h

.O Jlnssorr, P d s , 19S9.

Cytogenetic investigations on the Anuplrehs gambiae complex in Bobo-Dioulasso

region (Burkina Faso).

ANALYSE CYTOGNTIQUE
DU COMPLEXE ANOPHELES GAMBiAE
DANS LA REGION DE BOBO-DIOULASSO (BURKINA FASO)
Y. ROBERT*, 1
. IETRXRCX**. P. CXRXEVALE*,
L. OVAZZ.S*, .\I. COLUZZI**

RGSUME. Lanalyse cytogenetique d u complese Anopheles gambiae effectufe pendant quatre

annfes consecutives clans les environs de Bobo-Dioulasso conflrme que cette rCgion est une zone
de sympatric entre An. cirubiensis et An. gumbiae. Sur pres de 3 O00 femelles semi-gravides aucun
hybride na fL6 observ6. An. gambiae reprsente environ 90 des effectifs du complexe e t An. urabiensis, 10 .,!: Sur le plan cytogCnGtique, la structure de ces d e u s espi.ces se caracterise par un
important polymorphisme. Cinq inversions chromosomiques paracentriques ont kt recenses
chez An. urabiensis et six chez An. gambiue. De lassociation de ces inwrsians e t de leurs frequentes
on peut dGduirc, sur le plan gnetique. que :

- An. cirabiensis se presente coniine une seule population ou les croisements sont alatoires.
- An. gumbiae est compos6 de d e u s populations partiellement isolks sur le plan reproductif.
Chaque ~)upulationcorrespond B une fornie chromosomique. La forme Mopti est caract6risCe
par les arrangements 2Rbc e t 2Ru : la forme Savane par ZRb.

Presque tous les individus (96 6) de Iespke An. gambiue appartiennent h line de ces d e u s
[orines chromosomiques. Les autres (1 6) pcuvent Ctre interpretfs comme des hybrides ou rccornbinants entre les d e u s formes sauf quelques cas non classds.
Les d e u s formes coesistent dans la plupart des 1ocaliti.s prospectees sauf tlans la zone rizicole
d e Ia Vall6e du Kou o An. gambiae XIopti est present seul ou presque. Cette zone de riziculture
irriguGe, Gcologiquement tres diffrente de la savane alentour. permet localement le maintien de
populations dAn. gambiue e t dAn. arabiensis chromosoniiquernent difffrenciCes [le celles des
populations de savane.
Dans le cas cldnopheles gqmbiae la fornie chromosomique Mopti domine dans les zones h
gltes larvaires productifs en saison tles pluies comme en saison seche. tandis que la forme Savane
prend lavantage l i o h les gites sont temporaires et limites B la saison des pluies.
Xok-ds : Anopheles gambiae. Anopheles urabiensis. CytogBnBtique. Ihologie. Burkina Faso.

1. Cette recherche a bCn6tlci dune aide financire du Programme spcial de recherche et

de formation pour les m:ilatlics tropicales PSUD/Banque .\Iondialc/OJIS e t de la Commission
tles Coniniuneut6s EuropCennes, D G S l I.
Antenne O R S T O J I du Centre Mura:, B. P. 111, Bobo-Dioulasso, Burkina Faso.
.Idresse ncluelle : OCEdC, O. P. 2 S 8 , Saocinde, Cameroiin.
** Islilulo di Parassilologitc. Gniucrsil di Roma u La Sapien-a D, Piar-ale Aldo .Iloro. 3 ,
00165 Roma, Ilalici.
Accept8 le 13 dicembre 19SS.
i

SUMMARY. Cytogenetic investigations vere carried out on the .-lnophelcs gctmbiae complex
(luring four cousecutive years in the area of Bobo-Dioulasso (Burkina Faso). An. gombiae anil
An. arabiensis are conllrmed to be sympatric in this zone. Out of 3,000 half-gravid females examined no hybrid was observed. This conlirnis the genetic isolation of the two sibling species.
Anopheles gombiae represents about 90 % of the speciniens collected and An. arabiensis
10 76. The cytogenetic analysis reveals t h a t both species are characterized b y a high level of
chromosomal polymorphism. Five paracentric inversions mere recorded i n An. arabiensis antl
six in An. gumbiae, T h e study of t h e associations of these inversions and of their frequeucies
s h o w that: i) An. arabiensis appears as a single population whose individuals :ire crossing at
random; ii) An. gambiae inclurlcs two populations showing partial rcprotluctive isolation.
Each of the t x o Anopheles ytrtnbiae popuiations can be referred to a chromosomal forni.
The form Mopti is characterized by arrangements 2Rhr. 2Rii; the form Savanna by 2Rb. T h e
arrangement ,Lu is nearly flsed in the Mopti Iomi. while i t shows a signitlcant lower freCpleJiC?.
in the Savanna forni.
Almost all spccimcns of An. gambiae (9ti p;I) belong to one of tlicsc chromosomal forms.
The remaining specimens (4 z ) can be interpretctl either :IS hybrids or recombinants between
the two forins or as not classified.
The karyotype analysis s h o w obvious departures from Hardy-Weinberg equilibrium if
i t is carried o u t on mised ~ n i i i p l of
e ~ the two forms. while a good azrcement with Hardy-Wcinberg
equilibrium is generally observed when lhe :nialysis is liniitetl Lo each form.
The two chromosomal forms are cocsisling i n most of tlie localities esamined with the escepLion of the central p:irt oI lhe rice-cullirolrtl :wca of Kou Ynlley where Nopti is pr:~ctic:rllyalone.
The chromosomal lorin .\IopLi is prevailing in :irc:is with non-scasonal kirval breeding places
Xvhich are produrtive i n tlie rainy senson :is \\-ell as i n thc dry season. On Lhe contrary, the SW:IIIII>I
forni is frequent where breeding places are temporory and liinitctl to the rainy season.
IGey-itwrds: .lnopheles gambirie. ;lrtopheles rrrtrbirnsis. Cytogenetic. Ecology. Burkina Fmo.

