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THESE
POUR LE DIPLOME D'ETAT DE DOCTEUR EN PHARMACIE
obtenu après soutenance
du Mémoire du DIPLOME d'ETUDES SPECIALISEES
de BIOLOGIE MEDICALE
(conformément décret n° 90-810 du 10 septembre 1990 modifié par arrêté du 4 juillet 2003)
DELSARTE Marie
Le 30 Avril 2010
JURY
REMERCIEMENTS
Maman et Mamée, vous qui veillerez toujours sur nous. Merci pour tout ce que vous nous avez
transmis, j’espère être aussi forte que vous l’avez été dans votre vie. Je vous aime.
Mon père et ma grand-mère, pour avoir toujours cru en moi et m’avoir soutenue dans les
moments difficiles de la vie comme des études. Merci d’être là pour nous.
Sylvain et Alice, les deux « bels », merci d’être comme vous êtes !
Nicolas, pour tout ce que tu m’apportes, merci de me donner confiance en moi. Et merci pour tes
initiations bivouac et ski de rando…
Merci à Stéphanie et Xavier, pour tous ces bons moments passés avec vous, tous ceux à venir, et
tous ces apéros du PORC ratés ! Merci aussi de votre soutient dans les coups durs. Merci Steph
pour ton incroyable capacité d’organisation de petits repas sympas, sorties culturelles, WE en
gite et vacances en tout genre ! Et merci Xav pour ta persévérance dans mon apprentissage
laborieux du babyfoot, c’est mon dernier DES à valider !
Merci à Fanny pour notre WE à Marseille toujours planifié, toujours pas fait… nos supers WE
fille, et le soutient réciproque pendant les coups de blues (girl power !!)
Merci à Claire (Lise…), tout a commencé par un coup de pinceau dans un appartement avec vue
sur le Puy de Dôme. Aujourd’hui, tu côtoies la Tour Eiffel mais ça n’a rien changé : tu gardes ta
bonne humeur et ton rire communicatif ! Je te souhaite beaucoup de bonheur.
Merci à Marina, ma binôme de choc à la fac, pour notre formulation du principe qui va
révolutionner la chimie du XXIème siècle : toujours garder les deux phases de l’ampoule à
décanter, on ne sait jamais…
Céline et Pierre, Aude et Jérôme, Julie et Olivier, Ariane et Marion « les 2 swoofs », Guillaume,
Manu, Anne Claire, Pamela, Marie Lise, Isabelle, Cécile, les Clermontois, Stéphanie, Adeline,
Anne Séverine, Audrey : pour toutes ces années passées ensemble. Et bon courage pour les
futurs thésards…
5
1. Historique............................................................................................................. 11
2. Taxonomie bactérienne........................................................................................ 12
3. Phylogénie............................................................................................................ 13
4. Genres apparentés ................................................................................................ 14
5. Bactériologie ........................................................................................................ 16
5.1. Morphologie en microscopie optique .......................................................... 16
5.2. Culture.......................................................................................................... 17
5.2.1. Conditions de culture ........................................................................... 17
5.2.2. Aspect des colonies.............................................................................. 18
6. Caractères biochimiques ...................................................................................... 19
6.1. Caractères principaux................................................................................... 19
6.1.1. Cytochrome oxydase............................................................................ 20
6.1.2. Catalase ................................................................................................ 20
6.1.3. Recherche de leucine aminopeptidase (LAP) ...................................... 21
6.1.4. Recherche de la pyrrolidonyl arylamidase (PYR) ............................... 21
6.1.5. Étude de la fermentation des sucres..................................................... 21
6.2. Caractères secondaires ................................................................................. 22
7. Les différentes espèces d’Aerococcus ................................................................. 23
7.1. Aerococcus viridans..................................................................................... 23
7.1.1. Bactériologie ........................................................................................ 24
7.1.2. Physiopathologie.................................................................................. 26
7.1.3. Aerococcus viridans et antibiotiques ................................................... 28
7.2. Aerococcus urinae ....................................................................................... 29
7.2.1. Bactériologie ........................................................................................ 29
7.2.2. Physiopathologie.................................................................................. 32
7.2.3. Aerococcus urinae et antibiotiques...................................................... 35
7.3. Aerococcus christensenii ............................................................................. 39
7.3.1. Bactériologie ........................................................................................ 39
7.3.2. Physiopathologie.................................................................................. 41
7.3.3. Aerococcus christensenii et antibiotiques............................................ 41
7.4. Aerococcus sanguinicola ............................................................................. 42
7.4.1. Bactériologie ........................................................................................ 42
7.4.2. Physiopathologie.................................................................................. 46
7.4.3. Aerococcus sanguinicola et antibiotiques............................................ 47
7.5. Aerococcus urinaehominis........................................................................... 48
7.5.1. Bactériologie ........................................................................................ 48
7.5.2. Physiopathologie.................................................................................. 51
7.5.3. Aerococcus urinaehominis et antibiotiques ......................................... 51
7.6. Aerococcus suis............................................................................................ 51
7.6.1. Bactériologie ........................................................................................ 51
7.6.2. Physiopathologie.................................................................................. 55
6
PARTIE II
MATERIEL ET METHODES ..................................................................................... 69
1. Méthodes.............................................................................................................. 70
1.1. L’examen cytobactériologique des urines (ECBU) ..................................... 70
1.1.1. Généralités ........................................................................................... 70
1.1.2. Conditions de recueil ........................................................................... 71
1.1.3. Examen cytologique............................................................................. 71
1.1.4. Mise en culture et dénombrement des colonies ................................... 72
1.1.5. Identification ........................................................................................ 73
1.1.6. Antibiogramme .................................................................................... 74
1.2. Outils taxonomiques : étude de la Superoxyde Dismutase sodA et de l’ARNr
16S ...................................................................................................................... 74
1.2.1. La superoxyde dismutase sod .............................................................. 75
1.2.2. Extraction de l’ADN bactérien ............................................................ 76
1.2.3. Amplification du gène codant la sod ................................................... 76
1.2.4. Amplification du gène codant l’ARNr 16S ......................................... 77
1.2.5. Purification, séquençage et comparaison des séquences ..................... 78
2. Matériel ................................................................................................................ 81
2.1. Les infections urinaires (IU) ........................................................................ 81
2.1.1. Infections urinaires communautaires (IUC)......................................... 81
2.1.2. Infections urinaires nosocomiales (IUN) ............................................. 81
2.1.3. Physiopathologie.................................................................................. 82
2.1.4. Clinique des infections urinaires.......................................................... 83
2.1.5. Facteurs favorisants les infections urinaires ........................................ 84
2.1.6. Traitement des infections urinaires ...................................................... 85
2.2. Patients inclus dans l’étude de cas ............................................................... 86
2.3. Observations cliniques ................................................................................. 87
PARTIE III
RESULTATS................................................................................................................ 114
PARTIE IV
DISCUSSION ............................................................................................................... 136
CONCLUSION……………………………………………………………………….157
BIBLIOGRAPHIE…………………………………………………………………...158
8
INTRODUCTION
Le genre Aerococcus a été décrit pour la première fois en 1953 par Williams, lors
d’une étude des microorganismes trouvés dans les atmosphères confinées.
Les cocci gram positif, micro-aérophiles, catalase négative, disposés en amas ou
tétrades, mis en évidence prennent le nom d’Aerococcus viridans, seule espèce du genre
à l’origine.
Au cours de ces dernières décennies, l’amélioration des méthodes de biologie
moléculaire, notamment du séquençage de l’ARN ribosomal 16S, a contribué à la
reclassification de Pediococcus urinaeequi en Aerococcus urinaeequi et à la description
de cinq nouvelles espèces : Aerococcus urinae, Aerococcus sanguinicola, Aerococcus
christensenii, Aerococcus urinaehominis et Aerococcus suis.
Nous avons donc au cours de ce travail, fait une revue des connaissances
actuelles sur les Aerococcus, au travers l’étude de la littérature et l’étude de 29 cas
d’infection, diagnostiqués au Centre Hospitalier de Cahors entre 2001 et 2009.
10
PARTIE I
LE GENRE AEROCOCCUS
11
1. HISTORIQUE
Les Aerococcus ont été décrits pour la première fois en 1953 par Williams [1].
Ces isolements ont été réalisés dans l'air ambiant de chambres de patients hospitalisés,
sur des milieux de culture sélectifs contenant du cristal violet et du tellurite de
potassium.
Les bactéries observées étaient des cocci gram positif en amas, aéro-anaérobie
facultatifs, catalase négative et produisant une α hémolyse sur gélose au sang.
La question s'est alors posée de savoir à quel genre rattacher ces cocci, notamment par
rapport aux Streptocoques viridans et au genre Pediococcus.
Bien que la bactérie ait des caractéristiques biochimiques similaires à celles des
Streptocoques, et plus particulièrement aux Entérocoques, elle était clairement différente
de ceux-ci en coloration de gram [2].
Les Aerococcus différaient également des Pediococcus de part leur aspect au
gram, leur métabolisme respiratoire (Pediococcus est une espèce micro aérophile) et leur
capacité d'acidification du milieu et de fermentation du glucose.
De plus, les bactéries isolées à partir de l'air ambiant étaient capables de croissance sur
des milieux contenant du cristal violet et du tellurite de potassium, et produisaient une α
hémolyse sur gélose au sang.
Il a donc été proposé par Williams de créer un nouveau genre, Aerococcus, avec
une espèce Aerococcus viridans.
En 1960, Deibel et son équipe mène une étude comparative sur des souches de
cocci gram positif formant des tétrades au gram: Gaffkya homari (pathogène des
homards) et Aerococcus viridans. Il considère que les cultures sont suffisamment
similaires du point de vue de leurs caractéristiques morphologiques et phénotypiques
pour être réunies au sein d'une même espèce.
Et du fait de leur relation proche avec le genre Pediococcus, il est proposé le nom de
Pediococcus homari nov. comb [3].
positive. Il propose alors que le genre Aerococcus pourrait contenir deux espèces, l'une,
Aerococcus viridans, catalase négative, et l'autre, Aerococcus catalasicus, catalase
positive [4]. Cette idée n'a jamais été officiellement reconnue par les comités chargés de
la taxonomie bactérienne.
L'espèce Aerococcus viridans est restée unique jusqu'à la mise en évidence par
Christensen, au Danemark, de bactéries proches, dans des prélèvements urinaires ou à
point de départ urinaire. Ces bactéries sont alors appelées ALO pour « Aerococcus like
organism » [6]. Celles-ci prendront le nom d’Aerococcus urinae en 1992, après
séquençage et étude phylogénétique du gène codant leur ARN 16S ribosomal (ARNr
16S) par Aguirre et Collins [7].
Depuis 1992, quatre nouvelles espèces ont été décrites dans le genre: Aerococcus
christensenii (1999), Aerococcus sanguinicola (2001), Aerococcus urinaehominis (2001)
et Aerococcus suis (2007).
Enfin, il faut noter qu’en 2005, Pediococcus urinaeequi, espèce décrite en 1986, a été
reclassée en Aerococcus urinaeequi suite à l’analyse des séquences des ARNr 16S et des
hybridations ADN-ADN réalisées.
2. TAXONOMIE BACTERIENNE
Domaine Bacteria
Phylum Firmicutes
Classe Bacilli
Ordre Lactobacillales
Famille Streptococcaceae
Genre Aerococcus
3. PHYLOGENIE
Figure 1 : Dendrogramme d’Aerococcus urinae et autres espèces gram positif catalase négative
(Source : [8])
4. GENRES APPARENTES
Les espèces des genres Streptococcus et Enterococcus sont les plus impliquées en
pathologie humaine. Mais d’autres espèces comme Abiotrophia, Aerococcus,
Alloiococcus et Gemella sont de plus en plus fréquemment rencontrées chez l’homme.
Les principales caractéristiques biochimiques et les implications en pathologie humaine
des genres apparentés à Aerococcus sont résumées dans les tableaux 2,3 et 4 suivants.
Tetra-
Alloio- Helco- Pedio- Entero- Lacto- Strepto- Vago- Globi- Abio- Leuco-
Aerococcus geno- Gemella
coccus coccus coccus coccus coccus coccus coccus catella trophia nostoc
coccus
cocci,
cocci et cocci et cocci et cocco- cocci et
très gros
Morphologie cocci cocci cocci cocci cocci cocco- cocco- cocco- cocci cocci bacilles et cocco-
cocci
bacilles bacilles bacilles pseudo- bacilles
bacilles
A. urinae, viridans,
G.haemolysans :
sanguinicola: amas, paires, paires, paires, paires,
amas paires, paires, diplocoques paires, paires, paires et
Groupement tétrades tétrades et tétrades tétrades, tétrades chainettes
G.morbillorum : chainettes chainettes et chainettes chainettes chainettes chainettes
A. christensenii: amas et amas amas et amas
chainettes
chainettes
Croissance
+ + + v + - + v - + - v
NaCl 6,5%
Test bile
v - - + + - + + v + v - v
esculine
LAP v + - + + + + + + + - + -
PYR v + + - - + + v - + + + -
Sensibilité
S S S R S S S S S S S S R
vancomycine
A. urinae,
Autres A. viridans: mobiles
R cotrimoxazole
Tableau 2 : Caractères utilisés pour différentier entre eux les cocci gram positif, catalase négatif
(Sources : d’après [9] et [10] et cette étude)
Tableau 3 : Caractéristiques phénotypiques des cocci gram positif catalase négative se divisant
suivant deux plans (Source : [8] )
16
5. BACTERIOLOGIE
En coloration de gram, les Aerococcus sont des cocci à gram positif, groupés en
tétrades ou amas, du fait de leurs divisions successives selon deux plans
perpendiculaires. Ils peuvent aussi se présenter par paires (diplocoques) ou isolément.
L’étude de la morphologie au gram a une grande importance, car elle permet de
différencier les Aerococcus (en amas) des Streptocoques viridans (en chaînette) ayant le
même aspect en culture.
A l’état frais, ce sont des cocci immobiles.
17
5.2.Culture
Les Aerococcus sont des bactéries exigeantes. Leur pousse nécessite l’utilisation
de gélose enrichie avec 5% de sang, contenant ou non des antibiotiques (type gélose
Columbia Acide Nalidixique + Colistine ANC).
