Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
L’eau
Clostridium sulfitoréducteurs
Recherche des germes pathogènes :
Les salmonelles
Les staphylocoques
Vibrio
Dénombrement des germes aérobies mésophiles
1. Dénombrement des germes de contamination
fécale:
E.coli
Principaux Milieux de Culture pour la recherche des Coliformes
Totaux et Fécaux :
-Technique :
A partir de chaque dilution décimale on porte aseptiquement 1ml dans les
tubes de BCPL et on incube à 37°C pendant (18à 24) heures.
Cette méthode est dite pré somptive
2- test de confirmation ou test de Mac-Kenzie:
la recherche des coliformes fécaux
formation
Principe Technique: Résultat positif:
d'un
anneau
rouge
utiliser la Pour chaque tube
propriété d’ E.coli positif on
de produire de ensemence:
-1ml, dans un tube
l’indole et de de BCPL, incubation
fermenter le 24h a 44°C,
lactose à 44°C. la
-1ml dans une eau production
peptoné exempte d'indole
d'indole + 3 ou 5
gouttes du réactif
de Kovacs.
Milieux solides La composition
• le désoxycolate,
Gélose au Désoxycholate inhibiteur des
à 1 %° ou gélose VRBL bactéries Gram +
• indicateur de pH: le
rouge neutre
Test de confirmation:
Incubation à 44C
pendant 24h
1-2- recherche des streptocoques fécaux:
Les streptocoques fécaux sont des bactéries
appartenant à la famille des Streptococcaceae
Trouble homogène et
Louche microbien
une pastille violette au
fond de tube
Test présomptif:
Clostridium botulinum
La Les
4. recherche
germes et le dénombrement
anaérobies sulfito- des
anaérobies sulfito-réducteurs
réducteurs: sont réalisés sans
deux buts différents:
Préparation de
l’échantillon
Résultats -- Résultat +
Régénérée la gélose
VF par ébullition au
bain-marie bouillant placer ensuite le
pendant environ 30 tube à l'étuve (à
minutes. 37°C) pendant 24
-Ensemencer lorsque heures.
le milieu est encore
liquide, vers 45°C. et
chargée
Lecture :
La présence des clostridium solfito-réducteurs est mise en évidence
par l’apparition des colonies entourées d’un halo noir, le résultat est
présenté par le nombre de spores dans 1ml de produit.
2. la recherche des germes pathogènes :
2.1 Recherche des salmonelles :
principe de dénombrement:
Bouillon au vert
La gélose Hektoen
malachite et au
chlorure de magnésium
Mode opératoire :
principe de dénombrement:
Résultat
• OMS GN à pH 8 additionné
• Wilson Blair et Heard de 1% de taurocholate
de sodium
• Incubation :
Saccharomyces cerevisiae
Principe:
Le milieu sélectif utilisé doit renfermer une substance
inhibant le développement des bactéries.
Ce milieu est la gélose glucosé à
l’oxytétracycline (OGA).
Technique :
On étale 0.1ml de la suspension mère et des dilutions décimales
de produit à analyser sur la surface de la boite de pétri contenant le
milieu sélectif (OGA) ; et l’incubation se fait à 25°C pendant 5jours
Les moisissures se présentent
en colonies ayant un aspect Résultats
velouté
Les levures se
présentent en
colonies semblables
à celles des bactéries
mais plus brillantes
et rondes.
Normes et textes réglementaires
• Limites de qualité des eaux destinées à la
consommation humaine
• Absence de samonella dans 5 lites,
• Absence d’autres germes pathogènes
• Absence de staphylocoques dans 100ml
• Absence de bactériophages fécaux dans 50 ml
• Absence de coliformes thermotolérants et de
streptocoques fécaux dans 100ml
• Germes anaérobies sulfito-reducteurs < 1/20ml
• 95% au moins des échantillons prélevés ne
doivent pas contenir de coliformes dans 100ml.