Introduction
Le complese dnopheles gambiae Giles, 1902 est probablement le plus tudie
et le plus finement analys des coinplexes despke dintrt mdical. Dans les
annees 1940 tait dej acquis qudnopheles gambiae seR.su alo prsentait une
hetrogenit dans ses capacits comme vecteur de paludisnie dans diffrentes
parties de lAfrique (De Aleillon, 1935). La dcouverte de populations stades
primaginaus halophiles sur le pourtour de 1Xfrique introduisait dautres diffrences (Ribbands, 19W). Lempli gnralis dinsecticides lors des campagnes
de lutte,antipaludique a suscit des comportements-rPponses tres variables selon
les localits (Davidson, 1956) faisant suspecter lesistence de taxons differents.
Cest en 1962 quCclata dfinitivement le taxon An. gambine s. 1. grace la mthode
des croisements avec des souches de rfrences (Daridson et Jackson, 1962 ;
Davidson, 1962). X la suite de ces dticouvertes, tles tudes de morphologie ont et
reprises avec du matriel biologique identili gin0tiquement ; elles ont nio9t1-e

ORSTQN Fonds Documentarie

!)y

_- .

Y. ROBERT e t collaborateurs

une similitude complete entre les diffrentes espkces sauf pour les especes halophiles vis-a-vis des espkces dulaquicoles (Coluzzi, 1964) ou pour certaines populations marginales (Chauret el al., 1969 ; Zahar el al., 1970). La technique niorphologique classique tait inoprante et la technique mixiologique ncessitait trop de
temps ; une nouvelle technique tait ncessaire pour dterminer les espces e t
analyser plus avant leurs inter-relations.
Ltude cytognetiqoe des clironiosomes polytniques des glandes salivaires
du quatrikme stade larvaire (Frizzi e t Holstein, 1956) et des cellules trophocytaires
de lovocyte du stade de Christophers III fin IV dbut (Coluzzi, 1968) sest
avre la plus performante e t sest gnralise. Les chromosomes des cellules
ncurricikres sont plus utiliss car ils sont rencontrs chez la, femelle adulte, ils
sont plus facilement accessibles e t ils procurent une frquence suprieure de
prCparations russies. Ces tudes chromosomiques ont permis de dfinir cytotasonomiquenient les diffrentes espkces du complexe An. gambiae (Coluzzi,
l9GG ; Coluzzi et Sahatini, 1967, 1968, 1969 ; Davidson e t Hunt, 1973).
Ces especes sont au nombre de six. An. gambiae (ancienne espece A) e t An.
cirabiensis (ancienne espce B) sont les plus anthropophiles et les meilleurs vecteurs
de paludisme, de llariose de Bancroft et darboviroses. En gnral, An. gambine
domine en zone de fort et de savane humide (Coz, 1973a). An. arabiensis est plus
zoophile et plus cxophile quAn. gambiae. Ces deus especes sont sympatriques
dans la quasi totalite de la zone afrotropicale non meridionale. .In. qcindriannrrlnfcrs
(ancienne espcce C) est strictement zoophile et est rencontr en gthiopie et dans
lEst de 1Xfrique mi.ridionale. Les larves de ces trois espcices vivent dans leau
tloucc, contrnircmcnt 1 celles dcs troi:; suivantes. Les larves d h . bructmbae (ancienne
cspcce D) vivent dans les sourccs dmu minerale de la fortit de Semlilii en Ouganda
(IYhite, 19%). Les larves d.-tri. melirs et ddn. merus vivent en eau saumbtre,
rcspecti\:cnienl sur IC littoral Ouest et Est de lAfrique. Ces trois dernieres especes
gambiae et/ou
:ont allopatriques entre elles niais sympatriques la fois avec h.
.in. crrabiensis (IVhite, 1974).
Cliacune de ces six especes est manifestement protege par dellcaccs nieCanisriies disolcment reproductif. Ces b i s m e s ne sont pas encore formellement
identifis niais certainement relatifs des composants khologiques, agissant
avant la copulation (Coluzzi el u., l9S5). Bien que la possibilit dliybridatioii
esiste dans tie nombreuses zones de sympatrie, les hybrides naturels entre ces
sis espkces sont trs rares. Les hybrides obtenus par croisements exprimentaux
sont le plus souvent viables. La sterilite est de regle seulement pour les miles
hybrides.
Les etudes effectues au Burkina Faso (ex. Haute-Volta) par Coz (1973a et c)
ont dmontr qu.-ln. gambine e t dn. arabiensis sont sympatriques dans tout le
pays et que leur frquence relative est fonction des conditions climatiques. An.
gambine domine dans la partie meridionale humide du pays, alors qu.-ln. arabiensis
est mieus reprsente dans les steppes sahliennes.
Des etudes plus recentes portant sur le polymorphisme girntique des membres
de ce complexe en associaliori avec un environnement anthropis, ont eu pour

CYTOGl?NgTIQEE D.ISOPHELES

GAJIBIAE

203

cadre le Nigeria (Coluzzi el al., l979), la Snegambie (Bryan rl al., 1952 ; Petrarca
et al., 1987) et le Nali (Tour el al., 1983). I1 a,tC montr que ltudc des inversions
chromosomiques donnait des informations importantes sur le polymorphisme
gntique des populations naturelles du complexe. I1 a aussi t montr, chez
An. gambine s. s., quune grande htrognit gCntiqne tait lie un processus
de spciation en cours et que les inversions chromosomiques en constituait u n
excellent marqueur (Coluzzi el al., 1985).
Dans la rgion de Bobo-Dioulasso la cration du primktre rizicole de la Valle
rtu Kou a boulevers le biotope originel e t a slectivement favoris comme vecteur
dn. gambiae s. 1. Cette zone constitue un paradoxe pidmiologique que lon peut
,schmatiser par : plus de piqres danophkles que dans les villages de savane
avoisinante niais moins de transmission du paludisme. Parmi les hypothkses arances pour tenter dexpliquer cette situation il a t enrisag une modification
de la structure gntique des populations de ce vecteur due aux changements
Ccologiques occasionnes par la riziculture (Robert cf al., 19S5).
Les resultats prsents dans cette tude sont obtenus partir de moustiques
rcolts de 19S1 a 19S4 et nont, jusquh present, donn lieu quh des communications (Robert el al., 1986 ; Petrarca el al., 19%).