Leur croissance sur gélose usuelle (type gélose d’orientation contenant des substances
chromogènes), utilisée lors de l’ensemencement des urines par exemple, est variable.
Ceci pouvant expliquer les discordances retrouvées dans certains cas entre des
hémocultures positives et des cultures d’urine négatives.
18
Les colonies d’Aerococcus sont de petite taille. Les colonies d’A. viridans sont
plus grosses (1 mm) que celles de A. urinae (0.5 mm) et des autres espèces du genre.
Sur gélose au sang de mouton, elles ont une couleur pouvant aller de blanc-
grisâtre à verdâtre et produisent une α hémolyse.
A 24 heures, les colonies d’Aerococcus ressemblent à celles des Streptocoques ou
Lactobacilles α hémolytiques.
A 48 heures, elles sont similaires à celles des Entérocoques [14].
Zhang, au cours de son rapport en 2000 de deux cas d’infection urinaire, a étudié
l’aspect des colonies de deux souches d’Aerococcus urinae et Aerococcus viridans
cultivées sur gélose avec 5% de sang de mouton et incubées à 35°C sous différentes
atmosphères [14].
A 24 heures, les diamètres des colonies d’Aerococcus urinae incubées en air
ambiant, atmosphère enrichie à 8% de CO2 et en anaérobiose étaient respectivement de
0.1, 0.5 et 0.5 mm. A 48 heures, toutes les colonies étaient plus grosses.
19
6. CARACTERES BIOCHIMIQUES
6.1.Caractères principaux
Cependant, il faut noter ici que les bases de données des systèmes commerciaux
d’identification disponibles sont incomplètes.
En effet, dans la majorité des cas, seuls les profils des espèces Aerococcus viridans et
quelquefois Aerococcus urinae sont renseignés, et certains ne sont pas assez
discriminants dans l’identification des espèces, conduisant ainsi à des identifications
erronées.
L’oxydase est une enzyme essentielle retrouvée chez toutes les bactéries
possédant une chaîne respiratoire complète.
La mise en évidence de cette oxydase est effectuée à l’aide d’une solution de
chlorhydrate de tétraméthylparaphénylène diamine qui forme un complexe violet au
contact de celle ci. Il est à noter que cette technique ne peut être utilisée que dans le cas
de culture pure.
6.1.2. Catalase
Figure 3 : Exemple de réactions colorées obtenues sur galerie API 20 Strep (bioMérieux) pour
Aerococcus urinae (Source : Centre Hospitalier de Cahors)
6.2.Caractères secondaires
A. A. A. A. A.
christensenii sanguinicola A. suis A. urinae urinaehominis viridans urinaeequi
Production de
LAP - + - + - -
PYR - + - - - +
ADH - + + - - - -
β−glucosidase - - - - V V
β−glucuronidase - + - + + V ND
Fermentation du
lactose - - - - - +
maltose - + - - + + +
mannitol - - - + - V V
ribose - - + V + V ND
saccharose - + - + + + +
thréalose - + - - - + +
7.1.Aerococcus viridans
C’est en 1950, lors d’une étude des bactéries trouvées dans les atmosphères
confinées, qu’est mis en évidence pour la première fois un coccus à gram positif α
hémolytique ressemblant à un Streptocoque.
24
7.1.1. Bactériologie
• Aspect au gram : la coloration de gram montre des cocci gram positif disposés
en tétrades, associées à des diplocoques et des petits amas. On ne note pas de
chaînettes ni de grappes [12].
Ils sont immobiles à l’état frais.
Figure 4 : Aerococcus viridans, coloration de gram (grossissement x100), GS CO2 48h (Source :
Centre Hospitalier Cahors)
1 2
Figure 5 : Aerococcus viridans, GS sous CO2 à 24h (1) et 48h (2) (Source : Centre Hospitalier de
Cahors)
Figure 6 : Colonies d’Aerococcus viridans sur GS sous CO2 à 48h (Source : Centre Hospitalier
Cahors)
A. viridans
LAP -
PYR +
Fermentation du
lactose +
maltose +
mannitol V
ribose V
saccharose +
thréalose +
Production de
ADH -
β−glucosidase V
β−glucuronidase V
7.1.2. Physiopathologie
• Chez l’animal : Aerococcus viridans est un agent commun d’infections chez les
homards (responsable de gaffkiose) et les autres crustacés [19].
• Chez l’homme :
- Endocardites et bactériémies :
- Infections urinaires :
Aerococcus viridans est également retrouvé lors d’infections urinaires chez des
patients présentant des facteurs favorisants de stase vésicale (adénome prostatique,
séquelles d’accident vasculaire cérébral) [6], [12], [22], facteurs également
retrouvés lors des infections à Aerococcus urinae. Chez ces malades, Aerococcus
viridans vient souvent se surajouter aux entérobactéries habituellement retrouvées.
Bien que Aerococcus viridans soit rarement associé à des cas graves en
pathologie humaine, il serait utile que des études plus larges soient menées afin
de mieux appréhender ses profils de résistance et d’établir un protocole
thérapeutique optimal en fonction des différents cas.
7.2.Aerococcus urinae
Aerococcus urinae a été dans un premier temps décrit par Christensen comme un
« Aerococcus like organism ALO » [6], avant qu’Aguirre et Collins prouvent, en 1992,
grâce au séquençage du gène codant son ARNr 16S, qu’il s’agissait d’une espèce
différente d’Aerococcus viridans et que le nom d’Aerococcus urinae soit proposé [7].
7.2.1. Bactériologie
• Aspect au gram : l’aspect au gram est celui de cocci gram positif disposés
en amas semblables aux Staphylocoques.
Ils ont immobiles à l’état frais.
30
Figure 7 : Aerococcus urinae, coloration de gram (grossissement x100), GS CO2 48h (Source :
Centre Hospitalier Cahors)
• Aspect en culture : sur gélose au sang (mouton ou cheval), les colonies sont
blanches à grisâtres, de la taille de petites colonies de Streptocoques (0.5
mm) et entourées d’une zone d’α hémolyse verdâtre. Elles sont plus nettes
après 48 heures d’incubation.
La croissance sur milieu gélosé ordinaire (milieu chromogène d’orientation
pour urocultures par exemple) est peu fiable. Sur gélose chromogène Orient
BD, les colonies sont vertes (source CH Cahors).
1 2 3
Figure 8 : Aerococcus urinae GS CO2 à 24h (1), 48h (2) et 72h (3) (Source : Centre Hospitalier
Cahors)
31
1 2 3
Figure 9 : Colonies d’Aerococcus urinae GS CO2 à 48h (1 et 2) et dissociant (3) (Source : Centre
Hospitalier Cahors)
A. viridans A. urinae
LAP - +
PYR + -
Fermentation du
lactose + -
maltose + -
mannitol V +
ribose V V
saccharose + +
thréalose + -
Production de
ADH - -
β glucosidase V V
β glucuronidase V +
7.2.2. Physiopathologie
• Chez l’homme :
- Localisations urinaires :
Il faut noter que, même si la majorité des infections urinaires décrites dans la
littérature l’ont été chez des patients âgés présentant des facteurs de prédisposition,
la première description d’une infection à Aerococcus urinae chez un enfant a été
faite récemment.
En effet, Murray a rapporté en 2008 le cas d’une pyélonéphrite avec cette bactérie
chez un enfant de 12 ans ayant des antécédents de chirurgie rénale et de reflux
urinaire [31]. Le patient a été traité par ampicilline/sulbactam IV pendant 48 heures
puis céfazoline IV et sa fièvre et les douleurs abdominales ont disparu au 5ème jour
d’hospitalisation. Les urocultures réalisées pendant la période de traitement sont
revenues négatives.
A noter que parmi les cas d’infections à Aerococcus urinae recensés au Centre
Hospitalier de Cahors, nous comptons un garçon de deux ans.
- Endocardites et bactériémies:
Aerococcus urinae a été également décrit dans des cas d’endocardites, avec ou
sans bactériémie associée [30, 32, 33, 34, 35, 36].
Les Aerococcus ont été associés pour la première fois à un cas d’endocardite en
1972 par Parker et Ball, et Christensen, en 1991, décrit le premier cas
d’endocardite à « ALO » [37].
En 2008, seuls 16 cas d’endocardite à Aerococcus urinae ont été rapportés [35].
34
Du fait de la rareté de ces endocardites, il n’a pas été conduit d’études permettant
la standardisation du traitement antibiotique de ces cas.
Les recommandations actuelles de la prise en charge de ces endocardites sont
l’utilisation d’une βlactamine (telle l’ampicilline) ou d’un glycopeptide
(vancomycine) associée à un aminoside comme la gentamicine (durée non
spécifiée) [30].
- Autres :
Enfin, Aerococcus urinae peut être un agent d’infection des tissus mous :
phlegmon, balanite [33].
En 2003, Astudillo et l’équipe du Professeur Arlet (service médecine interne
hôpital Purpan Toulouse) ont rapporté le premier cas de spondylodiscite à
Aerococcus urinae [39].
Les premières souches d'Aerococcus urinae ayant été isolées lors d'infections
urinaires, on peut déjà noter la résistance des souches aux sulfamides et autres
antibiotiques utilisés pour le traitement des infections urinaires, comme le
cotrimoxazole ou l'acide nalidixique.
En 2001, Skov et son équipe [40] étudie pour la première fois la sensibilité in
vitro de 56 souches d’Aerococcus urinae à 14 antibiotiques, et pour les 2 souches
des patients souffrant d'endocardite, une étude de la bactéricidie est également
réalisée.
Les CMI sont déterminées par la méthode de dilution (milieu Mueller Hinton
supplémenté de 5% de sang de cheval) après 2 jours d'incubation à 37°C sous 5%
de CO2, et lues à la plus faible concentration d'antibiotiques permettant la pousse
de 3 colonies maximum.
Les CMI obtenues figurent dans le tableau 9.
Toutes les souches étaient sensibles aux pénicillines alors qu'une sensibilité
diminuée aux céphalosporines testées était décrite.
37
Toutes les souches possèdent une sensibilité réduite aux aminosides, cependant
aucune résistance de haut niveau n'a été détectée, ce qui laisse ouverte la
possibilité d'un effet synergique avec les βlactamines ou la vancomycine.
Toutes les souches étaient sensibles à la vancomycine.
La rifampicine semble être l'antibiotique le plus actif parmi ceux testés.
7.3.Aerococcus christensenii
En 1999, Collins et son équipe [41] décrit deux souches d’ALO, inconnues
jusqu’ici, retrouvées dans des prélèvements vaginaux.
L’analyse comparative des séquences des gènes codant l’ARNr 16S de ces souches
montre qu’elles constituent un nouveau groupe dans le genre Aerococcus.
Ces deux souches ont également été facilement distinguées des deux espèces connues
d’Aerococcus, Aerococcus urinae et Aerococcus viridans, par les tests biochimiques de
routine et l’analyse électrophorétique de leurs protéines.
Sur la base de ces différences phénotypiques et phylogénétiques, il a été proposé
de classer cette bactérie comme Aerococcus christensenii (d’après le nom du
microbiologiste Danois Jens J. Christensen).
7.3.1. Bactériologie
• Aspect au gram : cocci gram positif, ne sporulant pas, groupés par paires,
tétrades ou petits groupes. L’aspect en courtes chaînettes peut être retrouvé, ce
qui est caractéristique de cette espèce au sein du genre Aerococcus.
A l’état frais, ils sont immobiles.
• Aspect en culture : sur gélose au sang de cheval 5%, les colonies sont de petite
taille, α hémolytiques. La culture se fait à 37°C sous 5% de CO2.
La croissance est possible sur milieu contenant 6,5% de NaCl.
• Biochimie : cette espèce est catalase et oxydase négatives, ainsi que PYR et LAP
négative.
L’utilisation de galerie commerciale de type API Rapid ID32Strep (bioMérieux)
révèle qu’il s’agit d’une espèce non réactive.
40
Aucune production d’acide à partir des sucres testés n’est observée et aucune des
enzymes testées n’est détectée. Seule l’hydrolyse de l’hippurate est positive.
A.
A. viridans A. urinae christensenii
LAP - + -
PYR + - -
Fermentation du
lactose + - -
maltose + - -
mannitol V + -
ribose V V -
saccharose + + -
thréalose + - -
Production de
ADH - - -
β glucosidase V V -
β glucuronidase V + -
• Phylogénie : l’ADN des deux souches a été amplifié par PCR puis séquencé.
L’arbre phylogénétique, obtenu par comparaison de séquences de 1320
nucléotides avec celles des autres bactéries gram positif, montre que Aerococcus
christensenii est bien un membre des Aerococcus, et qu’il est plus proche
d’Aerococcus urinae que d’Aerococcus viridans (respectivement 4% et 6% de
différence au niveau des séquences).
7.3.2. Physiopathologie
7.4.Aerococcus sanguinicola
7.4.1. Bactériologie
• Aspect en culture : la culture est réalisée sur gélose au sang, à 37°C sous
atmosphère enrichie en 5% de CO2.
Les colonies sont de petite taille (< 1mm), grisâtres et produisent une α hémolyse
sur gélose au sang.
La croissance est possible sur milieu contenant 6.5% de NaCl et la réaction sur
milieu bile esculine est positive.
43
1 2
Figure 12 : Aerococcus sanguinicola GS CO2 à 24h (1) et 48h (2) (Source : Centre Hospitalier de
Cahors)
A. A.
A. viridans A. urinae
christensenii sanguinicola
LAP - + - +
PYR + - - +
Fermentation du
lactose + - - -
maltose + - - +
mannitol V + - -
ribose V V - -
saccharose + + - +
thréalose + - - +
Production de
ADH - - - +
β glucosidase V V - -
β glucuronidase V + - +
Il faut cependant noter que Aerococcus sanguinicola est absent des bases de
données de tous les systèmes d’identification disponibles sur le marché [44].
L’identification rendue par ceux-ci devrait donc être « profil inacceptable » ou
« non identifié ». Mais ce n’est pas toujours le cas.
