CHAPITRE 1 : HOMEOSTASIE ET PHYSIOLOGIE CELLULAIRE. 1. Lhomostasie permet aux organismes de survivre dans des environnements varis. 2.

Un organisme est un ensemble de compartiments physiquement et fonctionnellement distincts. ! 2.1. La compartimentation. ! 2.2. Les transports sont essentiels la fonction physiologique. 3. La physiologie cellulaire ou gnrale concerne les processus de rgulation ayant lieu au niveau des membranes Plan Gnral. CHAPITRE 2 : DIFFUSION ET PERMEABILITE 1. La diffusion et le dplacement de molcules en fonction dun gradient de concentration 2. La premire loi de Fick modlise la diffusion 3. La diffusion rete la quantication de mouvements molculaires dus au hasard ! 3.1. Des mouvements au hasard aux mouvements stochastiques ! 3.2. La racine carre du dplacement moyen est une bonne mesure du progrs de ! la diffusion ! 3.3. La diffusion nest pas efcace pour transporter des molcules sur une distance importante. ! 3.4. La diffusion impose des contraintes la physiologie ! 3.5. La densit des capillaires est fonction du travail mtabolique dun tissu. 4. La diffusion travers une membrane biologique ! 4.1. Modlisation mathmatique de la diffusion dune substance travers une ! ! membrane biologique. ! 4.2. Le ux net travers une membrane biologique est le rsultat de la diffrence ! entre ux entrant et ux sortant ! 4.3. La permabilit dtermine la vitesse avec laquelle un solut peut tre ! transport travers une membrane. ! 4.4. La premire loi de Fick applique la diffusion des gaz au niveau du poumon 5. Rsum. 1. La diffusion est un mouvement spontan de molcules qui se droule de la rgion la plus concentre vers une rgion moins concentre : en dautres mots, les molcules se dplacent selon leur gradient de concentration. 2. La premire loi de Fick dcrit quantitativement la diffusion et selon cette quation, le ux de molcules est directement proportionnel au gradient de concentration. 3. La diffusion rsulte uniquement des mouvements molculaires qui se font au hasard. 4. Ce caractre stochastique des mouvements molculaires a pour consquence le fait que la distance de diffusion dune molcule est proportionnelle la racine carre du temps de diffusion 5. Etant donn que la distance de diffusion est proportionnelle la racine carre du temps de diffusion, celle-ci nest effective physiologiquement que sur des distances courtes, de lordre de quelques microns. Selon ltat mtabolique des tissus, un capillaire sanguin sera donc plus ou moins loign des cellules en gnral (10 100 m selon la nature des tissus). 6. Le ux net de molcules diffusant travers une membrane est le rsultat de linux et de lefux. 7. La facilit avec laquelle une molcule diffuse travers une membrane biologique dpend des caractristiques de permabilit P de cette membrane vis--vis du solut. 8. Le produit de la permabilit dune substance par sa concentration est un ux : PO2 [O2]o est la mesure de linux de O2 dans la cellule par exemple. 9. lexception de petites molcules neutres comme loxygne, le dioxyde de carbone, leau et lthanol, la plupart des molcules importantes sur le plan physiologique ne traversent pas passivement une membrane cellulaire. 1

! CHAPITRE 2 : Appendices - Modlisation mathmatique du dplacement des molcules diffusantes. - Modlisation mathmatique de la vitesse de diffusion travers une membrane biologique. CHAPITRE 3 : PRESSION OSMOTIQUE ET MOUVEMENTS DE LEAU 1. LOsmose 2. Le transport de leau au cours de losmose tend modier les volumes 3. La pression osmotique favorise le transport net deau. ! 3.1. Limportance de la concentration des soluts ! 3.2 La tonicit et losmolarit 4. La pression osmotique et la pression hydrostatique assurent les mouvements de leau travers les membranes. ! 4.1. Lquation de Starling ! 4.2. La direction du ux de leau travers un capillaire est dtermine par la ! balance des pressions osmotiques et hydrostatiques. ! 4.3. Les protines dissoutes sont responsables de la pression collode osmotique ou oncotique dans le plasma et dans les liquides extracellulaires. ! 4.4. Ldme : un excs daccumulation de liquide 5. Seuls les soluts impermants ont des effets osmotiques permanents ! 5.1. Les changements transitoires du volume cellulaire rpondent aux changements ! de la concentration extracellulaire des soluts permants. ! 5.2. Des changements permanents du volume cellulaire sobservent en rponse ! aux changements de concentration extracellulaire de solut impermant ! 5.3. La quantit dun solut impermant intracellulaire dtermine le volume ! cellulaire 6. Rsum 1. Si une membrane est permable leau et impermable des soluts, et que la concentration de ces soluts diffre de part et dautre de cette membrane, leau passera travers la membrane du compartiment le moins concentr vers le compartiment le plus concentr. Ce mouvement deau travers une membrane semi-permable est appel osmose. 2. Les mouvements deau dorigine osmotique conduisent des modications du volume des uides. Le volume saccrot du ct de la membrane o la concentration en solut est la plus leve tandis que le volume dcrot du ct de la membrane o la concentration de solut est la plus faible. 3. Les mouvements osmotiques de leau peuvent tre envisags comme tant mus par la diffrence de pression osmotique de part et dautre de la membrane. Cette pression osmotique est proportionnelle la concentration des soluts. Leau passe du compartiment contenant une faible pression osmotique vers le compartiment o se trouve une pression osmotique plus leve. 4. La diffrence de la pression hydrostatique de part et dautre dune membrane peut galement tre responsable de mouvements deau travers cette barrire membranaire. Leau passe du compartiment o la pression hydrostatique est plus leve vers le compartiment o la pression hydrostatique est moins leve. La direction nette des mvt deau travers une barrire capillaire est contrle par la balance des pressions hydrostatiques et osmotiques. Ces mvt sont dcrits par lquation de Starling.. 5. Un solut permant peut traverser une barrire membranaire et nalement abolir son [gradient]. Ainsi, le dans la [EXT] dun solut permant ne peut provoquer quun changement transitoire du volume . Un solut impermant ne peut traverser une barrire membranaire. Il peut donc persister une de concentration de ce solut impermant de part 2 et dautre de la membrane. Ce solut impermant peut, dans ces conditions, provoquer un changement permanent du volume .

