Screening de lactivit bionmaticide de diffrents extraits deThym (Thymus zygis)

Pr. Ghizlane Echchgadda

Dpartement de Protection des Plantes et de lEnvironnement, ENA-Mekns, Maroc

Lutte chimique

Menace de pollution de lenvironnement

Augmenter les possibilits naturelles comme alternative la lutte chimique contre les nmatodes notamment les plantes effet nmaticide Plusieurs molcules actives ont t mises en vidence telles que les composs phnoliques extraites de plantes comme les Tagte, Neem, Acacia

Objectifs

Evaluation de l'activit bionmaticide de diffrents extraits de Thymus zygis contre les nmatodes galles ; Meloidogyne ssp.

Effectuer une caractrisation chimique des diffrents extraits aqueux, mthanolique, thanolique et lhuile essentielle

Tester in vitro et in vivo leffet nmaticide de ces quatre extraits

Source du matriel vgtal peuplements spontans de la rgion dAzrou

Schage lombre pendant une semaine

Extractions

Prparation des extraits

Extraction de lHE hydrodistillation pendant 3h dans un Clevenger

Stockage 4 C en prsence de Na2SO4

Extrait aqueux prpar en transfrant 100g de poudre de feuilles dans un montage reflux pendant 2h

Centrifugation 2000 rpm pendant 10 minutes et filtration

Dshydratation dans un rotavapor 105C

Stockage 4C

Extrait thanolique prpar par macration avec agitation pendant une heure la temprature ambiante de lextrait 1/5 de poudre de feuilles et dthanol 96%

Solvant limin dans un Rotavapor 60C

Extrait sec stock 4C

Extrait mthanolique prpar par un appareil Soxhlet chaud en utilisant 30g de poudre de feuilles avec le mthanol comme solvant pendant 10 h

Solvant limin dans un Rotavapor 40C

Rcupration de lextrait sec et stockage 4C

Analyse de la composition par CPG-MS

Prparation des mulsions bionmaticides

Extrait Adjuvant Concentrations utiliss Essai in vitro Extrait aqueux thanol 5% 20 g/ml 50 g/ml 100 g/ml 20 g/ml 50 g/ml 100 g/ml 20 g/ml 50 g/ml 100 g/ml 20 ppm 50 ppm 100ppm Essai in vivo 5% 7,5% 10% 5% 7,5% 10% 5% 7,5% 10% 500l/l 1ml/l 1,5ml/l

Extrait thanolique

thanol 5%

Extrait mthanolique

Mthanol 5%

Huile essentielle

Tween 80 (0,2%)

Essai Bionmaticide Essai in vitro

100 4 J2 3 rptitions
9 ml deau (10 ml pour le tmoin)

Le taux de mortalit (Tm) des juvniles J2 a t rapport 1 ml de lextrait chaque 8 heures Dispositif exprimental Tm = (100% * (Pmtr - Pmtm)) / (100- Pmtm) (Abbott, 1925) Pmtr : Pourcentage de juvniles morts en traitement. Pmtm. : Pourcentage de juvniles morts en tmoin Incubation la temprature ambiante (28 C 2) pendant 72 h

Essai in vivo

Plants de tomate, varit Daniella

Entretien jusquau moment de linoculation 2 mois et demi dge

Inoculation par 1200 J2 pour chaque plant de tomate

Application de 300 ml de la solution biocide

Plants de tomate 2 mois et demi dge

Rsultats
Composition de lHuile Essentielle

-Terpinne

Thymol

p-Cymne

Carvacrol

Chromatogramme de lHE

Composition de lextrait aqueux

RT: 4.00 - 44.15 SM: 15G RT: 14.83 100 95 90 85 80 75 70 65

Phenol, 5-methyl

NL: 1.45E8 TIC F: MS F346GC02

Benzene, 1-methyl
RT: 9.14

Relative Abundance

60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 5

12.22 6.95 10 15

17.18 26.73 20 25 Time (min) 31.04 30 35 40 42.37

Chromatogramme de lEA

Composition de lextrait thanolique

RT: 4.00 - 44.16 SM: 15G 100 95 90 85 80 75 70 65

Relative Abundance

RT: 14.98

3-Carene

NL: 7.39E7 TIC F: MS F346GC03

60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 6.96 0 5 10 15 12.22 17.19 20.04 20 24.85 25 Time (min) 29.97 30 35 40 42.48

Phenol, 2-methyl
RT: 9.89

Chromatogramme de lEEt

Composition de lextrait mthanolique

1-Cyclopropene-1-pentanol

[1,1'-Bicyclopropyl]-2-octanoic acid

Methyl 2-heptanol

Chromatogramme de lES

Essai Bionmaticide Essai in vitro

Essai in vivo

Femelle de Meloidogyne lintrieur des racines aprs une semaine dinfestation

Essai in vivo

Essai in vivo
Traitements Concentrations 500 l/l Huile Essentielle 1 ml/l 1,5 ml/l 5% Extrait Aqueux 7,5% 10% 5% Extrait Ethanolique 7,5% Indice de galles 2,3333 b 0,00 a 0,00 a* 3,125 c 1,5833 b 0,00 a 2,875 c 2,5417 b

Indice de galle

10%
5% Extrait Soxhlet 7,5% 10% Tween Mthanol Ethanol Tmoin 0,2% 5% 5% -

1,00 a
3,125 c 1,6667 b 0,00 a 3,125 a 3,250 a 3,250 a 3,2038 a

Aspect des racines avec les traitements et concentrations donnant le meilleur rsultat

Moyenne des indices de galles pour les diffrents traitements et concentrations.

Traitements Concentrations Indice de galles Poids frais racinaire
Poids de la fraiche arienne matire

Nb J2/100 g de sol

500 l/l Huile Essentielle

2,3333 b

19,5900 c

12,5500 c

89,71 c

1 ml/l
1,5 ml/l 5%

0,00 a
0,00 a 3,125 c 1,5833 b 0,00 a 2,875 c 2,5417 b 1,00 a 3,125 c 1,6667 b 0,00 a 3,125 a 3,250 a 3,250 a 3,2038 a

13,025 b
8,775 a 19,7543 c 13,3167 b 11,3417 a 18,6300 b 17,0750 b 14,7152 a 20,0123 c 14,0230 b 10,5167 a 19,7000 a 20,9500 a 19,7250 a 19,6750 a

25,5562 b
38,775 a 11,5240 c 25,3375 b 40,4000 a 12,0120 b 10,6450 b 34,2656 a 09,9436 c 27,3230 b 41,0583 a 10,8750 a 11,5000 a 11,2250 a 10,4750 a

52,8 b
11, 5 a 93,50 c 65,3 b 14,3 a 91,75 b 88,0 b 35,5 a 91,25 c 67,75 b 11,0 a 90,75 a 91, 00 a 91,25 a 95,50 a

Extrait Aqueux

7,5% 10% 5%

Extrait Ethanolique

7,5% 10% 5%

Extrait methanolique

7,5% 10%

Tween Mthanol Ethanol Tmoin

0,2% 5% 5% -

Conclusion
Nos rsultats ont dmontr les proprits nmaticides des divers extraits de T. zygis qui se rvlent prometteuses, toutefois, dautres investigations sont ncessaires pour dterminer les concentrations les plus appropries pour une meilleurs efficacit ainsi que leur faisabilit pour une utilisation en plein champs tout en valuant les aspects conomique.