Maladies infectieuses

Les molcules virales potentiellement immunognes

Bicouche lipidique

Vaccin contre le VIH :

o en est-on vraiment ?

ARN
simple brin

Protines denveloppe
codes par le gne env
gp120 (SU)
gp41 (TM)

Spicule

Enzymes codes
par le gne pol
Transcriptase
inverse

Protines codes
par le gne gag
(core)
Matrice

Lampleur de lpidmie dinfection par le VIH

et le cot des mdicaments anti-VIH rclament
la mise au point aussi rapide que possible
dun vaccin. Diffrentes stratgies vaccinales
sont tudies travers le monde.
Les travaux avancent, mme si il serait hasardeux
de prdire une russite prochaine.

prs une quinzaine dannes

de recherches, les connaissances concernant la famille
des virus responsables du syndrome
dimmunodficience acquise ont largement progress : chaque tape du
cycle viral est petit petit dmantele, et de nouvelles cibles thrapeutiques sont envisages. Cependant,
on compte aujourdhui environ
34 millions de personnes sropositives, dont plus de 95 % vivent dans
des pays en voie de dveloppement.
Le sida, ou plus exactement linfection par le VIH, cest aussi plus de
16 000 nouvelles contaminations
chaque jour dans le monde.

Ces chiffres parlent deux-mmes :

mme si les multithrapies, proposes aujourdhui aux sropositifs des
pays industrialiss, apportent des rsultats satisfaisants, elles sont contraignantes, trs coteuses et difficilement accessibles la majeure partie
des gens contamins sur la plante.
Cest pourquoi il devient chaque jour
plus ncessaire de mettre au point un
vaccin, avec deux contraintes : acclrer son dveloppement et minimiser son cot, afin de le rendre accessible rapidement aux populations
les plus menaces.

La structure du virus
dvoile des cibles
thoriques
Le virus de limmunodficience
humaine (VIH) est compos dun
core contenant, dans une capside, le
gnome viral (deux brins dARN
identiques) et les enzymes ncessaires

Source :
Colloque 1999 des Cents Gardes,
organis lInstitut Pasteur de
Marnes-la-Coquette.

la rplication virale. Ce core est envelopp dune bicouche lipidique

dans laquelle sancrent les spicules
denveloppe, des glycoprotines formes de domaines qui peuvent tre
trs variables selon les souches.
Historiquement, les premires
stratgies vaccinales tudies reposaient sur lutilisation de glycoprotines denveloppe fabriques
par recombinaison gntique, ou de
peptides drivs de celles-ci : lexposition de ces molcules la surface
des particules virales en faisait une
cible de choix pour linduction dune
rponse immunitaire protectrice. Cependant, la protection induite par ce
type de prparation ntait que partielle. On obtenait certes lapparition
danticorps neutralisants (rponse humorale) dirigs contre certains pitopes connus, mais pas ou trs peu de
stimulation de la rponse cellulaire.
De plus, le principal problme rencontr avec ce type de vaccin est la
grande variabilit des glycoprotines denveloppe, et donc la difficult dinduire des anticorps neutralisant plusieurs souches virales
la fois. Ces prparations sont aujourdhui utilises pour des injections de
rappel dans des protocoles combins.
Dautres protines ou peptides
drivs du virus sont galement tudis comme cibles possibles.
La protine Tat est une protine
rgulatrice qui active la transcription
des gnes viraux. Elle joue un rle
essentiel dans la rplication (mais,
ntant exprime que lors de celle-ci,
elle est dite accessoire). Tat possde
galement des fonctions immunosuppressives sur les cellules voisines.
Do lide quune rponse humorale
prcoce dirige contre cette protine
pourrait bloquer la rplication virale
et viter limmunosuppression associe. Des rsultats trs intressants
ont t obtenus dans ce sens chez le
macaque, avec lapparition dune rponse immunitaire relativement com-

Protase
Capside
Intgrase

Nuclocapside
Protines
accessoires
Tat
Nef

plte (stimulation des rponses humorale et cellulaire). Cependant, tant

donn ses proprits, cette molcule
est trs toxique. Des tudes visant
diminuer sa toxicit (par inactivation
chimique par exemple) sont en cours.
Un ensemble de peptides drivs des protines Nef (autre protine
accessoire ), Gag (protines constitutives du core), Env (protines denveloppe) et Pol (enzymes) sont galement valus, combins avec des
lipides pour former des micelles ou
lipopeptides, qui semblent pntrer
plus facilement dans les cellules que
les peptides seuls. Les peptides utiliss sont en fait des pitopes (dterminants immunitaires) qui activent
spcifiquement les lymphocytes T cytotoxiques. Des tudes cliniques de
phase I sur volontaires sains ont montr quune forte rponse immunitaire
de type cellulaire est induite court
terme, mais dcrot rapidement. Il
sagit maintenant de russir prolonger la rponse induite.