Description de la zone dtucle

Les localits prospectes sont situes h moins de 55 km de la ville de BoboDioulasso, deusicmc ville du Burkina Faso, situe au Sud-Ouest du pays.
Le climat est caractris par lnltcrnance de deux saisons tres contrastees
qui se succhdent sans vritable transition. La saison des pluies dure de debut mai
ifin octohre avec un inasimum de pri.cipitation en aoitt. La saison scche dure
de debut novembre h fin avril. Lhumidit est particulil.rement basse cle dtlcembre
h fCvrier. Les prcipitations annuelles varient autour de 1 O00 mm.
Dcembre e t janvier sont les mois les plus frais (minima moyen de 170). 11
existe deux pics thermiques en mars (maxima moyen de 370) e t en novembre
(maxima moyen de 340). Ces pics encadrent la saison pluvieuse dont les varialions
(le temprature sont inversement proportionnelles a u s precipitations (maxima
moyen de 290 en aot).
La zone considre est une savane arboree. Elle appartient la marge sud
des savanes soudaniennes. La strate herbace est tres dense e t tres fournie ; elle
est ordinairement brille en dbut de saison scclie et repousse ds les premikres
pluies. Les cours deau permanents ou temporaires sont ordinairenic.nl bords de
grands arbres qui forment des galeries forestieres.
Lethnie majoritaire est Hobo. Lhabitat traditionnel est constitu par des
maisons parallelpipediques h murs de banco et toit de bois recouvert de banco.
On trouve aussi des maisons circulaires de type JIossi avec murs de banco et toit

V. ROBERT et collaborateurs

CYTOGl?NfiTIQUE DANOPHELES GAAIBIAE

de paille de forme conique. Depuis peu, on rencontre de plus en plus de maisons

recouvertes avec des tales ondules. Lusage des moustiquaires de lit est exceptionnel.
Les douze villages prospects en savane sont installs proximit immdiate
dun cours deau. Cinq (Desso, Kokorow, Toukouro, Samandni, et Sgure)
sont implants le long dun cours deau permanent. Un (Karankasso) est implant
en bordure dun cours deau semi-permanent qui tarit parfois en saison sche
apres une saison des pluies dficitaire. Enfin six (Bar, Dand, Kouentou, Koro,
Pala, Soumousso) sont implants en bordure de cours deau temporaires qui ne
coulent pas en saison sche ; dans les villages de Pala e t de Kro aucune eau de
surface ne subsiste en saison sche, excluant toute possibilit dexistence de gite
anophlien primaginal.
La zone rizicole de la Valle du Kou situe Q 30 km au Nord de Bobo-Dioulasso est trs particulibre. Depuis la ralisation du projet en 1970, un vaste domaine
de 1O00 ha dun seul tenant est irrigu pratiquement en permanence grce
leau dtourne dune riviere (le Kou), amene par u n large canal ciment. Deux
cycles de cultures ont lieu par an, lun, en saison des pluies de juillet novembre,
lautre, dit de contre saison n, de janvier a juin, en grande partie pendant la
saison sche. Six villages construits de toutes piPces abritent 12 000 personnes
qui sont majoritairement de lethnie Nossi. Ces villages sont nommes par un
numero dc 1 h 6 prrced des lettres V. K. (ex. : \IC4 dsigne le village Vallee
d u Iiou, numero -4). IJn septicme, I3ama, est ancien mais a t transform par la
rizikre. Dans ces villages les cases sont alignes, le plus souvent paralllpipdiques
arec des murs de banco et toit de t61e, dautres sont du type Nossi dj dcrit.
Lusage des moustiquaires de lit est Ia rgle. Contrairement ce qui est observc
en savane, le gros btail, tel que les bocufs dc labour, passe la nuit lintrieur
des villages de rizierc, dans la cour des habitations.

effectues selon la technique de Hunt (1973), utilisant line coloration lorcine

actolactique. La lecture des squences de bande des chromosomes polytkniques
a t faite au microscope contraste de phase suivant la nomenclature de Coluzzi
e al. (1979). Chacun des trois chromosomes est dsign par un numro. Le chromosome 1 est lhtrochromosome; il est tlocentrique. Les chromosomes 2 e t
3 sont autosomaux e t submtacentriques. Les bras de part et dautre du centromere sont dsigns par les lettres R ou L mis pour right )) ou left 1). Les inversions
sont dsignes par des lettres minuscules sur chaque bras. Larrangement standard
Ce mme symbole avec une notation particulire, peut
de rfrence est not
dsigner larrangement standard dune section du bras chromosomique ; par exemple 2R+ dsigne lalternative standard de linversion a du bras droit du chromosome 2. Lensemble de tous les arrangements alternatifs dune portion de bras
chromosomique constitue un systme dinversion. Ces arrangements alternatifs
sont dautre part lorigine dune srie de caryotypes exclusifs les uns des autres.

294

((

295

((

+.

