Virologie et Cintiques du Virus de lHpatite C

Pr Jean-Michel Pawlotsky

Laboratoire de Virologie, INSERM U635, & CNR des Hpatites B, C et delta Hpital Henri Mondor Universit Paris 12 Crteil

Virus de lHpatite C

Cycle Cellulaire du VHC

Fixation au rcepteur et endocytose Transport et relargage

Fusion et dcapsidation

(+) RNA

Assemblage

Rplication Traduction et maturation de la polyprotine (Dubuisson J, 2006)

Cintiques du VHC
Hpatocytes infects Hpatocytes non infects

Cintiques du VHC
Hpatocytes infects
production

Hpatocytes non infects

Cintiques du VHC
Hpatocytes infects
production

Hpatocytes non infects

infection de novo

Cintiques du VHC
Hpatocytes infects
production

Hpatocytes non infects

infection de novo

Cintiques du VHC
Hpatocytes infects
mort des cellules infectes production

Hpatocytes non infects

infection de novo

Cintiques du VHC
Hpatocytes infects
mort des cellules infectes production

Hpatocytes non infects

infection de novo

Sang priphrique (charge virale)

Cintiques du VHC
Hpatocytes infects
mort des cellules infectes production

Hpatocytes non infects

infection de novo

Sang priphrique (charge virale)

dgradation

Compartiment de dgradation

Objectifs du Traitement
Equilibre des cintiques du VHC:
n n

Demi-vie estime des virions libres: 2,7 heures Production/clairance quotidiennes: 1012 virus/jour

Objectifs du traitement:
n n

Rompre lquilibre des cintiques virales Eliminer dfinitivement linfection

Applications de lEtude des Cintiques de Rplication Virale

Description de la rponse anti-virale Comprhension des mcanismes de succs ou dchec des traitements Prdiction de lissue du traitement (rponse virologique prolonge)

I Traitements Fonds sur lInterfron-

Description de la Rponse Antivirale

Dynamiques sous IFN-

Charge virale (log UI/ml)

7 Dlai 6 5 4 3
Seuil

1re phase 2nde phase

2 1 0 1 2 3
(Neumann et al., Science 1998;282:103-7)

jours

14

T(n)

DITTO-Null Responder
DITTO NULL responder
7

<0.5 log

5 <2 log

3 detection limit 600

detection limit 50

1 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30

DITTO-Rapid Responder (Biphasic)

DITTO Rapid Viral Responder
7

Biphasic

6 <0.5 log

5 <2 log 4

3 detection limit 600

detection limit 50

1 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30

DITTO-Rapid Responder (Triphasic)

DITTO RVR with shoulder 1st week
7

Triphasic
<0.5 log

5 <2 og 4

3 detection limit 600

detection limit 50

1 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30

Comprhension des Mcanismes de Succs et dEchec Thrapeutiques

Cintiques par Gnotype

Essai europen DITTO
7 ARN VHC (log UI/ml) diffrence significative, 4 et 1 vs 3 * = diff 6

*
3 Seuil du test quantitatif

* * * * * *

Gnotype 4 Gnotype 1

2 Seuil du test qualitatif

Gnotype 3

0 -28 -7 0 1 4 7 8 15 22 29 (Hagai et al., manuscrit en prparation)

Cintiques par Gnotype

Essai europen DITTO
7 ARN VHC (log UI/ml) diffrence significative, 4 et 1 vs 3 * = diff 6

*
3 Seuil du test quantitatif

* * * * * *

Gnotype 4 Gnotype 1

2 Seuil du test qualitatif

Gnotype 3

0 -28 -7 0 1 4 7 8 15 22 29 (Hagai et al., manuscrit en prparation)

Cintiques par Gnotype

Essai europen DITTO
7 ARN VHC (log UI/ml) diffrence significative, 4 et 1 vs 3 * = diff 6

*
3 Seuil du test quantitatif

* * * * * *

Gnotype 4 Gnotype 1

2 Seuil du test qualitatif

Gnotype 3

0 -28 -7 0 1 4 7 8 15 22 29 (Hagai et al., manuscrit en prparation)

Cintiques par Gnotype

Essai europen DITTO
7 ARN VHC (log UI/ml) diffrence significative, 4 et 1 vs 3 * = diff 6

