am a a eS ee Oe URE RE ee RS CONTROLES & EXAMENS BCG S4 hoRésumé du chapitre: Microbiologie des aliments fermentés Différents produits alimentaires sont issues d'une lactofermentation, dont on cit ~ Certains dérivés laitiers (yaourts, fromages etc.) ~ Produits camés (Jambons fumés de campagne, Saucissons (par Pediococcus cerevisiae et Lactobacillus plantarum), Salami, sauces de poisson etc... ~ Produits végétaux issues de lactofermentation (Tempeh, tofu, Sufu, Idli, Kimchi, Choucroute...). Avantages des aliments produits par lacto- fermentation * Amélioration des propriétés organoleptiques des aliments: ~ Amélioration du goat ~ Acquisition de nouveaux arémes (par production d'acétate et propionate dans le cas du Roquefort, ou de lacétaldéhyde et du diacétyle dans le cas du yaourt). - Amélioration de la texture * Amélioration de la digesti ité des aliments: - Diminution de l'intolérance au lactose (qui est dégradé en acide lactique) - Meilleure assimilation des protéines * Amélioration des qualités nutritionnelles des aliments - Enrichissement de I'aliment en vitamines, acides aminés, Calcium... - Meilleure conservation des protéines, vitamines ... ~ Enrichissement de l'aliment en substances prédigérés au cours de la fermentation tel que les acides gras polyinsaturés, glucides lents, amidons, protides et lipides prédigérés ainsi quien bactériocines. * Amélioration du systéme immunitaire: ~ Réduction du taux de cholestérol sérique -Activité anti tumorale - Activité anti-inflammatoire des voies digestives. -Activité antimicrobienne; qui conduit & inhi dot un équilibre de la flore intestinale,TRAVAUX DIRIGES oa organisme peut crojtre qu’a I"intérieur d'un certain écart de température. On distingue a cet égard is catégories de bactéries : les nommer et indiquer leurs températures optimales, leur zone approximative de croissance. 2 Females catégories nommées au numéro précédent, indiquer celle que l'on pourrait rattacher aux cas ~ Flores normales de notre corps - Flore d’altération des aliments réfrigérés - La quasi-totalité des germes pathogénes ~ quelle legon dans le domaine alimentaire peut-on tirer de la préférence thermique des bactéries pathogenes. 3- Comment appelle-t-on le processus métabolique par lequel une cellule oxyde ses nutriments pour en tirer de l’énergie en utilisant la chaine respiratoire membranaire. ~ Quelle est la grande particularité de ce processus au point de vue des produits formés. - En conséquence, peut-on affirmer qu’il s'agit d'une oxydation complete ou incomplete. 4- Quel est le réle de ’oxygéne dans la respiration cellulaire ? - chez certaines bactéries l’oxygéne peut étre remplacé par des composés oxygénés ; en nommer Un. - comment qualifie-t-on le processus respiratoire lorsqu’il s’effectue sans oxygéne ? Expliquez. Comment appelle-t-on le processus métabolique par lequel les bactéries tirent leur énergies des nutriments sans faire intervenir la chaine respiratoire membranaire. ? - cette oxydation est-elle complete ou incompléte ? ~ nommer les types de produits résultant habituellement de ce processus. © indiquer le comportement des bactéries suivantes par rapport a l'oxygéne libre et nommer le ou les types d’oxydation biologique qu’elles peuvent effectuer : - anaérobies stricts - aérobies stricts - nérobies-anaérobies facultatifs 3} Donner un exemple de bactéries appartenant a chacune des catégories précédents. ‘A quelle catégorie appartiennent la plupart des bactéries pathogénes. Qp- qu’est-ce qui distingue fondamentalement un hétérotrophe d’un autotrophe ? 4 as ar 10 Beim®hactéries poussent sans ltence dans un milieu tel qu’aprés 6 heures, la population totale SEaIVA cellules, La phase stationnaire n’est pas encore atteinte A cevstade. de pénération de la bactérie dans ce milieu. / enregistre| Quel est le temps moyen 11+ La relation entre la croissance maximum de Aerobacter aerogenes et la concentration en acide sigue, dans un milieu non aéré contenant du citrate et du sel d’ammonium, est linéaire jusqu’a une cea ration 6x10-2 M de citrate, ce qui correspond a une population de 950x106 bactéries par ml. De plus grandes concentration de citrate n'ont pas d’effet sur la croissance. ies Reube A. aerogenes dans 50 ml d'un milieu de concentration inconnue en acide citrique et on caermine 1 population de la phase stationnaire, soit 725x106 bactéries par ml. Quelle est la quantité d'acide citrique (en mg) du milieu. Le poids moléculaire de l’acide citrique est de 192.