȚĮ ȣʌȠȕȐȜȜȠȞĲĮȚ ıȣıĲȘµĮĲȚțȐ ıİ ʌȠȚȠĲȚțȩ ȑȜİȖȤȠ ıİ įȚȐĳȠȡĮ ıĲȐįȚĮ ĲȘȢ
ʌĮȡĮȖȦȖȒȢ ĲȠȣȢ. īȚĮ İțİȓȞȠȣȢ ĲȠȣȢ ȤȡȒıĲİȢ ʌȠȣ İʌȚșȣµȠȪȞ ȞĮ įȚİȟȐȖȠȣȞ ĲȚȢ įȚțȑȢ ĲȠȣȢ İȟİĲȐıİȚȢ ʌȠȚȠĲȚțȠȪ İȜȑȖȤȠȣ µİ
ĲȘȞ ĲĮȚȞȓĮ, İȓȞĮȚ ʌȡȠĲȚµȩĲİȡȠ ȞĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȒıȠȣȞ ĲȠ ıĲȑȜİȤȠȢ 1. Escherichia coli ATCC 25922 Ȓ ĮȜȜȚȫȢ ȑȞĮ Įʌȩ ĲĮ
ĮțȩȜȠȣșĮ ıĲİȜȑȤȘ:
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* Ǿ țĮĲȐıĲĮıȘ N2 (+) µʌȠȡİȓ ȞĮ ʌĮȡĮĲȘȡȘșİȓ ȖȚĮ ĲȠ ıĲȑȜİȤȠȢ ATCC 13047 țĮȚ ĲȠ ıĲȑȜİȤȠȢ ATCC 25922.
• ȆȡȠĳȓȜ ʌȠȣ ʌȡȠȑțȣȥİ µİĲȐ Įʌȩ 24-48 ȫȡİȢ İʌȫĮıȘȢ ȖȚĮ ĲȠ ıĲȑȜİȤȠȢ ATCC 51331, ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞĲĮȢ ĮʌȠȚțȓİȢ ʌȠȣ ĮȞĮʌĲȪȤșȘțĮȞ
ıİ Trypticase Soy agar + ĮȓµĮ.
• ȆȡȠĳȓȜ ʌȠȣ ʌȡȠȑțȣȥĮȞ µİĲȐ Įʌȩ 18-24 ȫȡİȢ İʌȫĮıȘȢ ȖȚĮ ĲĮ ȐȜȜĮ ıĲİȜȑȤȘ, ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȫȞĲĮȢ ĮʌȠȚțȓİȢ ʌȠȣ ĮȞĮʌĲȪȤșȘțĮȞ ıİ
Trypticase Soy agar + ĮȓµĮ.
• ǺĮțĲȘȡȚĮțȐ İȞĮȚȦȡȒµĮĲĮ ʌĮȡĮıțİȣĮıµȑȞĮ ıİ API NaCl 0.85 % Medium.
ǹʌȠĲİȜİȓ İȣșȪȞȘ ĲȠȣ ȤȡȒıĲȘ ȞĮ įȚİȟȐȖİȚ ĲȠȞ ȆȠȚȠĲȚțȩ ǲȜİȖȤȠ ıȪµĳȦȞĮ µİ ĲȠȣȢ İțȐıĲȠĲİ ĲȠʌȚțȠȪȢ ȚıȤȪȠȞĲİȢ
țĮȞȠȞȚıµȠȪȢ.
api® 20 E 07584E - GR - 2004/05
ȆǼȇǿȅȇǿȈȂȅǿ ȂǼĬȅǻȅȊ ǼȊȇȅȈ ǹȃǹȂǼȃȅȂǼȃȍȃ ǹȆȅȉǼȁǼȈȂǹȉȍȃ

• ȉȠ ıȪıĲȘµĮ API 20 E ʌȡȠȠȡȓȗİĲĮȚ µȩȞȠȞ ȖȚĮ ĲȘȞ ȈȣµȕȠȣȜİȣĲİȓĲİ ĲȠȞ ȆȓȞĮțĮ ȉĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ ıĲȠ ĲȑȜȠȢ
ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ ĲȦȞ Enterobacteriaceae țĮȚ ĲȦȞ µȘ ĮȣĲȠȪ ĲȠȣ İıȫțȜİȚıĲȠȣ ȠįȘȖȚȫȞ ȖȚĮ ĲȠ İȪȡȠȢ ĲȦȞ
ĮʌĮȚĲȘĲȚțȫȞ, Gram-ĮȡȞȘĲȚțȫȞ ȕĮțĲȘȡȚįȓȦȞ ʌȠȣ ĮȞĮµİȞȩµİȞȦȞ ĮʌȠĲİȜİıµȐĲȦȞ ȖȚĮ ĲȚȢ įȚȐĳȠȡİȢ
ʌİȡȚȜĮµȕȐȞȠȞĲĮȚ ıĲȘ ȕȐıȘ įİįȠµȑȞȦȞ (ȕȜȑʌİ ȆȓȞĮțĮ ȕȚȠȤȘµȚțȑȢ ĮȞĲȚįȡȐıİȚȢ.
ȉĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ ıĲȠ ĲȑȜȠȢ ĮȣĲȠȪ ĲȠȣ İıȫțȜİȚıĲȠȣ
ȠįȘȖȚȫȞ). ǻİȞ µʌȠȡİȓ ȞĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȘșİȓ ȖȚĮ ĲȘȞ ǹȆȅǻȅȈǾ
ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ ȠʌȠȚȦȞįȒʌȠĲİ ȐȜȜȦȞ µȚțȡȠȠȡȖĮȞȚıµȫȞ Ȓ • Enterobacteriaceae :
ȖȚĮ ȞĮ ĮʌȠțȜİȓıİȚ ĲȘȞ ʌĮȡȠȣıȓĮ ĲȠȣȢ. ǼȟİĲȐıșȘțĮȞ 5514 ıĲİȜȑȤȘ ıȣȜȜȠȖȒȢ țĮȚ ıĲİȜȑȤȘ
• ȂʌȠȡİȓ ȞĮ ʌĮȡĮĲȘȡȘșȠȪȞ ĮıȣµĳȦȞȓİȢ µİ ĲȚȢ įȚĮĳȩȡȦȞ ʌȡȠİȜİȪıİȦȞ ʌȠȣ ĮȞȒțȠȣȞ ıİ İȓįȘ ʌȠȣ
ıȣµȕĮĲȚțȑȢ µİșȩįȠȣȢ. ǹȣĲȑȢ ȠĳİȓȜȠȞĲĮȚ ıĲȚȢ ıȣµʌİȡȚȜĮµȕȐȞȠȞĲĮȚ ıĲȘ ȕȐıȘ įİįȠµȑȞȦȞ:
įȚĮĳȠȡİĲȚțȑȢ ĮȡȤȑȢ µİșȩįȠȣ ĲȦȞ ĮȞĲȚįȡȐıİȦȞ ʌȠȣ - 92.80 % ĲȦȞ ıĲİȜİȤȫȞ ĲĮȣĲȠʌȠȚȒșȘțĮȞ ıȦıĲȐ (µİ Ȓ
ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȠȪȞĲĮȚ ıĲȘȞ ĲİȤȞȚțȒ API.ǼʌȚʌȜȑȠȞ,ȣʌȐȡȤȠȣȞ ȤȦȡȓȢ ıȣµʌȜȘȡȦµĮĲȚțȑȢ İȟİĲȐıİȚȢ).
įȚĮĳȠȡȑȢ ȣʌȠıĲȡȦµȐĲȦȞ ʌȠȣ İʌȓıȘȢ ȣʌȠȜȠȖȓȗȠȞĲĮȚ ȦȢ - 4.61 % ĲȦȞ ıĲİȜİȤȫȞ įİȞ ĲĮȣĲȠʌȠȚȒșȘțĮȞ.
ʌȠıȠıĲȚĮȓİȢ įȚĮĳȠȡȑȢ. - 2.59 % ĲȦȞ ıĲİȜİȤȫȞ ĲĮȣĲȠʌȠȚȒșȘțĮȞ ȜĮȞșĮıµȑȞĮ.
• ȈʌĮȞȓȦȢ, ȠȚ ĮȞĲȚįȡȐıİȚȢ ĲȘȢ ȖȜȣțȩȗȘȢ ȖȚĮ ȠȡȖĮȞȚıµȠȪȢ
ȩʌȦȢ Ș Klebsiella Ȓ o Proteus µʌȠȡİȓ ȞĮ ĮȞĮıĲȡĮĳȠȪȞ • ǱȜȜĮ µȘ ĮʌĮȚĲȘĲȚțȐ Gram-ĮȡȞȘĲȚțȐ ȕĮțĲȘȡȓįȚĮ :
Įʌȩ șİĲȚțȑȢ ıİ ĮȡȞȘĲȚțȑȢ, ʌİȡȓʌĲȦıȘ ıĲȘȞ ȠʌȠȓĮ ǼȟİĲȐıșȘțĮȞ 2386 ıĲİȜȑȤȘ ıȣȜȜȠȖȒȢ țĮȚ ıĲİȜȑȤȘ
ʌĮȡȠȣıȚȐȗİĲĮȚ ȖĮȜĮȗȦʌȩ-ʌȡȐıȚȞȠ ȤȡȫµĮ. ǹȣĲȒ Ș įȚĮĳȩȡȦȞ ʌȡȠİȜİȪıİȦȞ ʌȠȣ ĮȞȒțȠȣȞ ıİ İȓįȘ ʌȠȣ
ĮȞĲȓįȡĮıȘ șĮ țĮĲĮȖȡĮĳİȓ ȦȢ ĮȡȞȘĲȚțȒ ĮȞĲȓįȡĮıȘ. ıȣµʌİȡȚȜĮµȕȐȞȠȞĲĮȚ ıĲȘ ȕȐıȘ įİįȠµȑȞȦȞ :
ȉȑĲȠȚİȢ ʌİȡȚʌĲȫıİȚȢ ĮʌİȚțȠȞȓȗȠȞĲĮȚ ıĲĮ ʌȠıȠıĲȐ ʌȠȣ - 90.32 % ĲȦȞ ıĲİȜİȤȫȞ ĲĮȣĲȠʌȠȚȒșȘțĮȞ ıȦıĲȐ (µİ Ȓ
ʌĮȡĮĲȓșİȞĲĮȚ ıĲȠȞ ȆȓȞĮțĮ ȉĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ. ȤȦȡȓȢ ıȣµʌȜȘȡȦµĮĲȚțȑȢ İȟİĲȐıİȚȢ).
• ǹȞ ĲĮȣĲȠʌȠȚȘșİȓ Salmonella Ȓ Shigella, ʌȡȑʌİȚ ȞĮ - 6.16 % ĲȦȞ ıĲİȜİȤȫȞ įİȞ ĲĮȣĲȠʌȠȚȒșȘțĮȞ.
įȚİȟĮȤșİȓ ȠȡȠȜȠȖȚțȒ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ ȖȚĮ ȞĮ İʌȚȕİȕĮȚȦșİȓ Ș - 3.52 % ĲȦȞ ıĲİȜİȤȫȞ ĲĮȣĲȠʌȠȚȒșȘțĮȞ ȜĮȞșĮıµȑȞĮ.
ȕĮțĲȘȡȚĮțȒ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ.
• ȉĮ µȘ ȗȣµȦĲȚțȐ Gram-ĮȡȞȘĲȚțȐ ȕĮțĲȘȡȓįȚĮ, ʌȠȣ ȑȤȠȣȞ ǹȆȅȇȇǿȌǾ ǹȆȅǺȁǾȉȍȃ
ĮʌȠµȠȞȦșİȓ Įʌȩ ĮıșİȞİȓȢ µİ țȣıĲȚțȒ ȓȞȦıȘ µʌȠȡİȓ ȞĮ ǹʌȠȡȡȓȥĲİ ĲĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȘµȑȞĮ Ȓ µȘ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȘµȑȞĮ
įȘµȚȠȣȡȖȒıȠȣȞ µȘ ĲȣʌȚțȐ ȕȚȠȤȘµȚțȐ ʌȡȠĳȓȜ, ĲĮ ȠʌȠȓĮ ĮȞĲȚįȡĮıĲȒȡȚĮ țĮșȫȢ țĮȚ ȠʌȠȚĮįȒʌȠĲİ ȐȜȜĮ İʌȚµȠȜȣıµȑȞĮ
µʌȠȡİȓ ȞĮ İʌȘȡİȐıȠȣȞ ĲȘȞ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘ. ĮȞĮȜȫıȚµĮ ȣȜȚțȐ ĮțȠȜȠȣșȫȞĲĮȢ ĲȚȢ įȚĮįȚțĮıȓİȢ ȖȚĮ
• ȂȩȞȠȞ țĮșĮȡȑȢ țĮȜȜȚȑȡȖİȚİȢ ĮʌȠțȜİȚıĲȚțȐ İȞȩȢ µȠȜȣıµĮĲȚțȐ Ȓ įȣȞȘĲȚțȫȢ µȠȜȣıµĮĲȚțȐ ʌȡȠȧȩȞĲĮ.
ȠȡȖĮȞȚıµȠȪ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȘșȠȪȞ. ǹʌȠĲİȜİȓ İȣșȪȞȘ țȐșİ İȡȖĮıĲȘȡȓȠȣ ȞĮ ĮȞĲȚµİĲȦʌȓȗİȚ ĲĮ
ȐȤȡȘıĲĮ ȣȜȚțȐ țĮȚ ĲĮ ȣȖȡȐ İțȡȠȒȢ ʌȠȣ ʌĮȡȐȖȠȞĲĮȚ,
ıȪµĳȦȞĮ µİ ĲȠȞ ĲȪʌȠ țĮȚ ĲȠȞ ȕĮșµȩ İʌȚțȚȞįȣȞȩĲȘĲȐȢ
ĲȠȣȢ țĮȚ ȞĮ ĲĮ įȚĮȤİȚȡȓȗİĲĮȚ țĮȚ ȞĮ ĲĮ ĮʌȠȡȡȓʌĲİȚ (Ȓ ȞĮ
ĮȞĮșȑĲİȚ ĲȘ įȚĮȤİȓȡȚıȘ țĮȚ ĮʌȩȡȡȚȥȒ ĲȠȣȢ) ıȪµĳȦȞĮ µİ
ĲȠȣȢ İțȐıĲȠĲİ ȚıȤȪȠȞĲİȢ țĮȞȠȞȚıµȠȪȢ
api® 20 E 07584E - GR - 2004/05
ȆǿȃǹȀǹȈ ǹȃǹīȃȍȈǾȈ
ǹȆȅȉǼȁǼȈȂǹȉǹ
ǼȄǼȉǹ ȆȅȈ.
ǻȇǹȈȉǿȀǹ ȈȊȈȉǹȉǿȀǹ ǹȃȉǿǻȇǹȈǼǿȈ/ǼȃǽȊȂǹ
ȈǼǿȈ (mg/țȣʌ.)
ǹȇȃǾȉǿȀȅ ĬǼȉǿȀȅ
ß-ȖĮȜĮțĲȠıȚįȐıȘ
2-ȞȚĲȡȠĳİȞȣȜ-ßD-
ONPG 0.223 (ȅȡșȠ ȃȚĲȡȠĭİȞȣȜ-ßD- ȐȤȡȦµȠ țȓĲȡȚȞȠ (1)
ȖĮȜĮțĲȠʌȣȡĮȞȠıȓįȘ
īĮȜĮțĲȠʌȣȡĮȞȠıȚįȐıȘ)
ADH L-ĮȡȖȚȞȓȞȘ 1.9 ǻȚȣįȡȠȜȐįȘ ĲȘȢ ǹȡȖȚȞȓȞȘȢ țȓĲȡȚȞȠ İȡȣșȡȩ / ʌȠȡĲȠțĮȜȓ (2)
LDC L-ȜȣıȓȞȘ 1.9 ǻİțĮȡȕȠȟȣȜȐıȘ ĲȘȢ ȁȣıȓȞȘȢ țȓĲȡȚȞȠ İȡȣșȡȩ / ʌȠȡĲȠțĮȜȓ (2)
ODC L-ȠȡȞȚșȓȞȘ 1.9 ǻİțĮȡȕȠȟȣȜȐıȘ ĲȘȢ ȅȡȞȚșȓȞȘȢ țȓĲȡȚȞȠ İȡȣșȡȩ / ʌȠȡĲȠțĮȜȓ (2)
CIT țȚĲȡȚțȩ ĲȡȚȞȐĲȡȚȠ 0.756 ȋȡȒıȘ țȚĲȡȚțȠȪ ĮȞȠȚȤĲȩ ʌȡȐıȚȞȠ / țȓĲȡȚȞȠ țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ / țȣĮȞȩ (3)
µĮȪȡȠ ȣʌȩȜİȚµµĮ / ȜİʌĲȒ