*
3 Seuil du test quantitatif

* * * * * *

Gnotype 4 Gnotype 1

2 Seuil du test qualitatif

Gnotype 3

0 -28 -7 0 1 4 7 8 15 22 29 (Hagai et al., manuscrit en prparation)

Rsistance antivirale

Clairance retarde

Demi-vie prolonge des cellules infectes

Facteurs Viraux

Effet Antiviral de la Ribavirine

Dcroissance moyenne de lARN du VHC (log UI/ml)
0.5

0.0

Tmoins Monoth Monothrapie ribavirine

-0.5

-1.0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28

Temps (jours ) (jours)

(Pawlotsky et al., Gastroenterology 2004;126:7032004;126:703-14)

Action Antivirale de la Ribavirine

Hypothses fondes sur la modlisation mathmatique des cintiques de dcroissance sous IFN--ribavirine:
n

La ribavirine rduit linfectiosit des populations virales de faon dosedpendante. La ribavirine ninfluence pas la premire phase de dcroissance virale qui dpend de lefficacit antivirale de lIFN-. La ribavirine acclre la seconde phase de dcroissance virale. Laction de la ribavirine sur linfectiosit des virions du VHC pourrait napparatre que lorsque la rplication virale est inhibe par lIFN-, ce qui expliquerait le modeste effet antiviral de la ribavirine administre en monothrapie.

(Dixit et al., Nature 2004;432:922-4)

Attention !
Le suivi et la modlisation mathmatique des cintiques de rplication virale au cours du traitement permet dmettre des hypothses. Ces hypothses doivent tre confirmes exprimentalement dans des modles in vivo et/ou in vitro.

Prdiction de lIssue du Traitement

RVP = 2-log ou ARN VHC (-) at S12

Dbut de ltude RVP-S12 RVS-S72 Pas de RVS RVP Gnotype 1 Population totale (n=298) Pas de RVP 19%
(Ferenci et al., J Hepatol 2005;43:425-33)

Peg-IFN-2a + Ribavirine

43% RVS 57% RVS 2% Pas de RVS 98%

81%

= VPP

= VPN

RVP = 2-log ou ARN VHC (-) at S12

Dbut de ltude RVP-S12 RVS-S72 Pas de RVS RVP Tous gnotypes Population totale (n=511) Pas de RVP 26%
(Davis et al., Hepatology 2003)

Peg-IFN-2b + Ribavirine

28% RVS 72% RVS 0% Pas de RVS 100%

74%

= VPP

= VPN

Prdiction Prcoce
Essai DITTO
EVR criteria definition EVRw12
HCV RNA ((-) and/or decline >2 log at week 12

Week N of tests

NPV

PPV

12

100%

84%

0.001

DITTO-2nd-slope
slope > 0.3 log/week on days 8-29 and/or days 1515-29)

100%

90%

0.001

DITTO-1st-week-VK
VL<5.5 log on day 4 and/or decline > 0.5 log at day 7

100%

93%

0.001

DITTO-4weeks-VK
DITTODITTO-2nd-slope + DITTODITTO-1stweek
(Neumann et al., Hepatology 2003;38:248A)

100%

93%

0.001

II Nouveaux Traitements de lHpatite C

Nouveaux Traitements de lHpatite C

Nouveaux interfrons Inducteurs oraux de linterfron Alternatives la ribavirine Thrapies immunologiques Inhibiteurs spcifiques du VHC

Description de la Rponse Antivirale

R1626 (Roche)
Efficacit antivirale
Traitement Dcroissance moyenne de lARN du VHC (log UI/ml) 1.0 0.5 0.0 Placebo 500 mg 1500 mg Suivi

-0.5 -1.0 -1.5 -2.0 0 5 10 15 Jours 20 25 30

(Roberts et al, EASL 2006)

Valopicitabine (NM283, Idenix/Novartis)

Efficacit antivirale
0
semaines 12-24 n=7

-0,5

A 0,46 log

Dcroissance de lARN -1,5 du VHC

(en log UI/ml)

-1

-2 -2,5 -3 -3,5 0 6 12 18 24
(n=21) (n=41) (n=41) (n=41) (n=34) n = ITT

30

A B C D E

NM283 800 mg QD NM283 400 mg QD + peg-IFN 180 g QW NM283 400? 800 mg QD ramp (1st week)? 800 mg QD +peg-IFN 180 g QW NM283 800 mg QD + peg-IFN 180 g QW Ribavirin + peg-IFN 180 g QW @ D8