~~ _ Bh doi Aosta Divigént HicarRcatsgur/ detailer Bs Aaee ty acai por Gn cpu \__ TDi 4 » 1 eh ego Puteasler 8 CeKnaua tal Baa a2 a eh A Se Scork de timp MY Pecans toot" BSL a) Rmpiration Bpbwaly Vea at yo a Aner 3). de putas Bal ane gong Or rubimeata four tran de Creat [da Respiration (Atria): & Tove suydlation das rubumenle or O #Peapirctilon (Anaknadie). Seabees Reatetenl dh Roms a ae tr Seen ate gemcnatre hare SEDER Sag | carn et oa oh J Floxe dllliaatin deo alinands | “Csbbal of “ee rhRurggase (de We. & 50): oan ens Pedias. Gs mates a'ABN de can iene dendlappsal ins O'S % Nowe CABiSSence 5 damn CrBdaona opiitroth wet alr J) WW BEST avec Me T de Wis, ein O8S°C dr tonpurts} maaimat de 39% ha qurasitdebbides Grunts fect se doudanhunl & dis tempralins de 34% ee Ko Arron Ran abimupts & dy ‘ iparian & Co Tins Fempurelius onfans cy rn FS das temphsbines sayutinns Oa Te} WL 8 250 foskatit GisT “eythinalis By Se Treo ites subabil Je Guissana. de Hésopthilio (BdRagay i pact + dos ayn Gl pow quills ne cpienk pos. ¢ censtituamls aPlsLarrs ; Hy. de nb deG downs ba raspiratian? | is ch Bations qui putin ve be cde wilde 2 Respiction Protwbique Sralaena Aloayatne ion dower Bnbils. gun Qolocidien Wiha bodtios = Be mat & (ndeaiwur te Co unpiratiin anatastea. (Nifiat, —> Niu) 5). Clark Ca Bosnentaliin te subelvall Saul Rie Gichione bY wm east Fnal (Compo Bagarcuguedias wma de compar winbrale G6 O,) - — Poaenat ofanPagus. —» CHfoua ~Fesrambat 5 Reels @ ee —afcels Papier,MB). Mead de pit ew tos Rachie : Trdars & compoclment dos lack ol ny Neon asthe + Fake ak on a ml age 9S 44- Mabie stich (Raisencr dO) Paral} tities acide: Aiderabe Renmin Aratvaben Cacullabihs (sen -Acktobodinie pHs & me cl co J'Q) [Rerentalin) buyer) gateumtatagye> aoe Y- Nee cas, “e OPiccomar flawiinsuen fe (esPakiapia ds fr Takoginss) ape" tie 5 oS at 3). habvatanphr ola a tin nla plan a! ean Pratation. fo cpiteancs « 3) ASP. Sama Cebonce. Aids Bpulahion teh: 3,68.4o° . -En ayor eres aint fo Rast Mationnous . —FRose hos UAdek ns 368447 T2360. — le Temps de Gbebraliin | : 7 _ eet: reuse, ay WSinl 7) 1 a6ulag/f ek ch a ' =U . . j = ussalh oe | sh who . i fouAS G. [M ne 8 - ta oe re aa =A . ; Ad gq 0644 i = A . bhava alot tog Bad “ a ey oa AE ae (i sl 4) Bo =O, hho 4 = Sus _ _ = sft EStal eotene) : incale §; nk ; quoLtbtinensnit & vosenllt = iments al Are Role Pasfline ; se : m1 ite k B fee cheats S ts : j YO rion queT ue , B Lace | et . = wi = rivolin af} ] eo wun | ade “=m a: agn-logn ma = = a + xlogh o fi “ . He wie fara, y 8. Cok : " =: "): 13 quent CO cla | | ; RSC MON? a Quaid fsb + Fy RNa ‘ts j ts At c | onkee ae lll hab 9 ; Pe 7 - : J {ide Salo 9, $04 ioe = : =: . “oi S.8 f seat AT post ~ 7 fost he sd besdun we * . Qualls ratiabe ae us | eonbibis. : 16 4 SSmun| rare 2 : m _ tour's - ee Swank - Hadesoa Covent sor contisiuy dn Moosntle vat, aia mabire worl. Ub wnalilhie, dy fiypede. Macsonattenlan. x Rokdinas « Flin «& bd okt ¢ Neides waclite * co ttawd: cortenneit Acolvine. se Neda Don stunt de Gonkienc? Aine Gilnigne “Bo Grerrence ne ff da Genre Nitrerenines amy D wriieud Caw “cone duh “Vane a une capsids, Weicone de Setarskaion W(Pddsbents) fan de Gui cla Same ad Q miko + Glrcie. 8H PogyulaB - “Welds inbalbn => Tab ce dB crap belie wulieak des Pay Lyne Gif SAien®® | BE Criontne, 6. CR dans Qo reas ff Bibisean dame Pespinicned . ye fyvds snculaalion, ceak 4 wien B dows troubeb. con iD eontioat dw Cabspre => x Uae Eagurin + Wilverawas pre dubnfs.ck &. (ian Adene Bho tyeurt, ne dunce de Carbone (CO, ol m@epldutqun) De venifie, S travons ane comnySt bt Dn callie nibiowamen os eure obinmyhie anbimant COL =) Nhfgdomanan biGavit CO,ah er By 6c ce denelbyhe En Memb ~ tL : pbhise CL Conbime dus. Chn.c% @ On Rubvenifin : Pn vaflive Fob ds an whe combonank du Bact Raich (sora B a%. Sekt OK © «C= Br vibakise B/E we D= inmines B-* @: Ezvitomins + Ba Huiomine Quack. Gaisang de Ca toddncs, ¥ + Comme sgurce de Corbene (Patol ae 13 ;F \iioe Sgpsine dP a alte Glos. ohendun de Wiha sour | DS Ooag o.eaxangs dG Cc Oo > Doaeaxnas Amorce Taille x w w = oo w 6 a Les mélanges de chaque réaction sont séparés par électrophorése sur gel de polyacrylamide. 1/ Dessiner le profil électophorétique de ce gel, en précisant le sens de migration. 2/ Déduire la séquence du brin d’ADN étudié. 3/ Préciser le réle de la forme didéosy nucléoside triphosphate. 4/ Quels sont les autres critéres utilisés en taxonomie génétique ? Précisez leurs principes. mer — FBS : enh : 3 60 82.1 oe | : : UNIVERSITE SIDI MOHAMED’ BEN aoe SASS Le FACULTE DES SCIENCES ET ‘TECHNIQUES 'UNIVERSITE SIDI MOHAMED BEN ABDELLAH FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES FES 7 Te 2202/4 Contréle continu de Microbiologie générale LST Biologie et Santé LST Biotechnologie, hygiéne et sécurité des aliments 1/ Définir la taxonomie et donner ses deux variantes. Dans quelle type de taxonomic le séquengage nucléotidique est il utilisé ? Quelles sont les autres critéres utilisés dans ce type? précisez leur principe. 