Rsultats

((

Un total de 2 SS6 prparations a et exploite. Les prparations partiellement

lisibles nont pas t comptabilises.
1

DISTRIBUTION DES JIEbIBRES D U COXPLESE

Deux espces, An. gambiae et An. arabiensis, ont t rencontres. Aucun

hybride na t trouv. An. gambiae est lespbce dominante avec 58 yo des effectifs
(lablean I). An. arabiensis est present dans presque tous les chantillons mais
jamais dans des proportions suprieures 1/4$es effectifs du complexe. En rizire
An. arabiensis est mieux reprsent (14,6 04 des effectifs du complexe) quen savane
(6,15 /o). Dans la zone rizicole An. nrabiensis est relativement mieux reprsent

Matriel et mthodes
Toutes les analyses cytogntiques ont t conduites partir de femelles
semi-gravides prleves dans les habitations. Une premikr? mthode de collecte
a consist rcolter les moustiques le matin, de faon non traumatique avec un
aspirateur spcial dcrit par Coluzzi e t Petrarca (1973), puis les maintenir dans
de bonnes conditions jusquau stade semi-gravide. Une seconde mthode, base
sur la pulvrisation dinsecticide non rmanent effet (( knock down P entre 15 heures
et IS heures a t plus employe car elle a procur un meilleur rendement e t un
pourcentage suprieur de prparations esploitables. Quelle que soit la methode, les
chromosomes ont t fixs dans du Carnoy (1/4 acide actique glacial, 314 ethanol
absolu) soit rn y plongeant le moustique entier, soit seulement les ovaires. Une
fois fixs les prlkvements ont et conservs 24 heures temperature ambiante
puis B - 200 o h ils peuvent attendre plusieurs mois. Les prparat:ons ont t

- IDENTIFICATION ET

TABLEAU
I. - Appartenance spcifique des individus, du complexe Anopheles
gambiae, rcoltes dans Ia rizire de la Valle du Kou et dans la savane alentour,
rgion de Bobo Dioulasso, de 1981 h 1954.
Species identification of the members of the Anopheles gambiae complex collected
in the Kou Valley rice-fields and in neighbouring savanna areas of the BoboDioulasso region, 1981 t o 1954.
i

Biotope

An. gambiae
N

An. arabiensis

Total

06

or

6,5
14,6

894
1992

11,99

2 SSG

Savane
Rizire

1501

839

93,85

85,39

55
391

Total

2 540

ss,o1

346

,o

.-.

- . .

f
V. ROBERT et collaborateurs

296

CYTOGBNTIQUED 'ANOPIIELES

- LE POLYMORPHISME

'
i

dans les villages de la priphrie (16,2 %) que dans ceux du centre (3,6 yo). I1
est aussi significativement mieux reprsente dans des gtes de repos tels que les
poulaillers plutdt que les chambres B coucher : V K 6 les 24 e t 25 septembre 1981.
An. arabiensis reprsentait 34,5 % (100/290)dans les chambres e t 62,l % (59/95)
dans deux poulaillers abandonns dans la cour des maisons prospectes
(x' = 21,4 - P << 0,001).
2

GA.l;lBIAE

297

.!

CHROMOSOMIQUE D'An; arabiensis

F

Pour le bras 2 R cinq inversions ont t observes : a, b, c, dl et f (pg. 1);

elles forment les arrangements a, b, bc, d1 e t bf. Ces arrangements appartiennent
B trois Systemes d'inversions qui concernent chacun des rgions diffrentes du
chromosome :

- 2Ra : avec les arrangementsf

- 2Rb : avec les arrangements+
- 2Rd' : avec les arrangementsf

a e t bf ;
b, b, bc et bf :
d', d1 e t bf.
a,

E
-!-

.
z

.=
4

.c

+
i:

+
Pour ces trois Systemes les frquences des arrangements observes en savane
e t en rizire sont comparables (tableau I I ) . Pour le Systeme 2Ra l'arrangement
standard est le plus frquent (85,l %), suivi de I'invers'a alors que bf est rare.
Pour le Systeme 2Rb l'invers b est IC, plus frquent (74,6%), suivi de bc (23,l yo);
les arrangements standard et bf sont rares. Pour le systme 2Rd1 le standard
est trhs majoritaire et l'invers d peu frquent. Les principaux arrangements
observs sur la totalit d u bras chromosomique 2R sont, par ordre d'importance
numrique dcroissant : b, bc e t ab. I1 existe galement des chromosomes abc,
bd', a, dl e t bf.

c
C

.-C

".f

.
299

Y. ROBERT et collaborateurs

29s

Pour le bras 313 la seule inveision a a t observee. L'arrangement invers6

est mieux reprsent en savane (G7,G %) qu'en rizikre (45,G yo) (fableau I I ) ;
la diffrence est significative (P < 0,001).
Dans 1'chantillon numriquement le plus grand, qui reprsente prs de la
moiti des An. arabiensis rcolts pendant la totalit de l'tude, les frquences
des inversions observes sur 2R e t 3R ne s'cartent pas significativement de celles
calcuIes selon la loi d'Hardy-Weinberg (fableau I I I ) . I1 en va de mme pour
les autres Cchantillons statistiquement exploitables.

- Analyses gntiques pour trois Systemes d'inversion des Anopheles

arabiensis chantillonns les 24 et 25 septembre 1981 au village VK6. Les
effectifs calculs sont obtenus selon l'quilibre de Hardy-Weinberg.
Analysis of three inrersion systems of Anopheles nrabiensis collected in the village YK6 on September 24th and SJth, 1981. The expected values (Gt calculs II)
are obtained applying the Hardy-Weinberg law.

TABLEAU
I II.

Systemes
d'inversion

Caryotypes

2Ru

talni

(0)

Sfllfl

ala
Total
2Rb

+b/+b

125,90
38,30

734.10-5
1,05.10-3
3,45.10-3

2,90

O
3

0,o-i
&'i
l,l5
0,03

b /b
h /be

93

93,56

tio

5,o3

bclhc

blbf

1
7

1,50

hlibf

8,88
0.46

0;01

167

166,99

55
80

54,O-l
8132
31,04
167,OO

+aliu
ia,a

Total

(O-C)?
C

l67,OO

'b/bf

fl / u

CalculCs
(C)

167

Total

126
38
3

+c-

bc 101

:<Ra

Observs

32

167

s;= 0,004

ProbahilitC

cmo>IosoxIQrx

D':In.

