Cryptosoridium:

Actualités

Introduction

I. Historique

II. Epidémiologie

1. Taxonomie

2. Morphologie

3. Réservoir du parasite.

4. Transmission

5. Cycle évolutif.

6. Répartition géographique.

III. Clinique

V. Diagnostic

VI. Traitement

VII. La prophylaxie
 Introduction
Cryptosporidium est un protozoaire très largement répandu dans le monde, responsable de diarrhées
spontanément résolutives chez les patients immunocompétents, notamment les enfants, et de diarrhées
chroniques graves chez les malades immunodéprimés.

I. Epidémiologie

1. Taxonomie :
Ancienne classification: Cryptosporidium a été classé parmi les coccidies
• Règne : Animal
• Embranchement : Protozoa Protozoaires
• Phylum : Apicomplexa
• Classe : Sporozoea Sporozoaires
• Sous-classe : Coccidia Coccidies
• Ordre : Eucoccidiida
• Sous-ordre : Eimeridea
• Famille : Cryptosporidae
• Genre : Cryptosporidium
Classés pendant de nombreuses années comme coccidies, les espèces de Cryptosporidium ont été considérées
comme atypiques pour un certain nombre de raisons
Cependant, il a longtemps été spéculé que le Cryptosporidium représente un «chaînon manquant» entre la
gregarine plus primitive et coccidies
Puis il a été transferé de la sous classe coccidies, classe Coccidiomorphea à une nouvelle sous classe,
Cryptogregaria, dans la classe Gregarinomorphea

Similitudes entre cryptosporidium et gregarines :

Le cycle de vie, des données structurelles, ultrastructurales et génomiques suggèrent une relation plus étroite
avec Gregarines, et une lignée distincte dans le phylum Apicomplexa a été proposée.
 La réactivité sérologique croisée de Cryptosporidium sp avec un Monocystis. Gregarine
 Le séquençage de la région 18S de Cryptosporidium démontre une relation plus étroite aux grégarines qu’aux
Coccidies
La description des nouveaux stades dans le cycle de vie de Cryptosporidium in vitro
Développement extracellulaires de Cryptosporidium in vitro
Présence de syzygy décrite dans Cryptosporidium in vitro
 La capacité de Cryptosporidum de développement dans les biofilms; et la confirmation de la présence des
stades gamont extracellulaires

Les espèces du genre cryptoporidium :

26 espèces de Cryptosporidium ont été décrite dont deux sont les plus importantes :
 C. hominis (=C. parvum génotype 1 ) : l'espèce anthroponotique qui est en grande partie restreint à l'homme.
 C. parvum (=C. parvum genotype 2) est l'espèce zoonotique qui provoque à la fois des maladies humaines et
animales, en particulier chez les jeunes ruminants.
D’autres espèces sont à l’origine de la cryptosporidiose humaine : C. Meleagridis et occasionnellement
Cryptosporidium cuniculus, Cryptosporidium felis et Cryptosporidium canis
Chez les animaux d’élevage, C.parvum, C.andersoni, C.baileyi et C.meleagridis ont été enregistrés comme
agents de morbidité
2.Morphologie
Oocyste : se trouve dans les selles d’un malade ou dans le milieu extérieur (forme d’infestation et de
dissémination).
Trophozoite : se trouve au niveau de la région apicale de l’entérocyte qui peut être objectivé sur des biopsies
intestinales

3. Réservoir du parasite.
Cryptosporidium Sp. infecte une vaste gamme de vertébrés, les animaux
domestiques et les animaux sauvages. Les hôtes affectés comprennent les
mammifères,reptiles, oiseaux, amphibiens et poissons
La capacité du cryptosporidium de former des biofilm constitue un
réservoir pour l’infection

4. Transmission :
*La transmission directe :
-Par la voie orofécale : c’est la forme la plus courante de transmission, que
ce soit zoonotique ou directement interhumaie de personne à personne
-Les épidémies d'origine hydrique sont un problème majeur, en effet Cryptosporidium était l'agent étiologique
de 60,3% des épidémies parasitaires dues à protozoaires aquatiques qui ont été signalées dans le monde entier
entre 2004 et 2010 ( Baldursson et Karanis 2011 ).
La transmission hydrique a causé 12 a 20 millions /an aux Etats Unis (Reynolds et al., 2008 ).
60 000 cas par an au ROYAUME UNIS (Bridge et al, 2010)
Il a été utilisé comme référence pathologique parmi les protozoaires transmis par voie orofécale dans la
conception et la mise en oeuvre des recommandations de l'OMS pour la surveillance de la qualité d’eau de
consommation
-La transmission d'origine alimentaire à la suite de pratiques agricoles, d'une mauvaise hygiène par les
manipulateurs d'aliments ou au sein des ménages, est responsable d’un nombre significatif d'infections par
Cryptosporidium (Rose et Slifko, 1999; Thompson et Smith, 2011 ; FAO, 2014)

