ENVIRONNEMENT
Utilisation des mousses en tant que
I. Pollution atmosphérique
Le programme d’étude de la pollution
atmosphérique au moyen de bio-accumulateurs a
débuté au LPS, à l’instigation de Norbert et Chantal
Deschamps au cours de la période 1993-1995. Les
travaux de biomonitoring des métaux lourds sur des
mousses ont été poursuivis sous la responsabilité de
Sophie Ayrault au LPS, dans plusieurs directions :
A) Thèse de Géraldine Amblard-Gross, dirigée
par le Professeur Férard, (Centre des Sciences de
l’Environnement, Université de Metz). Cette thèse co-
financée par l’ADEME et le CEA a débuté au LPS en
Novembre 1997. Elle a pour objectif d’évaluer les
limites d’utilisation des mousses en tant que
biomoniteurs et ceci à différentes échelles
d’observation :
• comparaison statistique des 2 techniques
d’analyse multi-élémentaire [analyse par activation
neutronique instrumentale (INAA) et spectrométrie de
masse par plasma induit (ICP-MS)] utilisées dans le
cadre du programme européen et conséquences dans
l’interprétation des résultats et des cartographies
européennes ;
• relation entre les retombées atmosphériques
réelles et le contenu des mousses (conversion stock-
flux) ;
• étude de la localisation des métaux et éléments en
trace dans le végétal ;
Cette thèse est en cours et sera soutenue fin
Octobre 2000.
B) Etablissement d’une cartographie des
retombées en France de la pollution atmosphérique.
C) Une application du biomonitoring à la mise en
évidence de nouveaux polluants atmosphériques : les
métaux du groupe du platine : Pt, Pd et Rh émis par les
pots catalytiques des véhicules.
L.P.S. – Rapport d’activité 1996-2000
I.1.
bio-accumulateurs
I.1.1. Comparaison statistique de deux techniques
d’analyse multi-élémentaire INAA et ICP-MS
dans une étude de biomonitoring par des mousses
de la pollution atmosphérique en métaux et
éléments trace
G. Amblard-Gross, S. Ayrault, M.D. Sciarretta, F. Carrot, C.
Deschamps, en collaboration avec P. Bonhomme, LSCE, Gif sur
Yvette, L. Galsomiès, ADEME, Paris
Les échantillons de mousses de la campagne
française ainsi que les références ont été analysées au
LPS par INAA et ICP-MS. Les résultats
cartographiés proviennent de l'une des 2 méthodes et il
importe donc d'estimer les conséquences de ce choix
quant à l'interprétation des cartes européennes et des
possibles transports trans-frontaliers.
Une comparaison statistique entre ces deux
méthodes a été réalisée dans le cadre de la thèse de G.
Amblard-Gross. Il en ressort que le choix de la
méthode a une influence non négligeable dans
l’interprétation des cartes pour certains éléments. Pour
Ba, Ce et Rb, les deux méthodes donnent des résultats
équivalents. On trouve une surestimation par ICP-MS
pour As, Co, Fe, V et dans une moindre mesure pour
Cs. L’INAA surestime Cr, Cu, La et Th. Cette
surestimation du chrome par INAA, ou la sous-
estimation par ICP-MS, est très importante, puisqu’un
facteur deux existe entre les deux méthodes. Cette
sous-évaluation par ICP-MS peut être imputée à une
dissolution incomplète du chrome au cours de la
minéralisation, peut-être liée à la présence de plusieurs
formes chimiques de cet élément, dont seulement
certaines sont dissoutes. L’activation fournit un résultat
en chrome total.
La comparaison des résultats entre techniques
d’analyses est très importante car elles peuvent
expliquer les différences de concentrations observées
entre la France et les pays limitrophes pour certains
éléments. En effet, pour As ce sont les résultats obtenus
par INAA qui ont servi à carto-graphier la France alors
que les pays voisins ont donné des valeurs ICP-MS.
Comme l'INAA sous-estime As par rapport à l’ICP-
MS, si les données ICP-MS avaient été
cartographiées, la France serait apparue plus
"contaminée" que ses voisins. La charge globale
40
française serait apparemment sous-estimée sur les
cartes disponibles.