(Afdhal et al, EASL 2006)

BILN 2061: Efficacit Antivirale

(Lamarre et al, Nature 2003;426:186-9)

SCH 503034: Efficacit Antivirale

Dcroissance de lARN (log) 0,5 Traitement 0 -0,5 -1 -1,5 -2
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 Placebo (n=16) 100mg x2/j (n=12) 200mg x2/j (n=12) 400mg x2/j (n=11) 400mg x3/j (n=10)

Suivi

Jours de traitement

(Schiff et al., , HEPDART 2005)

Telaprevir (VX 950): Efficacit Antivirale

(Reesink et al., Gastroenterology 2006;131:997-1002)

PegIFN + Telaprevir
Dcroissance de lARN du VHC (Log 10 IU/mL)

1 0 -1 -2 -3 -4 -5
VXVX-950 + PEGPEG-IFN VXVX-950 Base PegPeg-IFN + placebo

-6 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
Jours de traitement

(Reesink et al., EASL 2006) 2006)

PegIFN + Ribavirine + Telaprevir

8 7
HCV RNA (Log10 IU/mL)

6 5 4 3 2 1 0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28
Limite de quantification Limite de dtection

Jours de traitement (Lawitz et al., DDW 2006) 2006)

Comprhension des Mcanismes de Succs et dEchec Thrapeutiques

Telaprevir (VX 950): Efficacit Antivirale

(Reesink et al., Gastroenterology 2006;131:997-1002)

Rponses Virologiques au Telaprevir

Traitement
Dcroissance de lARN du VHC
7 6 5 4 3 2 1 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 placebo (n=6) breakthrough (n=13) plateau (n=8) continuous decline (n=7)

Jours de traitement
(Sarrazin et al., AASLD 2005)

Mutations de Rsistance sur la Protase NS3/NS4A

T54 R155 A156 V36

(Sarrazin et al., AASLD 2005)

Prdiction de lIssue du Traitement

Valopicitabine (NM283, Idenix/Novartis)

Efficacit antivirale
0
semaines 12-24 n=7

-0,5

A 0,46 log

Dcroissance de lARN -1,5 du VHC

(en log UI/ml)

-1

-2 -2,5 -3 -3,5 0 6 12 18 24
(n=21) (n=41) (n=41) (n=41) (n=34) n = ITT

30

A B C D E

NM283 800 mg QD NM283 400 mg QD + peg-IFN 180 g QW NM283 400? 800 mg QD ramp (1st week)? 800 mg QD +peg-IFN 180 g QW NM283 800 mg QD + peg-IFN 180 g QW Ribavirin + peg-IFN 180 g QW @ D8

(Afdhal et al, EASL 2006)

Combinaison avec lIFN- pgyl

Dcroissance de lARN du VHC 0 -0,5 -1 -1,5 -2 -2,5 -3 0 1 2 3 5 7 8 9 10 12 13
Jours de traitement
Peg-Intron seul (n=22) Peg-Intron+200 mg x3/j SCH503034 (n=12) Peg-Intron + 400 mg x3/j SCH503034 (n=10)

SCH 503034

(Zeuzem et al., AASLD 2005)

PegIFN + Ribavirine + Telaprevir

8 7
HCV RNA (Log10 IU/mL)

6 5 4 3 2 1 0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28
Limite de quantification Limite de dtection

Jours de traitement (Lawitz et al., DDW 2006) 2006)

Conclusions
Ltude des cintiques de rplication virale est utile pour dcrire les rponses virologiques aux traitements antiviraux. Elle permet dmettre des hypothse sur les mcanismes qui sous-tendent lchec thrapeutique:
n n

aussi bien pour les traitements fonds sur lIFN- que pour les nouveaux mdicaments, mais ces hypothses doivent tre confirmes exprimentalement, in vivo ou in vitro.

Le suivi des cintiques virales au cours du traitement:

n n

permet de prdire lissue ultime des traitements fonds sur lIFN- et ribavirine et dadapter le schma thrapeutique la rponse, pourrait galement permettre de prdire lissue ultime des nouvelles approches thrapeutiques, en cours dessais cliniques.