H2S șİȚȠșİȚȚțȩ ȞȐĲȡȚȠ 0.075 ʌĮȡĮȖȦȖȒ H2S ȐȤȡȦµȠ / ȖțȡȚȗȦʌȩ
ȖȡĮµµȒ
URE ȠȣȡȓĮ 0.76 ȠȣȡİȐıȘ țȓĲȡȚȞȠ İȡȣșȡȩ / ʌȠȡĲȠțĮȜȓ (2)
TDA / ȐµİıȠ
TDA L-ĲȡȣʌĲȠĳȐȞȘ 0.38 ǻİĮµȚȞȐıȘ ĲȘȢ ȉȡȣʌĲȠĳȐȞȘȢ țȓĲȡȚȞȠ țȠțțȚȞȦʌȩ țĮĳȑ
JAMES / ȐµİıȠ
ȐȤȡȦµȠ
IND L-ĲȡȣʌĲȠĳȐȞȘ 0.19 ȆĮȡĮȖȦȖȒ ȚȞįȩȜȘȢ
ĮȞȠȚȤĲȩ ʌȡȐıȚȞȠ / țȓĲȡȚȞȠ ȡȩįȚȞȠ
VP 1 + VP 2 / 10 ȜİʌĲȐ
ʌĮȡĮȖȦȖȒ ĮțİĲȠǸȞȘȢ
VP ʌȣȡȠȣȕȚțȩ ȞȐĲȡȚȠ 1.9 ȐȤȡȦµȠ ȡȩįȚȞȠ / İȡȣșȡȩ (5)
(Voges Proskauer)
GEL ǽİȜĮĲȓȞȘ įȚȐȤȣıȘ µİȜĮȞȒȢ

0.6 ǽİȜĮĲȚȞȐıȘ µȘ įȚȐȤȣıȘ
(ȕȠİȓȠȣ ʌȡȠȑȜİȣıȘȢ) ȤȡȦıĲȚțȒȢ
ȗȪµȦıȘ / ȠȟİȓįȦıȘ
GLU D-ȖȜȣțȩȗȘ 1.9 țȣĮȞȩ / țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ / ȖțȡȚȗȦʌȩ țȓĲȡȚȞȠ
(ȖȜȣțȩȗȘȢ) (4)
MAN D-µĮȞȚĲȩȜȘ 1.9 țȣĮȞȩ / țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
(µĮȞȚĲȩȜȘȢ) (4)
INO ȚȞȠıȚĲȩȜȘ 1.9 țȣĮȞȩ / țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
(ȚȞȠıȚĲȩȜȘȢ) (4)
SOR D-ıȠȡȕȚĲȩȜȘ 1.9 țȣĮȞȩ / țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
(ıȠȡȕȚĲȩȜȘȢ) (4)
RHA L-ȡĮµȞȩȗȘ 1.9 țȣĮȞȩ / țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
(ȡĮµȞȩȗȘȢ) (4)
SAC D-ıȠȣțȡȩȗȘ 1.9 țȣĮȞȩ / țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
(ıĮțȤĮȡȩȗȘȢ) (4)
MEL D-µİȜȚȕȚȩȗȘ 1.9 țȣĮȞȩ / țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
(µİȜȚȕȚȩȗȘȢ) (4)
AMY ĮµȣȖįĮȜȓȞȘ 0.57 țȣĮȞȩ / țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
(ĮµȣȖįĮȜȓȞȘȢ) (4)
ARA L-ĮȡĮȕȚȞȩȗȘ 1.9 țȣĮȞȩ / țȣĮȞȠʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
(ĮȡĮȕȚȞȩȗȘȢ) (4)
(ȕȜȑʌİ İıȫțȜİȚıĲȠ ȠįȘȖȚȫȞ ĲȘȢ

OX ȠȟİȚįȐıȘ ĲȠȣ țȣĲȠȤȡȫµĮĲȠȢ (ȕȜȑʌİ İıȫțȜİȚıĲȠ ȠįȘȖȚȫȞ ĲȘȢ İȟȑĲĮıȘȢ ȠȟİȚįȐıȘȢ)
İȟȑĲĮıȘȢ ȠȟİȚįȐıȘȢ)
(1) ǲȞĮ ʌȠȜȪ ĮȞȠȚȤĲȩȤȡȦµȠ țȓĲȡȚȞȠ șĮ ʌȡȑʌİȚ İʌȓıȘȢ ȞĮ șİȦȡİȓĲĮȚ șİĲȚțȩ.

(2) ǲȞĮ ʌȠȡĲȠțĮȜȓ ȤȡȫµĮ µİĲȐ Įʌȩ 36-48 ȫȡİȢ İʌȫĮıȘȢ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ șİȦȡİȓĲĮȚ ĮȡȞȘĲȚțȩ.
(3) Ǿ ĮȞȐȖȞȦıȘ ȑȖȚȞİ ıĲȠ țȣʌȑȜȚȠ (ĮİȡȩȕȚĮ).
(4) Ǿ ȗȪµȦıȘ ȟİțȚȞȐİȚ ıĲȠ țĮĲȫĲİȡȠ ĲµȒµĮ ĲȦȞ ıȦȜȒȞȦȞ, Ș ȠȟİȓįȦıȘ ĮȡȤȓȗİȚ ıĲȠ țȣʌȑȜȚȠ.
(5) ǲȞĮ İȜĮĳȡȫȢ ȡȩįȚȞȠ ȤȡȫµĮ µİĲȐ Įʌȩ 10 ȜİʌĲȐ șĮ ʌȡȑʌİȚ ȞĮ șİȦȡİȓĲĮȚ ĮȡȞȘĲȚțȩ.
• ȅȚ ĮȞĮȖȡĮĳȩµİȞİȢ ʌȠıȩĲȘĲİȢ µʌȠȡȠȪȞ ȞĮ ȡȣșµȓȗȠȞĲĮȚ ĮȞȐȜȠȖĮ µİ ĲȠȞ ĲȓĲȜȠ ĲȦȞ ʌȡȫĲȦȞ ȣȜȫȞ ʌȠȣ
ȤȡȘıȚµȠʌȠȚȠȪȞĲĮȚ.
• ȅȡȚıµȑȞĮ țȣʌȑȜȚĮ ʌİȡȚȑȤȠȣȞ ʌȡȠȧȩȞĲĮ ȗȦȚțȒȢ ʌȡȠȑȜİȣıȘȢ, İȚįȚțȐ ʌİʌĲȩȞİȢ.
api® 20 E 07584E - GR - 2004/05
ȈȊȂȆȁǾȇȍȂǹȉǿȀǼȈ ǼȄǼȉǹȈǼǿȈ
ǼȄǼȉǹ ȆȅȈ. ǹȆȅȉǼȁǼȈȂǹȉǹ

ǻȇǹȈȉǿȀǹ ȈȊȈȉǹȉǿȀǹ ǹȃȉǿǻȇǹȈǼǿȈ/ǼȃǽȊȂǹ
ȈǼǿȈ (mg/țȣʌ.)
ǹȇȃǾȉǿȀȅ ĬǼȉǿȀȅ
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 ȜİʌĲȐ
ǹȞĮȖȦȖȒ
ȞȚĲȡȚțȫȞ ȆĮȡĮȖȦȖȒ NO2 țȓĲȡȚȞȠ İȡȣșȡȩ
ȞȚĲȡȚțȩ țȐȜȚȠ 0.076
ȂȚțȡȠ- Zn / 5 ȜİʌĲȐ
ıȦȜȒȞĮȢ ĮȞĮȖȦȖȒ ıİ ĮȑȡȚȠ N2 ʌȠȡĲȠțĮȜȓ-İȡȣșȡȩ țȓĲȡȚȞȠ
GLU
API M Medium Ȓ
MOB - țȚȞȘĲȚțȩĲȘĲĮ µȘ țȚȞȘĲȚțȩ țȚȞȘĲȚțȩ
µȚțȡȠıțȩʌȚȠ
McC ȊȜȚțȩ MacConkey - ĮȞȐʌĲȣȟȘ ĮʌȠȣıȓĮ ʌĮȡȠȣıȓĮ
OF-F - ȗȪµȦıȘ : ıİ ʌĮȡĮĳȚȞȑȜĮȚȠ ʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
ȖȜȣțȩȗȘ (API OF Medium)
OF-O - ȠȟİȓįȦıȘ : ȑțșİıȘ ıĲȠȞ ĮȑȡĮ ʌȡȐıȚȞȠ țȓĲȡȚȞȠ
ǻǿǹǻǿȀǹȈǿǹ ıİȜ. I
ȆǿȃǹȀǹȈ ȉǹȊȉȅȆȅǿǾȈǾȈ ıİȜ. II
ǺǿǺȁǿȅīȇǹĭǿǹ ıİȜ. IV
ȆǿȃǹȀǹȈ ȈȊȂǺȅȁȍȃ ıİȜ. V

au capital de 11 879 045 € Box 15969,
69280 Marcy-l'Etoile / France ȉȘȜ. (1) 919 620 20 00
ȉȘȜ. 33 (0)4 78 87 20 00 Fax (1) 919 620 22 11
Fax 33 (0)4 78 87 20 90
http://www.biomerieux.com ǼțĲȣʌȫșȘțİ ıĲȘ īĮȜȜȓĮ
ȉȠ ȜȠȖȩĲȣʌȠ ĮʌȠĲİȜİȓ țĮĲĮȤȦȡȘµȑȞȠ țĮȚ țĮĲȠȤȣȡȦµȑȞȠ İµʌȠȡȚțȩ ıȒµĮ ĲȘȢ of bioMérieux SA Ȓ µȚĮȢ İț ĲȦȞ șȣȖĮĲȡȚțȫȞ
ĲȘȢ.
REF 20 100 / 20 160 07584E - SE - 2004/05
®
20 E IVD
Identifieringssystem för Enterobacteriaceae och andra icke-krävande Gram-negativa stavar
SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING Material:

API 20 E är ett standardiserat identifieringssystem för - Pipetter eller PSIpetter
Enterobacteriaceae och andra icke-krävande Gram- - Ampullskydd
negativa stavar. Testet består av 21 biokemiska tester i - Ampullställ
miniatyr och en databas. En fullständig lista över de - Allmän utrustning för mikrobiologiskt laboratorium
organismer som är möjliga att identifiera med hjälp av
detta system återfinns i Identifieringstabellen, sist i denna YTTERLIGARE TÄNKBARA REAGENSER :
bipacksedel. - API OF Medium (Art.nr. 50 110) :
Test för bestämning av fermentativ eller oxidativ
METOD metabolism.
API 20 E strips består av 20 mikrobrunnar innehållande - API M Medium (Art.nr. 50 120) :
dehydrerade substrat. Dessa tester inokuleras med en Motitlitetstest för fakultativt anaeroba bakterier.
bakteriesuspension som rekonstituerar mediet Under
inkubationen frambringar metabolismen färgförändringar FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER
som antingen uppträder spontant eller framkallas genom • Används för in vitro-diagnostik och mikrobiologisk
att reagenser tillsätts. kontroll.
Reaktionerna avläses enligt Avläsningstabellen och • Endast för professionell användning.
identifieringen sker med hjälp av ett index över analytiska • Detta kit innehåller produkter av animaliskt ursprung.
profiler eller med hjälp av identifieringsprogrammet. Certifierade data angående ursprunget och/eller
hälsotillståndet hos djuren garanterar inte total frånvaro
KITETS INNEHÅLL av överförbara patogena agens. Vi rekommenderar
Kit för 25 tester (Art.nr. 20 100) därför att dessa produkter behandlas som potentiellt
- 25 API 20 E strips infektiösa och handhas enligt sedvanliga
- 25 inkubationsboxar försiktighetsåtgärder (ska inte förtäras eller inandas).
- 25 rapportblad • Alla prover, odlingar av mikroorganismer och
- 1 tätningsklips inokulerade produkter skall anses infektiösa och
- 1 bipacksedel behandlas på ett lämpligt sätt. Sterilteknik och vanliga
försiktighetsåtgärder för att handha den speciella
Kit för 100 tester (Art.nr. 20 160) gruppen av bakterier skall iakttas under hela
- 100 API 20 E strips (4x25 strips) proceduren. Se "NCCLS M29-A, Protection of
- 100 inkubationsboxar Laboratory Workers from Instrument Biohazards and
- 100 rapportblad Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids,
- 1 tätningsklips and Tissue; Approved Guideline - Nuvarande upplaga".
- 1 bipacksedel För ytterligare information angående
försiktighetsåtgärder vid hantering, se “Biosafety in
STRIPSETS SAMMANSÄTTNING Microbiological and Biomedical Laboratories - CDC/NIH
– Senaste upplaga", eller de f.n. gällande reglerna i det
API 20 E-stripsets sammansättning anges i avläsnings-
aktuella landet.
tabellen i denna bipacksedel.
• Använd inte reagenser efter sista förbrukningsdatum.
• Kontrollera före användning att de olika
REAGENSER OCH NÖDVÄNDIGT MATERIAL (SOM komponenternas förpackningar är intakta.
INTE MEDFÖLJER) • Använd inte strips som har blivit skadade: med
Reagenser: deformerade kupoler, påsen med torkmedel öppen, etc.
- API NaCl 0,85% Medium, 5 ml (Art.nr. 20 230) eller • Data angående prestanda som presenteras har
API Suspensionsmedium, 5 ml (Art.nr. 20 150) uppnåtts med hjälp av den metod som anges i denna
- API 20 E reagenskit (Art,nr. 20 120) eller bipacksedel. Varje ändring i utförandet kan påverka
enskilda reagenser : TDA (Art.nr. 70 402) resultaten.
JAMES (Art.nr. 70 542) • Tolkningen av testresultaten skall göras med hänsyn till
VP 1 + VP 2 (Art.nr. 70 422) patientens anamnes, provkälla, kolonial och
NIT 1 + NIT 2 (Art.nr. 70 442) mikroskopisk morfologi hos stammen och, om
- Zn-reagens (Art.nr. 70 380) nödvändigt, resultaten av andra utförda tester, speciellt
- Oxidas (Art.nr. 55 635*) antibiotikakänslighet.
* säljs inte i vissa länder: använd ett
motsvarande reagens
- Mineralolja (Art.nr. 70 100)
- API 20 E Analytical Profile Index (Art.nr. 20 190) eller
identifieringsprogram (kontakta bioMérieux)
bioMérieux® SA Svenska - 1
api® 20 E 07584E - SE - 2004/05
FÖRVARING Inokulering av stripset