*Transmission indirecte, où l'infection résulte de la transmission mécanique d'oocystes sur, par exemple, les
mouches ou d’autres animaux tels que les chiens ( Szostakowska et al., 2004 )
Rq : Rares cas d'infection respiratoire après inhalation ou aspiration ont été décrit (Shirley,et al.2012)

Facteurs favorisants la dispersion des oocystes :

Un certain nombre de caractéristiques biologiques de Cryptosporidium favorisent la transmission, en particulier
Via l'eau:
-le potentiel de biofilms d'agir en tant que réservoir de Cryptosporidium dans lequel les oocystes peuvent non
seulement être piégés et ensuite libérés dans l'approvisionnement en eau, mais peuvent aussi agir comme des
environnements riches en nutriments dans lequel le parasite peut se développer et se multiplier ( Koh et al.,
2013, 2014 )
- les oocystes produits par Cryptosporidium sont extrêmement résistants, facilement propagés par l'eau, résistants
aux traitements par le chlore et sont difficiles à éliminer de l'eau potable sans l'utilisation d'une filtration coûteuse
et longue ( Jakubowski,1995; Striepen et Kissinger, 2004 )
-Le cycle de vie ne nécessite pas d'hôtes double ou multiples pour l'achèvement
- Le stade de l'oocyste est entièrement sporulé dans les selles; (transmission directe peut également se produire
entre les hôtes)
- Dans le genre il y a un grand réservoir d'espèces hôtes
- Les oocystes sont relativement petits par rapport à d’autres protozoaires
- Les hôtes infectés peuvent éliminer un grand nombre d'oocystes (par exemple, la production journalière
d'oocystes à partir de veaux diarrhéiques> 10
-Très infectieux : en effet l'ingestion d'un seul oocyste peut fournir une infection humaine

5.Cycle evolutif
Les oocystes à paroi épaisse de Cryptosporidium sont transmis par voie orofécale traversent le tractus gastro-
intestinal de l'hôte pour le desenkystement dans l'iléon. Ce dernier, est initié par l'exposition aux sécrétions telles
que les sels biliaires et les enzymes pancréatiques, Quatre sporozoïtes infectieux sont libérés, laissant la paroi de
l'oocyste vide avec un corps résiduel.
Les sporozoïtes s'attachent à la membrane apicale des cellules hôtes principalement localisées dans le jéjunum et
l'iléon.
Par la suite, les formes endogènes sont amplifiées dans l'intestin conduisant à diffusion de l'infection à travers le
petit et le gros intestin. L'invasion et la colonisation de la surface épithéliale détruit la bordure en brosse des
microvillosités et induit une perte de cellules épithéliales de surface.
L'invasion cellulaire par le sporozoïte est suivie d'un développement intracellulaire :
Les trophozoïtes développent une vacuole (nommée vacuole parasitophore) dans les cellules hôtes et subissent
ensuite une merogonie pour former des meronts de type I avec des mérozoïtes de type I circulaires.
Les mérozoïtes de type I éclosent à partir des meronts I pour initier:
un cycle auto-infectieux =Envahissent les entérocytes pour former d'autres meronts I, et un cycle sexuel =
envahissent les entérocytes pour former un meront II, qui contient quatre mérozoïtes de type II.
Les mérozoïtes de type II infectent d'autres entérocytes pour former des micro- et macrogametocytes qui sont
respectivement les stades gametocytes mâles et femelles.
un microgametocyte va libérer plusieurs microgamètes.
un macrogametocyte va donner une seule macrogamète.
Un microgamete fertilise un macrogamete pour former
- un oocyste à parois minces, qui mesure 5 um de diamètre et infecte les entérocytes dans l'iléon de l'hôte;(auto
infestation)
- Et un oocyste à parois épaisses de 5 à 7 um de diametre , eliminé dans les selles(resistance)

En absence de cellules hôtes, deux morphotypes extracellulaires ont été observé; ceux - ci sont communément
appelés les stades de Gamont-like et gigantesques Gamont-like .
Ces stades se développent probablement à partir du stade trophozoïte avec le but de produire plus de mérozoïtes
et de trophozoïtes pour maximiser le potentiel de reproduction sans la nécessité d'une reproduction sexuée , mais
leur véritable nature et leur fonction demeurent Inconnu
Hijjawi et al ont montré que Cryptosporidium peut terminer une partie de son cycle dans un milieu sans cellule.
Curieusement, la recherche a également montré que Cryptosporidium peut se multiplier dans des cultures in vitro
dépourvues des cellules hôtes
Des études menées par Koh et al. Ont démontré que Cryptosporidium peut remplir une grande partie de son cycle
de vie dans un biofilm .
Donc Cryptosporidium n’est pas Obligatoirement intracellulaire comme on le pensait auparavant.