51

0,94

0,040
0,146
0,628

0,030
0,003
0,087
0,167
0,398

0.634
OlOlO

S' = O,%*

0.84

0,017
0,045
0,030

s;= 0,09

O,6

Y corrig.

- LE POI.S>IOIIPHISJIE

ganibiae

Pour le liras 2L la seule inversion a a t observe (fableau 1V). L'arrangement

invers est tres frquent et reprsente 98,2 y$ des arrangements totaux. L'arrangement standard est rare ; en savane il a une frdquence de .J % e t a kt renconti 6

-.
l'
300

301

V. ROBERT et collaborateurs

3 fois I'lat honiozygole, en rizire il a montr une frquence bien plus faible
(0,06 yo).La diffrence de frquence de 2L
a entre ces deux biotopes est significative (P <O,OOl).
Pour le bras 2R six inversions ont t rencontres : j , b, c, d, u e t k ; elles forment six arrangements inverss :i, b, bc, d , u et bk.
Les arrangements j e t bk sont trs rares (respectivement 0,3 Yo e t 0,l "/o).
Ils ont t observs uniquement en savane e t pas en rizire (tableau I V ) ; cette
diffrence de frquence entre les deux biotopes est significative (P <0,01 pouf
.iet pour bk). Eu gard h leurs frquences ces deux arrangements seront ngligs
par la suite.
Les arrangements 6, bc, d, I I , e t du bras 2 R appartiennent h deux systemes
d'inversions (lablenii 11:) :

:a

.- 2 R 6 avec+ b , h e t IJC, tres polymorphe en savane e t 'en rizikrc. E n savane

l'arrangement b est le plus frquent (47,O %) suivi par
(33,3 %) et bc (18,4 %) ;
en riziere ce sont les arrangements bc (47,4 yo) et
(49,7 yo)qui sont les plus
frquents ; l'arrangement b est rare (3,O yo).Les diffrences de frquence de ces
trois arrangements entre la s a w n e et la rizire sont trs significatives (P < 0,001
pour chaque comparaison).

- 2 R d avec+ ,' d et I I , trs polymorphe en rizire. L'arrangement d est

rare, rencontrCs dans l,!) &: des arrangements totaux: il est mieux reprsent
est le plus
en savane (3,3 O $ ) qu'en riziere (1,2 "b). E n savane l'arrangement
frquent (SI, 0 ; ) suivi par I I (14,6 ",), tandis qu'en rizire les frquences sont
35,s 7; et 40,O O b , respectivement. Les dilTrences de frquence de ces trois arrangements entre la savane et la rizire sont tres significatives (P < 0,001 pour
chaque comparaison).
Pour ce:; deux systmes l'quilibre de f-Iardy-\Veinberg est vrifi en xizire
niais pas en savane (ln6leaii \').
La frquence des differents caryotypes du bras 2R ir1 lulo n'est pas non plus
alatoire. Qui:lques caryotypes polyhCtrozygotes ont une configuration cytologique
trs semblable (par esemple bcd/b et bclbd); leur discrimination, base sur la
squence des bandes des homologues, n'a pas toujours t possible lorsque la
preparation chromosomique n'tait pas excellente. L'attribution de ces caryotypes
a t dfcide partir des frequences relatives des caryotypes et des arrangements
homozygotes donc indiscutables. En savane (fableau \'I a ) les caryotypes 6lb
et h/+ d'une part, et u / + , bc/+, r i / t i , bc/u et bc/bc d'autre part, sont abondants.
Les deux caryotypes blu et b/bc sont rares, respectivement 1 e t 13 observations,
alors que leurs effectifs attendus en accord avec l'quilibre de Hardy-Weinberg
sont respectivement 114,13 et 131,O. En rizire (tableau \'I b) seuls les caryotypes u/+, u / u , b c / + , bcju et / J C / ~ Csont bien reprsentes. L'ensemble de ces observations montre l'existence dans les chantillons prlevs en savane des formes
chromosomiques (1 Savane n e t (( JIopti selon la nomenclature de Tour el al.
(1'583)reprise par Coluzzi et al. (1985). En rizire la forme JIo?fi est IRseule pr&
sente ou pre.:q
L ue.

'

))

;.-a
.e

2
*

V. ROBERL ct collaborateurs

902

Des ailalyses, en riziere e t en savane, portant sur lensemble des caryotypes

les plus frquemment rencontrs, conlirnient u n considrable dsquilibre de
Ce dsHardy-\Yeinberg si on considere ensemble les arrangements br, b, I I et
quilibre est limin ou presque si on analyse sparment les arrangements b et
dune part et bc et ZI dautre part (tableail V I I ) . Le fait que lquilibre dHardy\Veinberg nest pas tout fait vrifi dans lechantillon du biotope de rizihre
pourrait Ctre li au faible nombre de moustiques examins et/ou leffet Wahlund
(voir Wallace, 1981).

+.

1 - LES DEUS

FORMES

CHnONOSOMIQUES D A n . ganibiae s. s.

La forme Savane est caracterise essentiellement par les arrangements 2 R b

et 2La. Les arrangements 2 R d , 2Rbd et 2Rbcd appartiennent aussi cette forme
et sont beaucoup plus rares dans la zone. La forme Mopti est caractrise par le
polymorphisme 2 R b c / u e t linversion 2La fixe. Le caryotype standard appartient
aux deux formes chromosomiques (lableauz V I a ef V I b).
Lensemble des caryotypes qui nest pas assimilable ni h la forme Savane
ni la forme Mopti est constitu dindividus soit issus dun croisement entre deus
parents appartenant chacun a une des deux foimes, soit issus dau moins un gamete
recombin, soit prsentant au moins une inversion tres rare. Cet ensemble htrogene dhybrides, de recnmhinants et de non-clnsss reprsente 4 y(, de lchantillon
total d.-Ln. yambine (lableartx \I (i el V I b).
T.%BLEAU
\I a.