Stripsen levereras i en aluminiumpåse innehållande påsar • Använd samma för pipett för att fylla både brunn och
med torkmedel. kupol med bakteriesuspension för testerna CIT , VP
Påsen bör, när den en gång har öppnats (*), återförslutas and GEL .
med tätningsklipset (medföljer kitet). För att bevara de • Fyll bara brunnen (och inte kupolen) för de övriga
kvarvarande stripsen med torkmedelspåsarna: placera testerna.
den öppna änden av påsen längs med tätningsklipset och • Skapa en anaerob miljö för testerna ADH, LDC, ODC,
kläm försiktigt samman de båda delarna. Stripsen kan H2S och URE genom att täcka över med mineralolja.
sedan förvaras vid 2-8°C i upp till 10 månader efter det • Stäng inkubationslådan.
att påsen öppnats (eller fram till det utgångsdatum som • Inkubera vid 36°C ± 2°C under 18-24 timmar.
är angivet på förpackningen, om detta inträffar tidigare).
(*) Rekommenderad metod för att öppna påsarna: klipp AVLÄSNING OCH TOLKNING
upp påsen precis under förseglingen medan påsen hålls Avläsning av stripset
upprätt, så att påsarna med torkmedel inte skadas.
• Efter inkubationtiden avläses stripset mot Avläsnings-
tabellen.
PROVER (INSAMLING OCH PREPARERING)
• Om 3 eller flera tester (GLU test + eller –) är positiva,
API 20 E är inte avsett för användning direkt med kliniska anteckna alla spontana reaktioner på rapportbladet.
eller andra prover. Bestäm sedan vilka tester som kräver en tillsats av
Mikroorganismerna som ska identifieras måste först reagens:
isoleras på ett lämpligt medium, anpassat till odling av - TDA Test: tillsätt 1 droppe TDA-reagens. En rödbrun
Enterobacteriaceae och/eller icke-krävande gramnegativa färg indikerar en positiv reaktion som ska antecknas
stavar i enlighet med mikrobiologiska standardtekniker. på rapportbladet.
- IND Test: tillsätt 1 droppe JAMES-reagens. En rosa
BRUKSANVISNING färg som utvecklats i hela kupolen indikerar en positiv
Oxidastest reaktion som ska antecknas på rapportbladet.
- VP Test: tillsätt 1 droppe av vardera VP 1 och VP 2-
Oxidastestet måste utföras enligt tillverkarens reagens. Avvakta i minst 10 minuter. En rosa eller röd
bruksanvisningar. Resultatet ska antecknas på färg indikerar en positiv reaktion som ska antecknas
rapportbladet eftersom det utgör en väsentlig del av den på rapportbladet. Om en svagt rosa färg uppträder
slutliga profilen (21:a identifieringssteget). efter 10 minuter, ska reaktionen anses som negativ.
OBS: Indolproduktionstestet ska utföras sist, eftersom
Preparering av stripset denna reaktion utlöser gasproduktion, vilket interfererar
• Gör i ordning en inkubationsbox (platta och lock) och med tolkningen av andra tester på stripset.
tillsätt ca 5 ml destillerat vatten eller avmineraliserat Inkubationslocket av plast ska inte sättas tillbaka sedan
vatten [eller vatten utan tillsatser eller kemikalier, vilka detta reagens tillsatts.
skulle kunna utveckla gaser (t.ex. Cl2, CO2, etc.)] till • Om antalet positiva tester (inkl. GLU-testet) innan tillsats
håligheterna i plattan för att skapa en fuktig atmosfär. av reagens är färre än 3:
• Anteckna stammens referens på den förlängda fliken på - Återinkubera stripset under ytterligare 24 timmar
plattan. (Skriv inte referensen på locket eftersom det (± 2 timmar) utan tillsats av reagens.
kan komma att förläggas under arbetet.) - Fastställ vilka tester som kräver tillsats av reagens (se
• Ta ut stripset ur dess förpackning föregående stycke).
• Placera stripset i inkubationsboxen - För att få en fullständig identifiering, kan det vara
OBS: API 20 E bör enbart användas med nödvändigt att utföra kompletterande tester (se stycket
om identifiering).
Enterobacteriaceae och/eller icke-krävande gramnegativa
stavar. Krävande organismer som har speciella krav på Tolkning
näring och som ska handhas på speciellt sätt (t.ex. Identifieringen görs med hjälp av den numeriska
Brucella och Francisella) är inte inkluderade i API 20 E- profilen.
databasen. För att utesluta eller bekräfta deras närvaro
behövs andra metoder. • Bestämning av den numeriska profilen:
På rapportbladet delas testerna upp i grupper om 3,
Preparering av inokulatet varpå varje grupp tilldelas ett värde: 1, 2 eller 4. Genom
• Öppna en ampull med API NaCl 0,85 % Medium (5 ml) att addera de värden som motsvarar positiva reaktioner
eller en ampull med API Suspensionsmedium (5 ml), inom varje grupp, erhålls en 7-siffrig numerisk profil för
som beskrivet under "Försiktighetsåtgärder" i de 20 testerna på API 20 E-stripset. Oxidasreaktionen
bipacksedeln för dessa produkter, eller använd ett rör utgör det 21:a testet och har värdet 4 om det är positivt.
med 5 ml. steril saltlösning eller sterilt destillerat vatten, • Identifiering :
utan tillsatser. Denna utförs med hjälp av databasen (V4.0)
• Plocka en enskild och välisolerad koloni från en * med Analytical Profile Index :
isoleringsplatta med hjälp av en pipett eller PSIpett. Det - Sök den numeriska profilen i listan över profiler.
rekommenderas att använda unga kulturer (18 – 24 * med identifieringsprogrammet:
timmar gamla) - Skriv in den 7-siffriga numeriska profilen via
• Emulgera försiktigt för att få en homogen tangentbordet.
bakteriesuspension.
Denna suspension måste användas genast efter
beredning.
OBS: de flesta Vibrio-arter är halofila. Vid misstanke om
Vibrio suspenderas bakterierna i API NaCl 0,85%
Medium.
api® 20 E 07584E - SE - 2004/05
I vissa fall är den 7-siffriga profilen inte tillräckligt - Motilitet (MOB) : Inokulera en ampull API M Medium
särskiljande och följande kompletterande tester kan bli (se bipacksedeln).
nödvändiga att utföra: - Tillväxt på MacConkey agarmedium (McC) : Gör utstryk
- Reduktion av nitrater till nitriter (NO2) och N2-gas (N2) : på en MacConkey agarplatta (se bipacksedeln).
tillsätt 1 droppe vardera av NIT 1- och NIT 2- - Oxidation av glukos (OF-O) : Inokulera en ampull API
reagenserna till GLU-brunnen. Avvakta 2 till 5 minuter. OF Medium (se bipacksedeln).
En röd färg indikerar en positiv reaktion (NO2). En - Jäsning av glukos (OF-F): Inokulera en ampull API OF
negativ reaktion (gul) kan bero på en reduktion till Medium (se bipacksedeln).
nitrogen (ibland signalerat av gasbubblor): tillsätt 2 till 3 Dessa kompletterande tester, som anges i inledningen
mg Zn-reagens till GLU-brunnen. Om brunnen förblir gul (Profilkodning) till Analytical Profile Index, kan användas
efter 5 minuter indikerar detta en positiv reaktion (N2), för att skapa en 9-siffrig profil. Identifieringen erhålls
som ska antecknas på rapportbladet. Om testet blir sedan med hjälp av identifieringsprogrammet.
orange-rött, visar detta en negativ reaktion : zinken har
reducerat de kvarvarande nitraterna i bunnen.
Detta är en användbar reaktion för att testa Gram-
negativa, oxidaspositiva stavar.
OBS: Av samma skäl som för indoltestet (se 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
anmärkning i stycket “Avläsning av stripset”), måste Ytterligare tester kan föreslås vid dålig urskiljning. Använd
nitratreduktionstestet utföras sist. identifieringsprogrammet eller index över analytiska
profiler.
KVALITETSKONTROLL
Medier, strips och reagenser är systematiskt kvalitetskontrollerade vid olika steg i tillverkningen.
För de användare som önskar utföra egna tester för kvalitetskontroll av stripset är användning av stammen
1. Escherichia coli ATCC 25922 eller en av följande stammar att föredra:
ONPG ADH LDC ODC CIT H2S URE TDA IND VP GLU MAN INO SOR RHA SAC MEL AMY ARA NO2 N2*
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* N2 (+)-tillståndet kan observeras för stammen ATCC 13047 och för stammen ATCC 25922.
• Profil som erhålls efter 24-48 timmars inkubation för stammen ATCC 51331, där kolonierna odlats på Trypticase Soy agar + blod.
• Profiler som erhålls efter 18-24 timmars inkubation för övriga stammar, där kolonierna odlats på Trypticase Soy agar + blod.
• Bakteriesuspensioner som beretts i API NaCl 0,85 % Medium.
Det är användarens ansvar att utföra kvalitetskontroll i enlighet med de lokalt tillämpade bestämmelserna.
METODENS BEGRÄNSNINGAR • Endast rena kulturer av en enda organism bör

• API 20 S-systemet är uteslutande avsett för identifiering användas.
av Enterobacteriaceae och de icke-krävande Gram-
negativa stavar som ingår i databasen (se FÖRVÄNTADE RESULTAT
Identifieringstabellen sist i denna bipacksedel). De förväntade resultaten för de olika biokemiska
Systemet kan inte användas för att identifiera några reaktionerna framgår av Identifieringstabellen i slutet av
andra mikroorganismer eller för att utesluta deras denna bipacksedel.
närvaro.
• Avvikelser i jämförelse med konventionella metoder kan PRESTANDA
förekomma. De beror på de annorlunda reaktions- • Enterobacteriaceae :
tekniker som används i API-tekniken. Därtill kommer 5514 stammar från insamling och stammar av olika
substratvariationer som också kan förklara procentuella ursprung, tillhörande arter inkluderade i databasen,
skillnader. testades:
• Vid sällsynta tillfällen kan glukosreaktionerna skifta för - 92,80% av stammarna identifierades korrekt (med
organismer som Klebsiella eller Proteus från positivt till eller utan kompletterande tester).
negativt, varvid en blågrön färg kan iakttas. Denna - 4,61% av stammarna identifierades inte.
reaktion antecknas som negativ. Sådana tillfällen - 2,59% av stammarna blev felidentifierade.
återspeglas i de procenttal som anges i
• Andra icke-krävande Gram-negativa stavar:
Identifieringstabellen.
2386 stammar från insamling och stammar av olika
• Om Salmonella eller Shigella identifieras, ska serologisk
ursprung, tillhörande arter inkluderade i databasen,
identifiering utföras för att bekräfta bakterieidentifier-
testades:
ingen.
- 90,32% av stammarna identifierades korrekt (med
• Icke-fermenterande, gramnegativa stavar, isolerade från
eller utan kompletterande tester).
patienter med cystisk fibros kan genera atypiska
- 6,16% av stammarna identifierades inte.
biokemiska profiler som kan påverka identifieringen.
- 3,52% av stammarna blev felidentifierade.
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AVFALLSHANTERING
Avfallshantering av använda eller oanvända reagenser Det är varje laboratoriums ansvar att handha avfalls- och
såsom andra kontaminerade engångsmaterial bör ske avloppsprodukter efter typ och farlighetsgrad och
enligt procedurer för infektiösa eller potentiellt infektiösa behandla och avlägsna dem (eller få dem behandlade och
produkter. avlägsnade) i enlighet med alla tillämpliga föreskrifter.
AVLÄSNINGSTABELL
AKTIVA MÄNGD RESULTAT

TESTER REAKTIONER/ENZYMER
INGREDIENSER (mg/kup.) NEGATIVT POSITIVT
ß-galaktosidas
2-nitrofenyl-ßD-
ONPG 0,223 (orto-nitrofenyl-ßD- färglös gul (1)
galaktopyranosid
galaktopyranosidas)
ADH L-arginin 1,9 Arginin dihydrolas gul röd / orange (2)
LDC L-lysin 1,9 Lysindekarboxylas gul röd / orange (2)
ODC L-ornitin 1,9 Ornitin-dekarboxylas gul röd / orange (2)
CIT trinatriumcitrat 0,756 CITratanvändning ljusgrön / gul blå / blågrön (3)
H2S natriumtiosulfat 0,075 H2S-bildning färglös / gråaktig svart avlagring / tunn linje
URE urinämne 0,76 UREas gul röd / orange (2)
TDA / omedelbar
TDA L-tryptofan 0,38 Tryptofan-deaminas gul rödbrun
JAMES / omedelbar
0,19 färglös ljusgrön / gul
IND L-tryptofan INDol-bildning rosa
VP 1 + VP 2/10 min
acetoinbildning
VP natriumpyruvat 1,9 färglös rosa / röd (5)
(Voges Proskauer)
GEL Gelatin spridning av svart

0,6 GELatinas ingen spridning
(av nöt) pigment
GLU D-glukos 1,9 jäsning / oxidation (GLUkos) (4) blå / blågrön gul / grågul
MAN D-mannitol 1,9 jäsning / oxidation (MANnitol) (4) blå / blågrön gul
INO inositol 1,9 jäsning / oxidation (INOsitol) (4) blå / blågrön gul
SOR D-sorbitol 1,9 jäsning / oxidation (SORbitol) (4) blå / blågrön gul
RHA L-ramnos 1,9 jäsning / oxidation (RHAmnos) (4) blå / blågrön gul
SAC D-sukros 1,9 jäsning / oxidation (SACkaros) (4) blå / blågrön gul
MEL D-melibios 1,9 jäsning / oxidation (MELibios) (4) blå / blågrön gul
AMY amygdalin 0,57 jäsning / oxidation (AMYgdalin) (4) blå / blågrön gul
ARA L-arabinos 1,9 jäsning / oxidation (ARAbinos) (4) blå / blågrön gul
OX (se bipacksedel för oxidastest) cytokrom-Oxidas (se bipacksedel för oxidastest)
(1) En mycket ljust gul färgning ska också anses som positiv.
(2) En orange färg efter 36-48 timmars inkubation ska anses negativ.
(3) Avläsning utförd i kupolen (aerob).
(4) Jäsning börjar i brunnens nedre delar, oxidation börjar i kupolen.
(5) En svagt rosa färg efter 10 minuter, ska anses negativ.
• Den angivna mängden kan justeras beroende på titern av de använda råmaterialen.
• Vissa kupoler innehåller produkter av animaliskt ursprung, i synnerhet peptoner.
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KOMPLETTERANDE TESTER
RESULTAT
TESTER AKTIVA MÄNGD REAKTIONER/ENZYMER
INGREDIENSER (mg/kup.) NEGATIVT POSITIVT
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min

Nitrat-
reduktion NO2-bildning gul röd
kaliumnitrat 0.076
GLU- Zn / 5 min
brunn reduktion till N2 gas orange-röd gul
API M Medium eller
MOB - motilitet icke-motil motil
mikroskop
McC MacConkey medium - tillväxt frånvaro närvaro
OF-F - jäsning : under mineralolja grön gul
glukos (API OF Medium)
OF-O - oxidation : exponerad för luft grön gul
METOD s. I
IDENTIFIERINGSTABELL s. II
REFERENSLITTERATUR s. IV
SYMBOLER s. V

au capital de 11 879 045 € Box 15969,
Tel. 33 (0)4 78 87 20 00 Fax (1) 919 620 22 11
Fax 33 (0)4 78 87 20 90
http://www.biomerieux.com Tryckt i Frankrike
Logotypen är ett registrerat och skyddat varumärke för bioMérieux SA eller ett av dess dotterbolag.
REF 20 100 / 20 160 07584E - DK - 2004/05
®
20 E IVD
Identifikationssystem for Enterobacteriaceae og andre ikke-kræsne Gram-negative stave
RESUMÉ OG FORKLARING Materiale:

API 20 E er et standardiseret identifikationssystem til - Pipetter eller PSIpetter
Enterobacteriaceae og andre ikke-kræsne Gram-negative - Ampulbeskytter
stave, som anvender 21 minimerede biokemiske tests - Ampulstativ
samt en database. Den komplette liste over de - Almindeligt laboratorieustyr til mikrobiologi
organismer, som det er muligt at identificere med dette
system, er angivet i Identifikationstabellen i slutningen af EVENTUELLE SUPPLERENDE REAGENSER :
denne indlægsseddel.
- API OF Medium (Ref. 50 110) :
Test til bestemmelse af fermentativ eller oxidativ
PRINCIP metabolisme.
API 20 E strip består af 20 mikrorør indeholdende - API M Medium (Ref. 50 120) :
dehydrerede substrater. Disse tests inokuleres med en Test for fakultativt anaerobe bakteriers motilitet.
bakteriesuspension, der rekonstituerer mediet. Under
inkubationen fremkalder metabolismen farveændringer, ADVARSLER OG FORHOLDSREGLER
som enten sker spontant eller afsløres ved tilsætning af
reagenser. • Til in-vitro diagnostisk brug og mikrobiologisk
Reaktionerne aflæses i henhold til aflæsningstabellen, og kontrol.
identifikationen opnås ved opslag i det analytiske • Kun til professionel brug.
profilindeks eller ved anvendelse af identifikations- • Dette kit indeholder produkter af animalsk oprindelse.
softwaren. Certificeret kendskab til dyrenes oprindelse og/eller
sundhedstilstand er ikke nogen fuldgyldig garanti for, at
der ikke er indeholdt nogen patogene stoffer. Det
KITTETS INDHOLD anbefales derfor, at disse produkter behandles som
Kit til 25 tests (ref. 20 100) potentielt smittefarlige og håndteres under iagttagelse af
- 25 API 20 E strips de normale sikkerhedsforanstaltninger (må ikke
- 25 inkubationsæsker indtages eller indåndes).
- 25 resultatark • Alle prøver, bakteriekulturer og inokulerede produkter
- 1 poseforsegler skal betragtes som smittefarlige og håndteres i
- 1 indlægsseddel overensstemmelse hermed. Der skal anvendes aseptisk
teknik og sædvanlige forholdsregler for håndtering af
Kit til 100 tests (ref. 20 160) den undersøgte bakteriekultur gennem hele denne
- 100 API 20 E strips (4x25 strips) procedure. Se venligst "NCCLS M29-A, Protection of
- 100 inkubationsæsker Laboratory Workers from Instrument Biohazards and
- 100 resultatark Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids,
- 1 klemtætning and Tissue; Approved Guideline - Gældende revision".
- 1 indlægsseddel For yderligere forsigtighedsforanstaltninger ved
håndtering henvises til "Biosafety in Microbiological and
Biomedical Laboratories – CDC/NIH – Seneste
SAMMENSÆTNING AF STRIP'EN
udgivelse", eller de bestemmelser, der aktuelt anvendes
Sammensætningen af API 20 E strip’en er angivet i i det enkelte land.
aflæsningstabellen på denne indlægsseddel. • Reagenserne må ikke anvendes efter udløbsdatoen.
• Check inden brug, at de forskellige komponenters
NØDVENDIGE MEN IKKE MEDFØLGENDE pakninger er intakte.
REAGENSER OG MATERIALER • Brug ikke strips, der er beskadiget: deformerede
Reagenser: brønde, åbne poser med tørremiddel, osv.
• De fremlagte præstationsdata blev fundet ved
- API NaCl 0,85 % Medium, 5 ml (Ref. 20 230) eller anvendelse af den procedure, der er angivet på denne
API Suspensionsmedium, 5 ml (Ref. 20 150) indlægsseddel. Enhver ændring eller modifikation af
- API 20 E reagenskit (Ref. 20 120) eller denne procedure kan påvirke resultaterne.
individuelle reagenser : TDA (Ref. 70 402) • Ved fortolkning af testresultaterne skal der tages højde
JAMES (Ref. 70 542) for patientens sygehistorie, prøvens kilde, koloniens og
VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422) mikroskopiens morfologi for stammen samt om
NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442) nødvendigt resultaterne af eventuelle andre udførte
- Zn reagens (Ref. 70 380) prøver, specielt de antibakterielle følsomhedsmønstre.
- Oxidase (Ref. 55 635*)
* reference, sælges ikke i visse lande: anvend et
tilsvarende reagens.
- Mineralsk olie (Ref. 70 100)
- API 20 E Analytisk Profilindeks (Ref. 20 190) eller
identifikationssoftware (spørg bioMérieux)
bioMérieux® SA Dansk - 1
api® 20 E 07584E - DK - 2004/05
OPBEVARINGSFORHOLD Inokulation af strip'en

Strips leveres i en aluminiumpose med poser med • Brug den samme pipette til at fylde både røret og
tørremiddel. brønden i testen CIT , VP og GEL med
Når posen er åbnet (*), skal den forsegles igen med bakteriesuspensionen.
poseforsegleren (medfølger i kittet) for at bevare de • Fyld kun røret (ikke brønden) til de øvrige tests.
resterende strips med poserne med tørremiddel: Anbring • Skab anaerobiose i prøverne ADH, LDC, ODC, H2S og
den åbne ende af posen langs forsegleren og klem URE ved at overlejre dem med mineralsk olie.
omhyggeligt klemmen sammen mellem de to dele. Hver • Luk inkubationsæsken.
strip kan derefter opbevares i op til • Inkubér ved 36°C ± 2°C i 18-24 timer.
10 måneder efter, at posen er åbnet, ved 2-8°C (eller
indtil den udløbsdato, der er angivet på pakningen, hvis AFLÆSNING OG FORTOLKNING
dette sker inden).
(*) Anbefalet metode til åbning af poserne : Klip posen op Aflæsning af strip'en
lige under forseglingen, mens posen holdes opret for at • Efter inkubationsperioden aflæses strip'en ved at
undgå at beskadige poserne med tørremiddel. referere til Aflæsningstabellen.
• Hvis 3 eller flere tests (GLU test + eller -) er positive,
PRØVER (OPSAMLING OG PRÆPARERING) noteres alle de spontane reaktioner på resultatarket, og
API 20 E må ikke bruges direkte sammen med kliniske derefter afsløres de tests, der kræver tilsætning af
eller andre prøver. reagenser :
De mikroorganismer, der skal identificeres, skal først - TDA-Test : Tilsæt en dråbe TDA-reagens. En rødbrun
isoleres på et dyrkningsmedium, der er tilpasset dyrkning farve er tegn på en positiv reaktion at notere på
af Enterobacteriaceae og/eller ikke-kræsne Gram- resultatarket.
negative stave i henhold til mikrobiologiske standard - IND-Test : Tilsæt en dråbe JAMES-reagens. Hvis der
teknikker. udvikles en lyserød farve i hele brønden, er det tegn
på en positiv reaktion at notere på resultatarket.
- VP-Test : Tilsæt 1 dråbe af hvert af reagenserne VP 1
BRUGSANVISNING og VP 2. Vent mindst 10 minutter. En lyserød eller
Oxidasetest rød farve angiver, at en positiv reaktion skal noteres
Oxidasetesten skal gennemføres i overensstemmelse på resultatarket. Hvis der viser sig en let lyserød farve
med producentens brugervejledning. Resultatet bør efter 10 minutter, bør reaktionen betragtes som
indføres på resultatarket, da det er en integreret del af negativ.
den endelige profil (21. identifikationstest). BEMÆRK: Indolproduktionstesten skal udføres sidst,
da denne reaktion frigør gasprodukter, som påvirker
Præparering af strip'en fortolkningen af andre tests på strip'en.
• Præparer en inkubationsæske (bakke og låg) og fordel Plastinkubationslåget må ikke sættes på igen, når
cirka 5 ml destilleret eller demineraliseret vand [eller reagenset er tilsat.
eventuelt vand uden tilsætningsstoffer eller kemikalier, • Hvis antallet af positive tests (inklusive GLU-test) før
der kan frigive gasser (f.eks. Cl2, CO2, etc.)] i bakkens tilsætning af reagenserne er under 3 :
fordybninger for at skabe en fugtig atmosfære. - Reinkuberes strip'en i yderligere 24 timer (± 2 timer)
• Notér stammereferencen på bakkens forlængede klap. uden at tilsætte nogen reagenser.
(Notér ikke referencen på låget, da det kan blive flyttet - Afslør de tests, der kræver tilsætning af reagenser (se
under proceduren). foregående afsnit).
• Fjern strip'en fra pakningen. - For at afslutte identifikationen kan det være
• Anbring strip'en i inkubationsæsken. nødvendigt at udføre supplerende tests (se
BEMÆRK: API 20 E bør kun anvendes sammen med Identifikations-afsnittet).
Enterobacteriaceae og/eller ikke-kræsne Gram-negative
Fortolkning
stave. Kræsne organismer med krævende ernæringskrav,
og som kræver særlige håndteringsforanstaltninger (dvs. Identifikation sker med den numeriske profil.
Brucella og Francisella) er ikke medtaget i API 20 E • Bestemmelse af den numeriske profil:
databasen. Der må ikke anvendes alternative procedurer På resultatarket er testene opdelt i grupper på 3, og en
for at udelukke eller bekræfte deres tilstedeværelse. værdi, 1,2 eller 4, er angivet for hver. Ved at addere de
værdier, der svarer til positive reaktioner inden for hver
Præparering af inokulum gruppe opnår man et 7-cifret profilnummer for de 20
• Åbn en ampul med API NaCl 0,85 % Medium (5 ml) eller tests i API 20 E-strip'en. Oxidasereaktionen udgør den
en ampul med API Suspensionsmedium (5 ml) som 21. test og har en værdi på 4, hvis den er positiv.
angivet i afsnittet "Advarsler og forholdsregler" på • Identifikation :
indlægssedlen til disse produkter, eller anvend et rør, Denne udføres ved hjælp af databasen (V4.0)
der indeholder 5 ml sterilt saltvand eller sterilt destilleret * med Analytisk Profilindeks :
vand uden tilsætningsstoffer. - Slå den numeriske profil op i fortegnelsen over
• Fjern en enkelt brøndisoleret koloni fra en profiler.
isolationsplade med en pipette eller PSIpette. Det * med identifikations-softwaren:
anbefales at anvende unge kulturer (18-24 timer gamle). - Indtast den 7-cifrede numeriske profil manuelt via
• Emulgér omhyggeligt for at opnå en homogen tastaturet.
bakteriesuspension.
Denne suspension skal anvendes umiddelbart efter
præpareringen.
BEMÆRK: De fleste Vibrio species er halofile. Hvis der
er mistanke om en Vibrio, opslemmes bakterien i
API NaCl 0,85 % Medium.
api® 20 E 07584E - DK - 2004/05
I visse tilfælde er den 7-cifrede profil ikke tilstrækkeligt - Motilitet (MOB) : Inokulér en ampul med API M Medium
diskriminerende, og det er nødvendigt at udføre følgende (se indlægsseddel).
supplerende tests. - Dyrkning på MacConkey-agarmedium (McC) : Udstryg
- Reduktion af nitrater til nitriter (NO2) og N2 gas (N2) : en MacConkey agarplade (se indlægsseddel).
Tilsæt en dråbe NIT 1 og en dråbe NIT 2 reagens til - Oxidation af glukose (OF-O) : Inokulér en ampul med
GLU-røret. Vent 2 til 5 minutter. En rød farve er tegn på API OF Medium (se indlægsseddel).
en positiv reaktion (NO2). En negativ reaktion (gul) kan - Fermentation af glukose (OF-F) : Inokulér en ampul med
skyldes reduktionen til nitrogen (hvilket sommetider API OF Medium (se indlægsseddel).
viser sig i form af luftbobler) : Tilsæt 2 til 3 mg Zn- Disse supplerende tests, der er angivet i det indledende
reagens til GLU-røret. Hvis røret efter 5 minutter stadig afsnit (Profilkodning) af det Analytiske Profilindeks, kan
er gult, er det tegn på en positiv reaktion (N2) at notere anvendes til at skabe en 9-cifret profil. Identifikation opnås
på resultatarket. Hvis testen bliver orange-rød, er dette da ved hjælp af Identifikationssoftwaren.
en negativ reaktion. De nitrater, der stadig er i røret, er
blevet reduceret af zinken.
Denne reaktion er nyttig ved testning af Gram-negative
oxidasepositive stave.
BEMÆRK: Af samme årsag som indol-testen (se 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
bemærkning i afsnittet "Aflæsning af strip") skal
Der kan foreslås flere tests i tilfælde af lav diskrimination.
nitratreduktionstesten udføres sidst.
Der henvises til identifikations-softwaren eller Analytisk
Profilindeks.
KVALITETSKONTROL
Medier, strips og reagenser kvalitetskontrolleres systematisk på forskellige trin under fremstillingen.
For de brugere, der ønsker at udføre deres egne kvalitetskontroltests med strip'en er det bedst at anvende stammen
1. Escherichia coli ATCC 25922 eller en af følgende stammer:
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* N2 (+) tilstand kan observeres for stammen ATCC 13047 og stammen ATCC 25922.
• Profil opnået efter 24-48 timers inkubation for stammen ATCC 51331 ved brug af kolonier dyrket på Trypticasesojaagar + blod.
• Profiler opnået efter 18–24 timers inkubation for de øvrige stammer ved brug af kolonier dyrket på Trypticasesojaagar + blod.
• Bacterieopslemninger præpareret i API NaCl 0,85 % Medium.
Det er brugerens ansvar at foretage kvalitetskontrol i overensstemmelse med lokale gældende bestemmelser.
METODENS BEGRÆNSNINGER FORVENTEDE RESULTATER

• API 20 E-systemet er udelukkende beregnet til Se Identifikationsoversigten i slutningen af denne
identifikation af Enterobacteriaceae og de ikke-kræsne indlægsseddel for forventede resultater for de forskellige
Gram-negative stave, der er indeholdt i databasen (se biokemiske reaktioner.
Identifikationstabellen i slutningen af denne
indlægsseddel). Det kan ikke benyttes til at identificere PRÆSTATION
nogen andre mikroorganismer eller til at udelukke, at de
• Enterobacteriaceae :
er til stede.
5514 kollektions-stammer og stammer af forskellig
• Afvigelser i forhold til konventionelle metoder kan
oprindelse, som hører til species, der er inkluderet i
observeres. De skyldes de forskellige
databasen, blev testet:
reaktionsprincipper, der anvendes i API-teknikken.
- 92,80 % af stammerne blev korrekt identificeret
Desuden findes der substratvariationer, som også tager
(med eller uden supplerende tests).
højde for procentuelle forskelle.
- 4,61 % af stammerne blev ikke identificeret.
• I sjældne tilfælde kan glukosereaktioner for organismer
- 2,59 % af stammerne blev fejlidentificeret.
som Klebsiella eller Proteus reversere fra positiv til
negativ; i sådanne tilfælde ses en blågrøn farve. Denne • Andre ikke-kræsne Gram-negative stave:
reaktion noteres som en negativ reaktion. Sådanne 2386 kollektionsstammer og stammer af forskellig
forekomster afspejles i de procentdele, der er angivet i oprindelse, som hører til species, der er inkluderet i
Identifikationstabellen. databasen, blev testet:
• Hvis der identificeres Salmonella eller Shigella, skal der - 90,32 % af stammerne blev korrekt identificeret
udføres serologisk identifikation for at bekræfte den (med eller uden supplerende tests).
bakterielle identifikation. - 6,16 % af stammerne blev ikke identificeret.
• Non-fermentative Gram-negative stave, isoleret fra - 3,52 % af stammerne blev fejlidentificeret.
patienter med cystisk fibrose, kan resultere i atypiske
biokemiske profiler, hvilket kan påvirke identifikationen.
• Der bør kun anvendes rene kulturer af en enkelt
organisme.
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BORTSKAFFELSE AF AFFALD
Bortskaf alle brugte eller ubrugte komponenter samt Det er ethvert laboratoriums ansvar at håndtere det affald
eventuelle andre kontaminerede materialer efter og spildevand, der opstår, i overensstemmelse med dets
procedurer for infektiøse eller potentielt infektiøse type og grad af farlighed, og at behandle og bortskaffe det
produkter. (eller få det behandlet og bortskaffet) i henhold til
gældende forskrifter.
AFLÆSNINGSTABEL
AKTIVE MÆNGDE RESULTATER