2/ Pourquoi le régne des protistes a t-il été crée? 3/ Comparez les bactéries avec les levures. Erercice / Chez Yhomme la vaccination associée anti-diphtérique et anti-tétanique (vaccin DT) ‘intervalle. BBB Aa wil a suit le protocole suivant: trois injections, par voie intramusculaire, 4 un mois 4’ Les composants fondamentaux du vaccin sont: _ Composants Quantités Anatoxine diphtérique purifiée 1 dose _Anatoxine tétanique purifiée 1 dose Hydroxyde d'aluminium Alj0; Img Soluté physiologique qsp 0,5 mi 1/ Définir les termes « vaccination » et « toxine »/ 2/ Comparer les différents types de toxines que vous connaissez/ 2/ Comment transforme-t-on une toxine en anatoxine? a SEEREE EE 3/ Expliquer les bases du procédé utilisé lors des trois injections successives. Exereice H/ Clostridium botulinum est une bactérie en forme de batonnet, saprophyte du sol, agrobie-anaérobie facultative ou anaérobie stricte, trés répandue et sa présence est a craindre particuligrement dans les denrées alimentaires. 1/ Si on injecte cette bactérie en culture pure au cobaye, celui-ci présente les symptOmes du botulisme et meurt. Que pouvez vous en conclure ? 2) On réalise un filtrat de Ja culture bactérienne de C. botulinum, et on Vinjecte & un cobaye, on constate que celui-ci tue le cobaye qui présente les sympt6mes de la méme maladie. Mais si on chauffe ce filtrat avant linjection, on nobserve aucun symptéme. Quelle est Ja cause du pouvoir pathogéne dans ce cas? Expliquez.UNIVERSITE SIDI MOHAMED BEN ABDELLAT! FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES FES Exercice IV Soit les 4 souches buctériennes suivantes avec les proprisiés suivantes * A B c D Catalase - + : + Glucose ‘ + + Fructose ? + + + Saecharose + + + 2 Uréase 4 : + + Lipase 5 + + Faites l'analyse adansonnienne et déterminez les souches formant des groupes homogénes. V/ Préparer la matrice des caractéres, 2/Calculer le pourcentage de similitude entre les souches. 3/Faites un arrangement des pourcentages de similitude selon un ordre décroissant. 4/ Tracez le dendrogramme 5/ Tracez le triangle primaire selon le dendrogramme 6/Faites Ia réorganisation du triangle primaire pour obtenir le triangle final.UNIVERSITE SIDI MOHAMMED BEN ABDELLAH FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DE FES DEPARTEMENT DES SCIENCES DE LA VIE Le 03/03/2012 Contréle continu de Microbiologie Licences Biologie et Santé, Biotechnologie hygiéne et sécurité des aliments I- La découverte du réle éthilogique des microorgonisems a contribué au développement et A ta fondation de la science de la microbiologic. a- Définir le terme é logie. b- Qui a découvert ce réle c Quel est le 2°"* point qui a contribué au développement et 4 la fondation de cette science. 2- Comparez une bactérie et une algue unicellulaire 3. Définir les termes suivants : - Bactérie photolithotrophe ~ Anatoxine ~ Pili - Vacein Exercice I- Cing souches bactériennes ont les proprigtés suivantes : Tests biochimiques Souches bactériennes A B Cc D £E Catalase ? Oxydase.- . - - chee Glucose a Uréase - + 2 + 2 Lipase +o. FF + Gélatinase - ee 1- Préparez la matrice des caractéres. 2- Caloulez le pourcentage de similitude entre les souches. 3- Faites ’arrangement des pourcentages de similitude selon un ordre décroissant. 4: Tracez le dendrogramme, puis interprétez le. 5- Préparez le triangle primaire selon le dendrogramme. 6- Réorganisez, si nécessaire, le triangle primaire pour obtenir le triangle final FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DE FES ‘91 B.P. 2202 ~ Route d'tmouzzer @ 212.5) 6080 14-212 5) 60.29 53 FES 12 (35) 60 82°144] ABDELLAH UNIVERSITE SIDI MOHAMMED BE 3s DE F! FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES om DEPARTEMENT DES SCIENCES DE LA Exercice I- a fe Squence de I"Al Le séquengage nucléotidique est une technique trés utilisée pour déterminer la sea eh a fragment es! joactif en présence .s non radioactifs. Soit un fragment d’ADN monocaténaire ayant une extrémité 3?-OH libre. Ce présence d’ADN polymérase avec un mélange d’un nucléoside triphosphate radi¢ de la forme didéosy de ce méme nucléotide et des 3 autres nucléosides triphosphate: ‘ On téalise 4 incubations distinctes dans lesquelles un nucléoside déterminé est marqué & chaque fois. a dd ATP/d ATP* +d CTP +d GTP +d TTP. b- dd CTP/d CTP* +d ATP +d GIP +d TIP. ce dd GTP/dGTP* +d ATP +d CTP +d TTP. d- dd TTP /d TTP* +d ATP +d CTP +d GTP. (A XTP*: est le nucléoside triphosphate radioactif}, Donnez les résultats obtenus pour chaque incubation (c'est a dire : remplir le tableau suivant), sachant que le fragment séquencé est {3° catacccar() dATP/MATP ddCTPIdCTP ddGTP/dGTP daTTP/ATTP. Oligonuetéotides Amorce Taille 2 Les mélanges de chaque réaction sont séparés par dleetophorése sur gel de polyacrylamide, Dessinez