45
Figure 13 : Arbre phylogénétique d’Aerococcus sanguinicola et autres bactéries gram positif à faible
taux C+G (Source : [42])
7.4.2. Physiopathologie
7.5.Aerococcus urinaehominis
En 2001, Lawson et son équipe décrit également une autre espèce du genre
Aerococcus : Aerococcus urinaehominis, suite à l’étude phénotypique et phylogénétique
d’un coque gram positif catalase négative inconnu, isolé à partir d’urines [45].
7.5.1. Bactériologie
• Aspect en culture : la culture est réalisée sur gélose au sang, à 37°C sous
atmosphère enrichie en 5% de CO2.
Les colonies sont de petite taille (< 1mm), verdâtres et produisent une α
hémolyse sur gélose au sang de cheval.
A. A. A.
A. viridans A. urinae
christensenii sanguinicola urinaehominis
LAP - + - + -
PYR + - - + -
Fermentation du
lactose + - - - -
maltose + - - + +
mannitol V + - - -
ribose V V - - +
saccharose + + - + +
thréalose + - - + -
Production de
ADH - - - + -
β glucosidase V V - - V
β glucuronidase V + - + +
7.5.2. Physiopathologie
7.6.Aerococcus suis
Aerococcus suis est la dernière espèce à avoir été découverte en 2007, par Vela, à
Madrid, suite à l’étude de 5 souches d’un coque gram positif catalase négative, trouvées
dans des échantillons provenant de porcs d’élevage intensif [15].
7.6.1. Bactériologie
• Aspect au gram : Aerococcus suis est un coque gram positif, isolé ou par paires,
tétrades ou petits amas.
A l’état frais, il est immobile.
52
• Aspect en culture : les colonies sont rondes, de petite taille (< 1mm après 24
heures de pousse), et produisent une α hémolyse sur gélose au sang.
La croissance s’effectue à 37°C et elle est possible sur milieu contenant 6.5% de
NaCl.
Figure 15 : Aerococcus suis souches type 1821/02 (1) et 519/03 (2) GS CO2 à 48h (Source : Centre
Hospitalier de Cahors)
• Biochimie :
A. A. A.
A. viridans A. urinae A. suis
christensenii sanguinicola urinaehominis
LAP - + - + - -
PYR + - - + - -
Fermentation du
lactose + - - - - -
maltose + - - + + -
mannitol V + - - - -
ribose V V - - + +
saccharose + + - + + -
thréalose + - - + - -
Production de
ADH - - - + - +
β glucosidase V V - - V -
β glucuronidase V + - + + -
Le professeur Vela nous ayant aimablement fait parvenir les deux souches
d’Aerococcus suis de référence de son laboratoire (1821/02 et 519/03), nous avons
pu repiquer celles-ci sur GS au sang à 37°C sous 5-7% de CO2 afin d’obtenir des
cultures pures.
54
• Phylogénie : Un séquençage du gène codant l’ARNr 16S des cinq souches a été
réalisé et un arbre phylogénétique construit.
L’analyse montre que les cinq souches possèdent le même ARNr 16S et sont
clairement affiliées au genre Aerococcus en tant que nouvelle branche à
l’intérieur de celui-ci.
55
7.6.2. Physiopathologie
• Chez l’animal : les cinq souches ont été isolées de différents prélèvements chez
les porcs : poumon, ganglion lymphatique bronchique, articulation, intestin et
cerveau, qui présentaient respectivement des signes de pneumonie, arthrite,
entérite et méningite.
Il faut cependant noter que seule la souche issue du cerveau a été obtenue en
culture pure, ce qui ne permet pas pour le moment de conclure à la pathogénicité
de cette nouvelle espèce.
• Chez l’homme : la souche n’ayant jamais été isolée chez l’homme, son rôle
pathogène demeure inconnu.
56
Figure 16 : Antibiogramme des 2 souches d’Aerococcus suis, MH sang de mouton sous CO2 48h
disques Rosco (Source : Centre Hospitalier Cahors)
57
Tableau 20 : Valeurs des diamètres d’inhibition et interprétation obtenus pour les deux souches
d’Aerococcus suis (Source : Centre Hospitalier Cahors)
On constate que la souche 519/03 a un profil nettement plus résistant que la 1821/02.
Avec notamment une sensibilité diminuée à la pénicilline et l’acquisition d’une
résistance de type MLS.
Cette dernière pose la question du rôle de l’antibiothérapie (très utilisée chez les porcs
d’élevage intensif) dans l’acquisition des résistances chez les souches bactériennes
animales.
58
7.7.Aerococcus urinaeequi
7.7.1. Bactériologie
• Biochimie : cette espèce est catalase négative, PYR et LAP négatives. Les
principales caractéristiques de l’espèce sont résumées dans le tableau 21 suivant.
A. A.
A. viridans A. urinae A. urinaehominis A. suis A. urinaeequi
christensenii sanguinicola
LAP - + - + - - -
PYR + - - + - - -
Fermentation du
lactose + - - - - - V
maltose + - - + + - +
mannitol V + - - - - V
ribose V V - - + + +
saccharose + + - + + - +
thréalose + - - + - - +
Production de
ADH - - - + - + -
β glucosidase V V - - V - ND
β glucuronidase V + - + + - ND
7.7.2. Physiopathologie
Catalase - - - - - - -
Oxydase - - - - - - -
PYR + - - + - - -
LAP - + - + - - -
Croissance en NaCl
+ + + + NR + +
6,5%
Croissance à 10°C - - NR NR NR NR -
Croissance à 45°C - + NR NR NR NR -
β glucosidase =
V V - - V - +
hydrolyse esculine
ADH - - - + - + -
Hippurate - + (v) + + + - -
β galactosidase V - - - - + NR
β glucuronidase V + - + + - NR
Glucose + + NR NR + - NR
Maltose + - - + + - +
Ribose V V - - + + +
Saccharose + + - + + - +
Lactose + - - - - - V
Thréalose + - - + - - +
Sorbitol - + - - - - -
Mannitol V + - - - - V
Acétoine - - - - - - NR
Réduction nitrates - - NR NR - - -
Sensibilité vancomycine S S NR S NR S S
Sensibilité
S R NR V NR R NR
cotrimoxazole
9.1.Difficulté d’identification
En effet, la pousse est variable voire nulle sur les milieux dépourvus en sang. Or
pour les ensemencements d’urines, les milieux chromogènes d’orientation sont très
fréquemment utilisés et rarement associés à un ensemencement sur gélose au sang.
De ce fait, il est probable que certaines colonies d’Aerococcus ne sont pas observées et
identifiées lors de l’observation des boites à la paillasse.
Le système MIDI a identifié correctement une souche mais pas la souche type, le Crystal
en identifiant deux mais pas la souche type. Enfin, l’API 20 Strep a identifié
correctement les trois souches (données dans le tableau 23 page suivante).
En 2003, Aerococcus urinae était compris uniquement dans la base du BBL
Crystal, dont l’identification a été correcte. Les autres systèmes auraient du rendre « non
identifié » ou « profil inacceptable », le Vitek et la galerie RapidID 32strep ont rendu ces
réponses mais certains systèmes ont identifié la souche type testée comme Gemella
morbillorum (Microscan WalkAway), Streptococcus pyogenes (MIDI) ou Streptococcus
acidominimus (API 20 Strep) (données dans le tableau 23 page suivante).
Aerococcus sanguinicola, christensenii et urinaehominis n’étant dans aucune
base de données, les identifications correctes auraient du être « profil inacceptable ». Or
certains systèmes ont rendu des identifications comme Streptococcus acidominimus,
Streptococcus sanguinis, Staphylococcus haemolyticus ou Aerococcus viridans (voir
données du tableau 23 de la page suivante)
64
Tableau 23 : Identification obtenue pour Aerococcus par différents systèmes commerciaux (Source :
[44])
65
Il apparaît donc dans l’étude de Facklam en 2003 que certains systèmes ne sont
pas assez discriminants pour l’identification des Aerococcus.
Le grand nombre d’identifications erronées rendues pour Aerococcus viridans,
normalement inclus dans leurs bases de données, peut être lié au fait que tous les
systèmes n’ont pas utilisé la même souche de référence pour documenter leur base et que
tous les profils n’étaient pas disponibles au moment de la création de celle-ci [44].
Pour l’identification d’Aerococcus sanguinicola, Facklam conclut que la RapidID32strep
et le Crystal sont les systèmes les plus adaptés, puisque qu’ils ont rendus la réponse
correcte « no identification ». L’addition de nouveaux profils dans leurs bases de
données pourraient augmenter le nombre d’identifications correctes rendues par ces 2
systèmes.
Les autres systèmes d’identification testés nécessitant une remise à niveau beaucoup plus
importante de leurs bases au regard du nombre d’identifications erronées rendues.
Peu à peu donc, les nouvelles versions des systèmes commerciaux sont mises à
jour, ce qui permettra sûrement d’améliorer l’identification d’un bon nombre de souches.
Ainsi, Aerococcus urinae et Aerococcus urinae sont désormais retrouvés dans les bases
de données les plus récentes des systèmes suivants : API 20 Strep (V7.0), API
RapidID32 Strep (V3.0), Vitek2, Phoenix system, Crystal GP ID system.
Cependant des études récentes ont rapporté des cas de résistance non seulement à
la pénicilline, mais aussi au chloramphénicol, aux fluoroquinolones.
En 1987, Kern et Vanek ont décrits deux cas d’Aerococcus isolés d’hémocultures
sensibles à la pénicilline G et à la pipéracilline, mais résistants aux
fluoroquinolones et à la nétilmicine donnée en prophylaxie orale.
En 1994, Augustine et al. rapporte un cas d’endocardite à Aerococcus viridans
avec résistance à plusieurs antibiotiques : pénicilline, ampicilline, céfotaxime,
gentamicine et résistance intermédiaire à la ciprofloxacine [21].
En 1989, Buu-Hoi et al. décrit une résistance, chez huit souches d’Aerococcus
viridans testées, à l’érythromycine (6 souches sur 8), à la tétracycline et
minocycline (5 souches sur 8), au chloramphénicol (1 souche) et de haut niveau à
la streptomycine (1 souche) [23].
67
En 1990, sur les trente souches provenant du CDC et testées par Bosley, 46% se
sont révélées être résistantes, à plus ou moins haut niveau, à la pénicilline (9
souches sur 30 avaient une CMI supérieure ou égale à 0,5 mg/l et 5 avaient une
CMI > 1 mg/l) [25].
Christensen a d’ailleurs proposé d’utiliser ce critère de résistance pour
différencier Aerococcus viridans de Aerococcus urinae, jusqu’à présent
constamment sensible à la pénicilline [24].
Il a été émis l’hypothèse que l’apparition de résistance chez Aerococcus viridans
serait favorisée par une antibioprophylaxie prolongée [17].
Il est intéressant de noter que au cours de l’étude menée par Facklam en 2003
[44], le National Center for Streptococcus NCS, qui y participait, a fait
l’observation suivante : lors de l’utilisation de disques de pénicilline 10µg pour la
réalisation d’un antibiogramme en boite (gélose au sang de cheval 3%), il existe
pour Aerococcus viridans et Aerococcus sanguinicola, en plus de la zone
d’inhibition autour du disque, une zone périphérique où l’α hémolyse est plus
importante. Cette observation n’est pas faite pour les souches d’Aerococcus
urinae.
68
PARTIE II
MATERIEL ET METHODES
70
1. METHODES
1.1.1. Généralités
• Objectifs :
Les objectifs de l’ECBU sont de mettre en évidence la présence de bactéries dans les
urines, de les identifier et d’étudier leur sensibilité aux antibiotiques, de mettre en
évidence des éléments anormaux ou de contrôler l’efficacité du traitement.
• Indications :
Les infections du tractus urinaire étant une des infections les plus fréquentes,
l’ECBU est par conséquent une analyse bactériologique très demandée.
Les circonstances amenant le clinicien à demander un ECBU sont variées :
o symptomatologie clinique urinaire présente : dysurie, pollakiurie,
incontinence urinaire, douleurs lombaires, avec signes biologiques
d’infection : bandelette urinaire positive (protéines, sang, nitrites,
leucocyte estérase).
o symptomatologie clinique urinaire absente mais existence d’une
hyperthermie isolée, personne âgée ou diabétique ou signes biologiques
présents.
o de façon systématique chez la femme enceinte.
o en pré opératoire urologique, orthopédique ou gynécologique.
o en contrôle post thérapeutique.
71
Le recueil des urines est dit « à la volée » ou « du milieu de jet ». Il doit être
précédé du lavage hygiénique des mains et d’une toilette soigneuse au savon ou
antiseptique doux de la région vulvaire chez la femme et du méat chez l’homme, suivi
d’un rinçage.
Le premier jet d’urines doit être éliminé, et le recueil de 10-30 ml d’urine se fait
dans un flacon stérile, en prenant soin de ne pas toucher le bord supérieur du récipient.
Le flacon, fermé hermétiquement, identifié et avec l’heure de prélèvement, doit être
acheminé rapidement (dans les deux heures) au laboratoire, accompagné de la
prescription.
En cas d’empêchement, on peut placer le flacon quelques heures à + 4°C ou utiliser un
tube boraté. Ce tube contient en effet un tampon pour stabiliser le pH et un conservateur
doux (borate) pour arrêter la multiplication bactérienne sans tuer les bactéries.
On prélève deux tubes : un tube sans additif pour réaliser les analyses biochimiques et
cytologiques, et un avec conservateur et tampon pour la culture.
L’urine est ensemencée à l’aide d’une anse calibrée de 1µl : le dénombrement des
colonies obtenues sur le milieu après incubation permet une évaluation quantitative de la
bactériurie (une colonie correspondant à 10p3 UFC/ml). La quantification des bactéries
peut s’effectuer par ensemencement en étoile, par la technique de l’anse calibrée ou par
la technique de la lame immergée.
Les milieux ensemencés sont des géloses contenant des substances chromogènes
(gélose Chromagar Orientation BD) associées à une gélose au sang lorsque les urines
sont alcalines (pH ≥ 6).
73
Les milieux sont placés à l’étuve à 37°C sous 9% de CO2 et observés à 24 et 48 heures
afin de dénombrer, différentier et identifier les colonies.