TESTS REAKTIONER/ENZYMER
INDHOLDSSTOFFER (mg/brønd) NEGATIVE POSITIVE
ß-galaktosidase
2-nitrofenyl-ßD-
ONPG 0.223 (Ortho-NitroFenyl-ßD- farveløs gul (1)
galaktopyranosid
Galaktopyranosidase)
ADH L-arginin 1.9 Arginin DiHydrolase gul rød / orange (2)
LDC L-lysin 1.9 Lysin DeCarboxylase gul rød / orange (2)

ODC L-ornitin 1.9 Ornitin DeCarboxylase gul rød / orange (2)
CIT trinatriumcitrat 0.756 CITratudnyttelse lysegrøn / gul blågrøn / blå (3)
H2S natriumthiosulfat 0.075 H2S produktion farveløs / grålig sort aflejring / tynd stribe
URE urea 0.76 UREase gul rød / orange (2)

TDA / umiddelbar
TDA L-tryptofan 0.38 Tryptofan DeAminase gul rødbrun
JAMES / umiddelbar
0.19 farveløs lysegrøn / gul
IND L-tryptofan INDol produktion lyserød
VP 1 + VP 2 / 10 min
acetoindannelse
VP natriumpyruvat 1.9 farveløs lyserød / rød (5)
(Voges-Proskauer)
GEL Gelatine
0.6 GELatinase ingen diffusion diffusion af sort pigment
(okse-oprindelse)
GLU D-glukose 1.9 blå / blågrøn gul / grågul
(GLUkose) (4)
MAN D-mannitol 1.9 blå / blågrøn gul
(MANnitol) (4)
INO inositol 1.9 blå / blågrøn gul
(INOsitol) (4)
SOR D-sorbitol 1.9 blå / blågrøn gul
(SORbitol) (4)
RHA L-rhamnose 1.9 blå / blågrøn gul
(RHAmnose) (4)
SAC D-sucrose 1.9 blå / blågrøn gul
(SACcharose) (4)
MEL D-melibiose 1.9 blå / blågrøn gul
(MELibiose) (4)
AMY amygdalin 0.57 blå / blågrøn gul
(AMYgdalin) (4)
ARA L-arabinose 1.9 blå / blågrøn gul
(ARAbinose) (4)
OX (se indlægsseddel for oxidase-test) cytochrom-OXidase (se indlægsseddel for oxidase-test)
(1) En meget lys gul skal også betragtes som positiv.

(2) En orange farve efter 36-48 timers inkubation skal betragtes som negativ.
(3) Aflæsning foretaget i brønden (aerob).
(4) Fermentation starter i den nederste del af rørene, oxidation starter i brønden.
(5) En let lyserød farve efter 10 minutter skal betragtes som negativ.
• De angivne mængder kan justeres, afhængigt af titeren for de anvendte råmaterialer.
• Visse brønde indeholder produkter af animalsk oprindelse, specielt peptoner.
api® 20 E 07584E - DK - 2004/05
SUPPLERENDE TESTS
RESULTATER
TESTS AKTIVE MÆNGDE REAKTIONER/ENZYMER
INDHOLDSSTOFFER (mg/brønd) NEGATIVE POSITIVE
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min.

Nitrat-
reduktion NO2 produktion gul rød
kaliumnitrat 0.076
GLU-rør Zn / 5 min
reduktion til N2 gas orange-rød gul
API M Medium eller

MOB - motilitet ikke-motil motil
mikroskop
McC MacConkey medium - vækst findes ikke findes
OF-F - fermentation : under mineralsk grøn gul

olie
glukose (API OF Medium)
OF-O - oxidation : udsat for luft grøn gul
PROCEDURE p. I
IDENTIFIKATIONSTABEL p. II
BIBLIOGRAFI p. IV
SYMBOLFORTEGNELSE p. V

au capital de 11 879 045 € Box 15969,
Tel. 33 (0)4 78 87 20 00 Fax (1) 919 620 22 11
Fax 33 (0)4 78 87 20 90
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REF 20 100 / 20 160 07584E - PL - 2004/05
®
20 E IVD
Zestaw do identyfikacji Enterobacteriaceae i innych paáeczek Gram-ujemnych o niewysokich wymaganiach odĪywczych
WPROWADZENIE Materiaáy :
API 20 E jest wystandaryzowanym zestawem do - Pipety lub PSIpety
identyfikacji Enterobacteriaceae i innych maáo - Osáona na ampuákĊ
wymagających paáeczek Gram-ujemnych, który stanowią - Statyw do ampuáek
21 zminiaturyzowane testy biochemiczne i baza danych. - WyposaĪenie zazwyczaj stosowane w laboratorium
Peána lista organizmów, które moĪna zidentyfikowaü przy mikrobiologicznym
uĪyciu tego systemu jest podana na koĔcu niniejszej
instrukcji w Tabeli Identyfikacyjnej. EWENTUALNE DODATKOWE ODCZYNNIKI:
- API OF Medium (Ref. 50 110) :
ZASADA DZIAàANIA Test do okreĞlania metabolizmu fermentacyjnego lub
Paski API 20 E skáadają siĊ z 20 mikroprobówek oksydacyjnego.
zawierających odwodnione substraty. Testy te są - API M Medium (Ref. 50 120) :
napeániane zawiesinami bakteryjnymi, co odtwarza Test do oznaczania ruchu bakterii wzglĊdnie
podáoĪa. Procesy metaboliczne zachodzące podczas beztlenowych.
inkubacji powodują zmiany koloru, które są albo
spontaniczne, lub wywoáane przez dodanie odczynników. ĝRODKI OSTROĩNOĝCI
Po odczytaniu reakcji wedáug Tabeli Odczytów, otrzymuje
• Do diagnostyki in vitro i kontroli mikrobiologicznej.
siĊ identyfikacjĊ przez porównanie z KsiąĪką Kodów lub
• Do wykorzystania wyáącznie przez profesjonalistów.
stosując program komputerowy.
• Produkt zawiera materiaáy pochodzenia zwierzĊcego.
ĝwiadectwo pochodzenia i/lub stanu sanitarnego
ZAWARTOĝû ZESTAWU zwierząt nie gwarantuje w peáni nieobecnoĞci czynników
Zestaw na 25 testów (ref. 20 100) chorobotwórczych. Dlatego naleĪy obchodziü siĊ z nim
- 25 pasków API 20 E zgodnie z zasadami postĊpowania z materiaáem
- 25 komór inkubacyjnych potencjalnie zakaĨnym (nie spoĪywaü i nie wdychaü).
- 25 kart wyników • Wszystkie próbki pobrane od pacjentów, hodowle
- 1 zacisk zamykający bakteryjne i wykorzystane produkty są potencjalnie
- 1 instrukcja zakaĨne i powinny byü traktowane zgodnie z zalecanymi
Ğrodkami ostroĪnoĞci. NaleĪy stosowaü techniki
Zestaw na 100 testów (ref. 20 160) aseptyczne i zwykáe procedury obowiązujące przy pracy
- 100 pasków API 20 E (4x25 pasków) ze szczepami bakteryjnymi zgodnie z "NCCLS M29-A,
- 100 komór inkubacyjnych Protection of Laboratory Workers from Instrument
- 100 kart wyników Biohazards and Infectious Disease Transmitted by
- 1 zacisk zamykający Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline –
- 1 instrukcja BieĪąca wersja". Dodatkowe Ğrodki ostroĪnoĞci zawarte
są w "Biosafety in Microbiological and Biomedical
SKàAD PASKA Laboratories – CDC/NIH – Ostatnie wydanie", lub
regulowane przepisami wáaĞciwymi dla poszczególnych
Skáad paska API 20 E podano w tej instrukcji w Tabeli
paĔstw.
Odczytów.
• Nie uĪywaü odczynników przeterminowanych.
• Przed uĪyciem sprawdziü, czy opakowania
WYPOSAĩENIE WYMAGANE NIE NALEĩĄCE DO
poszczególnych skáadników są nienaruszone.
ZESTAWU
• Nie uĪywaü pasków uszkodzonych : odksztaácone
Odczynniki :
studzienki, otwarty Ğrodek odwadniający, itd.
- API NaCl 0.85 % Medium, 5 ml (Ref. 20 230) lub • W celu osiągniĊcia odpowiednich wyników naleĪy
API Suspension Medium, 5 ml (Ref. 20 150) stosowaü procedurĊ zawartą w opakowaniu. KaĪda
- API 20 E reagent kit (Ref. 20 120) lub modyfikacja procedury moĪe wpáywaü na wyniki.
pojedyncze odczynniki : TDA (Ref. 70 402) • W interpretacji wyników testu naleĪy wziąü pod uwagĊ
JAMES (Ref. 70 542) historiĊ choroby pacjenta, miejsce pobrania materiaáu,
VP 1 + VP 2 (Ref. 70 422) makro- i mikroskopową morfologiĊ oraz jeĞli bĊdzie
NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70 442) konieczne, wyniki innych przeprowadzonych testów,
- Odczynnik Zn (Ref. 70 380) szczególnie lekowraĪliwoĞci.
- Oksydaza (Ref. 55 635*)
* produkt nie sprzedawany w niektórych krajach:
uĪywaü równowaĪnego odczynnika.
- Olej mineralny (Ref. 70 100)
- KsiąĪka Kodów dla API 20 E (Ref. 20 190) lub
oprogramowanie komputerowe do identifikacji
(skontaktuj siĊ z bioMérieux)
bioMérieux® SA Polski - 1
api® 20 E 07584E - PL - 2004/05
PRZECHOWYWANIE Napeánianie paska