CHAPITRE 4 : LES CANAUX IONIQUES 1. Les canaux ioniques jouent un rle majeur dans le comportement lectrique des membranes 2. Diffrents types de canaux ioniques ont des proprits communes ! 2.1. Les canaux ioniques augmentent la permabilit membranaire aux ions. ! 2.2. Calcul de la vitesse des mouvements ioniques travers un canal ionique ! 2.3. Les canaux ioniques sont des protines membranaires intgrales qui forment ! les pores ! 2.4. Les canaux ioniques ont une slectivit ionique 3. Similarits structurelles des canaux ionique. ! 3.1. La structure molculaire des canaux ! 3.2. Crystallographie aux rayons X des canaux potassiques. 4. Rsum 1. Un canal ionique est une structure protique de relativement grande taille qui traverse plusieurs reprises une double couche lipidique membranaire et forme ainsi un pore hydrophile au sein dune membrane hydrophobe. Par ce pore hydrophile, une diffusion transmembranaire peut tre observe. En contrlant la permabilit membranaire aux ions, les canaux jouent un rle important dans le comportant lectrique des cellules. 2. Il existe plusieurs types distincts de canaux ioniques mais tous ont en commun certaines proprits. La fonction premire de tous ces canaux ioniques est daccrotre slectivement la permabilit de la membrane aux ions. Ainsi, un canal ionique transporte slectivement trs haute vitesse un ion particulier. Par exemple, un canal K+ peut permettre le transfert de 10 millions dions K+/sec et sera 100 1000 fois plus permable au K+ quau Na+. 3. Tous les canaux ioniques fonctionnent comme une porte qui peut tre ferme et ainsi empcher les mouvements ioniques ou ouverte permettant alors les mouvements ioniques transmembranaires. Les canaux ioniques voltage-dpendants sont ouverts par un changement de valeur du potentiel de membrane. Les canaux ioniques ligand- dpendants sont ouverts suite une liaison dun neurotransmetteur ou dun ligand sur la partie rceptrice du canal. Les canaux tirement-dpendants sont ouverts par une dformation mcanique de la membrane dans laquelle ils sont insrs. 4. Le clonage des canaux voltage-dpendants, Na+, K+ et Ca+2 ont permis de se rendre compte quil existait des squences dacides amins relativement similaires dun type lautre. Ceci indique quils sont tous membres dune super famille gnique. La structure tridimensionnelle de ces canaux sodiques et potassiques voltage-dpendants rvle quils sont tous forms de quatre domaines homologues (ou de quatre sous- units dans le cas des canaux K+), chacun de ces domaines contenant eux-mmes six hlices transmembranaires dnommes segments S1 S6. Le segment S4 reprsente le senseur de voltage. Une squence comprise entre les segments S5 et S6 forme la bouche P qui dlimite le mur interne du canal. 5. Un canal K+ bactrien (KcsA) a t cristallis donnant ainsi une ide de la structure dtaille par cristallographie aux rayons X. Ce canal est un ttramre compos de quatre sous-units identiques formant un canal central unique. La rgion P de chacune des sous-units de KcsA contient une boucle dacides amins qui comprennent, au niveau de leur chane latrale, des groupes carbonyles. Par ailleurs, on note la prsence rgulire de trois acides amins conscutifs : une glycine, une tyrosine et encore une glycine. Les atomes dO2 de ces groupes carbonyles de la squence GYG forment donc un pore dont le diamtre est optimal en ce qui concerne lion K+. Cette rgion est appele le ltre de slectivit. Ce ltre se substitue aux molcules deau hydratant lion et lnergie dinteraction entre lion et les molcules deau est rigoureusement identique celle de linteraction entre lion et le groupe GYG dans le ltre de slectivit.