- Frquence (?A) des caryotypes dinversion du bras 2R in fofo

dAnopheles yambiae de la rgion de Bobo-Dioulasso, rcolts en rizihre ( N = 1 701).
Voir dans le texte les dtails concernant Ia classifcation des caryotypes.
Frequency of whole arm inversion liaryotypes of Anopheles gambiae collected in
rice-fields of the Bobo-Dinulasso region (N = 1,701). See the text for details
on assignment of the karyotypes.

TADIXAU
V I I.

Frquence (Ob) des caryotypes dinversion. du bras 2R in fofo

ddnopheles gambiae de la rgion de Bobo-Dioulasso rcoltes en savane (.U =824).
es 15 caryotypes prsentant les arrangements 2hj ?u
ont et ngliges.

Voir dans e teste les dtails concernant la classificatlon des caryotypes.

Frequencv of whole arm inversion karyotvpes of Anopheles qctmbiae collected in

savana areas of the Robo-Dioulassd region (X = 82.1): The 15 specimens
carriers of 2Rj and/or 2Rk are not included. See the text for details on assignment of karyotypes.

SAVANE

SAVANE

Larrangement PL+ a a et6 rencontr s i fois dans la forme Savane et seulement 2 fois dans la forme Mopti. Dans la forme Savane, la frquence de
cet arrangement est S,G 00 dans les villages de savane ; elle atteint un masimuni
cle 12 yo dans le village de Pala. Les trois observations homozygotes concernent
les villages de Pala, Kor0 et Dand. o la frquence de la forme Savane
est levee. Ainsi la frquence de Iarrangenient ?L+ a est lie i celle de la forme
Savane.

E n ione de savane.
Les deux formes chromosomiques coexistent dans la plupart des localits
prospectes (/g. 2 ) . Leurs frquences respectives sont largement dpendantes
des conditions cologigues locales. Dans les six villages implantes le long dun
cours deau temporaire les frquences relatives des formes Savane et Mopti sont
et 12.2 X ; dans les six autres villages implants le
respectivement de S Z , l
long dun cours deau permanent ou semi-permanent elles sont de 33,3 Yo et 64,l oh
(tableau V I I I ) . Cette diffrence de frquence dans les villages avec ou sans gtes
larvaires en saison sche est tres significative (P <: 0,0001).
La forme Savane est avantage dans les milieus les plus secs, OC les gtes
larvaires ont un caractre temporaire dpendant des pluies. Par exemple cette
forme occupe seule le village de Pala, install a flanc de cbteau et elle est majoritaire dans tous les villages qui ne sont pas implants 1 prosimit6 dun cours deau
permanent (lableau VIZI).
La forme i\Iopti est avantagee clans les milieux Iiumicies. dans les zones iiion-

,-

S. ROBERT et collaborateurs

:304

- Analyse gntique des principaus groupes de caryotypes dinversion rencontres sur 2R chez Anopheles gambiae rcolt& en savane et en riziCre.
Les effectifs calculs sont obtenus selon lquilibre de Hardy-Weinberg.
Analysis of the main 2R inversion karyotypes of Anopheles gambiae collected in
savanna and rice-fields. The espected values are obtained applying the Hardy\Yeinberg law.
TABLEAU
111.

Caryotypes

Biotope savane

Tous caryotypesbclbc
39
bc/u
9s
35
13
54
u/ u
U/+
34
11/6
1
$/i
21
153
280
G8
rotal

22,69

4142
48,Sl
128,39
18,91
44,56
117,Ll
26,2G
138,12
181,64
ti$,Ol

s: = 48S,91
Ctrryolypes Jfopli
39
bclu
9s
11/11
51
Total
211
bclhc

55,28
103,14
50,28

58,ll
77,29
3,91
103,71
65.11
2,50

115,22
1,05

s,s1

53,6

0,0001

24,38
1ti6.24

(0)

419
621
112
7
273
152
8
14
17
20
1643

0,25

419

621
253
1313

0,47
0.27

Calculs
(Cl

*-

.___
_ _ _ _-*_ -

__----,__i.--

and

4,25
0,4l
8,92
22,OO
0,lO
5,94
13,2S
0,02
15,16
467,12

403,31
64x3s

259,31
1313,oo
s; = 2,34 P

14
17

-e

Village numdro 6

(O -C)

378,SD

637,25
148,39
34,58
267,D.L
124,H
29,08
14,53
6,77
0,D
1 G43,OO
s;= 533,49 P

0,52
O,a8

211,OO
S
i = 1,05 P = 0,31

Cirr!lol!lpes snuane
21
173

Observs

cana1

1I

Biotope rizikre

Observs Calculs, (O-C)*

(0)
(Cl
C

0,0001

ll.4ilN

0,46

1,lti
o,2

--

0,13

9,93
25,15

1,67
2,G-L
15,%
1,o1
51
51,Ol
S: = 5 , 3 j P = O , O ~

20

des e t le long des cours deau permanents ou les gtes larvaires prsentent un
caractkre permanent ou subpermanent. Par exemple, dans le village de Sgur,
situ en bordure de la riviere permanente Volta Noire (fig. 2), 90 0
4des An. gambiae
appartiennent cette forme.
En zone rizicole irriguie.

La forme Mopti est pratiquement la seule prsente. La forme Savane est

tres rare au centre de la rizikre (1,3 %) e t est plus frquente en priphrie (3,3 %).
d u sein de la forme Mopti il esiste des variations de frquence des arrangements PRbc et 2 R u . h ~milieu de la saison des pluies la frquence de larrangement bc

\.... .

Pic. 2. - Carte tlc la rCgioii de Uobo-l>ioulasso c t Iri.qucncc ties tliIl6rcnts taxons (lu complcxc
h o p h e l e s grimbine par localitti. Les villages sou1igni.s sont installfs i proximiti. tlunc! riviere
pcrtnancnte.
.\lap of Boho-Uioulnsso re4otl sliowing the frequencies of the Lasa of Lhe . h i p l t e l e s gambicte
conip~esfor earl1 1oca15y.T I I ~untlcrlineri yilktgcs arc scttletl nenri)y prrlnnncllt rivers.