Le chrome a été cartographié avec les valeurs
INAA qui sont en moyenne le double des valeurs ICP-
MS. Globalement, la France apparaît plus chargée que
ses pays voisins alors que pour des valeurs par ICP-
MS, la classe de contamination serait beaucoup plus
petite. Autrement dit, avec les données INAA pour Cr,
la France se "pénalise". Pour les 2 autres éléments
appartenant au programme européen, Cu et V, même
si les résultats ICP-MS et INAA ont été
respectivement cartographiés, les classes de pollution
ne changent pas de façon significative pour
l’interprétation des cartes.
D’autre part, de simples régressions linéaires
donnent des résultats satisfaisants pour convertir les
résultats entre les 2 techniques d’analyse (r2>0,91 pour
Ba, Ce, Cs, Fe, La, Rb et Th). Les deux méthodes
seraient donc parfaitement utilisables et
interchangeables pour ces éléments. Pour les éléments
V, As, Cr, Co et Cu, les régressions linéaires ne
donnent pas de résultats satisfaisants (r2<0,42 à 0,64).
Ils mettent en évidence des différences analytiques
entre les deux méthodes qui ne sont pas systématiques
et qui sont difficilement contrôlables. Pour eux, un choix
de la méthode s’impose. Il s’appuie sur les différentes
causes d’erreurs explicitées ci-dessus.
I.1.2. Conversion Stock-Flux : contenu des
mousses et retombées atmosphériques
G. Amblard-Gross, F. Carrot, S. Ayrault en collaboration avec A.
Maul, STID, Université de Metz, J.M. Ducruet, DSV/DBCM/SBE,
CE-Saclay, J.F. Ferard, CSE, Université de Metz, L. Galsomiès,
ADEME, Paris, P. Coddeville, M. Beguinel, SRSE, CE-Saclay
Depuis que les mousses sont utilisées dans des
études de "biomonitoring" et même si de bonnes
corrélations existent entre ces plantes et les retombées
atmosphériques humides en métaux lourds, très peu de
données concernent le rapport entre le contenu des
mousses et les retombées atmos-phériques sèches
(poussières). La relation entre ces retombées réelles
(flux) et le contenu des mousses (stock) est estimée au
mieux soit en datant les échantillons analysés
(identification des segments annuels de croissance), soit
en utilisant des techniques standardisées avec des
mousses pré-traitées qui se dessèchent rapidement. Or,
41
ENVIRONNEMENT
la viabilité des mousses et le maintien dans une
atmosphère humide apparaissent essentiels à un
comportement bioaccumulateur optimal.
Afin d’estimer les corrélations possibles entre ces
différents paramètres, des transplants de mousses
vivantes ont été élaborés et expérimentés sur 4 stations
de mesures en continu de la qualité atmosphérique (2
stations du réseau MERA, Ecole des Mines de Douai ;
2 stations du réseau de surveillance du site de Saclay,
SRSE). Des jauges mensuelles de retombées totales
ont été relevées en parallèle et les fractions dissoutes et
particulaires ont été analysées.
Les transplants standardisés de mousses (surface
et contenu en mousses définis) ont subi au préalable
des tests de viabilité pour 3 espèces envisagées et leur
efficacité d’accumulation a été mesurée sur 2 mois,
période d’exposition pré-définie. Les résultats indiquent
que les mousses restent vivantes sur toute cette période
d’exposition.
Les expositions réalisées en continu permettent
de différencier des stations à fortes retombées par
rapport à des sites témoins (par exemple pour les
retombées en Pb, Sb) et ceci, dès 2 mois d’exposition.
Des différences significatives d’accumulation entre 2
espèces de mousses transplantées au même endroit
sont constatées pour des éléments comme Pb, Sb, ce
qui permet une cali-bration entre les espèces.
La conversion des données stock pour les
mousses en flux de dépôt est rendue possible par des
modèles de régression. En effet, ces modèles montrent
de bonnes relations entre les termes stock des mousses
(µg/g) et les termes flux des poussières récupérées (µg/
m2/t) pour les éléments Ba, Cu, Sb, Ti et V.