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CHAPITRE 5 : CONSEQUENCES ELECTRIQUES DES GRADIENTS IONIQUES 1. La concentration ionique est diffrente de part et d'autre d'une membrane biologique. ! 1.1. Introduction ! 1.2. Lquation de Nernst 2. La valeur stable d'un potentiel de repos est tablie par de multiples ux ioniques permanents. ! 2.1. Les membranes plasmiques sont permables plusieurs ions ! 2.2. Le potentiel de repos membranaire peut tre quanti par l'quation de ! Goldman-Hodgkin-Katz. ! 2.3. Un ion permant son potentiel d'quilibre lectrochimique ne doit pas entrer ! en ligne de compte dans l'quation de Goldman, Hodgkin et Katz. ! 2.4. L'quation de Nernst constitue un cas particulier de l'quation de Goldman, ! Hodgkin et Katz ! 2.5. La cellule peut modier la vaLeur de son potentiel de membrane par une ! modication slective de sa permabilit certains ions. 3. L'effet Donnan est une menace osmotique vis--vis des cellules vivantes 4. Rsum 1. Les ions biologiquement importants (Na+, Cl-, K+, ...) sont asymtriquement distribus de part et d'autre d'une membrane biologique. Cette situation est la base de lexistence dun gradient de concentration pour chacun de ces ions prsents de part et d'autre de cette membrane. 2. Les mouvements des ions (qui portent une charge lectrique) travers une membrane modient le potentiel lectrique de cette membrane. 3. Si une cellule est permable slectivement un seul type ionique, le gradient de concentration de cet ion favorise alors une diffusion de cet ion travers la membrane. Aprs un temps relativement court, les mouvements ioniques ainsi gnrs par la diffusion vont crer un potentiel lectrique de part et d'autre de la membrane. Ce potentiel lectrique va s'opposer la diffusion de cet ion travers la membrane. Le potentiel de membrane peut arriver une valeur qui contrebalancera exactement la diffusion ionique travers la membrane. On aura atteint le potentiel d'quilibre lectrochimique de l'ion. Au potentiel d'quilibre ou potentiel lectrochimique d'un ion particulier, il n'existe plus de ux net d'ions travers la membrane. 4. Le potentiel d'quilibre lectrochimique d'un ion peut tre calcul en utilisant l'quation de Nernst pour autant que les concentrations de cet ion de part et d'autre de la membrane soient connues. Le potentiel d'quilibre d'un ion est galement appel potentiel Nernst. 5. En pratique cependant, une membrane cellulaire est permable plusieurs types ioniques en mme temps. Chacun de ces types ioniques possde un ux net travers la membrane. Le potentiel de repos membranaire d'une cellule l'quilibre est atteint lorsque tous les ux ioniques sont contrebalancs l'un par rapport l'autre. 6. Le potentiel de repos membranaire d'une cellule peut tre calcul par l'quation de Goldman, Hodgkin et Katz pour autant que les concentrations des ions de part et d'autre de la membrane soient connues ainsi que les permabilits relatives de la membrane ces ions. 7. Une cellule peut modier son potentiel de membrane en contrlant les permabilits relatives de sa membrane aux ions, notamment au sodium, au potassium et au chlore. 8. A l'intrieur de la cellule, la prsence de macromolcules impermantes et charges ngativement la plupart du temps donne naissance l'effet Donnan. Cet effet Donnan a des consquences sur le plan osmotique. Si l'effet Donnan n'est pas contrebalanc, la cellule peut voir son volume cellulaire augmenter dans des proportions incompatibles avec sa survie. L'effet Donnan est contrebalanc par les cellules qui rendent impermant un cation extracellulaire, le sodium. Cet ion est rendu impermant grce la fermeture quasi permanente des canaux sodiques et grce un systme de transport rapide qui expulse les ions sodium hors de la cellule aussi vite qu'ils aient pu y rentrer. Ce transport actif de sodium 4 est ralis par une pompe consommant de l'ATP dont le fonctionnement sera voqu ultrieurement.

! CHAPITRE 5 : Appendices 1. Les mouvements ioniques associs ltablissement du potentiel de membrane ne modient pas signicativement les concentrations intracellulaires. 2. Rappels lmentaires dlectricit et sur la thorie des circuits ! 2.1. On peut modliser la membrane comme un circuit lectrique. ! 2.2. Dnition des paramtres lectriques ! ! 2.2.1. Le potentiel lectrique et la diffrence de potentiel! ! ! 2.2.2. Le courant ! ! 2.2.3. Les rsistances et les conductances ! ! 2.2.4. La capacit ! 2.3. Le ux de courant dans les circuits simples. ! ! 2.3.1. La premire loi de Kirchhoff concerne le courant ! ! 2.3.2. La seconde loi de Kirchhoff concerne le voltage ! ! 2.3.3. Circuit ayant une batterie et une rsistance en parallle ! ! 2.3.4. Circuit ayant une batterie et une capacit en parallle CHAPITRE 6 : LES PROPRIETES ELECTRIQUES PASSIVES DES MEMBRANES 1. Les proprits lectriques passives de la membrane inuencent la valeur du potentiel de membrane 2. Le circuit lectrique modlisant une membrane excitable contient la fois une rsistance et une capacit en parallle. ! 2.1. La conductance membranaire est tablie par louverture des canaux ioniques ! 2.2. La capacit rete la capacit de la membrane sparer les charges 3. La relation entre les modications de courant ou de voltage la membrane est linaire. 4. La capacit membranaire inuence la vitesse de modication des voltages membranaires. ! 4.1. Louverture dun canal provoque des courants ioniques et de capacit. ! 4.2. Le caractre exponentiel des changements de potentiel membranaire est ! fonction des proprits passives de la membrane. 5. Les rsistances membranaires et axoplasmiques modulent le dplacement passif des signaux lectriques subliminaux ! 5.1. La diminution des potentiels subliminaux en fonction de la distance peut tre ! comprise en analysant les proprits passives des membranes ! 5.2. La constante de longueur est la mesure permettant de connatre la distance ! laquelle un stimulus est encore dtectable par rapport au site de stimulation 6. Rsum 1. Les proprits lectriques passives des cellules dcrivent en fait les proprits membranaires qui sont constantes un potentiel de repos stable. Ces proprits lectriques passives qui sont observes dans tous les types cellulaires recouvrent trois proprits distinctes mais interdpendantes : ! a) la rsistance membranaire ! b) la capacit membranaire ! c) la rsistance INT le long des prolongements ns (la rsistance axoplasmique) 2. La membrane cellulaire est quivalente sur le plan lectrique une capacit connecte en parallle une rsistance ainsi qu une batterie. 3. Les canaux ioniques se comportent en termes lectriques comme des conducteurs ou des rsisteurs (inverse de conducteurs). Le ux de courant travers un canal ouvert possde un comportement ohmique : il obit la loi dOhm. 4. La membrane peut tre considre comme une capacit car la double couche lipidique agit comme un isolateur lectrique; cet isolateur permet aux charges de signes contraires de saccumuler la surface de la membrane. La capacit est la mesure de la quantit de charge 5 qui peut ainsi tre spare par la membrane par unit de surface membranaire. Toutes les membranes plasmiques ont une capacit voisine d1 farad/cm2.