le profil électophorétique de ce gel. 3- Précisez le réle de la forme didéosy nucléoside triphosphate, 4- Définir la taxonomie et donner ses deux variantes. Dans quelle type de taxonomie le séquengage nueléotidique est il utilisé 2 Quelles sont les autres critéres utilisés dans ce type?BEN ABDELLAH UNIVERSTTE SIDI MOHAMED & FACULTE DBS SCIENCES EY TECHNIQUES FES SAISS at (se traduisant par une culture je comportemen dire: un test permettant e'étudier I visrievis des glucides éudiés. Crest Un auxanogramme es ow non) de muicro-organismes (buctéries, levuces) déterminer si une soitche est capable dutiliser un sucre comme 5 On utilise un milieu de culture entigrement synthétique (sa compos as de glucides. Il permet In détermination de Yauxauogeamme joitrce de carbone. jtion est exnctement connue). du carbone, en I ne contient sjoutant un seul suere comme source de carbone, Il contient des éléments essenticls comme des acides aminégs, des vitamines et des sources diions un seul facteur limitant ; le glucide étudié, nérinnx ce qui permet d'tudi miler le glucide étudié, La présence dune culture indique que le inigro-organisme est capable dass Exereice II/ Sur un milieu M1, présenté en boite de pétri. On effectue un auxanoy gramme ; pour cela on réalise tun ensemencent par inondation aves In souche a étudier. Aprés séchage de la surface du milieu on Aigpose quatre disques contenant différentes substances enrbonées. Le milieu est ensuite incubé a 37°C pendant 48 heures. Le milieu M1 contient : KH2PO4, No2HPO4, NHACI, MG S04, Na Cl, Agar et eau distillée Les substances contenues dans les disques sont : (1) : glucose, (2): Maltose, (3) : Mannitol (4): Inositol. On refait ce test sur un milieu M2 de composition : M1 + Méthionine. Les résultats oblenus sont représentés dans Ia figure 1 pour le milieu M1 et la figure 2 pour M2, 1- A quels types de milieux appartiennent M1 et M2? 2- quel est le but d'un auxanogramme ? 3. Interprétez. les résultats obtenus pour Pseudomonans aeroginosa puis pour Xanthomonas maltophilia en définissant dans ce dernier cas le r6le de la méthionine. 4- Quel est le type trophique des deux espdces étudiées ? Expliquez. Preuiomonascergne —__‘Xothomonat maltephie Puesdomonas ceaginoss ‘Xanthomonas malopila ‘és eng cal © Sates oo ' (EEE Zone de cute 2) Absence de cute, EERE ER ERR ERE EEE ERE E: FACULTE DES ECIENCES | ET-TECHNIQUES DE FES SAISS x =! Immouzer ~ FES 212 (5) 60.0 14-212 (35) 6029 53 — Fax: 21205) 6082 14LEAH UNIVERSITE SIDI MOHAMED BEN ABDEDES |v ag FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES FES Exercice V/A partir d'un lait cru on a isolé une souche de Lactobacillus bulgaricus. Cette bactérie est ensemencée 45 °C et a un pH 5,6 dans le milieu suivant : Glucose ..sssssseeees secs Ugh K.HPO, 10,5 KHPO, 3,58 NH(Cl...... 0,5'g MgSOx, 7 H20.. 0,05 FeSOg, 7 120. ..0,005 g CaCl, 2 H,0. 0,05 g MnCh, 4 H,0. ,005 Eau distillé 1000 ml 1- Comment qualifie t-on ce milieu de culture ? Quels sont les autres types ? 2+ Aucune culture n’est visible dans ce milieu. Il n'y a croissance que lorsqu’on ajoute au milieu Ja riboflavine (sans aucun changement des conditions physico-chimiques). 2-a- Quel est alors le caractére mis en évidence chez cette bactérie? Comment peut on qualifier la riboflavine ? 2- b- Qu’apporte le glucose dans ce milieu ? Quel est le type trophique vis a vis du carbone et par rapport au métabolisme énergétique ? 3- En milieu additionné de riboflavine, il n’y a pas de croissance bactérienne lorsqu’on incube 4 une témpérature de 15 °C. Comment qualifie t— on cette bactérie ? 4-On suit I"évolution de la croissance bactérienne dans un bouillon MRS (Man-Rogosa- Sharpe) incubé &.45 °C, a pil 6,2. Définir les paramétres de Ia croissance : taux de croissance et temps de génération, ctiyes selon le tableau et la figure suivants, 200K) 205) 20,10 20.20 2050 2025 20000 19,80 59 cas minutes) FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DE FES SAiss ‘#1 BP. 2202 ~ Route d'lmmouzer — FES 212 (95) 60 80,14 —212 (5) 6029 53 — Fax £212 (35) 60 82 14 4 &'LKERERERRR RRR RRR RRS be UNIVERSITE SIDI MOHAMED BEN ABDELLAH FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES FES Te TEA Contréle Unifi¢ du demi-module : Microbiologie générale L.S.T B.H.S.ActB.S V/ Questions de cours = 1/ Quelle est la différence entre une bactérie psychrophile et une bactérie mésophile ?, 2/ Comparez la transformation et Ja transduction. 3/ Citez les méthodes directes utilisées pour la mesure de la croissance bactérienne, 4/ Donnez les principales caractéristiques des Rétrovirus. Exercice I/ ‘A/ On effectue un examen microscopique de trois suspensions bactériennes de Bacil/us subtilus, les résultats sont reportés sur la figure 1. 