1 2
Figure 17 : Exemples de technique d’ensemencement des milieux : (1) technique de la anse calibrée
(2) : technique en étoile (Source : (1) http://www.memobio.fr/images/bact/ensemecbu.jpg (2) Centre
Hospitalier Cahors)
1.1.5. Identification
1.1.6. Antibiogramme
Les résultats obtenus sont confirmés par le CNR-Strep lors de l’envoi de nos
souches pour identification par séquençage (antibiogramme en boite Muller Hinton au
sang BioRad référence 63901 + disques BioRad sous CO2 5-7%).
De plus, pour certaines espèces, les bases de données sont incomplètes ou inexistantes,
ne permettant pas l’identification de la souche ou au pire, conduisant à des
identifications erronées.
Peu à peu, l’idée d’une identification génotypique, basée sur l’amplification et le
séquençage de gènes cibles, s’est donc développée.
Les sod sont des enzymes de conversion d’anions superoxydes O2- en molécule
d’oxygène O2 ou en peroxyde d’hydrogène H2O2. Ces enzymes constituent un
mécanisme de défense majeur des cellules contre le stress oxydatif [48].
Les sod sont des métallo enzymes, dont il existe trois types en fonction du
cofacteur qu’elles utilisent :
• Cuivre/zinc Cu/Zn-sod: présente essentiellement chez les eucaryotes
• Manganèse Mn-sod : présente chez les procaryotes et dans les mitochondries des
eucaryotes
• Fer Fe-sod : présente chez les procaryotes et chondroplastes des eucaryotes
Pour les Aerococcus, c’est le gène codant une Mn-sod qui est séquencé.
On peut déjà noter à ce niveau que parmi les Aerococcus, seul Aerococcus urinae ne
possède pas de sod.
76
Les souches envoyées par le laboratoire sont remises en culture (gélose enrichie
de 5% de sang de mouton) au CNR-Strep et incubées 24 heures à l’étuve à 37°C sous 5-
7% de CO2.
L’extraction du matériel génétique bactérien, sous réserve de colonies en culture
pure, est réalisée le lendemain grâce au kit d’extraction rapide InstaGene Matrix
(BioRad), selon les préconisations du fabricant.
Bande à 480 pb
correspondant
à la sod
Dépôt
24 1 24 12 20 8 9 9 22 16 27 N° patient
Les brins sens et anti sens du gène codant l’ARNr 16S sont amplifiés.
Pour cela, on utilise un couple d’amorces spécifiques Ehs (5’-
TACGGGAGGCAGCAGTGG-3’) pour le brin sens et S15 (5’-
GGGCGGTGTGTACAAGGC-3’) pour le brin anti sens.
La PCR est réalisée à l’aide du Gene Amp System 2400, sur un volume final de
50µl : 5µl d’ADN et 45µl de Mix contenant le couple d’amorces, des dNTP, la Taq
Perkin Elmer, du tampon, du MgCl2 et de l’eau.
Le mélange est dénaturé 2 minutes à 94°C puis subit 25 cycles de dénaturation
(30 secondes à 94°C), hybridation (30 secondes à 57°C), élongation (30 secondes à
72°C) et enfin 3 minutes à 72°C pour le dernier cycle d’élongation.
On fait ensuite migrer le produit de PCR par électrophorèse sur gel d’agarose à
1% contenant du bromure d’éthidium, avec une piste témoin contenant un marqueur de
taille.
La mise en évidence d’une bande sur le gel d’électrophorèse témoigne de la
correcte amplification du gène et le séquençage de celui-ci peut donc être réalisé.
78
M 24 1 24 12 20 8 9 9 22 16 27
N° patient
Dépôt
Figure 19 : Gel d’électrophorèse obtenu après migration du produit amplification du gène codant
l’ARNr 16S des patients. M = marqueur de taille (Source : CNR-Strep)
Les séquences du gène de la sod ou de l’ARNr 16S ainsi purifiées sont envoyées
au centre de séquençage.
La technique est basée sur la méthode de Sanger utilisant des ddNTP marqués par des
fluorochromes. Elle comprend une étape d’élongation par une Taq polymérase, une
étape de purification puis de migration en microcapillaire. Elle est réalisée sur le 3130xl
de Applied Biosystems.
Un logiciel d’analyse (sequencing analysis ou sequence scanner Applied Biosystems)
permet d’obtenir la séquence, qui sera renvoyée par courriel en quelques jours.
Pour l’ARNr 16S, les séquences des brins sens et anti sens sont dans un premier
temps assemblées grâce à un logiciel.
79
Puis les séquences de la sodA ou de l’ARNr 16S sont comparées, par alignement,
à une banque de séquences connues, à l’aide de logiciels d’identification adaptés : le Bio
Informatic Bacteria Identification BIBI (pbil.univ-lyon1.fr/bibi, développeur JP
Flandrois) ou le logiciel Blast.
Concernant la comparaison des séquences du gène codant pour la sodA, si celle-
ci est concluante, la bactérie est identifiée et l’identification est rendue.
Mais pour certaines espèces dont la base de données est pauvre, on doit poursuivre
l’identification par amplification et séquençage du gène codant l’ARNr 16S.
Un arbre phylogénétique est construit en utilisant la méthode « joinning
neighbourg » afin de connaître le pourcentage d’homologie avec la souche référence.
On a vu précédemment que les banques de données de séquences concernant la sodA
sont incomplètes, notamment pour les dernières espèces d’Aerocccus identifiées, et qu’il
faut donc recourir au séquençage de l’ARNr 16S afin de parvenir à une identification.
Le CNR-Strep construit donc également une banque « en temps réel », à partir des
séquences de sodA qui n’ont pas pu être analysées dans un premier temps, mais dont
l’identification d’espèce a été faite grâce à l’ARNr 16S.
Ainsi, lorsque l’identification n’est pas concluante avec les logiciels classiques, une
comparaison peut être faite avec la base « maison » et un arbre phylogénétique construit.
En augmentant ainsi la base de données, on espère devoir de moins en moins recourir au
séquençage de l’ARNr 16S.
80
PCR sodA
purification
séquençage
Alimentation purification
base données
CNR-Strep séquençage
comparaison
bases de données
identification
Rendu de l’espèce % homologie
81
2. MATERIEL
Les bactéries responsables sont au premier rang Escherichia coli (90%), Proteus
spp (5%), Klebsiella-Enterobacter (1%), Staphylococcus saprophyticus (1%), autres
(3%). Chez la femme jeune, les infections basses peu ou pas symptomatiques sont dues
dans 10 à 40% des cas à Staphylococcus saprophyticus.
A noter une préoccupante antibiorésistance de ces bactéries communautaires aux
antibiotiques normalement utilisés : ainsi 40 à 50% des Escherichia coli sont devenus
résistants à l’amoxicilline, 15 à 30% à l’association amoxicilline-acide clavulanique, 15
à 30% au cotrimoxazole.
Les bactéries responsables sont au premier rang Escherichia coli (30 à 60% cas),
puis on retrouve Proteus mirabilis, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa,
Staphylococcus aureus.
82
2.1.3. Physiopathologie
Les IU non compliquées sont les plus fréquentes et ont été définies en 1996 par
L’Agence Nationale pour le Développement de l’Evaluation Médicale comme des IU de
la femme âgée de 15 à 65 ans, non enceinte, en l’absence d’anomalies urologiques
connues ou présumées. Elles se résument à la cystite et la pyélonéphrite aigue bénigne
de la femme, toutes les autres situations étant a priori « à risque » ou compliquées.
Chez l’homme, les infections urinaires sont rarement bénignes.
A noter que certaines IU, surtout chez la femme, sont récidivantes, c'est-à-dire se
manifestant à l’arrêt des antibiotiques (rechute ou réinfection). Ces cystites récidivantes
sont généralement bénignes.
Plusieurs facteurs prédisposants aux IU ont été identifiés. Ils sont résumés dans les 2
tableaux suivants.
● age avancé
- sont incriminés l'incontinence, les dysfonctionnements mictionnels et le sondage urinaire
● sexe féminin
- urètre court (3-4 cm) et topographiquement proche du vagin et du périnée
qui sont régulièrement colonisés pardes bactéries d'origine fécale
● antécédants d'infections urnaires récidivantes
● antécédants maternels d'IU et survenue d'IU dans l'enfance
- expose à la récurrence d'IU chez la femme jeune
● facteurs génétiques
- phénotype non sécréteur de facteur Lewis
- antécédants maternels d'IU
● facteurs anatomiques
- anomalies génito-urinaires fonctionnelles (résidu post mictionnel, incontinence…)
et anatomiques liées à l'âge
- rétrécissement et calculs urétraux (surtout chez l'homme)
- colonisation du gland et du prépuce chez les hommes
- anomalies congénitales (1er facteur de risque chez l'enfant)
● facteurs comportementaux
- rapports sexuels fréquents et récents
- utilisation de diaphragme vaginal et de spermicides
- rapports anaux
- mictions différées après rapports sexuels
● prise récente d'antibiotiques, quel qu'en soit le motif
• La cystite aigue non compliquée est traitée par antibiothérapie courte, après
s’être assuré cliniquement de l’absence de facteurs de complication :
fluoroquinolones FQ à dose unique (ciprofloxacine, ofloxacine), soit en cure de 3
jours (norfloxacine) ou furanes pendant 5 jours.
Nous avons réalisé une étude rétrospective sur les 29 cas d’infections à
Aerococcus diagnostiqués au laboratoire du Centre Hospitalier de Cahors entre février
2001 et décembre 2009.
Pour chaque patient, nous avons étudié le dossier d’hospitalisation contemporain au
diagnostic en nous efforçant de noter la symptomatologie du patient au moment de
l’infection, ses antécédents médicaux, les traitements en cours ou précédents
87
• Observation n°1
Mr A., 80 ans, est admis le 9 mai 2000 au SAU du Centre Hospitalier de Cahors
pour chutes à répétition à son domicile. Il sera ensuite transféré dans le service long
séjour de l’hôpital dans lequel il restera hospitalisé jusqu’à son décès.
On retrouve dans les antécédents de ce patient la notion d’une rétention urinaire
chronique sur adénome prostatique, une tuberculose rénale et pulmonaire, une
BPCO, une arthrose dorso-lombaire et des problèmes d’alcoolisme.
Au cours de l’été 2002, il présente plusieurs épisodes de globes vésicaux avec
des urines troubles et des difficultés à uriner et une sonde vésicale est posée le 8
juillet.
Le 14 aout 2002, on réalise un ECBU en vue d’une consultation d’anesthésie. Le
patient est apyrétique et ne présente pas de signes de dysurie.
A la coloration de gram on observe des cocci gram positif en diplocoques et petits
amas. La biochimie urinaire montre une leucocyturie (1020/mm3) sans présence
d’hématies, la recherche de nitrites et de protéines est négative. La culture retrouve
un Aerococcus identifié en routine Aerococcus urinae à 10p7 UFC/ml et Proteus
mirabilis à 10p5 UFC/ml. La souche est envoyée au CNR-Strep qui ré identifie
Aerococcus sanguinicola.
Une antibiothérapie par amoxicilline (Clamoxyl®) 2g par jour est entamée le 16
aout.
88
1 2
Figure 21 : Aerococcus sanguinicola coloration de gram Gx100 culture GS CO2 48h (1) ; réisolement
sur GS CO2 24h (2) cas n°1
• Observation n°2
Mr A., 39 ans, est admis le 25 mai 2009 au SAU du CH de Cahors, pour douleurs
dans le bas ventre, sans frissons, sans fièvre et sans douleurs lombaires. On retrouve
dans ses antécédents urologiques une opération de sténose de l’urètre antérieur en
2003.
Un ECBU est réalisé à son entrée et retrouve un Aerococcus urinae à 10p5
UFC/ml en culture pure, dont l’identification sera confirmée par le CNR-Strep.
La leucocyturie est de 165/mm3, on note une présence de sang mais pas de protéines.
La leuco estérase est positive 3+ et les nitrites négatifs.
Le patient est mis sous ofloxacine (Oflocet®) 200 mg par jour pendant huit jours.
On ne retrouve pas dans le dossier du patient la notion d’un ECBU de contrôle.
89
• Observation n°3
L’observation n°3 est une observation exceptionnelle réalisée chez une patiente
en 2008.
Mme B., 83 ans, est hospitalisée en octobre 2007 dans le service d’hospitalisation
long séjour du CH pour perte d’autonomie avec fausses routes et chutes à répétition.
On note dans ses antécédents urologiques la notion d’infections urinaires à
répétition, la patiente est continente à l’entrée. Cette patiente souffre également de
troubles neuro cognitifs avec un parkinson axial et une démence.
Episode n°1 : en février 2008, un ECBU est réalisé chez cette patiente, devant
une modification de son comportement. La patiente est apyrétique avec un abdomen
souple et indolore. Elle est incontinente.
Les urines sont troubles, la leuco estérase est positive 2+ avec une leucocyturie à
53/mm3, les nitrites et le sang sont négatifs et il y a présence de protéines. La culture
retrouve un Aerococcus urinae à 10p7 UFC/ml. La patiente est mise sous traitement
céftriaxone (Rocéphine®) 1g par jour pendant huit jours.
Episode n°2 : en mai 2008, un nouvel ECBU est réalisé devant des urines à odeur
forte très troubles en fin de miction. La patiente est apyrétique et on ne peut pas
savoir si elle ressent des brulures mictionnelles étant donné son niveau de
conscience.
La culture retrouve un Aerococcus « viridans » à 10p8 UFC/ml. La leuco estérase est
positive 3+ avec 146 leucocytes/mm3, les nitrites le sang et les protéines sont
positifs. La patiente est traitée par furantoïne (furadantine®) pendant dix jours.
Episode n°3 : en aout de la même année, la patiente présente à nouveau des
épisodes d’urines troubles, malodorantes, avec des bandelettes urinaires positives
pour la leucoestérase. La patiente est apyrétique et non plaintive. On réalise un
nouvel ECBU : les urines sont troubles et Aerococcus urinae à 10p8 UFC/ml est
identifié. La leuco estérase est positive 3+ avec des leucocytes à 3427/mm3, les
protéines et le sang sont positifs, les nitrites sont négatifs. Mme B. est à nouveau
traitée par furantoïne pendant dix jours.