. .

.__

..

.... ,

,,

,.

> .

, _ .

' .

- Nombres et pourcentages (les taxons du complcse Anopheles gambiae

rcoltes en savane e t cn rizire dans la rgion de Bobo-Dioulasso.
Nrin:l)crs and perccittagcs of the Litxa o f Lhe Anopheles garnbinc coniplex
collectcd in savanna arcas and rice-fieltls of tlic Bobo-Dioulasso region.

TAnLEAU

VIII.

Villagcs

Zones

cologiqiics

Ampheh
arabiensis

A nophelcs ganihiae

I"me
Savane

Forme
Mopti

%>

Hybrides,
recoinbinants,
non classes

'%i

Total

"/o

24

'rotal
Vill?gcs
:iwc

o11

sul,-

.1)crIll:lI1cIlLcs
.-

-----

zolle

de

rizibrc

I1

'l'o t :I I

116 ::J:

Tolnl gdttral

519 li1,86

Total

28

5,70

491

29

5,58

2;22
4,84

135
(i2

5,59

17 27,43

3 5,5G
8 .12,11
8 19.05

\'illages ccntraits
\'ill:tges peripltdriqucs

12,23

3.1

2
1

80,95

(i-t,08

o,oo

o
7
o
o

30

3,70

54
i9
42

5,2ti

0,oo

0,oo
0,oo

62

43
54
19.

2G

ti35

374

6,15

894

1,26

1 :Hi0

51

:,(JO

231 97,Oti

1,68

238

3,G4

347

92,9ti

55

3,76

1 4(;Q

282

16,lG

1 7-15

1 591 93,53

59

3,47

291

34,61

1 992

1 701

=
a

53
-

55

3,28

t:

143

348

520

839

48

- z

2,59

:13,73

2x3

108
5

1ti,28

0,OO
11 20,75

rJ

4.5
73

37 4,41
-___-____--

223

~ - _

13 :<3,33
4 9 90,74
10 53,ti3

28

109
1-52

8,2G

101 7-1.81

GO

82,OX

31 Y2,!)(i
42 07,74
24 ti(i,G7

Karankasso
I<oltorow
SgiirB
Sani anden i
'~oukouro

rivires

permanentes

403

1,97
1 . 2,22
1 1,37
10 9,2G
1 20,oo

73
O8

1 )esso

9
3

44

. i

ToLal
gCnral

4 14,29

1o0
149

Zone
,I,.

O
o1

,.

T,iijt.w.u

2
4

IS.- I+dquenccs caryotypiqucs et chro~iiost~~itic~i~cs

(le la fortne Mopti (1' Anophercs yccinbicte

dans des chatlibres c i dens des aliris (poulailler almidoiitid) du village \ X 6 .

n
"xp

Karyotypic and cliroinosomal frequencies of Mopti forni of Anopheles clambine

col~cctet~
in Imirooiiis and i n empty poultry-yards i n the v i ~ ~ a \;iCti.
gc

2
I il) lope

Caryolppes
bclbc

bclu

be/+

%,

nl+

npt

(:li:itnl)rcs

'ro1:tl

23
70
12,85 . 39,ll

12
6,70

'IO

27,37

21

11,73

+/+

__

(:hroniosonics
.
.
bC

128

180

":(HW)
1'

. -I__.I

4
223

179

:35,75

.52,70

41

1l,.t5

1,77
0,'ll

m
?
z
9
d

.. -

._.

308

V. ROBERT et collaborateurs

est minimale et ceIle de larrangement u maximale et au milieu de la saison sche,

cest linverse; par exemple VKG en avril 1984, bc/bc representait 51 y(, de la
forme Nopti et en aoiit, 42 /o. Dautre part la frquence d u caryotype bc/bc est
significativement plus grande parmi les An. gambiae au repos le jour dans des
chambres coucher que parmi ceux reposant dans des poulaillers (fablenci I-..).

Discussion

;
,

La prsente analyse cytogntique sinscrit dans le cadre dune vaste tude

de la distribution des taxons du complexe An. gambiae en Afrique de lOuest
(Coluzzi et al., 1985).
Dans la rgion de Bobo-Dioulasso, la prsence dAn. gambiae et ddn. arabiensis. ainsi que la prminence numrique dAn. gambiae se confirment (Coz,
1973a). Labsence dhybride, aprs quelque 3 O00 observations, prouve lisolenien t
reproductif de ces deux taxons e t le bien fond de leur statut splcilique. Ceci
ne remet videmment pas en cause les rares cas certils dhybridation naturelle
(White, 19T1) niais confirme leurs caractres exceptionnels.
1,hornognit gnttique dAri. arabiensis observe dans In region de HoboDioulasso est en accord arec les conclusions de Coluzzi et cil. (1971)) au Sigeria
et de Tour6 el (il. (1983) au Jlali. Lhterogn6it gntique d.in. ycinibicte est due
lexistence de deux fornies chromosomiques : Savane et Mopti, rencontres
aussi au Mali (Tour el al., 1983). Lquilibre de I-Iardy-Weinberg etant respect6
au sein de chacune de ces deux formes chromosomiques, ces derniPres peuvent
donc &tre considres comme deux units panmictiques.
Les frquences relatives de ces formes chromosomiques sont lies aux conditions physico-gographiques locales. Dans les villages install& h Ixoximite cles
rivires permanentes procurant des gites primaginaux mme pendant la saison
shche, la forme 3Iopti prdominerait la faveur dun avantage adaptatif dterminant en saison sche. La prminence numrique de la forme Savane dans les
localits oh les gtes primaginaux sont temporaires et dpendants de la saison
de pluies serait liee un avantage de cette forme en saison de pluies et/ou limpossibilit pour la forme Mopti dexploiter son avantage en saison shche.
A cet gard la zone rizicole de Ia Valle du Kou constitue un bel exemple de
Iinflu ence des conditions cologiques locales sur la constitution gntique des
populations du complexe. Au centre de la rizire An. arabiensis est faiblement
reprsent et la forme ;\Iopti d.An. gnmbiae est pratiquement le seul taxon rencontr du complexe. Une situation semblable a t observe par Tour el al. (1983)
dans le delta intrieur du fleuve X g e r au Mali. Cette convergence dans la structure
gntique du complexe, observe dans deux zones gographiquement loignes
aurait pour base cologique linondation naturelle dans un cas et lirrigation
artificielle dans lautre.
Les quatre villages les plus proches de la zone rizicole sont ceux ou la frquence