1/Interprétez ces observations microscopiques sachant que les trois suspensions bactériennes correspondent a: a- Suspension d'une colonie bactérienne en eau physiologique b+ Suspension d’une colonie bactérienne en milieu saccharosé 2 mol/| additionné de lysozyme c+ Suspension d’une colonie buetérienne en eau distillée additionnée de lysozyme. 2/ Quelle est la cible du lysozyme ? Comment agit - il? 3/ Quelles sont les propriétés de la structure qui sont mises en évidence d’aprés ces résultats ? B/ On effectue une quatriéme observation d'une culture liquide incubée 10 jours & 37°C (Figure 2) 1/Interprétez ce résultat 2/ Quelle est la structure bactérienne mise en évidence dans ce cas ? quelles sont ses roles et ses propriétés ? = e a\, ° e - ee - WN ee oo ‘ 5 0 Figure 8 Regt FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DE FES SAISS 11 B.P. 2202 ~ Route dImouzzer - FES W212 (35) 60 80 14 ~ 212 (35) 60.96 35 ~212 (35) 60 29 53 — Fax : 212 (35) 60 82 14lef te UNIVERSITE SIDI MOHAMED BEN ABDELLAH FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES FES Exercice I/ cee . Aprés 10 h de croissance, une population bactérienne passe de 10° 4 10° cellules. Définir et déterminer (calculer) le taux de croissance et le temps de génération. (log2 = 0,3). Exercice III/ On ensemence un milieu de culture X par une culture bactérienne A, et on incube 4 37°C, en présence de lumiére, dans une atmosphére enrichie en CO2. U n'y a pas de croissance. Par contre si on ajoute & ce milieu le pyridoxal (vitamine B6) on une croissance. Il en est de méme pour une deuxiéme souche B, mais celle ci présente sance a l’obscurité, sans CO2, lorsqu’on ajoute A la fois du Fructose et de lextrait de levure. LemilieuX contient: . . . K:HPOs : 1g; Mg SOx, 7 H,0 : 0,2 g ; Fe SOs, 7 HzO : 0,01 g; Ca Ch: 0.01g ; eau: 11. 1- Quelle est la nature du milieu X? Que devient il quand on lui ajoute de I'extrait de levure. 2- Quels sont les réles des constituants du milieu X ? du Fructose ? et de I’extrait de levure ? 3+ Quels sont les types trophiques des souches A et B? Exercice IV/ On analyse un échantillon d’eau par la technique de numération sur gélose nutritive aprés dilution en série. 1/ Sachant que le volume final de chaque dilution est 10 ml, décrire comment réalise = ton la série des dilutions suivantes : 1/50 ; 1/250 ; 1/750 ; 1/3000 et 1/1000, 2/ On étale sur la suface de Ta gél6st enboites de'Pétri, ui’ vole Vin &partié 8 le demiére dilution. Aprés incubation & 37°C, on compte dans les boites de pétei le nombre de colonies suivants : Pour le volume V1 = 0.1 ml ; on ol ent 40 colonies, Pour le volume V2 = 0.15 ml ; on obtient 75 colonies. Pour le volume V3 = 0.25 ml ; on obtient 105 colonies. Caleulez la concentration bactérienne dans I'échantillon analysé, cr |e ie ieee) S Ae BEEES =BRRSAAES BELEREELE SE, UNIVERSITE SIDI MOHAMMED BEN ABDELLAH FACULTE DES SCIENCES ET ‘TECHNIQUES DE FES DEPARTEMENT DES SCIENCES DE LA VIE Le 23/02/09 Contréle continu de Microbiologie Licences Biologie et Santé, Biotechnologie hygiéne et sécurité des aliments 1- Les microorganismes ont été observés pour la premidre fois en 1673 grice A Vutilisation de microscopes simples: L4& Qui a observé les micro-organismes pour la premiare fois ? b- Est -il toujours nécessaire d' utiliser un microscope pour observer ces étres vivants ? Si oui, expliquez pourquoi ? 2- La découverte du rdle éthilogique des microorganisems a contribué au développement et a la fondation de la science de la microbiologie. a- Définir le terme éthiologie. . b- Qui a découvert ce réle & Quel est le 2°** point qui a contribué au développement et a la fondation de cette science, 3+ Comparez un vaccin et un antibiotique 4- Comparez une bactérie et une algue unicellulaire 5- Comparez une bactérie photolithotrophe et une bactérie chimioorganotrophe. 6- Donnez les caractéristiques des spores bactériennes, Exercice I- Quatre souches bactériennes ont les propriétés suivantes : Tests biochimiques Souches bactériennes A B C DE > Oxydase a Glucose - acs + + Uréase - + 2 + i Lipase ee Gélatinase I - - + + 1-Préparez la matrice des caractéres. 2- Calculer le pourcentage de similitude entre les souches. 3- Faites Parrangement des pourcentages de similitude sclon un ordre décroissant. 4 Tracez le dendrogramme, puis interprétez le. 5- Préparez le triangle primaire selon le dendrogramme. 