L.P.S. – Rapport d’activité 1996-2000
 ENVIRONNEMENT
I.1.3. Etude de la distribution in vivo des métaux
et éléments trace chez les Bryophytes par les
techniques SXRF, PIXE et ICP-MS
G. Amblard-Gross, M. Bonnin-Mosbah, P. Chevallier, L. Daudin,
F. Carrot, S. Ayrault en collaboration avec J.F. Férard, CSE,
Université de Metz, A. Maul, STID, Université de Metz
Le protocole expérimental de biomonitoring à
grande échelle ne prend en compte que l’analyse d’une
partie du brin de mousse. Or, des répartitions
différentielles et des mouvements de métaux et
d’éléments ont été notamment mis en évidence suite à
une déshydratation. Mais ces variations verticales de
répartition n’ont été constatées que sur du matériel
biologique transformé (séché, minéralisé) et jamais in
vivo.
La fluorescence X sous rayonnement syn-
chrotron (SXRF) et l’émission X induite par des
protons (PIXE) ont été utilisées pour étudier la
distribution des éléments dans le végétal et déter-miner
la composition des poussières retenues par les
mousses, à une échelle microscopique. Quinze éléments
ont été analysés et des hétérogénéités de répartition en
fonction de l’âge de la plante ont été mises en évidence.
Les éléments non essentiels, comme Pb et As,
s’accumulent dans les parties les plus âgées de la
plante. La Figure 13 montre cette répartition sur deux
brins de mousse, l’un correspondant à un site sous
couvert forestier (site 1), l’autre correspondant à un site
fortement pollué par des activités industrielles (site 2).
Les éléments essentiels, comme le potassium ou le
calcium, se répartissent de façon homogène le long de
la plante ou bien encore, dans certains cas, de la même
façon que les non essentiels. Par comparaison des
résultats obtenus par SXRF et par ICP-MS sur un
même échantillon, la quantification directe sur les brins
de mousses intacts est rendue possible pour plusieurs
éléments. De plus, des mouvements ioniques ont été
mis en évidence, comme en témoigne la perte de
potassium après lavage des végétaux. Les éléments peu
solubles comme Pb et Ti sont localisés dans les parties
âgées de la plante ce qui renforce l’hypothèse d’un
simple dépôt particulaire.
42
L.P.S. – Rapport d’activité 1996-2000
300
Plomb (lavage et ultrasons)
taux de comptage/taux de diffusion
3 ans 2 ans 1 an
Pb site 1
200 Pb/10 site 2
100
0
0 50 100
distance de la base vers l'apex du brin (mm)
bas haut
Figure 13 : Répartition du plomb (de la base vers l’apex)
dans des brins de mousses (lavés et ultrasons) soumis à de
faibles (site 1) et à de fortes (site 2) retombées atmos-
phériques en métaux lourds.
I.2.Etude des retombées atmosphériques
en France des métaux lourds et des
éléments en trace au moyen du
biomonitoring par les mousses
S. Ayrault, C. Deschamps, A. Gaudry, F. Carrot, X. Bertho, G.
Amblard-Gross, M.D. Sciarretta, en collaboration avec L.
Galsomiès, ADEME, Paris, P. Bonhomme, LSCE, Gif sur Yvette
Le LPS, en coopération avec l’Université de
Paris 6 et l’ADEME, s’est associé au réseau
"Mousses - Métaux Lourds" qui constitue la première
réalisation de bio-surveillance de la pollution
atmosphérique de fond à l’échelle du territoire national.
Il concerne le suivi des retombées atmosphériques de
36 éléments. Dix d’entre eux, As, Cd, Cr, Cu, Fe, Hg,
Ni, Pb, V, Zn, sont intégrés aux données de la
deuxième campagne 1995-96 du programme européen
"Atmospheric Heavy Metal Deposition in Europe -
Estimation Based on Moss Analysis" [16] coordonné
par le Conseil des Pays Nordiques. Les dosages ont
été effectués au LPS dans cinq espèces de mousses
(exemple : Figure 14).
Figure 14 : Hypnum cupressiforme, la mousse la
plus fréquente en France.
 Plusieurs organismes français sont impliqués dans
cette étude, qui vise non seulement à carto-graphier les
retombées, mais aussi à relier les quantités accumulées
à des flux de matière et les zones polluées à des
sources de pollution [17].
La récolte des mousses a été réalisée en 1996
suivant un maillage de 33 km x 33 km, excepté pour
l’Ile de France où le maillage était de 20 km x 20 km.
