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Kirane-Gacemi
Révisé le 07/06/21012
Accepté le 18/06/2012
ملخص
ٌُ فان انٍذف مه ػمهىا ٌذا،تانىظثح نهمظرٍهك انذي ٌرشاٌذ اٌرمامً بغٍاب األخطار ػهى صحرً فٍما ٌخص األ غذٌح انرً يصخٌهكي ا
جمٍغ ٌذي انؼهة ذؼزضد. انرحقق مه انىُػٍح انصحٍح نؼشزج مجمُػاخ مركُوح مه خمض ػهة تاسٌال ء ػادٌح َ مرشاتٍح فٍما تٍىٍا
ٌذا االخٍز أجزي ػه طزٌق ذحهٍم مٍكزَ تٍُنُجً كالطٍكظً نشراػح كم. فً أَل األمز انً ا خرثار االطرقزار مرثُع تاخرثار انؼقم
خَج ظٍُر وثاذاخ دقٍقح َفٍزج دَن ذغٍزاخ َاضحح نهمه. االوُاع انمزفُنُجٍح انرً نُحظد اثىاء اخرثار االطرقزار
.Bacillus قذ َجٍرىا وحُ شكم،ػهقح تانشرع َذأكٍذ ذثُؽ انظالالخ انؼاسنح
ورائج ٌذا انفحص إضافح إنً ذهك انمد.مٍشاخرثاراالطرقزار
مه تٍه األوُاع انرً ذم انرؼزف ػهٍٍا تانطزٌقح انثٍُكمٍائٍح ذُجذ خاصح
Bacillus cereus (42.50%); B. megatherium (30.40%); B. mycoides (10.73%); B. sphaericus (7.24%); B. pumilus
(4.60%) َ Brevibacillus brevis (4.53%).
ً ذؼزف بٌُكمٍائ- تكرٍزٌا ذثُغٍح- تاسٌالء- خضار مؼهثح: الكلمات المفتاحية
Résumé
Pour un consommateur de plus en plus attentif à l’absence de risques pour sa santé, quant à l’aliment qu’il
consomme, l’objectif de notre travail est de vérifier la qualité hygiénique de dix lots constitués, chacun, de cinq
boîtes de conserves de petits pois, normales et identiques entre elles. Toutes ces boîtes ont subi, dans un premier
temps, un test de stabilité suivi d’un contrôle de stérilité. Ce dernier a été réalisé par le biais d’une analyse
microbiologique classique pour la mise en culture de tous les types morphologiques observés au cours du
contrôle de stabilité. L’observation d’une microflore très abondante et variée sans modification apparente du
produit a caractérisé le test de stabilité. Les résultats de ce contrôle, ajoutés à ceux de la mise en culture et de la
confirmation de la sporulation de ces souches isolées, nous ont orientés vers le profil des Bacillus.
Parmi les espèces identifiées par méthode biochimique figurent principalement B.cereus (42.50%); B.
megatherium (30.40%); B. mycoides (10.73%); B. sphaericus (7.24%); B. pumilus (4.60%) et Brevibacillus
brevis (4.53%).
Mots clés : Conserves végétales - Petits pois- Bactéries sporulées - Identification biochimique.
Abstract
For a consumer more and more aware about the risks for his health, regarding the food he buys, the aim of this
study is to verify the hygienic quality of ten batches, each one contains five green peas cans, normal and
identical. All these cans have been submitted, at first, to stability and sterility test. This last has been conducted
with a classical microbiological study for the culture of all the morphological types observed during the stability
control. The observation of a very abundant and varied microflora without apparent modifications of the product
characterized the stability control. The results of this control, added to those of the culture and the confirmation
of sporulation directed us towards the Bacillus profile.
Among the species identified by biochemical method, we can find mainly B. cereus (42. 50%); B. megatherium
(30.40%); B. mycoides (10.73%); B. sphaericus (7. 24%); B. pumilus (4.60%) and Brevibacillus brevis
(4.53%).
©UBMA - 2012
Rev. Sci. Technol., Synthèse 25 : 131- 139 (2012) F. Guech-Lamari et D. Kirane-Gacemi
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Rev. Sci. Technol., Synthèse 25 : 131- 139 (2012) F. Guech-Lamari et D. Kirane-Gacemi
- La mobilité et le type respiratoire ont été Ces valeurs prouvent qu’il n’y a pas eu
recherchés respectivement sur milieu mannitol d’acidification c'est-à-dire pas de « flat-sour».
mobilité par piqûre centrale et sur gélose Ceci nous a permis d’écarter les
profonde viande-foie en vrille à l’aide d’une microorganismes responsables de ce type
pipette Pasteur boutonnée. d’altération qui est dû principalement aux
- La mise en évidence de la sporulation a été bactéries anaérobies facultatives thermophiles
réalisée par un test de thermo résistance à 80°C dont Geobacillus stearothermophilus [14] et B.
pendant 10 minutes sur bouillon nutritif avec et coagulans. Ce dernier est un thermophile
sans sulfate de manganèse à 0.004% à 30°C facultatif qui ne se manifeste que dans les
pendant 24h, puis d’une observation conserves à pH acide inférieur à 4.5.
microscopique après coloration de Gram. Les bactéries sporulées thermophiles sont
reconnues comme étant la cause principale des
Caractères biochimiques altérations des conserves alimentaires [15]. De
même, aucun fuitage n’est apparu ; le papier
Les galeries API 20E ont été utilisées pour buvard sur lequel ont été déposées ces boîtes de
l’étude des caractères biochimiques. conserve au cours de l’incubation, est resté sans
L'exploitation des résultats a été faite suivant tache.