6- Réorganiser, si nécessaire, le triangle primaire pour obtenir le triangle final. ‘FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DE FES (SBP. 2202—Route Pimouzzer FES 212 (95) 60 80 14-212 (35) 6029 53 ~Fax:212 G5) 60 82 14UNIVERSITE SIDI MOHAMMED BEN AEDES a FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DEPARTEMENT DES SCIENCES DE LA VIE Exervice I- On prepare trois suspensions bactériennes de Bacillus subrilis. a’ Une suspension préparée en eau Pphysiologique. §/Une suspension prépanée en milieu saecharosé (2 mol) addtionné du lysozyme, / Une suspension préparée en eau distillée additionné du lysozyme. V/ Lrexamen microscopique, a objectif& immersion ; aprés coloration de Gram montre & Des cellule allongées colorées en violet be Des cellules arrondies colonées en rose © Une absence de cellule, Interpréter ces résultats ; en expliquant I de Gram dautre part. ‘action du lysozyme d’une part et Ja réaction 1a coloration 2/ Quelle est la cible du lysozyme ? en donnant sa structure, 3/ Quelles sont les proprictés de cette structure mise en évidence.Professeur N. Chadli, Contréle unifié 25/05/2015, Durée: 1H Tronc commun, BCG-S4 Salle: Section A et B Microbiologie générale (B342) @S points). 1- Comparez les processus photos poi ynthétiques des microorganismes suivants : bactéries phototrop! hes, algues et cyanobactéries. (25 points). 2- Expliquez pourquoi les bactéries chimiolithotrophes ont un désavantage energetique considérable par rapport aux bactéries organotrophes. ' (50 points), 3- a- en quoi le terme croissance utilisé en microbiologie est-il différent du méme terme appliqué aux plantes et aux animaux. b- le temps de génération est-il le méme pour toute les bactéries ? ¢- le temps de génération d’une espéce donnée peut-il varier ? Expliquez. d- La culture d’ Acetobacter aceti dans un milieu non aéré contenant de acide acétique et du sel d’ammonium est linéaire jusqu’a une concentration 7x10° M d’acide acétique, ce qui correspond A une population de 89x10" bactéries par ml. De plus grandes concentrations d’acide acétique n’ont pas d’effet sur la croissance. On incube Acetobacter aceti dans 75 ml d’un milieu de concentration inconnue en acide acétique et on détermine la population de la phase stationnaire, soit 695x10" bactéries par ml. Quelle est la quantité d’acide acétique (en mg) du milieu de culture. Note : - Tolérance zéro pour toute forme de plagiat. - Aucun document n'est autorisé. | les téléphones portables ne sont pas autorisés en salle dexamen.dll Fus-sAlss hh racunte Dl pr-recunial Wen ANDEL sie. Prot Ne Chadli i UNIVIERSEL: SHOE MONT Département dex Seionees de ha Vie, Méerabiolon Professeur N. Chadli. . 01/04/2011. Durée: 1 1130 min Microbiologie , salle ; Amphi 1 Controle unifié uivantes, le 5 quel produit et en quelle positi | | d+ Dans les fermentations i 4 position indiquée ion du produit final retrouverons-nou. ty elueos -6-"C, dan I homofermentaire ? 2 |b) lucose-2-"C, dans Ia formation de glycérol par Saccharomyces sp ? MH lucose-3-"C, dans la fermentation de léthanol par Saccharomyces cereyisiae? . _ a) glucose-5-"'C, d e) glucose-1-"C, dan: a produit par Saccharomyce: carbone marqué ? / ; 1a production d'acide-lactiqué par un Lactobacillus fans la fermentation précédente ? s la production diacétate par Acetobacter, via l'éthanol s cerevisiae ? ue a partir d'une souche de levure et d'un élasse dont Ja teneur en carbone est de 2- Onaéalise une fermentation alcooliq L'! d'éthanol et de 18 gL" de Miaabstrat glucidique constitué par une m 44% du poids sec, La production est de 86 g. Moiomass s, dont la leneur en carbone est de 48%. Au cours d'essais réalisés dans des conditions comparables, on détermine que le rendement de Ja transformation laire, exprimé en carbone, est de 60%. En admettant du substrat en matériel cellu! que la fermentation alcoolique est réalisée selon le bilan moléculaire théorique suivant: , ' Bilan moléculaire de la transformation d'une molécule de glucose en éthanol ger sermentation alcoolique est : P Se CoH 206 - + 2C,H;0H. - Bilan de la fermentation Glucose ------— -2CO, + 2 éthanol : Théorie (mol) 0,025 0,05 0,05 j Pratique (mol) 0,025 0,0499 = -0,0489 ' arene ‘ [Kalculer Ja diminution de concentration de la mélasse dans le milieu BA {g} B.P, 2202 ~ Route d"Imouzzer ~ Fl ! 212 (5) 6080 14 = 212 (5) 696.35 ~212 (5) 0 29 $3 ~ Wax : 212 (5) 60 82 14Sa Professeur N. Chadli. Contréle continu 19/03/2012 Durée: 1H Microbiologie Liew : 4 (LST BHSA-S6-) : demi-module de génie microbiologique- Question 1 (15 points) La compagnie X vous embauche afin de mettre au point un processus biologique de production d’acide acétique par fermentation microbienne. . Les contraintes sont les suivantes : - substrat : le mais sera'utilisé 4 cause de sa disponibilité et de son ~ Produits : en particulier, l'acide acétique devra étre obtenu sous sa forme acide libre. ae c'est quoi votre décision pour le choix du microorganisme producteur. Justifier volre réponse. b+ Devra-t-on traiter le substrat avant sa fermentation ? si oui, comment? —- c- Brigvement, quel genre de fermenteur propose2-vous ? pourquoi ? aidez-vous d'un schéma. Dans un