Paski są dostarczane w aluminiowych opakowaniach • UĪywając tej samej pipety, napeániü zawiesiną
ze Ğrodkiem odwadniającym. bakteryjną zarówno probówkĊ jak i wgáĊbienie
Raz otwarte (*) opakowanie powinno byü zamykane przy mikroprobówki dla testów CIT , VP i GEL .
uĪyciu zacisku (zawartego w zestawie), aby zabezpieczyü • Napeániü wyáącznie probówki (bez wgáĊbieĔ pozostaáych
pozostaáe paski wraz ze Ğrodkiem odwadniającym: testów.
umieĞciü otwarte koĔce opakowania wzdáuĪ zacisku • Wytworzyü warunki beztlenowe w testach ADH, LDC,
i dokáadnie zamknąü miĊdzy jego dwiema czĊĞciami. Po ODC, H2S i URE poprzez naniesienie oleju
otwarciu opakowania paski mogą byü mineralnego.
przechowywane do 10 miesiĊcy, w 2-8°C (lub do • Zamknąü komorĊ inkubacyjną.
upáyniĊcia daty waĪnoĞci oznaczonej na opakowaniu, jeĞli • Inkubowaü w 36°C ± 2°C przez 18-24 godziny.
przypada ona wczeĞniej). ODCZYT I INTERPRETACJA
(*) Zalecany sposób otwierania opakowaĔ : obciąü
Odczyt paska
opakowanie tuĪ poniĪej miejsca zamkniĊcia trzymając je
pionowo, aby uniknąü uszkodzenia Ğrodka • Po inkubacji odczytaü pasek korzystając z Tabeli
odwadniającego. Odczytu.
• JeĞli 3 lub wiĊcej testów (test GLU + lub –) jest
MATERIAà DO BADAē (POBIERANIE I OPRACOWANIE)
pozytywnych, zanotowaü wyniki wszystkich reakcji
Paski API 20 E nie są przeznaczone do bezpoĞrednich spontanicznych na karcie wyników, nastĊpnie odczytaü
badaĔ materiaáu klinicznego lub innych próbek. testy wymagające dodania odczynników:
Identyfikowany mikroorganizm musi byü najpierw - Test TDA : dodaü 1 kroplĊ odczynnika TDA.
wyizolowany na podáoĪach hodowlanych dostosowanych Czerwono-brązowy kolor wskazuje na reakcjĊ
dla Enterobacteriaceae i/lub niewymagających Gram- pozytywną, co naleĪy wpisaü do karty wyników.
ujemnych paáeczek, zgodnie ze standardowymi - Test IND : dodaü 1 kroplĊ odczynnika JAMES.
technikami mikrobiologicznymi. RóĪowy kolor powstający w caáej probówce wskazuje
SPOSÓB WYKONANIA na reakcjĊ pozytywną, co naleĪy wpisaü do karty
wyników.
Test na oksydazĊ:
- Test VP: dodaü po 1 kropli z kaĪdego odczynnika
Test na oksydazĊ naleĪy wykonaü zgodnie z instrukcją VP 1 i VP 2. Odczekaü przynajmniej 10 minut.
w nim zawartą. Wynik naleĪy zanotowaü na karcie RóĪowy lub czerwony kolor wskazuje na reakcjĊ
wyników, poniewaĪ stanowi on integralną czĊĞü pozytywną, JeĞli po 10 minutach pojawi siĊ blado
ostatecznego profilu (21 test identyfikacyjny). róĪowy kolor, reakcjĊ naleĪy uznaü za negatywną.
Przygotowanie paska UWAGA : Test na indol naleĪy wykonaü na koĔcu,
• Przygotowaü komorĊ inkubacyjną (podstawkĊ poniewaĪ w jego trakcie dochodzi do wytworzenia
i pokrywkĊ) i nanieĞü okoáo 5 ml destylowanej lub produktów gazowych, które wpáywają na interpretacjĊ
demineralizowanej wody [lub jakiejkolwiek wody bez innych testów na pasku. Plastikowa pokrywka
dodatków lub związków chemicznych, z których mogą inkubacyjna nie powinna byü podnoszona po dodaniu
wydzielaü siĊ gazy (np. Cl2, CO2, itd.)] na podstawkĊ odczynnika.
w ksztaácie plastra miodu, w celu wytworzenia komory • JeĪeli liczba pozytywnych testów przed dodaniem
wilgotnej. odczynników (wáączając w to test GLU) jest mniejsza
• Zanotowaü numer szczepu na wydáuĪonej czĊĞci niĪ 3:
podstawki. (Nie notowaü numeru na pokrywce, - PrzedáuĪyü inkubacjĊ paska o dalsze 24 godziny
poniewaĪ moĪe ona ulec zamianie w trakcie badaĔ) (± 2 godziny) bez dodania odczynników.
• Wyjąü pasek z opakowania. - Odczytaü testy wymagające dodania odczynników
• UmieĞciü pasek w komorze inkubacyjnej. (patrz poprzedni paragraf).
UWAGA: API 20 E naleĪy stosowaü tylko dla - W celu uzupeánienia identyfikacji, moĪe byü konieczne
Enterobacteriaceae i/lub niewybrednych paáeczek Gram- przeprowadzenie dodatkowych testów (zgodnie
ujemnych. Organizmy o duĪych potrzebach odĪywczych z paragrafem identyfikacji).
i wymagające odpowiednich Ğrodków ostroĪnoĞci w Interpretacja
postĊpowaniu z nimi (np. Brucella oraz Francisella), nie
IdentyfikacjĊ otrzymuje siĊ z profilu numerycznego.
są wáączone do bazy danych API 20 E. W celu
potwierdzenia lub wykluczenia ich obecnoĞci muszą • OkreĞlanie profilu numerycznego:
zostaü zastosowane alternatywne metody. Na karcie wyników testy podzielone są na grupy po 3,
kaĪdy odpowiednio o wartoĞci 1, 2 lub 4. Przez dodanie
Przygotowanie inokulum
do siebie wartoĞci odpowiadających pozytywnym
• Otworzyü ampuákĊ API NaCl 0.85 % Medium (5 ml) lub reakcjom w obrĊbie kaĪdej grupy otrzymuje siĊ 7
ampuákĊ API Suspension Medium (5 ml) w sposób cyfrowy profil numeryczny dla 20 testów wystĊpujących
opisany w paragrafie "ĝrodki ostroĪnoĞci" w instrukcji na pasku API 20 E. Reakcja oksydazy stanowi 21 test
dla tego produktu, lub uĪyü jakąkolwiek probówkĊ i ma wartoĞü 4, jeĞli jest pozytywna.
zawierającą 5 ml jaáowej soli fizjologicznej lub jaáowej
wody destylowanej, bez dodatków. • Identyfikacja:
• UĪywając pipety lub PSIpety pobraü pojedynczą, dobrze Uzyskuje siĊ ją uĪywając bazy danych (V4.0)
wyizolowaną koloniĊ z páytki. Zaleca siĊ uĪywanie * z KsiąĪki Kodowej:
máodych hodowli (18-24 godzinnych). - Odszukaü wáaĞciwy profil numeryczny na liĞcie
• OstroĪnie rozetrzeü w celu osiągniĊcia jednorodnej profili.
zawiesiny. * z oprogramowania komputerowego:
ZawiesinĊ tĊ uĪyü natychmiast po sporządzeniu. - Wprowadziü 7 cyfrowy profil numeryczny manualnie
UWAGA: wiĊkszoĞü gatunków Vibrio jest halofilnych. przy uĪyciu klawiatury.
JeĞli zachodzi podejrzenie otrzymania Vibrio naleĪy
sporządziü zawiesinĊ w API NaCl 0.85 % Medium.
api® 20 E 07584E - PL - 2004/05
W niektórych przypadkach 7 cyfrowy profil nie jest - RuchliwoĞü (MOB) : Posiaü ampuákĊ API M Medium
wystarczająco charakterystyczny i naleĪy przeprowadziü (zapoznaü siĊ z instrukcją).
nastĊpujące testy uzupeániające: - Wzrost na podáoĪu agar MacConkey’a (McC): Posiaü
- Redukcja azotanów do azotynów (NO2) i gazowego N2 páytkĊ z agarem MacConkey’a (zapoznaü siĊ
(N2): z instrukcją).
dodaü po 1 kropli z kaĪdego odczynnika NIT 1 i NIT 2 - Utlenianie glukozy (OF-O): Posiaü ampuákĊ API OF
do probówki GLU. Odczekaü 2 do 5 minut. Czerwony Medium (zapoznaü siĊ z instrukcją).
kolor wskazuje na reakcjĊ pozytywną (NO2). Reakcja - Fermentacja glukozy (OF-F): Posiaü ampuákĊ API OF
negatywna (Īóáty) moĪe byü spowodowana redukcją do Medium (zapoznaü siĊ z instrukcją).
azotu (co czasami jest uwidocznione przez pĊcherzyki Te uzupeániające testy wskazane w sekcji KsiąĪki Kodów,
gazu): dodaü 2 do 3 mg odczynnika Zn do probówki mogą byü uĪyte do utworzenia 9 cyfrowego profilu.
GLU. Po 5 minutach, jeĞli probówka pozostaje Īóáta IdentyfikacjĊ moĪna wtedy otrzymaü stosując wyáącznie
wskazuje to na reakcjĊ pozytywną (N2), co naleĪy oprogramowanie komputerowe.
zanotowaü w karcie wyników. JeĪeli pojawia siĊ kolor
pomaraĔczowo-czerwony jest to wynik negatywny:
azotany nadal wystĊpujące w probówce zostaáy
zredukowane przez cynk.
Reakcja jest uĪyteczna w badaniu Gram-ujemnych, 5 315 173 (57) Enterobacter gergoviae
oksydazododatnich paáeczek.
UWAGA : Dla takich samych powodów jak test na indol Dalsze testy mogą byü proponowane w przypadku
(patrz uwaga w paragrafie "Odczyt paska"), test redukcji sáabego rozróĪnienia zgodnie z oprogramowaniem
azotanów musi byü przeprowadzony jako ostatni. komputerowym lub KsiąĪką Kodów.
KONTROLA JAKOĝCI
PodáoĪa, paski i odczynniki są systematycznie poddawane kontroli jakoĞci na róĪnym poziomie procesu produkcji.
Dla tych uĪytkowników, którzy chcą prowadziü swoją wáasną kontrolĊ pasków zaleca siĊ szczep wzorcowy
1. Escherichia coli ATCC 25922 lub jeden z nastĊpujących szczepów:
1. + – + + – – – – + – – + + – + + – + – + + –
2. + – V – V – – – – – + – – – – – – – – – – –
3. + + – + + – – – – + – + + – + + + + + + + –
4. – – – + V + + + – – V + – – – – V – – – + –
5. + – + – + – V – – V – + + + + + + + + + + –
* Wynik N2 (+) moĪna zaobserwowaü dla szczepów ATCC 13047 i ATCC 25922.
• Profil otrzymywany po 24-48 godzinach inkubacji dla szczepu ATCC 51331, uĪywając kolonii wyrosáych na agarze tryptozowo-
sojowym z krwią.
• Profil otrzymywany po 18-24 godzinach inkubacji dla pozostaáych szczepów, uĪywając kolonii wyrosáych na agarze tryptozowo-
sojowym z krwią.
• Zawiesina bakteryjna przygotowywana w API NaCl 0.85 % Medium.
UĪytkownik jest zobowiązany do prowadzenia kontroli jakoĞci zgodnie z lokalnymi przepisami.
OGRANICZENIA METODY • Niefermentujące paáeczki gram-ujemne, wyizolowane od

• System API 20 E sáuĪy jedynie do identyfikacji pacjentów z mukowiscydozą, mogą dawaü atypowe
Enterobacteriaceae i tych niewymagających paáeczek, profile biochemiczne, co ma wpáyw na identyfikacjĊ.
Gram-ujemnych, które znajdują siĊ w bazie danych • NaleĪy uĪywaü tylko czysto wyizolowanych bakterii.
(patrz Tabela Identyfikacyjna na koĔcu instrukcji). Nie
moĪe byü uĪywany do identyfikacji innych ZAKRES SPODZIEWANYCH WYNIKÓW
mikroorganizmów lub wykluczania ich obecnoĞci. W Tabeli Identyfikacyjnej na koĔcu instrukcji sprawdziü
• Mogą byü obserwowane rozbieĪnoĞci w odniesieniu do zakres spodziewanych wyników dla róĪnych testów
metod konwencjonalnych, spowodowane róĪnicami biochemicznych.
w przebiegu reakcji zastosowanych w technice API.
W dodatku, substraty mogą róĪniü siĊ procentową OCENA TESTU
zawartoĞcią.
• Enterobacteriaceae :
• Reakcje z glukozą dla takich organizmów jak Klebsiella
Przebadano 5514 szczepów, z kolekcji i róĪnych Ĩródeá,
lub Proteus mogą rzadko ulec odwróceniu
naleĪących do gatunków zawartych w bazie danych:
z pozytywnej do negatywnej, co uwidacznia siĊ jako
- 92.80 % szczepów prawidáowo zidentyfikowano
niebieskawo-zielony kolor. Taka reakcja moĪe byü
(z lub bez testów uzupeániających).
zapisana jako negatywna. W tym wypadku naleĪy
- 4.61 % szczepów nie zidentyfikowano.
zastanowiü siĊ nad procentowym wskaĨnikiem w Tabeli
- 2.59 % zostaáo nieprawidáowo zidentyfikowanych.
Identyfikacyjnej.
• Identyfikacja Salmonella lub Shigella musi byü
potwierdzona testami serologicznymi.
api® 20 E 07584E - PL - 2004/05
• Inne niewymagające Gram-ujemne paáeczki: POSTĉPOWANIE ZE ZUĩYTYMI TESTAMI

Przebadano 2386 szczepów, z kolekcji i róĪnych Ĩródeá, ZuĪytych i niezuĪytych odczynników, jak równieĪ
naleĪących do gatunków zawartych w bazie danych: zanieczyszczonych sprzĊtów jadnorazowych, naleĪy
- 90.32 % szczepów zidentyfikowano prawidáowo pozbywaü siĊ zgodnie z procedurami dla materiaáów
(z lub bez testów uzupeániających). zakaĨnych lub potencjalnie zakaĨnych.
- 6.16 % szczepów nie zidentyfikowano. Obowiązkiem kaĪdego laboratorium jest pozbywanie siĊ
- 3.52 % szczepów zidentyfikowano nieprawidáowo. zuĪytych testów i wytworzonych Ğcieków w zaleĪnoĞci od
typu i stopnia zabezpieczenia laboratorium oraz
dezynfekowaü je i usuwaü (zleciü dezynfekcjĊ i usuwanie)
zgodnie z zatwierdzonymi procedurami.
TABELA ODCZYTÓW
AKTYWNE STĉĩENIE WYNIKI

TEST REAKCJE/ENZYMY
SKàADNIKI (mg/probówka) NEGATYWNY POZYTYWNY
ß-galaktozydaza
2-nitrofenylo-ßD-
ONPG 0.223 (orto nitrofenylo-ßD- bezbarwny Īóáty (1)
galaktopiranozyd
galaktopiranozyd)
ADH L-arginina 1.9 dihydrolaza argininy Īóáty czerwony / pomaraĔczowy (2)
LDC L-lizyna 1.9 dekarbosylaza lizyny Īóáty czerwony / pomaraĔczowy (2)
ODC L-ornityna 1.9 dekarbosylaza ornityny Īóáty czerwony / pomaraĔczowy (2)
CIT cytrynian trisodowy 0.756 wykorzystanie cytrynianu jasno szary / Īóáty niebiesko-zielony / niebieski (3)
H2S tiosiarczan sodowy 0.075 wytwarzanie H2S bezbarwny / szarawy czarny osad / rozpáyniĊta linia
URE mocznik 0.76 ureaza Īóáty czerwony / pomaraĔczowy (2)

TDA / natychmiast
TDA L-tryptofan 0.38 dezaminaza tryptofanu Īóáty czerwono-brązowy
JAMES / natychmiast
bezbarwny
IND L-tryptofan 0.19 wytwarzanie indolu róĪowy
jasno zielony / Īóáty
VP 1 + VP 2 / 10 min
wytwarzanie acetoiny
VP pirogronian sodu 1.9 bezbarwny róĪowy / czerwony (5)
(Voges Proskauer)
Īelatyna dyfuzja czarnego
GEL 0.6 Īelatynaza brak dyfuzji
(woáowa) pigmentu
GLU D-glukoza 1.9 fermentacja / utlenianie (glukoza) (4) niebieski / niebiesko-zielony Īóáty / szaro-Īóáty
MAN D-mannitol 1.9 fermentacja / utlenianie (mannitol) (4) niebieski / niebiesko-zielony Īóáty
INO inozytol 1.9 fermentacja / utlenianie (inozytol) (4) niebieski / niebiesko-zielony Īóáty
SOR D-sorbitol 1.9 fermentacja / utlenianie (sorbitol) (4) niebieski / niebiesko-zielony Īóáty
RHA L-ramnoza 1.9 fermentacja / utlenianie (ramnoza) (4) niebieski / niebiesko-zielony Īóáty
fermentacja / utlenianie (sacharoza)
SAC D-sacharoza 1.9 niebieski / niebiesko-zielony Īóáty
(4)
MEL D-melibioza 1.9 fermentacja / utlenianie (melibioza) (4) niebieski / niebiesko-zielony Īóáty
fermentacja / utlenianie (amigdalina)
AMY amigdalina 0.57 niebieski / niebiesko-zielony Īóáty
(4)
ARA L-arabinoza 1.9 fermentacja / utlenianie (arabinoza) (4) niebieski / niebiesko-zielony Īóáty
(przeczytaü instrukcjĊ do testu

OX oksydaza cytochromowa (przeczytaü instrukcjĊ do testu oksydazy)
oksydazy)
(1) Nawet bardzo blady Īóáty kolor naleĪy rozpatrywaü jako pozytywny.
(2) PomaraĔczowy kolor po 36-48 godzinach inkubacji naleĪy uwaĪaü za negatywny.
(3) Odczytu dokonaü we wgáĊbieniu (warunki tlenowe).
(4) Fermentacja zachodzi w najniĪszej czĊĞci probówki, utlenianie we wgáĊbieniu.
(5) Sáabo róĪowy kolor po 10 minutach naleĪy uwaĪaü za negatywny.
• Wskazane stĊĪenia mogą byü regulowane w zaleĪnoĞci od miana uĪytego surowego materiaáu.
• Niektóre mikroprobówki zawierają produkty pochodzenia zwierzĊcego,zwáaszcza peptony.
api® 20 E 07584E - PL - 2004/05
TESTY UZUPEàNIAJĄCE
WYNIK
TEST AKTYWNY SKàADNIK STĉĩENIE REAKCJE/ENZYMY
(mg/probówka) NEGATYWNY POZYTYWNY
NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min

Redukcja
azotanów wytwarzanie NO2 Īóáty czerwony
probówka azotan potasu 0.076
Zn / 5 min
GLU
redukcja do gazowego N2 pomaraĔczowo-czerwony Īóáty
API M Medium lub

MOB - ruchliwoĞü brak ruchu ruch
badanie mikroskopowe
McC podáoĪe MacConkey - wzrost brak obecnoĞü
- fermentacja : pod olejem
OF-F zielony Īóáty
Glukoza mineralnym
(API OF Medium) - utlenianie : ekspozycja na
OF-O zielony Īóáty
powietrze
METODYKA str. I
TABELA IDENTYFIKACYJNA str. II
PIĝMIENNICTWO str.IV
TABELA SYMBOLI str. V

au capital de 11 879 045 € Box 15969,
Tel. 33 (0)4 78 87 20 00 Fax (1) 919 620 22 11
Fax 33 (0)4 78 87 20 90
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Logo jest znakiem towarowym zastrzeĪonym dla bioMérieux SA lub jednego z przedstawicielstw.
api® 20 E 07584E - XL - 2004/05
METHODOLOGIE / PROCEDURE / METHODIK / TECNICA / PROCEDIMENTO /