Des microbes
vaccineurs
Un autre type dapproches vaccinales consiste utiliser des microorganismes, bactries ou virus, modifis pour exprimer des protines
ou peptides du VIH en quantit importante et de faon prolonge.
Lide est quune r-exposition permanente des pitopes viraux les plus
immunognes assurerait une protection efficace en stimulant dans la dure la rponse immunitaire de lhte.
Les micro-organismes les plus
utiliss dans cette stratgie sont les
poxvirus attnus, comme le MVA
(virus vaccinal dAnkara modifi, attnu par de multiples passages dans
des embryons de poulet), le canarypox ou le fowlpox (virus infectant
lorigine des oiseaux). Ces poxvirus
sont inoffensifs pour lhomme et per-

mettent lexpression en grande quantit de multiples squences virales

provenant de toutes les protines
(Gag, Pol, Env, Nef). Cependant, ils
prsentent parfois le dsagrment
dinduire une rponse contre le vecteur dimmunisation lui-mme et
non contre les antignes viraux.
Plusieurs essais de phase I, visant
valuer la tolrance de ces prparations par les volontaires et la rponse immunitaire induite, ont t
mens depuis 1992. Ils ont montr
que des anticorps neutralisants
pouvaient tre induits chez la plupart des individus, tandis quune rponse cellulaire cytotoxique tait
dtecte chez 25 78 % des volontaires selon les essais. De plus, les
lymphocytes T cytotoxiques (CTL)
activs reconnaissent une large
gamme de peptides viraux, ventuellement issus de souches diffrentes
de celles dont sont drivs les peptides de vaccination, ce qui est encourageant. Cependant, mme si cette
rponse cellulaire a t dtecte dans
certains cas jusqu deux ans aprs la
dernire injection, elle diminue la plupart du temps rapidement, sans quon
puisse la ractiver par une injection
de rappel.
La capacit protectrice de ces
virus modifis a t teste chez le
macaque. Il nest pas toujours ais
de comparer les rsultats des diffrentes expriences cause des diffrences des protocoles utiliss (nombre
dinjections de rappel, combinaisons
de produits et surtout intervalle de
temps entre la dernire injection de
rappel et le moment o la protection
des animaux est teste en leur injectant une souche virale, souvent diffrente dune tude lautre). Une
chose est peu prs sre : les poxvirus seuls ne peuvent protger compltement lanimal, par contre, ils
permettent daugmenter lintensit
et la diversit de la rponse immunitaire lorsquils sont combins
A.I.M. 62 - 2000

VIH entier attnu

Protines virales

dutiliser une souche de VIH dont la

virulence a t svrement attnue
par des dltions dans les squences
des gnes codant la transcriptase inverse ou dans celle du gne rgulateur nef. Dans certains cas, les
souches ont galement t attnues
par passages successifs sur des cultures cellulaires de laboratoire. Ces
souches attnues doivent infecter
lanimal, sans le rendre malade bien
sr, et induire une rplication du virus faible mais suffisante pour stimuler en permanence la rponse immunitaire de lhte.

Fragment
de pro-ADN viral
Vaccination
directe

Vecteur inoffensif
(poxvirus modifi
par exemple)

Molcules
vaccinantes
fabriques dans
lorganisme

METHODES DE VACCINATION CONTRE LE VIH ACTUELLEMENT A LESSAI

Certains vaccins actuellement lessai visent faire produire dans lorganisme les molcules immunognes (poxvirus modifi, pro-ADN viral). Dautres utilisent directement certaines protines virales, voire des virus entiers attnus. Il semble que le succs puisse venir dune combinaison de mthodes.

Des tudes chez le macaque ont

montr que le degr de protection obtenu est inversement proportionnel
lattnuation de linfection, comme
si le virus vaccin devait occuper
suffisamment de place pour viter la
surinfection de lhte par un virus pathogne. Cette stratgie donne des rsultats trs intressants chez lanimal, mais il reste encore prouver
quelle est suffisamment sre, cest-dire que le virus vaccin ne retrouve pas sa pathognicit, mme
plusieurs annes aprs la vaccination,
ce que semblent montrer certains essais chez le macaque.

Des protocoles combins

avec dautres prparations (comme
nous le verrons plus loin).
Dautres virus vivants attnus et modifis sont aussi utiliss,
comme le virus de lencphalite
quine vnzulienne (qui a lavantage de cibler prfrentiellement les
ganglions lymphodes, sige important de rplication du VIH), le Semliki Forest Virus (SFV), ou encore les
Adnovirus et les Herps virus.
Certaines quipes ont galement
utilis le bacille de Calmette et Gurin (BCG), modifi pour exprimer les
protines Nef, Gag, ou Env : cette
bactrie serait susceptible dinduire
une immunit muqueuse long
terme, aspect trs intressant tant
donn que la contamination par le
VIH se fait essentiellement au niveau
des muqueuses, vaginale ou rectale
(en dehors de la contamination par
voie sanguine). Il a dailleurs t
montr que la prsence dimmunoglobulines de type A (IgA) au niveau
de ces muqueuses peut limiter la dissmination virale. Les rsultats
dtudes prliminaires ralises chez
la souris avec le BCG modifi semblent prometteurs.