563 échantillons ont été prélevés. Les éléments
recherchés ont été déterminés par INAA sur les
mousses desséchées et pulvérisées et par
Spectrométrie de Masse associée à une torche à
plasma (ICP-MS), après mise en solution des
échantillons par un four à micro-ondes (Figure 15).
Figure 15 : Minéralisation des mousses au moyen d’un
four ouvert à micro-onde.
Des éléments inaccessibles comme Pb et Ni ou
nécessitant des conditions particulières, coûteuses en
temps d’analyse par INAA, ont été mesurés par ICP-
MS, méthode qui a permis en outre de meilleures
limites de détection sur quelques éléments comme Cu
et Cd. Au total, 22 éléments ont été déterminés par
ICP-MS : As, Ba, Cd, Ce, Co, Cr, Cs, Cu, Fe, Hg,
La, Mo, Ni, Pb, Rb, Sb, Sr, Th, Tl, U, V, W. La
43
ENVIRONNEMENT
méthode a été qualifiée au moyen de matériaux de
référence : le Lichen 336 AIEA et trois mousses
préparées par le coordinateur européen pour comparer
les résultats des labora-toires participants.
Les résultats pour toutes les mousses collectées
en 1996 ont permis d’établir des cartes européennes et
françaises de retombées atmos-phériques en métaux
lourds pour les 10 éléments mentionnés toxiques pour
l’écosystème. Des cartes d’iso-concentrations ont été
dressées pour chaque élément toxique, à l’échelle des
22 régions françaises [18], et de l’Europe. Ces cartes
(Figure 16) mettent bien en évidence les particu-larités
régionales : pollution de l’Europe de l’Est en métaux
lourds ; impact de l’activité volcanique en Islande ; en
France, la région Ile-de-France reflète une pollution
plus importante en plomb, due à l’intense trafic routier,
mais aussi en cadmium, cuivre et nickel, éléments liés à
la combustion du pétrole et à l’incinération des déchets.
L’Est de la France est plus sensible aux activités
primaires (métallurgie, charbon, industries lourdes), et
on retrouve des concentrations plus importantes en
arsenic, cadmium et vanadium dans les mousses. Des
points de pollution très forte en plomb ont été mis en
évidence dans la région de Lille. Les autres éléments
étaient des constituants plus abondants de la plante et
les variations de leurs concentrations ne pouvaient en
aucun cas refléter une influence de la pollution. Certains
éléments tels que Al et Sc auraient pu permettre
d’évaluer une éventuelle influence des poussières
terrigènes environnantes, à condition de connaître la
composition chimique locale des sols.
Malheureusement nous n’avons pas eu d’échantillons
de ces sols. Il est toutefois suggéré, pour la prochaine
collecte, de prélever systématiquement des sols à
proximité de mousses.
L.P.S. – Rapport d’activité 1996-2000
 ENVIRONNEMENT
Figure 16 : Cartes des isoconcentrations (µg/g) en As et V analysés dans les mousses en Europe.
I.3. Mise en évidence de pollutions
atmosphériques en platine et palladium
issus des pots catalytiques, accumulées
dans des mousses de la région parisienne
S. Ayrault, A. Gaudry, G. Meyer, C. Li
L’utilisation des pots catalytiques automobiles
entraîne la présence dans l’atmosphère de métaux du
groupe du Platine (PGE) : Rh, Pd et Pt. Ces éléments
en proportions variables selon les modèles de pots,
servent de catalyseurs de réactions et diminuent ainsi
les émissions de certains gaz de combustion nocifs. En
revanche, sous l’action de la température et des
vibrations, les PGE sont entraînés par les gaz
d’échappement et suivent alors le devenir des aérosols
de combustion.
Certains composés du platine sont toxiques dans
certaines conditions. Les affections concernent alors les
systèmes respiratoires et cutanés. En fait, il existe peu
d’informations sur la toxicité des PGE. Il est légitime de
les caractériser dans les divers compartiments de
l’environnement où ils sont déjà disséminés, afin de
documenter les recherches d’impact sur la santé et le
milieu vivant, entreprises par d’autres laboratoires.
44
L.P.S. – Rapport d’activité 1996-2000
Etant donnée la dilution des PGE dans l’air (< à
1 ng/m3), il est nécessaire de disposer de méthodes très
sensibles, associées ou non à des préconcentrations.