ǻǿǹǻǿȀǹȈǿǹ / METOD / METODYKA
OX
1 colonie / 1 colony / 1 Kolonie /

1 colonia / 1 colónia / 1 ĮʌȠȚțȓĮ /
1 koloni / 1 kolonia
API NaCl 0.85 % Medium 5 ml /
API Suspension Medium 5 ml
- | CIT |
- | VP |
- | GEL |
api 20 E
ADH ODC
H2S - URE
36°C
18:00-24:00 / 48:00 ±
2°C
Tests ⊕ < 3
(y compris / including /
einschließlich / incluído /
compreso / incluindo / api 20 E
ıȣµʌİȡȚȜĮµȕȐȞİĲĮȚ / inklusive /
inklusiv / wáączając test GLU) TDA : TDA
IND : JAMES
VP : VP 1 + VP 2
GLU (NO2) : NIT 1 + NIT 2 (+Zn)
api 20 E
+ - + - + -

bioMérieux® SA I
api® 20 E 07584E - XL - 2004/05
TABLEAU D'IDENTIFICATION / IDENTIFICATION TABLE / PROZENTTABELLE / TABLA DE IDENTIFICACION / TABELLA DI IDENTIFICAZIONE / QUADRO DE IDENTIFICAÇÃO
ȆǿȃǹȀǹȈ ȉǹȊȉȅȆȅǿǾȈǾȈ / IDENTIFIKATIONSTABEL / IDENTIFIERINGSTABELL / TABELA IDENTYFIKACYJNA
% de réactions positives après 18-24 / 48 h à 36°C ± 2°C / % of positive reactions after 18-24 / 48 hrs. at 36°C ± 2°C / % der positiven Reaktionen nach 18-24 / 48 Std. bei 36°C ± 2°C /
% de las reacciones positivas después de 18-24 / 48 H a 36°C ± 2°C / % di reazioni positive dopo 18-24 / 48 ore a 36°C ± 2°C / % de reacções positivas após 18-24 / 48 h a 36º C ± 2º C /
% șİĲȚțȫȞ ĮȞĲȚįȡȐıİȦȞ µİĲȐ Įʌȩ 18-24 / 48 ȫȡİȢ ıĲȠȣȢ 36°C ± 2°C / % positiva reaktioner efter 18-24 / 48 timmar vid 36°C ± 2°C / % af positive reaktioner efter 18-24 / 48 timer ved 36°C ± 2°C /
% pozytywnych reakcji po 18-24 / 48 godzinach w 36°C ± 2°C
API 20 E V4.0 ONPG ADH LDC ODC CIT H2S URE TDA IND VP GEL GLU MAN INO SOR RHA SAC MEL AMY ARA OX NO2 N2 MOB McC OF/O OF/F
Buttiauxella agrestis 100 0 0 85 25 0 0 0 0 0 0 100 100 0 1 99 0 92 99 100 0 100 0 100 100 100 100
Cedecea davisae 99 89 0 99 75 0 0 0 0 89 0 100 100 10 0 0 100 0 100 1 0 99 0 87 100 100 100
Cedecea lapagei 99 99 0 0 75 0 0 0 0 90 0 100 99 0 0 0 0 1 100 1 0 99 0 87 100 100 100
Citrobacter braakii 50 45 0 99 75 81 1 0 4 0 0 100 100 1 100 100 1 91 99 99 0 100 0 95 100 100 100
Citrobacter freundii 90 24 0 0 75 75 1 0 1 0 0 100 99 25 99 99 99 82 40 99 0 98 0 95 100 100 100
Citrobacter koseri/amalonaticus 99 75 0 100 97 0 1 0 99 0 0 100 100 25 99 99 1 1 98 99 0 100 0 95 100 100 100
Citrobacter koseri/farmeri 99 2 0 100 25 0 1 0 99 0 0 100 100 1 99 99 99 80 99 99 0 100 0 95 100 100 100
Citrobacter youngae 100 50 0 1 80 80 0 0 1 0 0 100 100 0 95 100 1 0 25 100 0 85 0 95 100 100 100
Edwardsiella hoshinae 0 0 100 99 50 94 0 0 99 0 0 100 100 0 0 1 100 0 0 1 0 100 0 100 100 100 100
Edwardsiella tarda 0 0 100 99 1 75 0 0 99 0 0 100 0 0 0 0 0 0 0 0 0 100 0 98 100 100 100
Enterobacter aerogenes 99 0 99 98 82 0 1 0 0 85 0 99 99 99 99 99 99 99 99 99 0 100 0 97 100 100 100
Enterobacter amnigenus 1 99 25 0 99 40 0 0 0 0 75 0 100 100 0 1 100 99 99 99 99 0 100 0 92 100 100 100
Enterobacter amnigenus 2 99 80 0 99 80 0 0 0 0 75 0 100 100 0 99 100 1 99 99 99 0 100 0 100 100 100 100
Enterobacter asburiae 100 25 0 99 80 0 0 0 0 10 0 100 99 25 100 0 99 0 100 100 0 100 0 95 100 100 100
Enterobacter cancerogenus 100 75 0 99 99 0 0 0 0 89 0 100 100 0 1 100 1 1 100 100 0 100 0 99 100 100 100
Enterobacter cloacae 98 82 1 92 90 0 1 0 0 85 0 99 99 12 90 85 96 90 99 99 0 100 0 95 100 100 100
Enterobacter gergoviae 99 0 32 100 75 0 99 0 0 90 0 100 99 23 1 100 99 100 99 100 0 100 0 90 100 100 100
Enterobacter intermedius 99 0 0 99 1 0 0 0 0 2 0 100 97 0 88 99 40 100 99 99 0 100 0 92 100 100 100
Enterobacter sakazakii 100 96 0 91 94 0 1 0 25 91 10 100 100 75 8 99 99 99 99 99 0 100 0 96 100 100 100
Escherichia coli 1 90 1 74 70 0 1 3 0 89 0 0 99 98 1 91 82 36 75 3 99 0 100 0 95 100 100 100
Escherichia coli 2 26 1 45 20 0 1 1 0 50 0 0 99 90 1 42 30 3 3 1 70 0 98 0 5 100 100 100
Escherichia fergusonii 96 1 99 100 1 0 0 0 99 0 0 100 99 1 0 87 0 1 99 99 0 100 0 93 100 100 100
Escherichia hermannii 100 0 1 100 1 0 0 0 99 0 0 100 100 0 0 99 25 0 99 99 0 100 0 99 100 100 100
Escherichia vulneris 100 30 50 0 0 0 0 0 0 0 0 100 100 0 1 95 7 95 95 99 0 100 0 100 100 100 100
Ewingella americana 98 0 0 0 75 0 0 0 0 95 1 99 99 0 0 1 0 1 50 1 0 100 0 60 100 100 100
Hafnia alvei 1 75 0 99 98 50 0 10 0 0 50 0 99 99 0 1 99 0 0 25 99 0 100 0 85 100 100 100
Hafnia alvei 2 50 0 99 99 1 0 1 0 0 10 0 99 98 0 1 1 1 0 0 1 0 100 0 0 100 100 100
Klebsiella ornithinolytica 100 0 99 99 99 0 85 0 100 65 0 100 100 99 100 100 100 100 100 100 0 100 0 0 100 100 100
Klebsiella oxytoca 99 0 80 0 89 0 78 0 99 80 0 100 100 99 100 99 99 100 100 100 0 100 0 0 100 100 100
Klebsiella pneumoniae ssp ozaenae 94 18 25 1 18 0 1 0 0 1 0 99 96 57 66 58 20 80 97 85 0 92 0 0 100 100 100
Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae 99 0 73 0 86 0 75 0 0 90 0 100 99 99 99 99 99 99 99 99 0 100 0 0 100 100 100
Klebsiella pneumoniae ssp rhinoscleromatis 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 99 100 90 90 75 75 1 99 10 0 100 0 0 100 100 100
Klebsiella terrigena 100 0 99 6 52 0 0 0 0 75 0 99 99 99 99 99 100 100 100 99 0 100 0 0 100 100 100
Kluyvera spp 95 0 25 99 60 0 0 0 80 0 0 100 99 0 25 93 89 99 99 99 0 95 0 94 100 100 100
Leclercia adecarboxylata 99 0 0 0 0 0 1 0 99 0 1 100 99 0 2 100 66 99 99 100 0 100 0 100 100 100 100
Moellerella wisconsensis 97 0 0 0 40 0 0 0 15 1 0 100 1 0 0 0 100 99 0 0 0 90 0 0 100 100 100
Morganella morganii 1 0 10 98 1 1 99 93 99 0 0 99 0 0 0 0 1 0 0 0 0 88 0 95 100 100 100
Pantoea spp 1 85 1 0 0 13 0 1 0 1 9 1 100 99 1 26 1 98 26 59 61 0 85 0 85 100 100 100
Pantoea spp 2 99 1 0 0 99 0 1 0 53 62 4 100 99 36 82 90 98 81 99 99 0 85 0 85 100 100 100
Pantoea spp 3 99 1 0 0 21 0 1 0 1 86 15 100 99 34 1 97 93 23 65 97 0 85 0 85 100 100 100
Pantoea spp 4 86 1 0 0 29 0 1 0 59 1 1 99 100 10 32 99 72 89 99 99 0 85 0 85 100 100 100
Proteus mirabilis 1 0 0 99 50 75 99 98 1 1 82 98 0 0 0 0 1 0 0 0 0 93 0 95 100 100 100
Proteus penneri 1 0 0 0 1 20 100 99 0 0 50 99 0 0 0 0 100 0 1 0 0 99 0 85 100 100 100
Proteus vulgaris 1 0 0 0 12 83 99 99 92 0 74 99 1 1 0 1 89 0 66 1 0 100 0 94 100 100 100
Providencia alcalifaciens/rustigianii 0 0 0 0 80 0 0 100 99 0 0 99 1 1 0 0 1 0 0 1 0 100 0 96 100 100 100
Providencia rettgeri 1 1 0 0 74 0 99 99 90 0 0 98 82 78 1 50 25 0 40 1 0 98 0 94 100 100 100
Providencia stuartii 1 0 0 0 85 0 30 98 95 0 0 98 3 80 0 0 15 0 0 0 0 100 0 85 100 100 100
Rahnella aquatilis 100 0 0 0 50 0 0 1 0 99 0 100 100 0 98 99 100 97 100 98 0 100 0 6 100 100 100
Salmonella arizonae 98 75 97 98 75 99 0 0 1 0 0 100 99 0 99 99 1 78 0 99 0 100 0 99 100 100 100
Salmonella choleraesuis 0 15 99 99 6 64 0 0 0 0 0 100 99 0 98 99 0 20 0 0 0 100 0 95 100 100 100
Salmonella gallinarum 0 1 100 1 0 25 0 0 0 0 0 100 100 0 0 1 0 0 0 100 0 100 0 0 100 100 100
bioMérieux® SA II
api® 20 E 07584E - XL - 2004/05
API 20 E V4.0 ONPG ADH LDC ODC CIT H2S URE TDA IND VP GEL GLU MAN INO SOR RHA SAC MEL AMY ARA OX NO2 N2 MOB McC OF/O OF/F
Salmonella paratyphi A 0 5 0 99 0 1 0 0 0 0 0 100 99 0 99 98 0 96 0 99 0 100 0 95 100 100 100
Salmonella pullorum 0 1 75 100 0 85 0 0 0 0 0 100 100 0 0 100 0 0 0 75 0 100 0 0 100 100 100
Salmonella typhi 0 1 99 0 0 8 0 0 0 0 0 100 99 0 99 0 0 99 0 0 0 100 0 97 100 100 100
Salmonella spp 1 56 82 93 65 83 0 0 1 0 1 99 100 40 99 86 1 90 1 99 1 100 0 95 100 100 100
Serratia ficaria 99 0 0 0 100 0 0 0 0 40 90 100 100 50 99 74 99 99 100 99 0 92 0 100 100 100 100
Serratia fonticola 99 0 73 99 75 0 0 0 0 0 0 100 100 97 100 99 30 99 99 99 0 99 0 91 100 100 100
Serratia liquefaciens 95 1 78 98 80 0 2 0 0 59 65 100 99 80 98 2 99 72 97 97 0 100 0 95 100 100 100
Serratia marcescens 94 0 95 95 96 0 25 0 1 70 87 100 99 85 98 1 99 68 97 25 0 95 0 97 100 100 100
Serratia odorifera 1 95 0 95 99 95 0 0 0 99 50 99 100 99 99 99 99 99 99 99 99 0 99 0 100 100 100 100
Serratia odorifera 2 95 0 96 1 95 0 0 0 99 50 99 100 99 99 99 99 1 99 99 95 0 99 0 100 100 100 100
Serratia plymuthica 99 0 0 0 65 0 0 0 0 65 50 100 90 70 70 1 99 85 98 98 0 99 0 50 100 100 100
Serratia rubidaea 99 0 30 0 92 0 1 0 0 71 82 99 99 75 1 3 99 95 99 99 0 100 0 85 100 100 100
Shigella spp 1 0 0 1 0 0 0 0 29 0 0 99 63 0 7 7 1 20 0 50 0 100 0 0 100 100 100
Shigella sonnei 96 0 0 93 0 0 0 0 0 0 0 99 99 0 1 75 1 1 0 99 0 100 0 0 100 100 100
Yersinia enterocolitica 80 0 0 90 0 0 98 0 50 5 0 99 99 25 98 1 99 4 75 75 0 98 0 2 100 100 100
Yersinia frederiksenii/intermedia 99 0 0 75 1 0 99 0 99 1 0 100 99 25 99 99 99 1 99 99 0 98 0 5 100 100 100
Yersinia kristensenii 80 0 0 80 0 0 99 0 97 0 0 100 99 10 99 0 0 0 99 99 0 98 0 5 100 100 100
Yersinia pestis 68 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 99 99 0 70 0 0 0 30 30 0 47 0 0 99 100 100
Yersinia pseudotuberculosis 98 0 0 0 1 0 99 0 0 0 0 99 97 0 0 75 0 50 25 50 0 95 0 0 100 100 100
Aeromonas hydrophila gr. 1 98 90 25 1 25 0 0 0 85 25 90 99 99 1 3 5 97 1 75 75 100 97 0 95 99 99 99
Aeromonas hydrophila gr. 2 99 97 80 1 80 0 0 0 85 80 97 97 99 9 9 1 80 1 75 5 100 97 0 95 99 99 99
Aeromonas salmonicida ssp salmonicida 1 60 1 0 0 0 0 0 1 0 75 50 54 0 0 0 0 0 1 0 100 98 0 1 99 99 99
Photobacterium damsela 1 99 75 0 1 0 98 0 0 10 1 50 0 0 0 0 1 0 0 0 100 100 0 25 99 99 99
Plesiomonas shigelloides 95 99 100 100 0 0 0 0 100 0 0 99 0 99 0 0 0 0 0 0 100 99 0 95 99 99 99
Vibrio alginolyticus 0 0 98 75 60 0 1 0 100 10 75 99 100 0 1 0 100 0 10 1 100 47 0 100 99 94 94
Vibrio cholerae 98 1 94 97 75 0 0 0 99 58 92 98 98 0 0 0 94 0 5 0 100 96 0 100 96 99 99
Vibrio fluvialis 95 99 0 0 1 0 0 0 80 0 75 75 80 0 1 0 75 0 36 75 100 100 0 100 99 99 99
Vibrio hollisae 1 0 0 0 0 0 0 0 94 0 0 10 0 0 0 0 0 0 0 0 100 100 0 0 99 99 99
Vibrio mimicus 99 0 99 99 50 0 0 0 99 1 99 99 99 0 0 0 0 0 0 0 100 95 0 100 95 99 99
Vibrio parahaemolyticus 0 0 100 99 50 0 1 0 100 1 75 100 99 0 0 1 1 0 12 50 100 63 0 100 98 99 99
Vibrio vulnificus 99 0 91 90 25 0 0 0 99 1 99 99 75 0 0 0 1 0 90 0 99 54 0 100 99 99 99
Pasteurella aerogenes 99 0 0 80 0 0 99 0 0 0 0 99 0 97 0 1 99 0 0 75 75 100 0 0 100 100 100
Pasteurella multocida 1 4 0 0 25 0 0 0 0 99 0 0 29 1 0 1 0 75 0 0 0 99 90 0 0 2 23 23
Pasteurella multocida 2 7 0 0 45 0 0 0 0 99 0 0 44 99 0 99 0 99 0 0 0 89 90 0 0 2 23 23
Pasteurella pneumotropica/haemolytica 60 0 1 10 0 0 25 0 15 7 3 35 12 12 12 1 35 1 2 1 80 99 0 0 9 33 33
Acinetobacter baumannii/calcoaceticus 0 0 0 0 51 0 1 0 0 5 5 99 0 0 0 0 0 99 1 99 0 3 0 0 90 98 0
Bordetella/Alcaligenes/Moraxella spp * 0 0 0 0 52 0 14 1 0 25 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 95 62 1 75 75 0 0
Burkholderia cepacia 50 0 25 16 78 0 0 0 0 1 43 60 1 0 0 0 13 0 7 20 90 40 0 99 88 97 0
Chromobacterium violaceum 0 99 0 0 75 0 0 0 14 0 99 99 0 0 0 0 10 0 0 0 99 75 0 99 99 99 99
Chryseomonas luteola 86 75 0 0 94 0 0 0 0 25 13 84 0 1 0 1 1 15 1 85 0 30 0 100 91 94 0
Chryseobacterium indologenes 5 0 0 0 12 0 90 0 75 0 80 0 0 0 0 0 0 0 0 0 99 20 0 0 57 90 10
Chryseobacterium meningosepticum 77 0 0 0 20 0 1 0 85 0 90 0 0 0 0 0 0 0 0 0 99 6 0 0 48 93 6
Eikenella corrodens 0 0 75 99 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 100 95 0 1 1 49 49
Flavimonas oryzihabitans 0 0 0 0 89 0 0 0 0 25 1 10 0 1 0 1 0 10 0 45 0 7 0 100 99 99 0
Myroides /Chryseobacterium indologenes 0 0 0 0 50 0 75 0 0 1 75 0 0 0 0 0 0 0 0 0 99 0 0 0 84 2 2
Ochrobactrum anthropi 15 0 0 0 30 0 25 1 0 15 0 1 0 0 0 0 0 0 0 10 90 42 60 99 99 47 0
Pseudomonas aeruginosa 0 89 0 0 92 0 25 0 0 1 75 50 0 0 0 0 1 10 1 25 97 12 56 97 100 98 0
Pseudomonas fluorescens/putida 0 75 0 0 75 0 0 0 0 10 27 25 0 0 0 0 0 25 1 20 99 26 0 100 96 93 0
Non-fermenter spp 1 1 0 0 37 0 1 0 0 15 9 9 0 0 0 1 1 1 1 1 93 48 35 99 85 49 0
Shewanella putrefaciens 0 0 0 80 75 75 1 0 0 0 75 1 0 0 0 0 1 0 0 2 99 96 0 100 96 9 0
Stenotrophomonas maltophilia 70 0 75 1 75 1 0 0 0 0 90 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 26 1 100 91 49 0
* Brucella spp possible / möglich / posible / possibile / possível / ʌȚșĮȞȩȞ / möjlig / mulig / MoĪliwoĞü.
bioMérieux® SA III
api® 20 E 07584E - XL - 2004/05
BIBLIOGRAPHIE / LITERATURE REFERENCES / LITERATUR / BIBLIOGRAFIA /