5. Lorsque les courants ioniques passent travers des canaux ouverts, la capacit membranaire provoque une modication graduelle du potentiel de membrane. En dautres termes, la modication du potentiel de membrane est graduelle lorsquun courant ionique traverse un canal suite la prsence de cette capacit membranaire. En rponse une impulsion de courant constant, le potentiel de membrane est ds lors modi faon exponentielle en fonction du temps vers un nouveau niveau. La constante de temps de cette courbe exponentielle est appele la constante de temps membranaire et elle est gale la capacit membranaire multiplie par la rsistance membranaire. Elle reprsente la mesure de la vitesse avec le potentiel dune membrane se modie en rponse une stimulation EXT. 6. Le dplacement passif des courants de faibles amplitudes et infrieurs la valeur du seuil de dpolarisation (voir chapitre 7), est affect par la rsistance membranaire mais galement par la rsistance axoplasmique. Lamplitude de ces signaux dcrot de manire exponentielle en fonction de la distance le long de laxone. La constante de longueur permet de mesurer la distance de propagation de ces signaux lectriques. Un accroissement de la rsistance membranaire accrot la valeur de et un accroissement de la rsistance axoplasmique diminue cette valeur de . Nous verrons que les axones accroissent la rsistance membranaire en mylinisant les axones et diminuent la rsistance axoplasmique en augmentant le diamtre axonal : un gros axone mylinis conduit un signal lectrique plus vite que petit axone non mylinis.

CHAPITRE 7 : GENERATION ET PROPAGATION DU POTENTIEL DACTION 1. Le potentiel daction est une dpolarisation rapide et transitoire de la membrane observe uniquement dans les cellules excitables. 2. La fonction des canaux ioniques est tudie par la mthode de Voltage Clamp ! 2.1. Les courants ioniques mesurs potentiel de membrane constant. ! ! 2.1.1. Technique du voltage clamp qui maintient constant un potentiel de ! ! membrane ! 2.2. Les courants ioniques sont dpendants du voltage et du temps ! 2.3. Les canaux voltage-dpendants et le voltage membranaire 3. Les canaux ioniques individuels ont deux niveaux de conductance 4. Les canaux sodiques sinactivent mme lorsque la dpolarisation est maintenue. 5. Le potentiel daction est gnr par les canaux sodiques et potassiques voltagedpendants. ! 5.1. Equivalent de circuit dcrivant le dclenchement dun potentiel daction ! 5.2. Le potentiel daction est un processus cyclique douverture et de fermeture de ! canaux ! 5.3. La priode rfractaire dpend de linactivation des canaux sodiques et de ! ! louverture des canaux potassiques ! 5.4. Les agents pharmacologiques qui modient le potentiel daction interagissent ! avec les canaux 6. La propagation du potentiel daction rsulte de circuits de courants locaux. ! 6.1. Les axones non myliniss propagent le potentiel daction de proche en ! proche. ! 6.2. La vitesse de conduction est inuence par , par et par INa ! 6.3. La myline acclre la vitesse de propagation du potentiel daction
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7. Rsum: 1. Un potentiel daction est une dpolarisation rapide et transitoire du potentiel de membrane. 2. Un potentiel daction est observable uniquement dans les neurones et les cellules excitables. Il est caractris par une augmentation rapide de la permabilit membranaire aux ions sodium. Le sodium rentre donc dans la cellule et permet la dpolarisation. Ensuite, cette permabilit sodique diminue rapidement et la permabilit potassique augmente. Du potassium sort de la cellule et permet un retour rapide de la membrane son niveau de potentiel de repos. Les permabilits membranaires au sodium et au potassium sont contrles par des canaux sodiques et potassiques voltage-dpendants. 3. Les proprits des canaux ioniques tudies par la technique du voltage-clamp permettent de mesurer des courants ioniques en fonction du temps et un potentiel de membrane constant. tant donn que les courants ioniques rsultent du passage dions travers des canaux ouverts, plusieurs proprits fonctionnelles des canaux peuvent ainsi tre tudies et dduites par lanalyse de ces courants ioniques. 4. Un voltage dpolarisant impos laxone gnre trois composants de courant individualisables au niveau des axones des cellules nerveuses : ! a) un composant indpendant du voltage et qui rsulte dun courant de dcharge ! de capacit qui a une forme linaire. ! b) un courant sodique rsultant du passage de cet ion travers les canaux ! sodiques voltage-dpendant ouverts. ! c) un courant potassique rsultant du dplacement de cet ion travers des canaux ! potassiques voltage-dpendant. 5. Les canaux sodiques voltage-dpendant souvrent trs tt au cours de la dpolarisation et ensuite, sinactivent rapidement. Les canaux potassiques souvrent moins rapidement que les canaux sodiques mais restent ouverts globalement pendant tout le temps que dure la dpolarisation (ceci tant la consquence de leur inactivation synchrone au contraire des canaux sodiques). 6. La probabilit douverture des canaux sodiques et potassiques voltage-dpendant est en relation troite avec la fois la valeur de voltage transmembranaire et le temps. 7. Un seul canal ionique peut tre tudi par la technique du patch-clamp qui est une variation de la technique du voltage clamp. La plupart des canaux ioniques ont deux niveaux de conductance: un proche de 0 lorsque le canal est ferm et un second gal qui reprsente une valeur de conductance constante lorsque le canal est ouvert. 8. Les canaux sodiques voltage-dpendants ont trois conformations possibles : une conformation active ouverte, une conformation active ferme et une conformation inactive. Au cours de la dpolarisation, on note toujours une activation rapide du canal (ce qui a pour consquence douvrir le canal) suvie par un tat inactiv (ce qui a pour consquence une fermeture du canal). 9. La propagation du potentiel daction le long des axones non myliniss est possible grce la survenue de courants locaux. La vitesse de conduction est inuence par la constante de longueur , par la constante de temps et par lintensit du courant sodique INa 10. Dans les axones myliniss, les canaux sodiques sont localiss au niveau des nuds de Ranvier. La propagation du potentiel daction dpend de circuits locaux mais la vitesse de conduction est beaucoup plus rapide que dans les axones non myliniss pour deux raisons : la rgion internodale a une constante de longueur beaucoup plus importante car cette rgion possde dune part une rsistance de membrane trs leve et dautre part, elle est caractrise par une constante de temps et de propagation faibles tant donn la valeur relativement basse de la capacit membranaire.