L’hypothèse d’une accumulation des PGE par des
mousses, au même titre que pour les métaux lourds en
transit dans l’atmosphère, permet d’envisager
l’utilisation de ces plantes. Le LPS s’est engagé vers
l’application du biomonitoring aux PGE et a développé
l’analyse par ICP-MS du platine et du palladium.
Diverses mousses ont été prélevées, d’une part
en forêt de Fontainebleau loin des axes routiers,
donnant une estimation d’un bruit de fond de
concentrations en région parisienne, d’autre part à
quelques mètres d’une autoroute. Après dissolution des
mousses, les PGE sont préconcentrés sur résine avec
élimination des éléments interférants. Les éléments sont
ensuite repris en solution sous un très faible volume, en
milieu nitrique dilué, puis mesurés par ICP-MS. La
méthode n’est pas applicable au rhodium. Pour
déterminer cet élément, un autre schéma de séparation
doit être adopté.
 Pour le platine, la limite de détection, évaluée
pour 5 grammes d’échantillon sec, est de 0,06 ng/g.
Nous observons des teneurs de 0,2 à 0,6 ng/g dans les
mousses "bruit de fond" et des teneurs comprises entre
5 et 12 ng/g dans les mousses exposées à la pollution
par le trafic routier. Pour le palladium, la limite de
détection est de 0,26 ng/g. Les résultats révèlent une
variabilité de teneurs en platine selon les espèces de
mousses [19]. Trois de ces espèces montrent des
teneurs élevées en platine, et très voisines (9 à 12 ng/g)
et sont donc plus efficaces à accumuler le platine que
les autres, de teneurs moitié moindres. Une première
expérience en milieu urbain pour suivre l’évolution
temporelle des PGE a montré la difficulté du
biomonitoring actif (utilisation de transplants) des PGE
principalement émis sous forme particulaire. Elle a
abouti à la sélection d’une mousse mieux adaptée.
Publications
[16] Les cartes sont présentées dans le rapport européen E.
STEINNES, A. RULHING, Nord 15, 1998.
[17] GALSOMIES L., LETROUIT-GALINOU M.A.,
DESCHAMPS C., SAVANNE D., AVNAIM M. (1999). Sci.
Total. Environ., 232, 39-47.
[18] Rapport ADEME, 1999.
[19] LI C., GAUDRY A., AYRAULT S., MEYER G. (1999).
Journées CETAMA Mesures et analyses dans les matrices
environnementales et biologiques, INSTN Cadarache, Saint
Paul les Durance, 14-15 septembre 1999.
45
ENVIRONNEMENT
II. Pollution de l'eau et des
organismes aquatiques
Lorsqu’ils sont rejetés dans une rivière, les
polluants métalliques (As, Cd, Co, Cr, ...) peuvent
s’accumuler dans les sédiments, les plantes et les
animaux aquatiques. Il existe alors un risque
écotoxicologique pour l’homme. Le niveau de
concentration de ces polluants doit être vérifié quand
une pollution est soupçonnée ou reconnue. Les trois
premiers travaux présentés ci-dessous sont le fruit
d’une collaboration avec des Pays en voie de
développement soucieux du devenir des pollutions
anthropogéniques.
II.1. Localisation du cuivre dans les
crustacés en utilisant l'activation
neutronique et la microsonde nucléaire
B. Gouget, G. Revel, en collaboration avec M.I. Severo, Université
de Santa Cruz, Brésil, A. Heeren de Oliveiro, Université Fédéral de
Minas Gerais, Brésil, C. Sergent, Y. Llabador, Gradignan
Depuis 10 ans, la culture du cacao dans l’état de
Bahia (Brésil) est gravement touchée par un
champignon, le balais de sorcière (Crinipellis
perniciosa) qui a fortement fait chuter la production.
Aussi, des traitements à base de cuivre sont largement
utilisés pour enrayer cette maladie. Le cuivre, en partie
lavé par les eaux de pluie, se retrouve dans l'eau de la
rivière Cachoeira (Figure 17) où vivent des crevettes et
des crabes consommés par les populations locales.
Des analyses préliminaires avaient décelé sa
présence à des teneurs supérieures à 500 µg/g dans
certains crustacés vivant dans les zones de culture. La
répartition du cuivre et de nombreux autres éléments
Figure 17 : Rivière Cachoeira, état de Bahia, Brésil.
L.P.S. – Rapport d’activité 1996-2000