6. Répartition géographique.
 Cosmopolite
 La répartition varie selon les différents régions du monde.
  Cryptosporidium a été isolé dans 95 pays parmi tous les continents et sous toutes les latitudes (à l'exception
de l'Antarctique).
 La prévalence mondiale de la cryptosporidiose humaine est estimée entre 0,5 et 2 % dans les pays
industrialisés et peut dépasser 10 % dans les pays en développement, notamment en cas de forte prévalence
du VIH (Guyot, Sarfati, and Derouin, 2012).
 Dans la plupart des pays, l’incidence de la cryptosporidiose est soumise à des variations saisonnières. La
prévalence serait plus élevée pendant les mois les plus chauds et les plus humides de l’année (Ripert &
Guyot, 2003; de Oliveira-Silva et al., 2007; Nahrevanian & Assmar, 2008). Au nord-ouest de l’Angleterre,
par exemple, les cas observés sur une période de 17 ans ont eu lieu principalement au printemps et à
l’automne.

III. Clinique
Une gamme des caractéristiques cliniques caractérise la cryptosporidiose, dont la gravité varie d’Transport
asymptomatique à une maladie grave, mettant la vie en danger. (Chalmer 2014)
Une combinaison de parasite et les facteurs liés à l'hôte influencent le résultat de l'infection. (chalmers 2013 )

Sujet immunocompétent (diagnostic rarement fait)

-incubation : moyen de 5 à 9 jours. (Chalmers et Davies 2010)
-formes atténuées ou asymptomatiques
- une diarrhée, des nausées, Vomissements, fièvre et douleurs abdominales (Leitch et He, 2011)
-Chez l’enfant: perte de poids et déshydratation
-durée : symptômes durent généralement d'environ 1 à 2 semaines, Fois 3-4 semaines, (Chalmer 2014)
- Coinfections possibles
-Guérison spontanée en 4-14 jours. (Warren un d Guerrant, 2008)
-Excrétion d’oocystes pendant plusieurs semaines
l'infection peut avoir des conséquences à long terme. Certains symptômes peuvent être Indicatif du syndrome
de l'intestin irritable post-infectieux (PI-IBS)

Sujet immunodéprimé
Sévérité ; chronicité et résistance aux anti-infectieux
Localisation digestive: symptômes gastro -intestinaux : chronique, sévère, invalidante, voire mortelle.
-diarrhée aqueuse cholériforme (10-20 selles/j), non sanglante chronique
- déshydratation, IR, hypokaliémie, amaigrissement rapide
-douleurs abdominales hautes
-anorexie, nausées, vomissements, fébricule cachexie
Localisation pancréatique: une pancréatite
Hépatobiliaires: cholécystite alithiasique , cholangiopathie chronique, cholangite sclérosante, la cirrhose, le
cholangiocarcinome. Localisation pulmonaire
des Maladies pulmonaires chroniques (Leitch et lui, 2011)
Pneumopathies interstitielle au cours des infections digestives massives par contiguïté

IV. Diagnostic :

Le dg de Cryptosporidiose est un diagnostic de laboratoire car les signes et symptômes aigus peuvent être
similaires à d'autres causes de la gastro - entérite infectieuses et non infectieuses

A. Fiche de renseignement:
• Patients avec la diarrhée.
• Voyage récent à un Endémique;
• Épidémie locale;
• Immunodépression
B. Prélèvements :

mise en évidence des oocystes dans les selles, biopsie duodénale, liquide biliaire, expectorations et LBA en cas
de suspicion de localisation broncho-pulmonaire (localisation exceptionnelle et en principe associée à une
cryptosporidiose intestinale).

C. Diagnostic direct:

Examen à l’état frais:

 Les oocystes ne sont pas identifiables lors d’un examen parasitologique classique car ils sont très difficiles à
voir à l’état frais ou par les colorations habituellement utilisées en coprologie parasitaire (MIF, Lugol).Il est
donc nécessaire que la recherche de cryptosporidies soit clairement spécifiée sur la prescription du clinicien
(Guyot, Sarfati, and Derouin, 2012).
 Technique de Ziehl-Neelsen modifiée (coloration modifiée par Henriksen et Pohlenz)

Les selles doivent être concentrées par une technique de routine habituelle du type Ritchie ou Bailanger. Une
lame témoin est systématiquement colorée en parallèle.

Certains laboratoires ne concentrent pas au préalable les selles et réalisent la coloration sur un simple frottis de
selles ; cela expose au risque d’une lecture plus difficile en raison des nombreux artefacts et d’une
méconnaissance d’une pauci-infection (Guyot, Sarfati, and Derouin, 2012).