ǹȃǹĭȅȇǼȈ ǹȇĬȇȅīȇǹĭǿȍȃ / REFERENSLITTERATUR / LITTERATURHENVISNINGER /
PISMIENNICTWO
1. APPELBAUM P.C., STAVITZ J., BENTZ M.S., 6. MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A.,
VON KUSTER L.C. TENOVER F.C., YOLKEN R.H.
Four Methods for Identification of Gram-Negative Manual of Clinical Microbiology.
Nonfermenting Rods : Organisms more Commonly 7th Edition.
Encountered in Clinical Specimens. (1999) Amer. Soc. Microbiol., Washington, D.C.
(1980) J. Clin. Microbiol. 12, 271-278. 7. NEUBAUER H., SAUER T., BECKER H.,
2. BROOKS K.A., JENS M., SODEMAN T.M. ALEKSIC S., MEYER H.
A Clinical Evaluation of the API Microtube System for Comparison of systems for identification and differentiation of
Identification of Enterobacteriaceae. species within the genus Yersinia.
(1974) Am. J. Med. Techn. 40, 55-61. (1998) J. Clin. Microbiol. 36, 11, 3366-3368.
3. CASTILLO C.B., BRUCKNER D.A. 8. NORD C.E., LINDBERG A.A., DAHLBÄCK A.
Comparative Evaluation of the Eiken and API 20E Systems Evaluation of Five Test-Kits, API, AuxoTab, Enterotube,
and Conventional Methods for Identification of Members of PathoTec and R/B, for Identification of Enterobacteriaceae.
the family Enterobacteriaceae. (1974) Med. Microbiol. Immunol. 159, 211-220.
(1984) J. Clin. Microbiol. 20, 754-757. 9. SMITH P.B., TOMFOHRDE K.M., RHODEN D.L.,
4. HAYEK L., WILLIS G.W. BALOWS A.
Identification of the Enterobacteriaceae : a Comparison of the API System : A multitube Micromethod for Identification of
Enterotube II with the API 20E. Enterobacteriaceae.
(1984) J. Clin. Pathol. 37, 344-347. (1972) Applied Microbiol. 24, 449-452.
5. McLAUGHLIN J.K., ZUCKERMAN B.D., TENENBAUM S., 10. SWANSON E.C., COLLINS M.T.
WOLF B.A. Use of the API 20E System to Identify Veterinary
Comparison of the API 20E, Flow, and Minitek systems for Enterobacteriaceae.
the identification of enteric and nonfermentative bacteria (1980) J. Clin. Microbiol. 12, 10-14.
isolated from cosmetic raw materials.
(1984) J. Soc. Cosmet. Chem. 35, 253-263.
bioMérieux® SA IV
api® 20 E 07584E - XL - 2004/05
TABLE DES SYMBOLES / INDEX OF SYMBOLS / SYMBOLE /

CUADRO DE SIMBOLOS / TABELLA DEI SIMBOLI / QUADRO DOS SÍMBOLOS /
ȆǿȃǹȀǹȈ ȈȊȂǺȅȁȍȃ / SYMBOLER / SYMBOLFORTEGNELSE /
TABELA SYMBOLI
Symbole / Symbol / Signification / Meaning / Bedeutung /

Simbolo / Símbolo / Significado / Significato / ǼʌİȟȒȖȘıȘ / Betydelse /
ȈȪµȕȠȜȠ Betydning / Znaczenie
REF / Référence du catalogue / Catalog number / Bestellnummer /

Número de catálogo / Numero di catalogo / Referência de catálogo /
REF
ǹȡȚșµȩȢ țĮĲĮȜȩȖȠȣ / Artikelnummer / Katalognummer /
Numer katalogowy
Dispositif medical de diagnostic in vitro / In Vitro Diagnostic Medical

Device / In Vitro Diagnostikum / Producto sanitario para diagnóstico
IVD in vitro / Dispositivo medico-diagnostico in vitro / Dispositivo médico
para diagnóstico in vitro / In Vitro ǻȚĮȖȞȦıĲȚțȩ ǿĮĲȡȠĲİȤȞȠȜȠȖȚțȩ
ʌȡȠȧȩȞ / Medicinsk utrustning för in vitro-diagnostik / Medicinsk udstyr
til in vitro-diagnostik / Urządzenie medyczne do diagnostyki in vitro
Fabricant / Manufacturer / Hersteller / Fabricante /

Fabbricante / Fabricante / ȀĮĲĮıțİȣĮıĲȒȢ / Tillverkad av /
Producent / Producent
Limites de température / Temperature limitation /

Zulässiger Temperaturbereich / Limite de temperatura /
Limiti di temperatura / Limites de temperatura /
ȆİȡȚȠȡȚıµȠȓ șİȡµȠțȡĮıȓĮȢ / Temperaturgräns /
Temperaturbegrænsning / Przechowywaü w temperaturze
Utiliser jusque / Use by / Verwendbar bis / Fecha de caducidad /

Utilizzare entro / Prazo de validade / ǾµİȡȠµȘȞȓĮ ȜȒȟȘȢ /
Används före / Holdbar til / ZuĪyü do
Code du lot / Batch code / Chargenbezeichnung / Codigo de lote /

LOT Codice del lotto / Código do lote / ǹȡȚșµȩȢ ȆĮȡĲȓįĮȢ / Batchnummer /
Lotnummer / Numer serii
Consulter les instructions d'utilisation / Consult Instructions for Use /

Gebrauchsanweisung beachten / Consulte las instrucciones de uso /
Consultare le istruzioni per l’uso / Consulte as instruções de
utilização / ȈȣµȕȠȣȜİȣĲİȓĲİ ĲȚȢ ȠįȘȖȓİȢ ȤȡȒıȘȢ /
Se användarinstruktionerna / Se brugsanvisning /
OdnieĞ siĊ do instrukcji uĪycia
Contenu suffisant pour "n" tests / Contains sufficient for <n> tests /
Ausreichend für "n" Ansätze / Contenido suficiente para <n> ensayos/
Σ Contenuto sufficiente per "n" saggi / Conteúdo suficiente para “n”
ensaios / ȆİȡȚİȤȩµİȞȠ İʌĮȡțȑȢ ȖȚĮ «Ȟ» İȟİĲȐıİȚȢ /
Innehållet räcker till <n> tester / Indeholder tilstrækkeligt til "n" test /
ZawartoĞü wystarczy do wykonania <n> oznaczeĔ

au capital de 11 879 045 € Box 15969,
Tel. 33 (0)4 78 87 20 00 Fax (1) 919 620 22 11
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ȉȠ ȜȠȖȩĲȣʌȠ ĮʌȠĲİȜİȓ țĮĲĮȤȦȡȘµȑȞȠ țĮȚ ʌȡȠıĲĮĲİȣȩµİȞȠ İµʌȠȡȚțȩ ıȒµĮ ĲȘȢ bioMérieux SA Ȓ µȚĮȢ İț ĲȦȞ șȣȖĮĲȡȚțȫȞ ĲȘȢ
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REF 20 100 / 20 160 07584E - FR - 2004/05

INTRODUCTION ET OBJET DU TEST Matériel :

CONDITIONS DE STOCKAGE Inoculation de la galerie

LIMITES DU TEST • Les bacilles à Gram négatif non fermentants, isolés de

• autres bacilles à Gram négatif non fastidieux : ELIMINATION DES DECHETS

OX (voir notice du test oxydase) cytochrome-OXydase (voir notice du test oxydase)

(1) Une très légère couleur jaune est également positive.

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Identification system for Enterobacteriaceae and other non-fastidious Gram-negative rods

SUMMARY AND EXPLANATION Material :

STORAGE CONDITIONS Inoculation of the strip

LIMITATIONS OF THE METHOD RANGE OF EXPECTED RESULTS

WASTE DISPOSAL WARRANTY

NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min

bioMérieux® SA bioMérieux, Inc

LAGERUNGSBEDINGUNGEN Beimpfung des Streifens

• Andere gramnegative, nicht anspruchsvolle Stäbchen: BESEITIGUNG DER ABFÄLLE

AKTIVE MENGE ERGEBNISSE

CIT Trinatriumcitrat 0,756 CITratverwertung hellgrün / gelb blau-grün / blau (3)

H2S Natriumthiosulfat 0,075 H2S-Bildung farblos / gräulich schwarzer Niederschlag

GEL Gelatine Diffusion der schwarzen

OX (siehe Arbeitsanleitung des Cytochrom OXidase (siehe Arbeitsanleitung des Oxidase-Tests)

bioMérieux® SA bioMérieux, Inc

Sistema de identificación de Enterobacteriaceae y otros bacilos Gram negativos no exigentes

INTRODUCCIÓN Y OBJETO DEL ENSAYO Material:

CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Inoculación de la galería

Preparación del inóculo Interpretación

• Otros bacilos Gram negativos no perniciosos: ELIMINACION DE LOS RESIDUOS

OF-F fermentación: bajo aceite Verde Amarillo

INTRODUZIONE E OBIETTIVO DEL TEST Materiale :

CONDIZIONI DI CONSERVAZIONE Inoculo della galleria

• altri bacilli Gram negativi non esigenti : SMALTIMENTO DEI RIFIUTI

(1) Una leggerissima colorazione gialla è comunque positiva.

NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min.

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INTRODUÇÃO E OBJECTIVO DO TESTE Materiais :

• Outros bacilos Gram negativos não fastidiosos: ELIMINAÇÃO DE RESÍDUOS

COMPONENTES QTD RESULTADOS

(1) Uma cor amarela muito ligeira é também positiva.

bioMérieux® SA bioMérieux, Inc

ȈȪıĲȘµĮ ĲĮȣĲȠʌȠȓȘıȘȢ ȖȚĮ Enterobacteriaceae țĮȚ ȐȜȜĮ µȘ ĮʌĮȚĲȘĲȚțȐ Gram-ĮȡȞȘĲȚțȐ ȕĮțĲȘȡȓįȚĮ

ȆǼȇǿȁǾȌǾ Ȁǹǿ ǼȆǼȄǾīǾȈǾ ȊȜȚțȐ :

ȈȊȃĬǾȀǼȈ ĭȊȁǹȄǾȈ • ǵĲĮȞ ȤȡȘıȚµȠʌȠȚİȓĲİ ʌȚʌȑĲĲĮ Ȓ PSIpette, ȜȐȕİĲİ µȓĮ

ǼȡµȘȞİȓĮ ǹȞ ĲȠ ȤȡȫµĮ ĲȘȢ İȟȑĲĮıȘȢ ĮȜȜȐȟİȚ ıİ ʌȠȡĲȠțĮȜȓ-

ȆǼȇǿȅȇǿȈȂȅǿ ȂǼĬȅǻȅȊ ǼȊȇȅȈ ǹȃǹȂǼȃȅȂǼȃȍȃ ǹȆȅȉǼȁǼȈȂǹȉȍȃ

µĮȪȡȠ ȣʌȩȜİȚµµĮ / ȜİʌĲȒ

GEL ǽİȜĮĲȓȞȘ įȚȐȤȣıȘ µİȜĮȞȒȢ

(ȕȜȑʌİ İıȫțȜİȚıĲȠ ȠįȘȖȚȫȞ ĲȘȢ

(1) ǲȞĮ ʌȠȜȪ ĮȞȠȚȤĲȩȤȡȦµȠ țȓĲȡȚȞȠ șĮ ʌȡȑʌİȚ İʌȓıȘȢ ȞĮ șİȦȡİȓĲĮȚ șİĲȚțȩ.

ǼȄǼȉǹ ȆȅȈ. ǹȆȅȉǼȁǼȈȂǹȉǹ

bioMérieux® SA bioMérieux, Inc

Identifieringssystem för Enterobacteriaceae och andra icke-krävande Gram-negativa stavar

SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING Material:

FÖRVARING Inokulering av stripset

METODENS BEGRÄNSNINGAR • Endast rena kulturer av en enda organism bör

AKTIVA MÄNGD RESULTAT

LDC L-lysin 1,9 Lysindekarboxylas gul röd / orange (2)

ODC L-ornitin 1,9 Ornitin-dekarboxylas gul röd / orange (2)

CIT trinatriumcitrat 0,756 CITratanvändning ljusgrön / gul blå / blågrön (3)

URE urinämne 0,76 UREas gul röd / orange (2)

GEL Gelatin spridning av svart

OX (se bipacksedel för oxidastest) cytokrom-Oxidas (se bipacksedel för oxidastest)

NIT 1 + NIT 2 / 2-5 min

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