Episode n°4 : au début du mois d’octobre, une bandelette urinaire réalisée au lit
du patient révèle une leucoestérase positive et un ECBU est réalisé. La patiente est
apyrétique et non plaintive. A l’ECBU, on retrouve des urines troubles et la culture
permet l’isolement et l’identification de Citrobacter freundii et Aerococcus sp à 10p6
90
2
1
3
4
Figure 22 : Aerococcus urinae culture primaire sur gélose chromogène Orient BD (1) et GS (2), et
réisolement sur GS CO2 (3) et (4), cas n°3 épisode n°1
• Observation n°4
Mr B., 84 ans, est admis dans le service de neurologie le 6 octobre 2009 pour
troubles du comportement avec inversion du rythme du sommeil, troubles du
comportement alimentaire et incontinence urinaire. Il est suivi dans le service pour
démence frontale. On ne retrouve pas de foyer infectieux clinique à son entrée.
On note dans ses antécédents un adénocarcinome prostatique traité en 1990 par
prostatectomie radicale et radiothérapie. Puis une castration hormonale pour
élévation secondaire du PSA, arrêtée en 2005.
Il est également porteur d’une gammapathie monoclonale connue.
91
Figure 23 : Culture primaire sur CPS bioMérieux à 4 jours (en haut) et réisolement des colonies
viridans sur GS CO2 à 24h (en bas), cas n°4
92
• Observation n°5
Mme C., 83 ans, est admise le 23 aout 2008 pour chute avec fracture de la
clavicule gauche, puis est transférée dans le service de psychiatrie.
Ses antécédents comprennent de nombreuses chutes et malaises vagaux, un kyste de
l’ovaire gauche, une mycose vulvaire et des micro-calculs vésicaux.
Du point de vue urologique, on note des infections urinaires à répétition, des
antécédents de cystite et une rétention urinaire sous psychotropes.
En septembre 2008, elle présente des brulures urinaires et un méat urinaire
enflammé. La bandelette urinaire réalisée est positive pour la présence de sang et de
leucoestérase, la leucocyturie est de 2326/mm3. Un ECBU est donc réalisé et permet
d’identifier un Aerococcus urinae à 10p6 UFC/ml associé à un Staphylococcus
haemolyticus. Le CNR-Strep confirme cette identification.
La patiente sera traitée par ofloxacine (Oflocet®), à une posologie et pour une
durée qu’il ne nous a pas été possible de retrouver dans le dossier. A noter que celle
ci avait été traitée par furantoine le mois précédent cet épisode.
On retrouve dans le dossier clinique la notion d’une bandelette urinaire positive
en octobre 2008 suite à laquelle un ECBU est réalisé et la patiente traitée par
furantoïne. Il n’a pas été possible de retrouver les résultats de cet ECBU.
• Observation n°6
Mme C., 63 ans, est admise le 13 février 2009 au SAU pour intoxication
médicamenteuse volontaire par bromazépam (léxomil®) (trois boites ingérées), puis
transférée dans le service de psychiatrie de l’hôpital.
A son entrée elle est consciente mais somnolente, apyrétique et se plaint de
brûlures mictionnelles. Une bandelette urinaire est donc réalisée, positive pour la
leucoéstérase, et un ECBU prélevé. Les urines ont une odeur forte.
Elle n’a pas d’antécédents particuliers : obésité, hypertension artérielle traitée,
insuffisance veineuse des membres inférieurs et hypothyroïdie.
L’ECBU retrouve une leucocyturie à 16/mm3, avec une leuco estérase positive
2+ et des nitrites positifs. La culture met en évidence Aerococcus urinae à 10p6
UFC/ml associé à un Entérocoque. Le CNR-Strep confirme cette identification.
93
La patiente est mise sous furantoïne 50mg trois fois par jour pendant dix jours.
Elle est transférée par la suite dans un centre spécialisé, il n’a donc pas été
possible de retrouver la trace d’un ECBU de contrôle.
• Observation n°7
Mme C., 81 ans, est admise à l’UHCD le 8 janvier 2007 pour état de mal
convulsif. La patiente est incontinente totale, elle n’est pas insuffisante rénale et on
ne note pas de globe vésical. Pas d’antécédents notables.
Elle est transférée en neurologie et le lendemain, elle est fébrile à 38,5°. Une
bandelette urinaire est donc réalisée dans le service, et devant la positivité, un ECBU
est prélevé.
Celui-ci met en évidence un Aerococcus viridans en culture pure à 10p9 UFC/ml,
une leucocyturie à 600/mm3, une leco estérase positive 1+ ainsi que des protéines et
du sang.
La patiente est traitée par furantoïne 50mg trois fois par jour pendant six jours.
Durant une nouvelle hospitalisation la première quinzaine de février, une
infection urinaire basse à Escherichia coli est diagnostiquée et sera traitée par
ofloxacine (Oflocet®) 200mg 2 fois par jour pendant 8 jours.
94
Figure 24 : Comparaison des cultures primaires d’Aerococcus viridans obtenues sur 3 milieux
chromogènes de fabricants différents : CPS bioMérieux (haut), Orient BD (milieu) et UTI Oxoid
(bas), culture directe urines 24h, cas n°7
• Observation n°8
Mme D., 92 ans, est admise le 26 février 2001 dans le service de chirurgie
orthopédique et traumatologie pour suspicion de fracture de la hanche gauche, deux
jours après une chute de son lit.
A son entrée, la patiente est apyrétique et une sonde est mise en place car elle est
incontinente. Elle souffre également d’un diabète non insulinodépendant mal
équilibré. Dans ces antécédents, on note une suspicion d’angiomyolipome
centromérique rénal droit en 1996.
95
La bandelette urinaire réalisée dans le service est positive et un ECBU sur urines
par sondage est donc réalisé. La leucocyturie est à 140/mm3, avec une leuco estérase
positive 1+, la recherche de sang, de protéines et de nitrites est négative. On retrouve
une culture pure d’Aerococcus urinae à 10p6 UFC/ml et le CNR-Strep confirme
cette identification.
La patiente est mise sous cotrimoxazole (Bactrim fort®) du 2 au 7 mars 2001.
Elle sort du service le 4 mars et on ne retrouve donc pas dans son dossier
d’ECBU de contrôle, ce qui aurait été intéressant car Aerococcus urinae est une
espèce résistante au cotrimoxazole.
1 2
Figure 25 : Aerococcus urinae réisolement sur GS CO2 à 24h (1) et 48h (2) cas n°8
• Observation n°9
Mme D., 98 ans, est admise en juin 2002 à l’EHPAD pour perte d’autonomie,
service dans lequel elle est toujours hospitalisée en 2007, au moment de la réalisation
de l’ECBU. On note dans ses antécédents médicaux une lithiase vésiculaire, une
néoplasie colique opéré il y a une quinzaine d’années (patiente porteuse d’une sonde
rectale) et une insuffisance rénale.
En juillet 2007, la patiente étant fébrile à 38,6°C, on réalise une bandelette
urinaire qui se révèle positive 1+ à la leuco estérase. Un ECBU est donc réalisé le 25
96
1 2
Figure 26 : Différences observées à la coloration de gram (Gx100) entre Aerococcus sanguinicola (1)
et Aerococcus urinae (2), réisolement sur GS CO2 48h, cas n°9
1 2
Figure 27 : Aerococcus sanguinicola réisolement surGS CO2 24h (1) et 48h (2), cas n°9
97
1 2
Figure 28 : Aerococcus urinae réisolement sur GS CO2 24h (1) et 48h (2), cas n°9
• Observation n°10
Mme D., 93 ans, est hospitalisée le 28 mai 2009 en unité de gériatrie aigue pour
décompensation d’un syndrome démentiel avec troubles du comportement, associant
un syndrome anxieux, des troubles productifs à type d’idées délirantes et de
persécution, et une agressivité.
A l’entrée, la patiente est apyrétique, on ne retrouve pas de syndrome
inflammatoire ou infectieux. L’examen clinique retrouve une diminution du
murmure vésiculaire et une ulcération au niveau du membre inférieur gauche. Les
bruites du cœur sont réguliers.
La patiente souffre d’une insuffisance rénale avec un débit de filtration glomérulaire
estimé à 43 ml/minute.
Ses antécédents sont marqués par une coxarthrose droite, une hypertension
artérielle et surtout des infections urinaires récidivantes.
Le 31 mai, la bandelette urinaire réalisée dans le service se révèle positive pour la
leucocyte estérase et un ECBU est donc prélevé.
Les urines sont troubles, la leucocyturie est à 676/mm3 et l’hématurie à 31/mm3, la
recherche de sang, de protéines et de nitrites est négative. La culture met en évidence
un Aerococcus urinae à 10p5 UFC/ml en culture pure. Cette identification est
confirmée par le CNR-Strep.
98
• Observation n°11
Mme E., 100 ans, est hospitalisée dans le service de long séjour en avril 2002 car
elle est devenue inadaptée à sa structure d’accueil précédente, avec une très forte
dépendance et des troubles du comportement qui s’accentuent (service dans lequel
elle restera hospitalisée jusqu’à son décès).
On retrouve dans ses antécédents la pose d’un stimulateur cardiaque en 1998,
l’existence d’un syndrome démentiel avec dépendance totale et un AVC ischémique
en 2002. La patiente est incontinente.
Le 09 avril 2002, une sonde à demeure est mise en place. Le 18, un ECBU est
réalisé pour contrôle d’une bandelette urinaire positive pour la leuco estérase réalisée
dans le service. La patiente est alors apyrétique.
Les urines sont troubles, la leucocyturie est à 120/mm3, l’hématurie à 30/mm3, la
recherche de sang est positive, celle de protéines et nitrites est négative. La culture
retrouve un Aerococcus urinae à 10p7 UFC/ml. Le CNR-Strep confirmera cette
identification.
La patiente étant apyrétique, les gériatres décident de ne pas la traiter et aucun
ECBU de contrôle ne sera réalisé.
• Observation n°12
Mme E., 84 ans, est hospitalisée le 9 janvier 2007 dans le service de médecine de
l’hôpital de Gourdon, pour anoxie.
On retrouve dans ses antécédents l’existence d’une BPCO, d’une maladie
thromboembolique veineuse, d’une diverticulose colique et la notion d’infections
urinaires à répétition. La patiente restera toujours apyrétique.
Le 14 janvier, la patiente se plaint de douleurs à la vessie mais sans brulures. Un
ECBU est donc prélevé.
99
L’aspect des urines est trouble, la leuco estérase est positive 1+ avec une
leucocyturie >1000/mm3 et une recherche de sang et de protéines positive. La culture
retrouve Gardnerella vaginalis à 10p8 UFC/ml associé à Aerococcus urinae à 10p6
UFC/ml.
La souche est envoyée au CNR-Strep qui confirme cette identification.
La patiente est mise sous ofloxacine (Oflocet®) 200mg le 17 janvier à une
posologie et pour une durée non indiquée dans le dossier.
1 2
Figure 29 : Gardnerella vaginalis et Aerococcus urinae cultures primaires depuis urines surCPS CO2
48h (1) et GS CO2 48h (2), cas n°12
1 2
Figure 30 : Aerococcus urinae réisolement sur GS CO2 à 24h (1) et 48h (2), cas n°12
100
• Observation n°13
• Observation n°14
Cette observation est la seule réalisée chez un enfant dans notre étude.
L’enfant F., 2 ans, de sexe masculin, est admis en pédiatrie le 7 février 2009 pour
gastroentérite aigue et rhinopharyngite fébrile (T 38.5°C). On note également chez
lui des adénopathies, une hépato-splénomégalie et un eczéma. Cet enfant est sujet
aux infections ORL à répétition. L’écouvillon nasal réalisé pour recherche de grippe
le 9 février est positif pour la grippe A.
Un ECBU est réalisé, au niveau du collecteur d’urines.
Les urines sont troubles, avec une leucocyturie à 61/mm3, la leuco estérase et la
recherche de nitrites, sang et protéines est négative. La culture retrouve Aerococcus
urinae à 10p6 UFC/ml en culture pure. Le CNR-Strep confirme cette identification.
101
• Observation n°15
Mr J., 77 ans, est admis le 17 juin 2009 en chirurgie urologique pour résection
trans-urétrale de la prostate.
On note dans ses antécédents urologiques une rétention chronique d’urine sur
prostate obstructive et sténose du col, avec infections urinaires à répétition et
existence d’un résidu post mictionnel très important.
Il est apyrétique le jour de son admission (fièvre à 39.8° le lendemain de
l’intervention).
Un ECBU est prélevé la veille de son intervention.
Les urines sont hémorragiques, la leuco estérase est positive 3+, la leucocyturie est à
53911/mm3, l’hématurie à 9980/mm3, les recherches de protéines et sang sont
positives. La culture retrouve Aerococcus urinae à 10p7 UFC/ml en culture pure,
identification confirmée par le CNR-Strep.
En post opératoire, le patient bénéficie d’un traitement par ofloxacine (Oflocet®)
et amoxicilline-acide clavulanique (Augmentin®) (posologie et durée inconnue).
L’ECBU sous traitement du 22 juin 2009 est négatif en culture mais positif en
cytologie (194 leucocytes/mm3 et 60 hématies/mm3).
• Observation n°16
Mme J., 94 ans, est admise le 26 juin 2004 en chirurgie à l’hôpital de Gourdon
pour fécalome. La patiente est apyrétique. Elle souffre de démence de type
Alzheimer et est incontinente.
On retrouve dans ces antécédents de nombreuses infections urinaires à Escherichia
coli.
102
La bandelette urinaire réalisée dans le bilan standard d’entrée est positive pour la
leucoéstérase. Un ECBU est donc réalisé le 26 juin. Les urines sont troubles, la leuco
estérase positive 1+, la leucocyturie à 280/mm3, l’hématurie à 80/mm3, la recherche
de sang et de protéines positive. La culture isole Aerococcus urinae à 10p7 UFC/ml
associé à Streptococcus anginosus à 10p7 UFC/ml. Le CNR-Strep confirme cette
identification.
Aucune antibiothérapie n’est débutée chez cette patiente et nous ne retrouvons
pas la notion de contrôle de cet ECBU.