CYTOGl%i?rIQUE

DANOPNELES GddIUlAE

309

dAn. gambiae Mopti est la plus leve (fig. 2 ) . Ceci pourrait indiquer quun effet
rizire n serait perceptible au moins une dizaine de ltilomktres. En fait, il nen
est rien car des tudes complementaires (A paraitre) ont montr que cet e l k t
est beaucoup plus limit dans lespace. Le fort pourcentage de la forme Mopti
observ dans ces villages est en ralit dpendant des seules caractristiques
locales du milieu.
Dans des conditions cologiques apparemment comparables celles de la
Valle du Kou, Petrarca et al. (1987) ont obserr quau Nord du Sngal cest
pn. arabiensis qui domine alors quAn. gambiae Mopti est absent. Cette information, associe a labondhce et & la prsence quasi exclusive dAn. gambiae Mopti
au centre de la rizihre de la ValleeduKou (semblant utiliser la totalit de la niche
cologique ,exploitable par le complexe), suggrent quil convient de discuter de
loccupation dun biotope en termes dadaptation et de comptition.
Les diffrences significatives des frequences de certains arrangements dAn.
arabiensis et ddn. gambiae entre la zone rizicole et la savane typique avoisinante
supposent une forte pression slective propre 6 Ia zone rizicole et/ou u n isolement
gntique des populations de rizire et de savane, cest--dire une faible dispersion
des moustiques.
En Valle du Kou les faibles indices sporozotiqucs rgulirement relevs
ganibiae s. l. capturs sur sujets humains
depuis plusieurs annes chez des .h.
(Robert et al., 1985) ne paraissent pas devoir $tre attribus A une faible susceptibilit dAn. gnmbiae Mopti Plasmodirim ltilcipnrum (Tour el al., 1OSG). Des
phnomnes thologiques ou physiologiques (driation zoophile, longvit rduite,
forte dispersion, etc.) semblent deyoir tre envisags pour expliquer cette situation
particulire. Cependant il est possible que des diffi.rences dans la biocologie
des individus de ce taxon porteurs de larrangement I I , soient impliques dans la
modification des moda1itt.s de transmission du paludisme en Vallle du Kou (Robert
el al., 1986). Quoi quil en soit, ces faibles indices sporozotiques observs chez
.-in. gambiae s. l. ne sont pas dus B une eventuelle colonisation massive de la rizihre
par An. arabiensis dont on sait quil est plus zoophile qu.ln. gambiae (Coz, 1973b).
En effet, bien que mieux reprsent en rizire quen savane, An. arabiensis reste
toujours minoritaire en rizire e t est mme pratiquement absent de la zone centrale. Toutefois rappelons que nos conclusions sont bases sur des captures diurnes
de moustiques endopliiles ;ce mode de prlvement sous estime peut-tre la densit
relle ddn. cirabiensis. Mais si tel est le cas, sa zoophilie est probablement trs
marquee diminuant dautant ses contacts arec lhomme.
Au sein de lespce An. gambiae, la coexistence de deux populations sympatriques, partiellement isoles sur le plan gntique, constitue une situation inhabituelle compatible avec un processus de speciation en cours. Lisolement gnetique
est trs probablement d lexistence de barrikres prcopulatrices de nature
thologique, entranant un vitement des partenaires sexuels potentiels qui nappartiendraient pas i la m&meforme chromosoniique (Coluzzi el al.. 1985). Tou tefois
cet isolement gntique est incomplet ; dune part le pourcentage dhybrides
entre les formes Savane et JIopti. quoique faible. nest pas nkgligcable, dautre
((

Y. ROBERT e t collaborateurs

CYTOGBNTIQUE D'BNOPHELES GAdlBIAE

part le gnotype standard sert probablement de I( pont entre les deus formcs
dans la mesure oh il appartient effectivement ces deux formes.
Le complexe An. gambiae, grce une remarquable (1 vitalit volutive )I,
constitue un modkle d'volution qui propose, aux niveaux spcifiques et subspcifiques, diffrents degrs d'isolement gentique assimilaliles aux tapes successives d'un vaste processus de speciation. On remarque cependant qu'=in. arabiensis
qui prsente un haut degr de polymorphisme, de par I'bvidence d'une Panmixie.
ne semble pas concern par un tel processus. Ce modle illustre la notion moclerne
d'espkce reposant uniquement sur Ia ralit d'un (i pool 1) gnktique commun.
Ce modle confirme qu'un isolement gntique peut s'instaurer indkpendnmmcnt
d e dinerenciation morphologique.
Cette tude s'est droule dans deux situations contrastes, la savane e t
la rizikrc, qui ont chacune d'importantes implications Qiclmiologiques sur la
transmission du paludisme. Dans ces contextes cologiquement distincts quoique
gographiquement voisins, la cytogntique a permis d'observer des diffrences
majeures dans la composition qualitatiye et quantitative des populations (le
vecteurs. Ces dinrences peuvent contribuer expliquer des. comportelnents
particuliers des vecteurs. Elles illustrent bien l'importante notion de facies Epidrniologique (Carnevale el al., 1985) et s'inskrent dans le cadre plus gi.iii.ral de
l'valuation de l'impact d'un vaste projet hydro-agricole sur l'tii,itlCniiologie
du paludisme.

DAVIDSOX
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310

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