Noms et prénoms 

: -Saidali Rachid

-Mourabiti Anas

Filière : SVI S3

Date : 31/12/2020

TP de Microbiologie

Plan :
 Introduction général
 Introduction d la séance
 Objectif
 Matériels
 Méthode
 Résultats
 Discussion
 Conclusion

Introduction général :

-A l’aide de la culture dans un milieu solide on va essayer de cultiver des

bactéries des différents milieux et a chaque fois on observe la quantité et la
couleur des colonies pour comprendre la croissance bactérienne.
 TP N°1 : Initiation aux manipulations microbiologiques

Objectif :
-Le transfert d’une solution vers un ou plusieurs tubes stérile est une méthode basique qu’il faut la
maitriser et pouvoir l’utiliser sans aucun problème

-Connaitre la technique de transfert des solutions vers des tubes stériles sans l’infectassions de nos
solutions.

Matériels :

-Pipette de 1ml.

-Tube contenant le milieu BHI stérile.

-Tubes stérile.

-Bec de benzène.

Méthode :

 On désinfecte notre paillasse.

 On ouvre le tube où il y a BHI, et à l’aide d’une pipette en prend 1ml de la solution, puis on
stérile le tube et on le ferme avec un bouchon de coton.
 On prend le tube stérile puis on verse le ml de BHI et on ferme le tube avec un bouchon de
coton.
  On met le tube dans l’étuve réglé à 37°C pour 24h.

Résultat :

-Après 24h on observe que le milieu BHI est claire et il n y a pas de troublement.

Discussion :

-Le troublement et un signe de croissance bactérienne, et notre solution est claire ce qui signifie que
le transfert est bien effectué.

Conclusion :

-Le transfert des solutions est une opération répétable et importante dans le domaine de la biologie
c’est pour ça il faut la maitriser et bien connaitre qu’un seul faut mouvement peut ruiner notre
opération.

TP N°2 :Micro-organisme de l’environnement
Manipulation 1 :

Objectif :

-Attirer l’attention des étudiants sur la variabilité et l’importance du monde microbien

-prendre conscience des micro-organismes qui font partie de leur environnement quotidien.

-initiation à la diversité des formes qui peuvent offrir les colonies bactériennes.
Matériel :

- 2 boites de Pétri contenants la gélose.

Méthodes :

-Prendre une boite de pétri et on l’ouvre pour 5minutes dans l’air, puis prendre l’autre boite
et l’ouvrir pour 15 minutes dans l’air.

-fermer les deux boites après le temps donné et les mettre à étuve pour 24h.

Résultats :

-On observe que la deuxième boite qui est reste dans l’air pour 15 min contient beaucoup de
colonies avec des différents couleurs, nombre, et taille par rapport à la première boite qui
contient moins de nombre de colonie.

Manipulation 2 :

Objectif :

-Etudier les micro-organismes vivant qui existent dans notre corps.

Matériels :

 boite de pétri.
 Bec benzène.
 Coton tige stérile.
Méthode :

-Prendre une boite de pétri et diviser la a quatre partie, dans la deuxième partie passer le petit doigt
non lave.

-Dans la première partie passer le même doigt mais cette fois après le laver a l’eau et le savon et le
sécher près de la flamme.

-Dans la troisième partie on dépose une ou deux chevaux.

-Gratter les dents à l’aide d’un coton tige stérile puis faire l’ensemencement a épuisement dans la
quatrième partie.

-Mettre la boite à l’étuve réglée de 37°C pour 24h.

Résultats :

-Après 24h, on voit que les micro-organismes donnent naissance à des colonies à la surface des
milieux gélosé, avec des différents couleurs et tailles.

Manipulation 3 :

Objectif :

-Révélateur des micro-organismes vivant dans le sol et l’eau

Matériels :

 Anse de platine.

 Boite de pétri gélosé.

  Sol.
 Eau physiologique stérile.
 Eau métallique.
 Eau de robinet.

Méthode :

-Prendre une boite de pétri et la diviser en 3 partie.

-On met l’anse de platine dans l’eau physiologique stérile puis la mettre dans le sol.et ensemencer la
surface de la boite dans la première partie en utilisant la technique de l’épuisement de l’inoculum

-On met l’anse dans l’eau du robinet puis ensemencer la surface de la boite dans la deuxième partie à
l’aide de la technique d’épuisement de l’inoculum.

-On met l’anse dans l’eau métallique puis on prélève 2 à 3 gouttes dans la troisième partie par la
méthode de l’épuisement de l’inoculum.

-Incuber la boite de pétri pendant 24h à 37°C.

Résultats :

-On observe la présence des colonies dans les trois parties de la boite ce qui signifie qu’il y a une
croissance bactérienne.

Discussion :

-Dans les trois manipulations on a observé qu’il y a une croissance bactérienne même dans des
milieux qui sont stériles ou des milieux qui sont du corps humain.

Conclusion :

-Les micro-organismes se trouve dans notre milieu et même à l’intérieur de nos corps, et les micro-
organismes qui se trouvent dans ce dernier ne sont pas dangereuse. Alors les micro-organismes
peuvent se trouver dans les milieux solide, liquide et gazeux.
 TP N°3 : Méthodes d’observation des micro-organismes

Objectif :

-observer les différentes formes de bactéries.

Apprendre à réparer des frottis fixés de bactéries.

Montrer que la coloration est très utile pour l’identification des bactéries.

Matériels :

 Culture bactérienne.
 Lames porte-objets.
 Lamelles.
 Eau physiologique.
 Microscope optique.

 Une pince.
 Anse de platine.

Méthode :

-On dépose à l’aide d’une anse une goutte d’eau physiologique stérile au milieu d’une lame porte-
objet.

-prélever aseptiquement une petite quantité d’une culture bactérienne et la délayer dans la goutte
d’eau physiologique.

-Recouvrir d’une lamelle et observer au moyen et au fort grossissement.

Résultat :

Conclusion :

-A l’aide de cette méthode on peut avoir une idée sur les bactéries ou les micro-organismes en
général, et même il y a des autres méthodes et appareils qui nous aident à observer les micro-
organismes mieux et plus claire.