premier essai (100 litres), avee Péquivalent de 2 kg de glucose provenant dit mais, yous obtenez les résultats suivants: - Glucose final— coiit relativement bas. Acide acétique - Diacétyl- Le rendement en produits désirés est nettement trop bas. d- Comment expliquez-vous ce bas rendement ? Dans un deuxiéme essai, toujours avec I’équivalent de 2 kg de glucose, mais les problémes ont été réglés, vous obtenez des résultats acceptables qui sont comme suit : = Glucose final~ -200 g - 2,3- butane diol- - Acide acétique *_ Diacétyl— e- Quel est le pourcentage de récupération du carbone ? f Quelle quantité de CO2 (en moles, en grammes et en litres) s’est dégagée de cette fermentation ? g- Quel est le pourcentage d”utilisation dusubstrat ? Question 2 (05 points) L’acétate, c’est le déchet d’un métabolite aérobie ou anaérobie, produit en particulier par une bactérie aérobie stricte, pour fabriquer surtout le vinaigre. a- Nommer et discuter les fermenteurs utilisés dans ce type de production, : b- quel rendement d’acide acétique peut-étre obtenu de 500 gramme de glucose. c- quelle quantité de CO, (en gramme eten litre) sera libérée ? 2 d- quelle quantilé de Op (en gramme et en litre) sera théoriquement requise hanol en acide acétique. Pour oxyder l’étSS Ba VINEE ESE OTA HE AE DA WACTICNICD IE SC HEC HS HEE CHETTED FEE wali Professeur N, Chall TTT Durée + HE S0min Conmale wnifie habe Demi module de microbiologic induntriebe (40 points) 1- Fermentation aedtique, L acide acétique biologique est le déehet d'un Andtubolite wdrabie an nnaeilie, Heel Bee facile obtenir par vole micrablolagique, a) quel renclement acide nestique poml-Atrs oben de | Kye wlicee, em nape Wits defficacité pour les 2 processun de conversion (yluense @ dthanal ef diane weve acdlique)? b) quel quantité de CO? ( on gramme et en fire) sera Théider ¢) quel quantité de Og (en gramme et en Hinne) wer Hhdoviquement requive pow anzter Péthanol en acide aeétique Jue dee evista pantie dane nite wid galine une fermentation nlewolicque A hen ny cilia et de WAY OH f ratitué par une métaaie dont Ja te it de BO pale I diéthanol ob de TH bed de Dionne, dant ba beneun ee ‘Av cours densnls rdallids dans des conditions ¢ cnnjuaralibens, Gb détermine que le rendement de In transformation diy substrate adr ie} cellusbaine, ep inne’ bone, est de 60%, Fn acimettant ue Tn farmentation alooulique ent iublades wen Me théorique suivant | Ja tranaformation dr 1 Colle (50 points)2= Ont substrat glucidique sec, La production carbone est de 48%, en ci bilan moléculaire ~ Bilan moléculaire de fermentation alcoolique = Bilan de In fermentation Gincore meres 2002 +B fbbanol moldenle do glucaie en Aihianel pat oy 20, 1 AC OM 0,05 0,05 0,025 ono one 0,025 Théo pratique (mol) ntvntion de hn'fypstaees diane Te miliew, euler I diminution de eanee! Hieleneen de ta Vie Hannser FEN Wa TL aE Département de wey re 2202 Hee mr tajaali STDC) AN 2129) 00 nH |14/03/2012 Professeur N. Chudli. Contrale continu Durée : 2H Microbiologie Salle : S201 (25 points)(1) — Nommer et discuter la régulation des voies métaboliques de la Fermentation alcoolique chez Saccharomyces cerevisiae. (25 points)(2)- Fermentation alcoolique et la production du glycérol Dans la fermentation alcoolique par S. cerevisiae, expliquez comment agit l'effet du glucose ~ sur la production de la biomasse et la formation de I’alcool (25 points)(3)- On réalise une fermentation alcoolique a partir d'une souche de levure et d'un substrat glucidique constitué par une mélasse dont la teneur en carbone est de 44% du poids sec. La production est de 86 g.L-I d'éthanol et de 18°#:L71788'biSinasse, dont la teneur en carbone est de 48%, Au cours d'essais réalisés dans des conditions comparables, on détermine que le rendement de la transformation du substrat en matériel cellulaire, exprimé en carbone, est de 60%. En admettant que Ia fermentation alcoolique est réalisée selon le bilan moléculaire théorique suivant : - Bilan moléculaire de la transformation d'une molécule de glucose en éthanol par -— 2CO, + 2C,HsOH. fermentation alcoolique est: ~CoHpO¢ -- jlan dela fermentation Glucose - + 2CO2 + 2 Ethanol Théorie (mol) 0,025 0,05 0,05 Pratique (mol) 0,025 0,0499 0,0489 Calculer la diminution de concentration de la mélasse dans le milieu. (25 points)(4)- Dans les fermentations suivantes, le substrat est du glucose marqué en position indiqué. Dans quel produit et en quelle position du produit final retrouverons-nous le carbone marqué? a- glucose-2-"'C, clans la formation de glycérol par Saccharomyces sp. by glucose-3-'C, dans la fermentation alcoolique par Saccharomyces cerevisiae? c- glucose-5-"C, dans la fermentation précédente. 