CHAPITRE 8 : LA DIVERSITE DES CANAUX IONIQUES 1. Diffrents types de canaux ioniques rgulent plusieurs processus cellulaires 2. Les canaux calciques voltage-dpendants modulent lentre de Ca+2 dans les cellules ! 2.1. Les courants calciques peuvent tre enregistrs en condition de voltage-clamp ! 2.2. Les bloqueurs de canaux calciques sont des agents thrapeutiques utiliss ! couramment. 3. Les canaux potassiques reprsentent un type de canal aux fonctions multiples ! 3.1. La diversit des canaux potassiques des neurones contribue la rgulation ! des trains de potentiel daction ! 3.2. Les canaux potassiques voltage-dpendant rapidement inactivs retardent le ! dclenchement du potentiel daction ! 3.3. Les canaux potassiques activs par le calcium sont ouverts par un stimulus ! dorigine intracellulaire ! 3.4. Les canaux K+ sensibles lATP sont impliqus dans la scrtion dinsuline par ! les cellules des ilots de Langerhans du pancras. 4. Les canaux ioniques ligand dpendant ! 4.1. Lactylcholine ouvre des canaux au niveau de la jonction neuromusculaire ! 4.2. Lactivit des canaux ioniques ligand-dpendants peut tre rgule par des ! seconds messagers ! 4.3. Lactivation de rcepteurs adrnergiques module lactivit des canaux ! calciques de type L au niveau du muscle cardiaque. 5 Rsum 1. Les canaux ioniques sont caractriss par leur slectivit ionique ainsi que par leur structure et leur pharmacologie. Ils sont prsents la membrane de tous les types cellulaires, les cellules excitables comme les cellules non excitables. 2. Les diffrents types de canaux ioniques jouent des rles la fois spciques et critiques dans la fonction cellulaire normale. Des anomalies de canaux peuvent provoquer des pathologies potentiellement gravissimes. 3. Des canaux calciques voltage-dpendants favorisent le dclenchement du potentiel daction. De plus, les canaux calciques peuvent inuencer un grand nombre dactivits cellulaires. En effet, le calcium est un second messager intracellulaire (voir chapitre 12). 4. Quatre types de canaux calciques voltage-dpendants peuvent tre distingus sur la base de leurs proprits physiologiques et pharmacologiques. 5. Des drogues antagonistes des canaux calciques cardiaques diminuent lentre du calcium dans la cellule musculaire cardiaque. Ces bloqueurs calciques sont utiliss ds lors pour traiter des arythmies cardiaques, une insufsance coronaire et une hypertension artrielle. 6. Il existe de trs nombreux types et sous-types de canaux potassiques. 7. Des canaux potassiques sont exprims par tous les types cellulaires et ont diverses activits. Ils ont galement une structure variable. Au niveau des neurones, les canaux potassiques contribuent la rgulation de la frquence de dcharge des potentiels daction. 8. De nombreux neurones expriment des canaux KA qui gnrent des courants potassiques transitoires sortants. Au cours dune dpolarisation, ces canaux sactivent rapidement (en quelques millisecondes) et ont besoin de plusieurs dizaines de millisecondes pour sinactiver. Dans les neurones capables de raliser des bouffes de potentiel daction, la longueur de lintervalle entre ces potentiels daction dans la bouffe est rgule par lactivit de ces canaux KA.
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9. Il existe trois sous-types de canaux potassiques activs par le Ca+2 ( conductance importante, intermdiaire et faible). Ces canaux sont ouverts en fonction de la concentration intracellulaire de Ca+2. Les canaux BKCa sont conductance importante. Les courants passant travers ces canaux favorisent la repolarisation cellulaire aprs le potentiel daction mais peuvent galement jouer un rle pour terminer une bouffe de potentiel daction. 10.Les canaux potassiques sensibles lATP sont prsents au niveau des cellules des ilots de Langerhans du pancras. Ils sont inhibs par une concentration leve dATP et sont impliqus dans la scrtion dinsuline. En cas de glycmie leve, le mtabolisme glucidique des cellules favorise la formation dATP ce qui inhibe ses canaux potassiques dpendant de lATP. Suite cette inhibition, la cellule a tendance se dpolariser, ce qui favorise louverture de canaux calciques voltage- dpendant. Laugmentation du calcium intracellulaire qui en rsulte stimule la scrtion dinsuline. 11.Les sulfonylures qui inhibent les canaux potassiques liant lATP favorisent la scrtion dinsuline. Ce sont des mdicaments utiliss dans le diabte insulino- rsistant. 12.Les canaux dpendant des ligands sont ouverts suite la liaison de ce ligand sur son rcepteur (comme par exemple le rcepteur lactylcholine). Le sous-type nicotinique de rcepteur lactylcholine est prsent la surface membranaire des muscles squelettiques au niveau de la jonction neuromusculaire o ils ralisent la jonction fonctionelle entre laxone et la bre musculaire. 13.Lactivit des canaux ioniques peut tre rgule par diffrentes voies de signalisation intracellulaire. Par exemple, les canaux calciques voltage-dpendant de type L prsents dans le muscle cardiaque sont rguls par une phosphortylation stimules les rcepteurs adrnergiques (en cas de stimulation par ladrnaline et la noradrnaline). Cette phosphorylation favorise lactivation de ces canaux et donc leur ouverture en cas de dpolarisation de la bre musculaire cardiaque avec pour consquence une augmentation de la concentration de calcium intracellulaire en cas de potentiel daction. Cette hausse de calcium intracellulaire favorise la force de contraction musculaire au niveau du coeur. CHAPITRE 9: LENERGIE DU POTENTIEL ELECTROCHIMIQUE ! ! ! ! ! ! ET LES MECANISMES DE TRANSPORT 1. Lnergie du potentiel lectrochimique est la base de tous les mcanismes de transport ! 1.1.Analogie entre lnergie du potentiel lectrochimique et lnergie lie la ! gravit. ! 1.2. Un gradient dnergie potentielle chimique donne naissance une force qui ! mobilise les molcules. ! 1.3. Un ion a un potentiel nergtique la fois lectrique et chimique. ! 1.4. Lquation de Nernst est une expression simple du potentiel lectrochimique. ! 