1 2
Figure 31 : Aerococcus urinae réisolement sur GS CO2 à 24h (1) et 48h (2), cas n°16
• Observation n°17
Mme J., 78 ans, est admise le 21 juillet 2004 dans le service Long Séjour de
l’hôpital de Cahors pour troubles du comportement et perte d’autonomie. A l’entrée,
la patiente est apyrétique.
On note dans ses antécédents une néphrectomie gauche sur néoplasie, une
hystérectomie sur cancer de l’utérus, des ulcères variqueux et une démence
dégénérative.
En 2005, une échographie abdominale montre une hypotonie au niveau du rein
droit sans dilatation.
Le 12 septembre 2006, une bandelette urinaire réalisée dans le service montre
une positivité à la leuco estérase 3+ et aux nitrites. Un ECBU est réalisé le 12 et la
103
patiente est mise sous ofloxacine (Oflocet®) pendant deux jours puis cotrimoxazole
(Bactrim®) pendant huit jours. L’ECBU de contrôle réalisé le 28 septembre est
négatif en culture.
Le 2 novembre 2006, la patiente, apyrétique, se plaint de douleurs au niveau de la
fosse lombaire.
Une bandelette urinaire est réalisée dans le service et un ECBU est prélevé. Les
urines sont troubles, la leuco estérase est positive 1+, la leucocyturie est à
10000/mm3 et la recherche de sang est positive (traces de protéines). La culture
retrouve Aerococcus urinae à 10p7 UFC/ml en culture pure, identification confirmée
par le CNR-Strep.
La patiente est traitée par céftriaxone (Rocéphine®) du 3 au 10 novembre 2006
(posologie inconnue).
1 2
Figure 32 : Culture primaire des urines sur CPS à 24h (1) et ré isolement d’Aerococcus urinae sur
GS à 24h (2), cas n°17
• Observation n°18
Mr L., 97 ans, est admis le 21 juin 2001 dans le service de chirurgie de Gourdon
pour déshydratation et suspicion de rétention aigue d’urine. A l’entrée, le patient est
apyrétique.
104
• Observation n°19
• Observation n°20
Mme L., 83 ans, est admise le 24 mars 2009 en chirurgie vasculaire pour
angioplastie/recanalisation. A l’entrée on note une ischémie bilatérale des membres
inférieurs, un mal perforant du pied droit et un ulcère du talon gauche. Elle souffre
d’hypertension artérielle, de surpoids et d’un diabète insulinodépendant.
L’intervention a lieu le 26 mars 2009. Au cours de celle-ci est réalisée
l’amputation du séquestre osseux du 5ème rayon du pied droit, responsable de l’ulcère
latéral externe et du mal perforant plantaire.
Le prélèvement est envoyé au laboratoire de microbiologie et la culture de celui-
ci retrouve de rares Proteus mirabilis, quelques Staphylococcus simulans, quelques
Aerococcus sp et de rares Streptococcus dysgalactiae spp equisimilis groupe C.
La souche est envoyée au CNR-Strep qui identifie Aerococcus viridans.
La patiente reçoit une injection de clindamycine (Dalacine®) 600mg IV le 25
mars puis est traitée par ofloxacine (Oflocet®) 200mg deux fois par jour du 27 au 30
mars, clindamycine 600mg per os deux fois par jour à partir du 27 mars et pour une
durée de trois mois et par moxifloxacine (Izilox®) 400mg par jour à partir du 31
mars et pour une durée de trois mois. Les suites opératoires ont simples et l’évolution
de la plaie est favorable (pansement propre, pas de saignements).
• Observation n°21
Mme L., 97 ans, est admise à l’EHPAD. Il est très difficile de retrouver des
informations cliniques dans son dossier. On sait que cette patiente est atteinte de
démence de type Alzheimer et qu’elle est incontinente.
106
Le 25 juillet 2008, un ECBU est prélevé. Les urines sont troubles, la leuco
estérase et la recherche de nitrites sont positives, on note des traces de sang et de
protéines. La leucocyturie est à 1100/mm3 et l’hématurie à 20/mm3.
La culture retrouve Aerococcus urinae à 10p7 UFC/ml, identification confirmée par
le CNR-Strep, associé à Escherichia coli à 10p7 UFC/ml.
La mise en place d’un traitement n’est pas retrouvée dans le dossier.
1 2 3
Figure 33 : Aerococcus urinae, ré isolement sur GS CO2 à 24h (1) 48h (2) et 72h (3), cas n°21
• Observation n°22
Mme M., 97 ans, est admise dans le service de chirurgie de l’hôpital de Gourdon
le 29 mars 2003 pour chute accidentelle avec fracture de la diaphyse fémorale droite.
A son entrée la patiente est pâle, algique et apyrétique. Elle souffre d’une
hypertension artérielle modérée.
Un ECBU est réalisé à l’entrée.
Les urines sont troubles, la leuco estérase et la recherche de sang et de protéines sont
négatives. La leucocyturie est à 390/mm3 et l’hématurie à 23000/mm3. La culture
retrouve Aerococcus urinae à 10p8 UFC/ml, identification confirmée par le CNR-
Strep.
La patiente ne sera pas traitée pour cet épisode.
107
1 2 3
Figure 34 : Aerococcus urinae, ré isolement sur GS CO2 à 24h (1) 48h (2) et 72h (3), cas n°22
• Observation n°23
Mme M., 94 ans, est admise dans le service de soins de suite et réadaptation.
Le dossier clinique concernant la période d’hospitalisation nous concernant n’est pas
consultable, le recueil de données est donc impossible.
Cette patiente est connue pour être porteuse de BMR urinaire : isolement à
plusieurs reprises (mai et aout 2008) d’un Escherichia coli ayant une résistance
acquise à quatre familles d’antibiotiques.
Le 22 octobre 2008, un ECBU est réalisé. Les urines sont troubles, la leuco
estérase est positive 1+, la recherche de sang, de protéine et de nitrites est négative.
La leucocyturie est à 156/mm3. La culture met en évidence Aerococcus « viridans » à
10p6 UFC/ml associé à Escherichia coli (souche sensible) à 10p3 UFC/ml. Le CNR-
Strep ré identifie l’Aerococcus en Aerococcus sanguinicola alors que l’identification
réalisée en routine au laboratoire de Cahors à deux reprises sur automate Vitek2
(bioMérieux) avait donné pour cette première identification un niveau de fiabilité
« très bon » et « excellent ».
La mise en place d’un traitement n’est pas retrouvée dans le dossier.
108
• Observation n°24
Episode n°1 : Mr M., 89 ans, est admis le 12 mars 2008 au SAU de l’hôpital de
Cahors pour broncho-pneumopathie et syndrome confusionnel. A son entrée il est
fébrile à 40°C et son osculation révèle des ronchies de la base droite avec quelques
sous crépitants bilatéraux au niveau des bases. Il n’est pas retrouvé de signes
fonctionnels urinaires.
Ses antécédents montrent des infections urinaires à répétition avec des bactéries
de plus en plus résistantes et une cholécystite aigue lithiasique et une
cholécystectomie en 2003.
Ce 12 mars, on réalise un ECBU, un examen cytobactériologique des crachats
(ECBC) et deux jeux d’hémocultures chez ce patient.
Les urines, obtenues par sondage, sont claires, la leuco estérase est positive 3+ ainsi
que la recherche de protéines et de sang. La leucocyturie est à 1239/mm3 et
l’hématurie à 52/mm3. La culture met en évidence Aerococcus urinae à 10p7
UFC/ml et Proteus mirabilis à 10p2 UFC/ml.
Cet Aerococcus urinae (même profil de résistance) est retrouvé au niveau des
quatre flacons d’hémocultures prélevés (deux aérobies et deux anaérobies). On peut
remarquer que la culture des flacons anaérobies se positive plus rapidement que celle
des flacons aérobies. Le CNR-Strep confirme l’identification de l’Aerococcus isolé
des hémocultures.
L’ECBC est non contributif.
Le patient sera traité pour sa broncho-pneumopathie principalement par
amoxicilline (Clamoxyl®) 2g trois fois par jour et ofloxacine (Oflocet®) 200mg
pendant dix jours.
Episode n°2 : en octobre de la même année, le patient est hospitalisé dans l’unité
des maladies infectieuses et tropicales pour bilan d’hyperthermie avec suspicion
d’infection urinaire. A l’admission le patient dit ne pas avoir de problèmes pour
uriner mais il existe un doute sur un globe vésical, les urines ramenées par sondage
itératif sont foncées et nauséabondes. Le patient est conscient, désorienté avec une
toux irritative. A noter que le patient est traité par fluoxétine (Prozac®).
109
1 2 3
Figure 35 : Aerococcus urinae ré isolement sur GS CO2 à 24h (1) 48h (2) et 72h (3), cas n°24
110
• Observation n°25
Mme P., 78 ans est résidente à l’EHPAD. On retrouve très peu d’informations
dans son dossier clinique, on sait seulement qu’elle est incontinente et souffre d’un
syndrome Parkinsonien, d’un ralentissement psychique et d’un syndrome anxio-
dépressif.
On note dans ses antécédents l’existence de colites, de polypes intestinaux, d’une
sténose hépatique et d’une cholécystectomie.
Le 21 octobre 2008, un ECBU est réalisé. Les urines sont troubles, la leuco
estérase est positive 1+, la recherche de sang, protéines et nitrites est négative. La
leucocyturie est à 100/mm3. La culture retrouve Aerococcus sp. à 10p5 UFC/ml en
culture pure, que le CNR-Strep identifie par Aerococcus sanguinicola.
La patiente est mise sous antibiothérapie, sans que nous ne puissions retrouver
l’antibiotique utilisé, sa posologie et la durée du traitement.
Un ECBU de contrôle est réalisé le 23 décembre 2008 : les urines sont claires,
seule la leuco estérase est positive 1+. Il n’y a pas de leucocyturie et la culture est
négative.
• Observation n°26
• Observation n°27
Mr V., 94 ans, est admis dans le service de neurologie le 4 juin 2001 pour
suspicion l’accident ischémique transitoire. A son entrée, le patient est fébrile à
39,1°C, confus, avec une paralysie faciale, une apraxie et une ataxie. Le patient est
également incontinent et se plaint de brulures mictionnelles. La bandelette urinaire
réalisée est positive pour la leucocyte estérase mais l’ECBU ne peut pas être réalisé
car le patient a uriné dans sa couche.
Une hémoculture est réalisée le 4 juin car le patient est secoué de tremblements et
l’ECBU sera finalement prélevé le 5 juin, le traitement par ceftriaxone (Oroken®)
étant débuté le même jour.
Le flacon d’hémoculture permet la mise en évidence d’Aerococcus urinae. L’ancien
CNR (Hôtel Dieu Paris) confirme cette identification par séquençage du gène codant
l’ARNr 16S.
Les urines sont troubles, la leuco estérase est positive 1+ et la recherche de sang et de
protéines est positive. On retrouve 170 leucocytes/mm3 et 120 hématies/mm3. La
culture retrouve Streptococcus agalactiae à 10p6 UFC/ml.
Le patient est traité pour sa « pyélonéphrite à Streptocoque » (sic) par ceftriaxone
(Rocéphine®) 1g par jour du 5 au 12 juin associé deux injections de gentamicine
250mg le 6 juin et à 2 jours de furantoïne le 7 et 8 juin, puis relais par cefixime
(Oroken®) 200mg deux fois par jour à partir du 13.
112
1 2 3
Figure 36 : Aerococcus urinae ré isolement sur GS CO2 à 24h (1) 48h (2) et 72h (3), cas n°27
• Observation n°28
jours est débuté et ne sera pas réévalué à la réception des résultats d’identification de
la souche de Proteus mirabilis (résistance naturelle) ni à celle de l’antibiogramme.
La patiente est prise en charge par son fils et retourne à domicile.
• Observation n°29
Figure 37 : Comparaison des pousses d’Aerococcus urinae : culture primaire sur gélose chromogène
Orient (à gauche) et sur GS (à droite), cas n°29
114
PARTIE III
RESULTATS
115
29 patients ont été inclus dans notre étude de cas. Le sexe et les tranches d’âge de
ceux-ci se répartissent ainsi :
Femmes Hommes
<30 ans 0 1
30-50 ans 0 1
51-70 ans 1 2
71-90 ans 8 6
>90ans 8 2
total 17 12
10
nombre de patients
6 Femmes
4 Hommes
0
<30 ans 30-50 ans 51-70 ans 71-90 ans >90ans
La moyenne d’âge des patients inclus est de 81,3 ans, le patient le plus jeune
étant un garçon de 2 ans et le plus âgé une femme de 100 ans.