une méthode probabiliste numérisée. La base de Aucun bombage n’a été détecté ; on observe
données est fournie sous la forme d'un tableau également l’absence de couleur, d’odeurs
donnant, pour chaque taxon et pour chaque putride, butyrique et de production d’H2S.
caractère, sa probabilité d'être positif [10]. Dans les conserves des légumes à pH supérieur
Pour les calculs à effectuer, en vue, de à 4.5, comme les petits pois, le bombage (H2,
l’identification probabiliste de chacune des CO2) avec production H2S et d’odeurs putrides
souches obtenues, nous avons eu recours à la ainsi que le bombage sans production d’H2S
matrice d’identification des Bacillus selon la suivi d’odeurs butyriques sont l’œuvre de
galerie API 20E établie par Michel Cavalla en bactéries anaérobies sporulées comme les
2003, en utilisant le tableur Excel [11]. D’autres Clostridium mésophiles et thermophiles très
tests complémentaires tels que la mise en gazogènes [9, 16, 17]. Ce résultat révèle ainsi
évidence de la lécithinase, de l’amylase et de la l’inexistence de contamination de ces boîtes par
caséinase ont été réalisés respectivement sur ce type de bactéries.
gélose au jaune d’œuf, gélose à l’amidon et
gélose au lait [12]. Après coloration de Gram, nous avons observé
une population bactérienne aussi abondante que
3. RESULTATS ET DISCUSSION variée, constituée de formes bacillaires plus ou
moins longues, à l’état isolé ou regroupées en
3.1 Contrôle de stabilité chaînettes Gram+ et de quelques spores. Seule,
la présence de cette flore largement supérieure à
Pour toutes les boîtes de conserves analysées 30 bactéries sur 20 champs microscopiques met
(témoins et incubées), la présence d’amidon en doute la stabilité donc « la stérilité
révélée par un aspect farineux, prouve que les commerciale » des conserves de petits pois
petits pois n’ont pas été mis en boîtes juste étudiées [9, 18].
après la récolte [13]. L’exposition des boîtes de
conserves de petits pois, à 30°C pendant 21 3.2 Contrôle de stérilité
jours et à 55°C pendant 7 jours n’a entraîné
aucune modification visible du contenant et du Les résultats du contrôle de stabilité nous ont
contenu. orientés vers la recherche d’une microflore
L’emballage n’a subi aucune déformation, les aérobie mésophile.
caractéristiques organoleptiques et le pH ont été Après incubation à 30°C pendant 72 heures
préservés. Les résultats obtenus pour le pH sont avec une lecture toutes les 24h, certaines
en moyenne de 6.50 pour les boîtes témoins, de colonies obtenues sur gélose nutritive et caso-
6.28 et de 6.20 respectivement pour les boîtes agar, sont généralement assez grosses, mates ou
incubées à 30°C et à 55°C. Les différences granuleuses, à contours le plus souvent
moyennes de pH entre les boîtes de conserve irréguliers (Fig. 1) ou filamenteux.
incubées à 30°C et 55°C par rapport aux D’autres sont rhizoïdes et adhérentes à la
témoins sont respectivement égales à 0.22 et gélose.
0.30 donc inférieures à 0.5 unité.
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Rev. Sci. Technol., Synthèse 25 : 131- 139 (2012) F. Guech-Lamari et D. Kirane-Gacemi
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Tableau 1. Profils biochimiques des souches isolées après 48h d’incubation à 30°C.
Souches S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8
ANAEROBIOSE − − − − − − − −
ONPG − − − + + − + +
ADH + + − − + + + −
LDC − − − − − − − −
ODC − − − − − − − −
CITRATE + − − − + − + +
H2S − − − − − − − −
URE − − − − − − − −
TDA − − − − − − − −
INDOLE − − − − − − + −
VP − + + + + + + −
GELATINASE + + + − + − + +
GLUCOSE + + + + + − − +
MANNITOL − − − − + − − +
INOSITOL + + + − − − − −
SORBITOL + + − − − − − −
RHAMNOSE + − − − − − − +
SACCHAROSE + − − − + − − −
MELIBIOSE − − − − − − − +
AMYGDALINE − + − − + − − −
ARABINOSE − − − − − − − −
OXYDASE + + + − − − + +
NITRITES − + − − + − + +
MOBILITE + + + + + + + −
LECITHINASE + + + − − − − −
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Nom de la Pourcentage
Espèce identifiée
souche d’identification
S1 B. cereus 97.8
S2 B. cereus 100
S3 B. cereus 92.5
S4 B. sphaericus 69.7
S5 B. pumilus 61.9
S6 Brevibacillus brevis 44.1
S7 B. mycoides 91.1
S8 B. megatherium (2) 66.2
Notons que l’espèce B. cereus est apparue sous L’amidon a été aussi dégradé par toutes les
trois profils différents, ce qui reflète bien la souches, à l’exception de B. sphaericus,
diversité au sein d’une même espèce en ce qui Brevibacillus brevis et B. pumilus (Fig. 8).
concerne les bactéries sporulées.
Ceci est confirmé par Guinebretière et al. [20]
ainsi que Van der Auwera et al. [21] qui
indiquent que B. cereus fait partie d’un
ensemble d’espèces apparentées regroupées
sous le terme Bacillus cereus sensu lato
présentant une grande diversité phénotypique.
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