1.5. Lnergie du potentiel lectrochimique et les mcanismes de transport. 2. Lchange chlore/bicarbonate est essentiel pour le transport du dioxyde de carbone/CO2 3. Rsum 1. Lnergie du potentiel chimique dune substance est fonction de sa concentration. Une molcule prsente dans une rgion caractrise par une concentration leve possde une nergie de potentiel chimique plus importante que cette mme molcule prsente dans une rgion de faible concentration. 2. Une diffrence dans lnergie du potentiel chimique entre deux rgions donne naissance une force chimique favorisant le mouvement de molcules en fonction du gradient de ce potentiel nergtique. Ainsi, le mouvement se fera entre une rgion ayant une nergie potentielle leve vers une rgion de potentiel moindre. 3. Lion, qui est une molcule charge lectriquement peut avoir concomitamment cette nergie de potentiel chimique une nergie de potentiel lectrique. La combinaison des nergies des potentiels chimiques et lectriques est dnie comme lnergie du potentiel lectrochimique. 9

! CHAPITRE 9 : Appendices 1. Un gradient de concentration accumule une nergie chimique potentielle responsable de mouvements molculaires. 2. Lquation de Nernst est une expression simple du potentiel lectrochimique. 3. Lquation de lchange Cl-/HCO3CHAPITRE 10 : TRANSPORT PASSIF DE SOLUTE 1. La diffusion travers une membrane biologique est limite par le caractre hydrosoluble 2. Les canaux, les transporteurs et les pompes permettent les transports travers les membranes biologiques. ! 2.1. Le transport travers les canaux est rapide ! 2.2. La densit de canaux au niveau de la membrane ! 2.3. La vitesse de transport travers un canal ouvert dpend du gradient de ! concentration 3. Les transporteurs souvrent dun seul ct de la membrane la fois ! 3.1. Les transporteurs facilitent la diffusion travers la membrane ! 3.2. Les transporteurs ont des proprits cintiques semblables celles dcrites ! pour la catalyse enzymatique. ! 3.3. Le cas du transporteur GLUT-4 4. Le transport coupl ! 4.1. Exemple de lchange sodium/proton ! 4.2. Le sodium est cotransport avec de nombreux soluts comme le glucose ou ! les acides amins. ! 4.3. Couplage nergtique au niveau des mcanismes de cotransport 5. Les changeurs Na+/calcium 190 ! 5.1. Lchange Na+/Ca+2 est rgul par diffrents mcanismes ! 5.2. La signalisation par la concentration intracellulaire de Ca+2 6. Plusieurs systmes de transport fonctionnellement coupls 7. Rsum 1. Les membranes biologiques sont faiblement permables aux substances polaires. Des transporteurs spcialiss et des pompes sont ds lors ncessaires pour favoriser le transfert de ces substances spciques travers la membrane plasmique et pour maintenir les concentrations intracellulaires de substances critiques. 2. Le premier systme membranaire autorisant une permabilit aux substances hydrophiles et/ou de poids molculaire lev est constitu par les canaux dont nous avons dj largement tudi les proprits. Les canaux sont caractriss par un nombre de turn-over. 3. Les transporteurs de substances sont des protines membranaires intgrales qui possdent des proprits cintiques semblables celles des enzymes. Cependant, contrairement aux enzymes, il ny a pas de produit form mais dans leur cas, le produit peut tre assimil un transport vectoriel dune substance travers une membrane biologique. 4. Quelques transporteurs fonctionnent simplement en augmentant la vitesse de transfert dune substance travers la membrane. Cest le cas par exemple du transporteur au glucose GLUT qui favorise le transport du glucose en fonction du gradient lectrochimique de ce dernier. Ces transports simples ralisent une diffusion facilite. Ces transporteurs ne peuvent maintenir la concentration dune substance contre leur gradient lectrochimique. 5. Certains transporteurs couplent le transport de deux substances. Ces cotransporteurs peuvent gnrer une concentration plus leve dune substance contre un gradient lectrochimique de celle-ci lorsquelle utilise dans le mme temps la dissipation delnergie en transportant une autre substance en fonction du gradient lectrochimique de cette 10 dernire. Souvent, la substance ainsi cotransporte en fonction de son gradient +. lectrochimique est le Na

6. Lchange coupl dun ion sodium et dun proton est un exemple dun cotransport lectroneutre. Ce type de transport est utilis pour expulser hors de la cellule des protons lorsque le pH intracellulaire descend en-dessous de la valeur de 7.2. Lion sodium ainsi entr dans la cellule est secondairement expuls par la pompe au sodium (voir chapitre 11). 7. Les cotransporteurs Na+/glucose SGLT qui sont exprims au niveau de la bordure en brosse des cellules pithliales intestinales et rnales jouent un rle important respectivement dans labsorption et la rabsorption du glucose soit partir de la lumire intestinale soit partir de lurine en formation. Ces cotransporteurs ralisent un transport qui nest plus lectroneutre car il existe un mouvement net de charge. Ce cotransport est donc sensible la valeur du potentiel de membrane. 8. Parmi les nombreux autres cotransporteurs, on relvera lexistence du cotransporteur Na+/ I-, Na+/acide amin et Na+/neurotransmetteur. 9. Lchangeur Na+/Ca+2 est exprim dans de nombreux types cellulaires et notamment les cellules musculaires et les neurones. Cet changeur transporte un ion calcium pour trois ions Na+. Lchangeur qui nest pas lectroneutre est donc sensible au voltage. Lnergie stocke dans le gradient lectrochimique de Na+ est utilise pour permettre cet changeur de garder une concentration intracellulaire de Ca2+ voisine de 100 nM. 10.Parmi les autres types de cotransporteurs, citons un changeur Cl-/HCO3- et lchangeur multispcique dions organiques OAT-1. 11. Les proprits (afnits pour le substrat, vitesse de changement de conformation) de certains transporteurs peuvent tre rgules par des mcanismes tels quune phosphorylation ou une dphosphorylation, une insertion membranaire. Il existe donc une adaptation du fonctionnement de ces transporteurs aux besoins physiologiques.