La grande majorité (82,8%) a plus de 70 ans.
isolées
Tableau 28 : Tableau récapitulatif de la démographie des patients classés en fonction des espèces
signes infections
facteurs DFG estimé bactéries (sang)
n° cas sexe age service type plvmt traitement
de risque d'IU MDRD identifiées CRP GB
(mg/l) /mm3
Les différents points de ce tableau seront détaillés dans les chapitres suivants. 3
ep n°2
F 83 long séjour ECBU jet 05/08 3 71 A. "viridans" nd nd OUI
7 F 81 neurologie ECBU jet 0 91 A. "viridans" 3 15540 OUI
18 M 97 chir uro ECBU jet 1 48 A. "viridans" nd nd OUI
20 F 83 chir vasculaire pus profond 1 nd A. viridans 51 6380 non
2 M 39 urgences ECBU jet 1 nd A. urinae nd nd OUI
3 ep n°1 long séjour ECBU jet 02/08 3 71 A. "urinae" nd 5780 OUI
F 83
3 ep n° 3 long séjour ECBU jet 08/08 3 71 A. "urinae" nd nd OUI
4 M 83 neurologie ECBU jet 3 65 A. urinae 10 5410 nd
5 F 83 psychiatrie ECBU jet 1 86 A. urinae nd nd OUI
6 F 63 psychiatrie ECBU jet 1 86 A. urinae <3 4100 OUI
8 F 92 chir ortho ECBU sondage 1 35 A. urinae 59 12390 OUI
10 F 94 long séjour ECBU jet 2 34 A. urinae <3 4190 non
11 F 100 long séjour ECBU sondage 3 54 A. urinae 14 8420 non
12 F 84 médecine ECBU jet 1 45 A. urinae nd nd OUI
13 M 82 rhumatologie ECBU jet 1 28 A. urinae 52 8490 non
116
14 M 2 pédiatrie ECBU jet 0 non applicable A. urinae 29 12090 non
15 M 77 chir uro ECBU jet 2 79 A. urinae 84 10360 OUI
16 F 94 chirurgie ECBU jet 1 57 A. urinae nd nd non
17 F 78 long séjour ECBU jet 2 56 A. urinae nd nd OUI
19 M 67 chir uro ECBU sondage 4 88 A. urinae 17 10650 non
21 F 97 EHPAD ECBU jet 1 52 A. urinae 129 5100 nd
22 F 97 chirurgie ECBU jet 0 70 A. urinae nd nd non
hémoc x2 03/08 1 44 A. urinae 156 12000 OUI
24 ep n°1 urgences hémoc x2 03/08 1 44 A. "urinae" 156 12000 OUI
M 89
ECBU sondage 1 44 A. "urinae" 156 12000 OUI
24 ep n°2 urgences ECBU jet 09/08 1 44 A. urinae 253 24000 OUI
26 M 89 urgences ECBU jet 1 23 A. "urinae" 136 8570 non
27 M 94 neurologie hémoculture 0 nd A. "urinae" 66 9180 non
28 F 89 neurologie ECBU jet 1 54 A. "urinae" 50 9080 non
29 M 70 urgences ECBU jet 1 85 A. urinae 45 16490 OUI
A. urinae
9 F 98 EHPAD ECBU jet 1 60 54 11200 non
A. sanguinicola
1 M 80 long séjour ECBU sondage 2 59 A. sanguinicola 10 7970 OUI
3 ep n°4 F 83 long séjour ECBU jet 10/08 3 71 A. sanguinicola <3 4460 OUI
23 F 94 long séjour ECBU jet NR 35 A. sanguinicola 7 7600 nd
25 F 78 EHPAD ECBU jet 1 62 A. sanguinicola nd nd OUI
117
• Isolats multiples : l’ECBU par jet du cas n°9 retrouve Aerococcus urinae et
Aerococcus sanguinicola en culture, d’où le chiffre de 27 trouvé dans le tableau.
• Isolements multiples :
Une patiente a eu quatre ECBU par jet positifs dans la même année (observation
n°3).
Un patient a eu un ECBU par sondage et quatre flacons d’hémoculture (deux
aérobies et deux anaérobies) prélevés, puis un ECBU par jet 6 mois après
(observation n°24).
• 29 isolats d’Aerococcus urinae dont les 21 envoyés ont tous été confirmés par le
CNR-Strep, les autres souches n’ayant pas été conservées, elles n’ont pas pu être
envoyées.
• 4 isolats d’Aerococcus « viridans » dont une seule souche a pu être confirmée par
le CNR-Strep (autres souches non conservées).
119
FONTAINE 14 ECBU jet X X A. urinae nd nd nd nd A. urinae
JAPE 15 ECBU jet X X A. urinae nr faible IDGP V03.01 A. urinae
JIMENEZ 16 ECBU jet S. acidominimus 0,68 58 V6.0 S. acidominimus 0,44 83,9 V2.0 A. urinae nr faible IDGP V03.01 A. urinae
JOURDAN 17 ECBU jet S. acidominimus 0,31 83,3 V6.0 X A. urinae 99 excellente GPI R04.02 A. urinae
LABROUSSE 18 ECBU jet A. viridans 0,84 99,7 V6.0 A. viridans 0,43 99,8 V2.0 X X
LANDOIS 19 ECBU sondage X X A. urinae 99 excellente GPI R04.02 A. urinae
LAPORTE M 20 pus prof A. viridans 0,77 99,2 V7.0 A. viridans 0,73 99,9 V3.0 A. viridans 97 excellente IDGP V03.01 A. viridans
LAPORTE O 21 ECBU jet X X A. urinae 33 basse GPI R04.02 A. urinae
S. acidominimus
MALEVILLE 22 ECBU jet S. acidominimus 0,36 99,7 V6.0 nr nr V2.0 A. urinae 97 excellente IDGP V03.01 A. urinae
profil inacceptable
MAURY 23 ECBU jet X X A. viridans 97 excellente GPI R04.02 A. sanguinicola
hémoc x2 03/08 X X A. urinae nd nd nd nd A. urinae
hémoc x2 03/08 X X A. urinae nd nd nd nd X
MORTERA 24
ECBU sond 03/08 X X A. urinae nd nd nd nd X
ECBU jet 09/08 X X A. urinae nd nd nd nd A. urinae
POMICHTER 25 ECBU jet A. urinae 0,76 61,8 V7.0 X A. viridans 88 acceptable GPI R04.02 A. sanguinicola
REGODIAT 26 ECBU jet A. urinae 0,75 99,9 V7.0 X A. urinae 99 excellente GPI R04.02 X
S. acidominimus S. acidominimus
VARGUES 27 hémoc nr nr V6.0 nr nr V2.0 A. urinae 99 excellente IDGP V03.01 A. urinae
profil inacceptable profil inacceptable
VATIER 28 ECBU jet X X A. urinae 95 très bonne GPI R04.02 X
VEROLLEMAN 29 ECBU jet X X A. urinae 97 excellente IDGP V03.01 A. urinae
120
Dans notre étude de cas, 27 patients atteints d’infection urinaire à Aerococcus ont
été inclus. 31 ECBU ont été réalisés : 26 ECBU avec urines par jet et 5 ECBU avec
urines par sondage.
32 isolats ont été identifiés :
• 24 Aerococcus urinae ont été identifiés, 19 souches ont été envoyées au CNR-
Strep et toutes les identifications ont été confirmées (autres souches non
conservées).
• 3 Aerococcus « viridans » non confirmés par le CNR-Strep.
• 5 Aerococcus sanguinicola, tous confirmés.
121
Nature du prélèvement
ECBU jet ECBU sondage total
A. urinae 20 62,5% 4 12,5% 24 75%
A. "viridans" 3 9,5% 0 0% 3 9%
A. sanguinicola 4 12,5% 1 3% 5 16%
total 27 84,5% 5 15,5% 32
Tableau 31 : Répartition des espèces d’Aerococcus isolées dans les différents prélèvements urinaires
75% des espèces identifiées sont des Aerococcus urinae, 19% des Aerococcus
« viridans » et 16% des Aerococcus sanguinicola.
Aerococcus a été obtenu en culture pure sur 17 prélèvements (55%) et associé à
d’autres bactéries dans 14 cas (45%).
Tableau 32 : Signes cliniques d’infection urinaire retrouvés chez les patients de l’étude
122
Les facteurs favorisants d’infection urinaire ont été recherchés chez les 29
patients.
Nous les avons classés en facteurs systémiques et facteurs locaux.
Ces facteurs sont indiqués dans le tableau 33 suivant.
nombre de
FACTEURS GENERAUX
patients
maladies neurodégénératives 10
traitements favorisants la rétention urinaire 12
traitement antibiotique dans le mois précédent 1
diabète 3
VIH, immunodépression, cancer 0
FACTEURS LOCAUX
sonde à demeure 4
hyperplasie, adénome prostate 3
reflux ureteral ou sténose 5
incontinence 10
PAS DE SIGNES CLINIQUES 1
PAS DE RENSEIGNEMENTS 1
Tableau 33 : Facteurs favorisants d’infection urinaire retrouvés chez les patients de l’étude
123
Quatorze patients ne possèdent qu’un seul facteur de risque, neuf en ont deux, un
en ont trois associés et trois en ont quatre.
Une patiente avait reçu un traitement antibiotique par nitrofurantoïne trois
semaines auparavant.
Il n’a pas été possible de retrouver des facteurs de risque chez un patient de notre
étude car son dossier était peu renseigné.
Parmi les patients, l’incontinence urinaire (10 patients/29 soit 34,5%), l’existence
de maladies neurodégénératives (34,5%) et la prise d’un traitement médicamenteux
favorisant la rétention urinaire (12 patients/29 soit 41,4%) sont les facteurs
prédisposants les plus fréquemment rencontrés.
Pour savoir laquelle de ces deux techniques est la meilleure pour évaluer le DFG,
elles ont été comparées à la technique de référence : la clairance de l’inuline.
La formule de Cockcroft et Gault sous estime la fonction rénale du sujet âgé et surestime
la fonction rénale du sujet obèse.
La formule du MDRD estime mieux le DFG chez l’homme et celle de la CG chez la
femme.
La formule du MDRD a une performance prédictive supérieure, en particulier chez le
sujet âgé ou obèse. Enfin, si la fonction rénale est altérée, le DFG est toujours mieux
estimé par la formule du MDRD.
Dans le cadre de notre étude, c’est la formule du MDRD qui a été utilisée pour
estimer la fonction rénale des patients, car il était parfois difficile de retrouver le poids
des patients dans les dossiers, et la formule de CG ne pouvait pas être utilisée.
125
Tableau 34 : Evaluation de la fonction rénale des patients ayant eu une infection urinaire à
Aerococcus
14
nombre de patients
12
10
8
6
4
2
0
15-29 30-59 60-79 ≥80
DFG (ml/min/1,73m²)
Figure 38 : Répartition des patients atteints d’infection urinaire en fonction de leur fonction rénale
127
Sur les 31 prélèvements urinaires, Aerococcus a été trouvé en culture pure dans
17 cas et associé à d’autres bactéries dans 14 cas.
Quelle que soit l’espèce d’Aerococcus mise en évidence, les urines étaient en
grande majorité troubles : 25/31 étaient d’aspect légèrement trouble à trouble.
Deux urines étaient d’aspect purulent, l’une d’entres elles présentant en culture une
association de Aerococcus urinae, Aerococcus sanguinicola et Proteus mirabilis.
10
nombre de patients
6 A. urinae
A. sanguinicola
4 A. viridans
2
0
10p5 10p6 10p7 10p8 10p9
UFC/ml
Figure 39 : Répartition des 3 espèces d’Aerococcus isolées en fonction de leur abondance en culture.
La majorité des souches d’Aerococcus urinae a été isolé en culture entre 10p6 et 10p8
UFC/ml (22 souches sur 24).
129
14
12
10 leucocytes >10000
leucocytes 1000-9999
8
leucocytes 100-999
6
leucocytes 10-99
4 leucocytes 1-9
2
0
cult pure associé cult pure associé cult pure associé
Dans toutes les urines, quelle que soit l’espèce identifiée ou le caractère associé
en culture, on retrouve une leucocyturie >10 leucocytes/mm3.
• Aerococcus urinae : en culture pure, la majorité des souches (7 sur 12) est
retrouvée associée à une leucocyturie de 100 à 999 leucocytes/mm3. Lorsque la
souche est associée à d’autres bactéries, la leucocyturie observée est plus
importante.
• Aerococcus sanguinicola associé en culture, la leucocyturie observée est
variable.
pH
4,5 - 5,5 5,6 - 6,5 6,6 - 7,5 7,6 - 8,5
pur 2 4 4 2
A. urinae
associé 1 5 1 4
pur 0 1 0 0
A. sanguinicola
associé 0 1 2 1
A."viridans" pur 0 1 0 2
12
10
nombre de souches
8 A. sanguinicola associé
A. sanguinicola pur
6
A. urinae associé
4 A. urinae pur
2
0
4,5 - 5,5 5,6 - 6,5 6,6 - 7,5 7,6 - 8,5
pH
• Aerococcus urinae : les urines recueillies sont en majorité alcalines pH≥6 (20
urines sur 23). Le caractère associé ou non en culture ne semble pas avoir
d’influence sur l’alcalinité des urines.
Légende : Péni G : pénicilline G / Amox : amoxicilline / Piper : pipéracilline / Genta : gentamycine / Amik : amikacine / Erythro :
β lactamines aminosides macrolides glycopeptides
n° cas bactérie référence
PéniG Amox Piper Genta HC Kana HC Erythro Clinda Pristina Tetra TSU trimétho sulf Rifam Vanco Teico
2 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S nd nd nd S S S
A. "urinae" 15/02/08 ATB strep S S S BN R S nd S S R nd nd S S S
3
BN : résistance bas niveau aminosides (équivalent I du CNR-Strep)
TSU : cotrimoxazole / Sulfa : sulfamides / Rifam : rifampicine / Vanco : vancomycine / Teico : teicoplanine
érythromycine / Clinda : clindamycine / Pristina : pristinamycine / Tétra : tétracycline / Trimétho : triméthoprime /
A. "urinae" 11/08/08 ATB strep S S S BN BN S nd S S R nd nd S S S
4 A. urinae CNR S S S BN BN S S S R R R R S S S
5 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
6 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
8 A. urinae CNR S S S BN BN R R I S R R R S S S
9 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
10 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
11 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
12 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
13 A. urinae CNR S S S BN BN S R S S R R R S S S
14 A. urinae CNR S S S BN BN S R S S R R R S S S
15 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
16 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
17 A. urinae ATB strep S S S BN R R nd S R R nd nd S S S
19 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
132
21 A. urinae CNR S S S BN BN R R I S R R R S S S
22 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R S R S S S
A. urinae hémoc 03/08 CNR S S S BN BN R R S S R R R S S S
24 A. "urinae" ECBU 03/08 CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
A. urinae ECBU 09/08 CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
26 A. "urinae" boite S nd nd BN R S S S S R nd nd S S S
27 A. "urinae" CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
28 A. "urinae" ATB strep S S S BN R S nd S S R nd nd S S S
29 A. urinae CNR S S S BN BN S S S S R R R S S S
3 A. "viridans" ATB strep S S S BN BN S nd S S R nd nd S S S
7 A. "viridans" boite I nd nd BN BN S S S S R nd nd S S S
20 A. viridans ATB strep S S S BN BN R nd S S S nd nd S S S
18 A. "viridans" boite S nd nd R R S S S S R nd nd S S S
1 A. sanguinicola CNR S S S BN BN S S S S S R S S S S
3 A. sanguinicola CNR S S S BN BN S S S S R nd nd S S S
9 A. sanguinicola CNR S S S BN BN S S S S S R S S S S
23 A. sanguinicola CNR S S S BN BN S S S S S I S S S S
25 A. sanguinicola CNR S S S BN BN S S S S S I S S S S
133
• Macrolides : Aerococcus sanguinicola est sensible aux macrolides, ainsi que les
trois souches d’Aerococcus « viridans » testées au laboratoire de Cahors.