Les oocystes colorés en rouge sur fond vert

 Coloration par l’auramine

La lecture des lames s’effectue en microscopie à fluorescence.
Cette technique est sensible, non spécifique, mais elle permet de mieux dénombrer les oocystes contenant des
sporozoïtes ou des oocystes vides. La fluorescence aspécifique peut être vérifiée en recolorant la même
lame avec la technique de Ziehl-Neelsen. À noter que cette technique requiert l’utilisation de produits toxiques
(auramine, phénol) et qu’elle présente l’inconvénient de nécessiter un microscope à fluorescence.

D. diagnostic immunologique
 Immunofluorescence direct
Repose sur l’identification des oocystes par un anticorps monoclonal et une révélation par la fluorescence.
 Pratiquée sur lame, sur un dépôt de matières fécales ou après concentration.
Les oocystes apparaissent marqués avec une fluorescence verte périphérique (paroi de l’oocyste).
Cette technique spécifique et sensible présente un intérêt pour le diagnostic des pauci-infestations et pour les
enquêtes épidémiologiques.
Elle présente l’inconvénient de nécessiter un microscope à fluorescence

 Détection des antigènes de cryptosporidium par ELISA Ceux - ci sont souvent disponibles sous forme de
combinaison pour enquête simultanée pour Giardia et parfois Entamoeba histolytica / dispar.

 les tests rapides, des méthodes immuno-chromatographiques. , sont disponibles

E. Le diagnostic moléculaire
 La recherche d’ADN de Cryptosporidium peut être réalisée par PCR. Cette technique est d’une grande
sensibilité mais n’est pratiquée à ce jour que dans des laboratoires spécialisés ou de référence.
 L’amplification moléculaire permet également d’identifier les espèces et sous-espèces de
Cryptosporidium par analyse de fragments de restriction ou par PCR spécifique.
Le gène le plus souvent ciblé utilisé pour caractériser les espèces de Cryptosporidium est SSU-rRNA

V. Traitement
• Pas de traitement anti-infectieux efficace
• un TRT symptomatique:
-Rééquilibre hydro-électrolytique réhydratation et nutrition.

Immunocompétent
- Guérison spontanée
- Nitazoxanide 200 mg à 1g / j // 3 j peut accélérer la guérison

Immunodéprimé
-Ré-équilibration hydro-électrolytique
reconstitution immunitaire est plus efficace, mais pas toujours possible.
- VIH : multi-thérapie anti-virale HAART
- régimes multi-médicaments qui réduisent la charge virale du VIH et augmentent les lymphocytes T CD4,
comme le HAART, ont conduit à la résolution des symptômes et de la réduction des effets graves de la
cryptosporidiose sur la santé de ce groupe de patients.
- réduction des doses de TRT immunosuppresseur ou corticoïde.

Molécules évaluées Améliorations possibles: mais RECHUTES

Macrolides Azythromycine : efficacité rapportée (C°biliaire), mais résultats controversés
Aminoside de contact paromomycine (HUMATIN®), per os. 500 mg X 4/ jrs (7-14 jrs)
puis 500 mg X 2/ jrs traitement au long cours.
Antiparasitaire de synthèse Nitazoxanide (CRYPTAZ®)
présente une efficacité chez les enfants et les personnes immunocompétentes, les personnes immunodéprimés. (
Abubakar et al,2007 ; Amadi et al, 2009)
• Antiparasitaire de synthèse
• Principe actif tizozanide
• Administration orale :500MG X2/ j (ATU nominative) à administrer avec repas traitement au long cours.
• Etudes cliniques nécessaires pour valider doses/durée (dose toxique 4g/j)
VI. Prophylaxie
Individuelle
 Lavage des mains et des aliments
 Éviter le contact avec des selles humaines (couches), objets et linges souillés par des selles
 Éviter le contact avec des animaux susceptibles d’être contaminés (jeunes veaux)
 Être averti du risque de baignade en eaux non contrôlées (lacs, rivières, bases de loisirs qui peuvent être
contaminées)
 Éviter de boire de l’eau provenant d’une source douteuse, pouvant avoir été contaminée en amont
 En cas de doute sur l’eau potable, boire de l’eau encapsulée, des jus pasteurisés (éviter les jus de fruits
frais, les glaces)
 Recommander une hygiène renforcée aux voyageurs séjournant dans des pays à faible niveau d’hygiène.
Collective
 Contrôle de la contamination environnementale
 Protection des ressources d’eau destinée à la consommation humaine
 Adaptation des procédures de traitement de l’eau (Les oocystes résistent à la majorité des produits
chimiques aux doses normalement utilisées en traitement des eaux, ils ne sont plus infectieux après une
exposition à l’ozone)