102 ~ Route d'Imouzzer ~ FES 096 35 212 (5) 60 29 53 ~ Fax :212 (5) 60 82 14 B 212 (5) 60.80 14-2125Prof. N. i of: N. Chadli FST Dept Sci. de la Vie. Microbiologie Contréle unifié IAA(filigre ingénieur )S2___ Durée +2 Heures 07 avril 14 A) La pén découvert en 1929 par Fleminy A famille des B-lactames. La production industrielle de pénicilline est Ee parle = champignon Penicillium chrysogenum Ce champignon synthétise différentes formes de | pénicillines naturelles. Parmi ces formes seule la pénicilline G, synthétisée en faible proportion par rapport aux autres formes, a un intérét médical. ; Bi 1- Donnez un procédé industriel de production de pénicilline G. 2. Enumérer, discuter et donner |'intérét les différentes étapes du procéde industriel de production de la pénicilline G. 3- La synthése de pénicilline est commune av0° d'autres voies de biosynthéses, secondaire ? Jesquelles ? S'agit-il de produits du métabolisme primaire ou -4- Que pouvez-vous imaginer comme cinétique de production de Ia pénicilline G par rapport a la cinétique de consommation du substrat carboné et par rapport a la cinétique de oroissance du champignon ? il 5- Le milieu de culture utilisé pour la production industrielle de pénicilline Gest Constitué principalement de mélasse, de sirop de résidus céréaliers ot dhuiles végétales. Ce milieu permet une crowssance rapide du champignon & 25°C lorsque le il pHest maintenu a 6; 1a croissance du champignon s‘arréte aprés 24h de fermentation. ‘a-A votre avis, sur un tel milieu, quand Ja production de Pénicilline G démarre-t-elle ? - Imaginez le meil pénicilline G. ine est un antibiotique, eur procédé de fermentation pour la synthése de est la fermentation . En fait e industrielle de cet acide Le plus étudié et utilisé est 1 voie microbiologique. accharose ou sur un milieu & base de glucose, s Vintérét de Vinoculum dans la production du citrate -a principale soure: ‘ondiale se fait Hus niger, culti eau I, discuter a By Acide citrique :! 99% de la production m * Je champignon Aspergil A meélasse- 1-D’aprés le tab me d’inoculum. i 4 : tration de l’acide citrigque en fonction du volu ; ran Concannon ey cnn nee cians 0,25 63,21 04 80,95 0,6 34,72 , 90,00 a 98,56 A, niger. ment se fait la synthése de la production de l’acide citrique pat P 2- Expliquet com!oly MED BEN AN KACULTE DES SCIENCE, TECHNIQUES. ences dela Vie. a) Professeur N. Chiadli. a) Contréle a) urée : 1130 min Sirsa Corynebacterinm et la production du glutamate Te 25/03/201 1 salle + Expliquez comment se fait le contréle de la, biosynthése de Pacide plutamique chez 'esp&ce Corynebacterium glutamicunt ’? p's b)-Expliques-eommentteCorynebacterium-sontcapables d’excréter la e-nilieu_-extérieurtes-acides-aminés neutres et basiques? pls © Discntez les principaux intermédiaires de la production d” ‘acide lulamique a partir du glucose.” pro Discutez comment se fait la production de acide glutamique. a b pls e) Titre : Production d’acide glutamique en fonction du taux kt biotine. La ource de carbone est le glucose jiotine Croissance Acide Suere résiduel ide lactique | /t DOU/S0) glutamique #% ml 2% mi g% ml velo 0 01 0,13 a 0,0 0,5 0,4 1,170 ee 0,07 1,0 0 0,07 2,5. 0,07 5,0 0,14 Ga a 25 ; 50 0,1 0,3 i iz “ipl P = stion concernant le tableau ci-dessus : faire votre commentaire ou ication des résultats observés au tableau. ~ FACULTE DES SCIENGRS &T TECHNIQUE: BPur v Fac ERSTTE SIDI MOHAMMED BEN ABDELLAH Esc LTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DE FES j 'ARTEMENT DE SCIENCES DE LA VIE \ : CON: "SVI2-BC" icipales caractéristiques 7 ux Besar B MICROBIOLOG. 1- Qu’est ce qu'un micro-organisme ? et quels sont ses pr 2- Définir les termes suivants : ~ Chromatophore. = Pili. ‘ ~ Capsule. Se = ~ Souche auxotrophe ' 3+ Quelles sont les caractéristiques des spores bactériennes 7 ~ 4- Donnez les fonctions de la paroi bactérienne. 5- Quelle est la différence entre les Cyanobactéries et les Eubactéries uniccllulaires phototrophes concemant le processus de la photosyiithise ? +* G-Donner la définition d'un antibiotique et quels sont les différents cibles de ces agents 7 7- Des cultures d'une-souche bactérienne F sont réalisées en tube en absence et en présence d'un antibiotique B. il Ia mesure de la croissance bactéricniie en fonction du temps est représentée sur la courbe suivante. Logie N Rajout de Sans antibiotiaue B Fantibiotique B | —— Avec Ia iaue B ae Bw ‘Temps enh Ql- Intorpréter les résultats obfenus pour les deux cultures. Q2- Donner les différentes explications pour ln eroissance en présence de l'antibiotique B. " g- Aprés'10 heures de culture exponentille dune population bactrienne, celle eat passée de 10410" celtules. (Qi- Déterminer le taux de crois sance (j!), Ie nombre de génération (n) et le temps de génération (2). NB: On prend log2= 0,3 , a ‘ Bonne chance 7a T®