CHAPITRE 11 : LE TRANSPORT ACTIF 1. Le transport actif primaire ! 1.1. Trois classes dATPase sont impliques dans le transport actif dions. 2. La pompe Na+,K+-ATPase de la membrane plasmique ! 2.1. Les gradients de sodium et de potassium au niveau des membranes des ! cellules animales ! 2.2. Couplage de lhydrolyse de lATP et du cotransport sodium/potassium. ! 2.3. La pompe au sodium est lectrognique ! 2.4. La pompe sodique est la cible molculaire de substances cardiotoniques ! ! comme lOuabane ou la Digoxine 3. La signalisation intracellulaire par le calcium ! 3.1. La Ca+2 ATPase rgule les stocks intracellulaires de Ca+2 ! 3.2. La pompe calcique de la membrane plasmique. ! 3.3. Les rles des transporteurs de Ca+2 diffrent selon le type cellulaire. 4. Les autres ATPases membranaires ! 4.1. Une ATPase H+/K+ est responsable de la scrtion acide gastrique ! 4.2. Les transporteurs ABC forment une famille dATPases de type P. 5. Le transport net travers les cellules. ! 5.1. Les pithlia et le transport ! 5.2. Les diffrents pithlia possdent une spcicit fonctionnelle. ! 5.3. Les sources de Na+ pour les systmes de cotransport apicaux ! ! 5.4. Labsorption de Cl- est ralise par diffrents mcanismes. ! 5.5. Des substances peuvent tre scrtes par les pithlia ! 5.6. Les mouvements de leau et les mouvements de solut travers les pithlia

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6. Rsum 1. Certaines protines membranaires intgrales, connues sous le terme de pompe ou dATPases, utilisent lnergie libre par lhydrolyse de lATP pour transporter des soluts spciques tels que Na+, protons et Ca+2. Ce transport se fait contre les gradients lectrochimiques respectifs de ces ions. Ces transports sont dits transports actifs primaires. 2. Par molcule dATP hydrolyse, la pompe au sodium ralise lexpulsion de trois ions Na+ et limportation de deux ions K+. En exportant ainsi une charge positive chaque cycle, la pompe gnre un faible voltage do sa dnition de pompe lectrognique. Cette pompe sodique est sensible notamment des strodes cardiotoniques comme louabane ou la digoxine. 3. La pompe sodique maintient des gradients transmembranaires importants de Na+ et de K+. Ces gradients sont critiques en regard de lactivit lectrique des cellules excitables (chapitres 7 et 8) et pour permettre les transports secondairement actifs (chapitre 10). En maintenant une concentration intracellulaire faible de sodium, cette pompe joue un rle critique dans la rgulation du volume cellulaire : elle permet la cellule de se comporter comme si elle tait impermable au sodium (prvient leffet Donan). 4. La pompe au Ca+2 du rticulum sarco- ou endoplasmique (SERCA) possde une homologie de squence avec la pompe sodique. SERCA joue un rle important pour stocker le calcium dans le rticulum sarco- ou endoplasmique. Elle est implique dans la signalisation au calcium (chapitre 12). 5. Des tudes en cristallographie ont permis de dterminer que SERCA se lie 2 ions Ca2+. En outre, ces tudes ont permis de mieux comprendre le fonctionnement de SERCA au niveau molculaire. 6. La sous-unit catalytique de la pompe au sodium et lchangeur Na+/Ca+2 agissent de manire cooprative pour rguler les concentrations de sodium et de calcium au niveau du cytoplasme 7. Dautres ATPases permettent le transport dautres ions comme par exemple la H+/K+- ATPase gastrique qui secrte des protons dans la lumire de lestomac pour favoriser laction de la pepsine. 8. Les protines ABC sont impliques dans lextrusion de certains composs endognes mais galement de xnobiotiques (des substances trangres comme par exemple certains mdicaments). Ces transporteurs utilisent lnergie due lhydrolyse de lATP pour exercer leur mcanisme de transport. La protine de la rgulation de la conductance transmembranaire implique dans la pathognie de la mucoviscidose et qui se comporte, par certains gards, comme un canal chlore, est galement une protine ABC. 9. Le transport transpithlial se droule selon un mode paracellulaire ou transcellulaire. 10.Le gradient lectrochimique de sodium gnr par la pompe sodique fournit lnergie pour labsorption et la rabsorption de leau et pour un transport net (c'est--dire soit une absorption soit une scrtion) de la plupart des soluts travers les pithlia. 11.Le transport net de soluts travers un pithlium selon le mode transcellulaire requiert deux mcanismes de transports cellulaires diffrents, lun prsent au niveau de la membrane apicale et lautre prsent au niveau de la membrane basolatrale. 12.Un transport net de solut selon le mode paracellulaire dpend de la permabilit des jonctions serres entre les cellules mais galement, du jeu des pressions osmotiques et des forces lectriques existant travers lpithlium.