Faire fabriquer le vaccin

par les cellules de lhte
Une autre voie dimmunisation,
galement trs tudie dans le cas du
VIH aujourdhui, est limmunisation
gntique. Il sagit de vacciner en uti2000 - A.I.M. 62

lisant directement lADN codant

certaines squences virales (des fragments du pro-ADN issu de la transformation de lARN viral par la transcriptase inverse) de manire faire
produire par les cellules de lhte
les pitopes viraux susceptibles dinduire une rponse protectrice. Des
squences des gnes gag, nef, rev, env
ont t ainsi testes chez lanimal : la
protection obtenue, si protection il
y a, est souvent partielle, rsultat qui
peut-tre corrl la difficult de stimuler la rponse humorale avec ce
type de protocole.
Pire : des protocoles utilisant le
gne env ont permis de mettre en vidence lexistence de phnomnes de
facilitation de linfection qui pourraient tre dangereux : il sagit du
dtournement par le virus de certaines composantes de la rponse immunitaire normalement induite contre
lui, mais quil semble pouvoir utiliser pour infecter plus facilement les
cellules. Ces phnomnes ont dj t
observs pour dautres maladies, mais
sont encore assez mal compris. Les
tudes de vaccination contre le VIH
pourraient permettre de mieux comprendre ce phnomne que tout vaccin doit viter dinduire.

Des VIH attnus

Pour terminer ce tour dhorizon
des stratgies vaccinales tudies aujourdhui, nous citerons lutilisation
de virus entiers attnus. Il sagit

Finalement, la majorit des tudes

menes aujourdhui se concentrent
sur des protocoles combins, dans lesquels la premire injection est base sur de lADN viral ou de la vaccine recombinante. Des injections
de rappel comprennent les protines denveloppe seules ou associes des pseudo-particules virales
non infectieuses, drives dautres
virus.
La protection totale contre une
souche pathogne reste difficile obtenir, mais ce type de protocoles permet dlargir la rponse immunitaire
induite et surtout de prolonger dans
le temps la rponse spcifique contre
les antignes viraux en limitant la rponse induite contre les vecteurs
dimmunisation. De plus, linnocuit
de ces prparations en fait un matriel de choix pour la vaccination, ce
qui nest pas compltement dmontr dans le cas des virus VIH ou VIS
attnus utiliss dans certains cas.

Le singe, seul et
mdiocre modle
La mise au point dun vaccin
ncessite ltude de modles animaux. Dans le cas des virus du
sida, les modles les plus tudis
sont les primates : le chimpanz
et surtout le macaque. En effet, le
virus de limmunodficience simienne (VIS) infecte les macaques
en provoquant la mme maladie
que le VIH chez lHomme. Mais il
sagit dun modle coteux et trs
imparfait.
Quelques quipes travaillent
aussi sur le modle du chat infect
par le virus de limmunodficience
fline (VIF).

En conclusion, la recherche
dun vaccin contre le VIH avance,
comme en tmoigne la multiplication des essais cliniques. Les essais
de phase I et II, sur volontaires sains,
ont permis de tester la tolrance de
plusieurs prparations et surtout
dtudier les rponses immunitaires
induites. Cependant, lessai de phase
III lanc en 1998 aux Etats-Unis et
en Thalande reste le sujet de vives
controverses : il repose sur lutilisation dune combinaison de deux
gp120 diffrentes, type de prparation induisant certes lapparition
danticorps neutralisants, mais qui
na jamais permis de protger compltement la plupart des animaux
vaccins.

Un tel essai repose une fois de

plus les questions fondamentales de
la recherche dun vaccin, restes pour
linstant sans rponse : quels paramtres mesurables de la rponse
immunitaire sont vritablement
corrls avec une protection satisfaisante de lindividu et partir de
quel degr de protection obtenu chez
lanimal peut-on passer aux tests
chez lHomme, avec une chance
relle de protger les individus les
plus exposs ?
Sophie Broche
(Laboratoire de Gntique des Virus,
Institut Cochin de Gntique
molculaire, Inserm, Paris)

Appel aux volontaires

En France, les tudes cliniques sur un vaccin contre le VIH sont coordonnes par lAgence Nationale de Recherche contre le SIDA (ANRS). Pour
avancer aussi vite que possible, les chercheurs ont besoin de volontaires
sains, dsireux de sengager avec eux dans la recherche dun vaccin en participant aux essais cliniques. Si vous tes intress(e) ou connaissez des gens
intresss, vous pouvez prendre contact avec lANRS aux coordonnes suivantes :
ANRS, 101 rue de Tolbiac, 75013 Paris (Tl. : 01 53 94 60 00).