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CHAPITRE 12 : LES PRINCIPES DE LA SIGNALISATION CELLULAIRE 1. La signalisation chez les organismes pluricellulaires. 2. Le couple Ligand - Rcepteur. ! 2.1. Localisation des rcepteurs. ! 2.2. Le mtabolisme des rcepteurs. 3. Les seconds messagers. ! 3.1. LAMPc et les protines G. ! 3.2. Les ions calcium. ! ! 3.2.1. Vue gnrale de la signalisation calcique ! ! 3.2.2. Deux senseurs calciques bien connus : la troponine + calmoduline. ! ! 3.2.3. Rle de la membrane plasmique dans le maintien de la concentration ! ! en calcium. ! ! 3.2.4. Les rserves intracellulaires de calcium 3.3. Linositol phosphate et les lipides membranaires 3.4. La phosphorylation de protines. 3.5. La signalisation par un gaz : le NO. 3.6. Les rcepteurs intracellulaires. 4. Rsum 1. Le mcanisme de signalisation cellulaire est volutivement apparu avec les premiers organismes pluricellulaires. La signalisation cellulaire est la base volutive de la formation du systme endocrine, du systme nerveux et du systme immunitaire. Il nest donc pas tonnant que dans une certaine mesure ces systmes partagent dune part certains mcanismes de fonctionnement et dautre part, certaines molcules de signalisation. De plus il existe des inuences rciproques de ces trois systmes lun sur lautre. 2. Linteraction dun ligand (synthtique ou naturel) avec un rcepteur implique des liaisons de faible nergie et modie la structure et donc lactivit de la protine rceptrice. Les protines rceptrices sont prsentes soit au niveau membranaire (ligand hydrosoluble) soit au niveau cytoplasmique (ligand liposoluble). Les rcepteurs membranaires sont souvent arrangs dans des sous-domaines membranaires. On peut classer ces rcepteurs en quatre grands types sur la base de leur mode de transduction du signal. 3. La cellule peut moduler le nombre de rcepteurs membranaires ou cytoplasmiques prsents en modiant la vitesse de leur synthse ou de leur dgradation. Linteraction dun ligand avec un rcepteur membranaire favorise lendocytose suivie dune dgradation ou dun recyclage du rcepteur selon son type. La cellule peut sadapter la quantit de ligand prsent en ralisant une down-regulation ou une up-regulation de son nombre de rcepteurs. 4. Les rcepteurs membranaires sont associs un systme de second messager cytoplasmique. Ces messagers secondaires servent dune part transmettre le signal lintrieur du cytoplasme mais aussi amplient le signal (transduction du signal). Enn, ce systme de seconds messagers permet une intgration au niveau membranaire et cytoplasmique des diffrents signaux stimulant la cellule. 5. La concentration intracellulaire dAMPc dpend de sa formation par ladnylate cyclase et de son hydrolyse par les phosphodiestrases. LAMPc agit en stimulant une srine-thronine kinase, la PKA. Lactivit de ladnylate cyclase est module par des protines G couples du GTP. Les protines G sont des protines interrupteurs inactives sous la forme trimrique (dans le trimre, la sous unit G est inactive et lie du GDP) et sont actives par la liaison de certains ligands sur leur rcepteur membranaire. Lactivation consiste alors lchange de GDP par du GTP au niveau de la sous-unit G, avec dissociation conscutive du trimre.

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6. Le calcium est un second messager particulier en ce sens que: 1) ce sont ses variations de concentration intracellulaire qui constituent le second messager 2) le calcium entre dans la cellule par des canaux membranaires et est libr partir de stocks intracellulaires via des canaux sensibles la concentration cytoplasmique de calcium ou de canaux ouverts par InsP3; 3) le calcium interagit avec des protines senseurs comme la troponine dans le muscle ou la calmoduline implique dans de nombreuses voies de rgulation cellulaire 4) la concentration cytoplasmique de calcium dpend du fonctionnement de canaux calciques membranaires et du rticulum endo(sarco)plasmique, des PMCA et SERCA et de lchangeur Na+/Ca+2 de la membrane plasmique. 7. LInsP3 libr par hydrolyse de phospholipides membranaires par la phospholipase C active louverture de canaux calciques du rticulum endoplasmique. En outre la phospholipase C gnre aussi du diacylglycrol capable dactiver une srine-thronine kinase, la PKC. La phospholipase C est elle-mme active par des protines Gq ou des rcepteurs de type tyrosine-kinase. 8. En ajoutant un groupe phosphate sur la chane latrale des srines ou des thronines et des tyrosines, respectivement les srine/thronine kinases et les tyrosine kinases modient la fois la structure et la fonction des protines phosphoryles. Ces protines phosphoryles attirent vers elles dautres protines ayant une afnit pour les tyrosines phosphoryles ou les srines et thronines phosphoryles. Ces protines sont parfois dautres kinases qui se retrouvent ainsi actives conduisant alors une cascade de kinases. Ce mode de fonctionnement est rencontr pour un nombre lev de facteurs de croissance cellulaire. 9. Le NO est form par deux rductions de larginine catalys par les diffrentes isoformes de NO synthase. Le NO est particulier en ce sens que sa dure de vie est trs courte (quelques secondes) mais est la fois lipophile et hydrophile. Cette courte dure de vie est la consquence de son caractre hautement ractif d la prsence dun lectron non pair. Il agit via une interaction avec une guanylate cyclase rceptrice avec formation de cGMP. Il est particulirement impliqu dans la relaxation des muscles lisses vasculaires favorisant la vasodilatation. 10.Les ligands lipophiles comme les hormones strodiennes, thyrodiennes ou drives de la vitamine A circulent dans le plasma en association avec des protines de transport, traversent aisment la membrane plasmique et se lient des rcepteurs cytoplasmiques. Le rcepteur occup par le ligand peut alors tre transloqu dans le noyau et y agir comme un facteur de transcription activant ou rprimant lexpression de gnes spciques.

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