Une résistance érythromycine + clindamycine a été retrouvée chez trois souches
d’Aerococcus urinae ainsi qu’une résistance isolée à la clindamycine (deux cas)
ou l’érythromycine (un cas).
Nous avons ensuite recherché si une antibiothérapie avait été instituée suite à la
mise en évidence d’Aerococcus.
traitement ATB
sensibilité évolution: clinique,
n° cas bactérie molécule posologie durée
à l'ATB ECBU de contrôle
2 A. urinae ofloxacine 200mg /j 8j S X
A. "urinae" 02/2008: céftriaxone 1g /j 8j S X
3
A. "urinae" 08/2008: nitrofurantoine nd 8j S X
4 A. urinae nd nd nd X X
5 A. urinae ofloxacine nd nd S X
transféré vers
6 A. urinae nitrofurantoine 50mg x3/j 10j S
structure adaptée
8 A. urinae bactrim forte® 2cp /j 5j R sort du service
9 A. urinae NON X X
10 A. urinae NON X X
11 A. urinae NON X X
12 A. urinae ofloxacine nd nd S X
évolution favorable
13 A. urinae NON X
sort du service
14 A. urinae NON X ECBU ctrl: culture -
ofloxacine +
15 A. urinae nd nd S ECBU ctrl: culture -
amoxicilline + clav
16 A. urinae NON X X
17 A. urinae céfriaxone nd 7j S X
19 A. urinae NON X X
21 A. urinae nd nd nd X X
22 A. urinae NON X X
03/2008: amoxicilline 2g x3/j
A. urinae 10j S
+ ofloxacine 200mg /j X
24 09/2008: tazocilline 4g x3/j
A. urinae puis ceftazidime 2g x2/j nd S
+ amoxicilline 1g x3/j X
évolution favorable
26 A. "urinae" NON X
retour à domicile
évolution favorable
27 A. "urinae" NON X
retour à domicile
ECBU ctrl: culture -
28 A. "urinae" NON X
pour A. urinae
évolution favorable
29 A. urinae amoxicilline + clav 1g x3/j 10j S
retour à domicile
ECBU ctrl: culture -
1 A. sanguinicola amoxicilline 2g /j inconnue S
pour A. urinae
3 A. sanguinicola nitrofurantoïne nd 15j S X
9 A. sanguinicola NON X X
23 A. sanguinicola nd nd nd X X
25 A. sanguinicola oui nd nd X ECBU ctrl: culture -
3 A. "viridans" nitrofurantoïne nd 10j S X
7 A. "viridans" nitrofurantoine 50mg x3/j 6j S X
18 A. "viridans" ofloxacine 200mg x2/j 8j R X
20 A. viridans NON X évolution favorable
Parmi les patients traités, 6 l’ont été par des β lactamines : amoxicilline seule (1
patient), associée à l’acide clavulanique (1 patient) ou à d’autres antibiotiques (3
patients). Un patient a été traité par céphalosporines de 3ème génération.
Quatre patients ont été traités par fluoroquinolones (ofloxacine), deux par des
furanes (nitrofurantoïne) et un par cotrimoxazole.
Le patient qui a eu quatre infections à Aerococcus dans la même année à été traité
successivement par ceftriaxone puis furanes.
Il est très difficile de connaître l’évolution des infections suite à la mise en place
de l’antibiothérapie, car beaucoup de dossiers ne contiennent pas ces renseignements et
les ECBU de contrôle préconisés sont rarement réalisés.
Il aurait été intéressant de pouvoir disposer de ces informations pour évaluer l’efficacité
des traitements mis en place. Notamment pour l’observation n°8, le patient ayant été
traité par une association de molécules à laquelle Aerococcus urinae est résistant.
On constate cependant à partir de nos observations que pour 6 patients,
l’évolution de l’infection a été favorable et/ou la culture de l’ECBU de contrôle
négative, cela même alors qu’ils n’avaient pas été traités par antibiotiques. Cette
observation nous amène à nous demander dans quelle mesure la mise en place d’un
traitement est nécessaire, certaines infections évoluant spontanément de manière
favorable.
2 patients traités ont été transférés dans une autre structure ou sont retournés à
domicile et il n’est donc pas possible de connaître l’évolution de leur infection sous
antibiothérapie.
136
PARTIE IV
DISCUSSION
137
Parmi nos 29 patients inclus, 17 sont des femmes (58,6%) et 12 des hommes
(41,4%).
La moyenne d’âge des patients inclus dans notre étude est de 81,3 ans, le patient le plus
jeune étant un garçon de 2 ans et le plus âgé une femme de 100 ans.
Cette répartition des sexes et des âges est conforme ce qui a été décrit par Christensen et
al. en 1991 [6]: la moyenne d’âge des 63 patients inclus dans son étude était de 73 ans
(patient le plus jeune 3 ans et le plus âgé 97 ans) et il y avait 34 femmes (54%) pour 29
hommes (46%).
Parmi nos patients, cinq ont moins de 70 ans (17,2%), et 82,8% ont plus de 70
ans. Ceci confirme ce qui avait été précédemment décrit [6, 14, 26, 29], que les
infections à Aerococcus atteignent principalement le sujet âgé.
Dans la tranche d’âge des plus de 70 ans, 66,7% des patients sont des femmes.
On ne peut cependant pas conclure à une prédominance féminine car cette répartition
correspond également à la répartition usuelle des sexes à ces âges : 62% de femmes dans
la population de plus de 75 ans (données INSEE au 1er janvier 2010).
o Facteurs médicamenteux :
Douze patients sur les 29 (41,4%) prennent un traitement médicamenteux
responsable de rétention urinaire et/ou d’un globe vésical. Parmi ceux-ci, on
retrouve les neuroleptiques (6 patients sur 12), les antidépresseurs (4 patients sur
12), mais aussi certains antispasmodiques urinaires (2 patients). Les 2 derniers
patients sont traités par midodrine (Gutron®).
C’est via leur effet anti cholinergique, responsable de rétention urinaire chez les
patients, que ces médicaments favorisent la prolifération bactérienne au niveau
vésical et donc la survenue d’infections.
o Antibiothérapie préalable :
Une patiente avait reçu un traitement antibiotique par nitrofurantoïne trois
semaines auparavant. Deux autres patients avaient reçu un traitement antibiotique
préalable mais à deux mois d’intervalle de l’infection. Une antibiothérapie
préalable ne semble pas constituer un facteur de risque dans les infections à
Aerococcus et il n’a notamment pas été retrouvé de traitement préalable au
cotrimoxazole, dont on aurait pu penser qu’il sélectionnerait Aerococcus urinae.
• Les facteurs locaux retrouvés sont les suivants : incontinence (10 patients sur
29 soit 34,5%), sténose et reflux urétéral (5 patients soit 17,3%), adénome ou
hyperplasie de la prostate (3 patients soit 10%), et le sondage à demeure (4
patients soit 13,8%).
On retrouve également chez de nombreux patients des antécédents qui peuvent
favoriser la survenue d’infections urinaires comme une tuberculose rénale (1
patient), un antécédent d’adénocarcinome de la prostate (3 patients), de cancer de
la vessie (1 patient) ou de tumeur rénale (1 patient). On retrouve également chez
un patient la notion d’une opération pour sténose de l’urètre antérieur.
Ces facteurs de risque généraux et locaux sont ceux retrouvés dans les études de
la littérature [12, 14, 26-29, 32], et également retrouvés pour les infections urinaires à
autres bactéries plus fréquentes comme Escherichia coli par exemple.
Il semble que les infections urinaires à Aerococcus surviennent de façon quasi exclusive
sur une population spécifique caractérisée par : sujets âgés, avec un état général altéré,
souvent en hospitalisation de longue durée, et présentant des facteurs de risque généraux
et locaux d’infections urinaires.
Deux cas de bactériémie à Aerococcus urinae ont également été mis en évidence
au CH de Cahors, sans évolution vers une endocardite infectieuse.
Le premier patient avait été admis au SAU en juin 2001 pour suspicion
d’accident ischémique transitoire et hyperthermie. Suite à un pic thermique à 39,1°C
avec tremblements, une hémoculture avait été prélevée, puis le patient se plaignant de
brulures mictionnelles un ECBU avait été réalisé. On ne retrouvait pas chez ce patient de
facteurs de risque particuliers si ce n’est une incontinence. Aerococcus avait été mis en
évidence dans l’hémoculture, mais on ne retrouvait pas de foyer urinaire, l’ECBU
140
Enfin, un cas d’Aerococcus viridans a été mis en évidence dans un pus profond
sur un « pied diabétique » (ostéite du séquestre osseux du 5ème rayon du pied droit).
141
Nous avons identifié 29 isolats d’Aerococcus urinae, dont 21 ont été confirmés
par le CNR-Strep, 4 isolats d’Aerococcus « viridans », dont un seul a pu être confirmé et
5 isolats d’Aerococcus sanguinicola, tous confirmés par le CNR-Strep.
Ce nombre de cas à Aerococcus sanguinicola identifiés est remarquable au regard du
faible nombre de cas décrits dans la littérature mondiale (une quinzaine seulement en
mars 2008).
• Concernant Aerococcus urinae, les 29 isolats ont été correctement identifiés par
le Vitek2, quelle que soit sa version (11 identifications par la nouvelle version du
logiciel, 9 par l’ancienne et 9 non déterminées).
Cinq indentifications ont été réalisées à l’aide de galerie API rapidID 32strep
dans leur ancienne version (V2.0). L’espèce identifiée a été dans les 5 cas
Streptococcus acidominimus, avec un « profil inacceptable » dans 4 cas et un
pourcentage d’identification à 83,9% mais un indice de typicité T à seulement
0,44 dans le dernier cas.
Enfin sept identifications ont été réalisées avec des galeries API 20 strep, 5 dans
leur ancienne version (V6.0) et 2 avec la nouvelle (V7.0).
Les identifications obtenues avec l’ancienne version ont été Streptococcus
acidominimus, avec des « profil inacceptable » dans 2 cas ou des indices T
faibles. Cette erreur d’identification avait déjà été notée par Facklam en 2003
[44].
143
Une souche a été correctement identifiée par la nouvelle version de la galerie (T=
0,75 et %id= 99,9%) et une a été faussement identifiée en Aerococcus viridans
(T= 0,77 et %id= 99,2%).
Aerococcus urinae étant absent des bases de données des anciennes versions des
galeries API, l’identification correcte aurait du être « profil inacceptable ».
Ceci a été le cas dans 6 cas sur 10. Pour les 4 cas restants, une identification a été
rendue avec un indice T faible.
Une identification rendue avec un pourcentage d’identification élevé mais un
indice de typicité T faible doit donc nous alerter lors de notre pratique
quotidienne au laboratoire et nous conduire à réaliser des tests complémentaires
afin de pouvoir conclure.
Respectivement, les versions 7.0 et 3.0 des galeries API 20strep et rapidID
32strep ont intégré Aerococcus urinae dans leurs bases de données et au regard
de l’observation n°26, on peut penser que ces nouvelles versions sont plus
performantes pour l’identification de cette espèce.
Une souche, non confirmée par le CNR-Strep, a été identifiée comme Aerococcus
viridans par la API 20strep V6.0 (T= 0,84 et %id= 99,7%) et la API rapidID
32strep V2.0 (T= 0,43 et %id= 99,8). Au regard du faible index de typicité rendu
par la deuxième galerie, il aurait été intéressant de pouvoir faire confirmer cette
souche.
En 2003, Facklam [44] avait déjà testé des souches d’Aerococcus viridans (dont
la souche type) avec différents systèmes commerciaux d’identification
comprenant cette espèce dans leur base de données. Il avait mis en évidence que
tous n’étaient pas capable d’identifier correctement les souches. La version du
Vitek utilisée à ce moment là n’avait identifié aucune des trois souches testées,
l’API 20strep (version disponible en 2003) avait rendu des identifications
correctes pour les 3 souches et l’API rapidID 32strep (version disponible en
2003) également.
Depuis, des mises à jour ont été faites sur les dernières versions de ces 3
systèmes et au regard de l’observation n°20, les identifications rendues semblent
être meilleures ; affirmation cependant à nuancer vu le faible nombre de souches
testées et confirmées par le CNR-Strep.
• Aerococcus sanguinicola étant absent des bases de données de tous les systèmes
commerciaux, son identification correcte devrait être « profil inacceptable » ou
« non identifiée ».
Parmi nos 5 souches identifiées Aerococcus sanguinicola par le CNR-Strep,
toutes ont été identifiées comme Aerococcus viridans par les cartes GPI du
Vitek2, quelle que soit sa version, avec des profils d’identification allant de
acceptable à excellent.
145
Deux souches ont été testées au laboratoire sur la galerie API rapidID 32strep,
une avec la version 2.0 et une avec la version 3.0.
Dans les 2 cas, l’identification obtenue a été Aerococcus viridans, avec un index
de typicité faible (respectivement 0,31 et 0,32) et un pourcentage d’identification
élevé (99,8% et 99,9%). Ceci nous montrant encore une fois la prudence à avoir
au laboratoire devant des résultats d’identification obtenus avec un indice de
typicité T faible et ce malgré un pourcentage d’identification élevé.
Enfin, 3 souches ont été identifiées à l’aide de galeries API 20strep (2 avec la
V7.0 et 1 avec la V6.0).
La version V6.0 a rendue comme identification Aerococcus viridans (T= 0,69) et
la nouvelle version Aerococcus urinae (T= 0,69 et 0,76). Dans les 2 cas, les
identifications étaient donc erronées mais en plus l’indice de typicité obtenu était
assez haut. Sur les 10 souches testées par Facklam [44], 8 avaient été identifiées
comme Aerococcus viridans, avec des identifications allant de faible à bonne.
Encore une fois, une mise à jour des bases de données est nécessaire afin
d’améliorer les identifications obtenues pour cette espèce.
146
Au cours de notre étude, 31 ECBU ont retrouvé Aerococcus, en culture pure dans
17 cas et associés à d’autres bactéries dans 14 cas.
Quelle que soit l’espèce mise en évidence, les urines étaient troubles dans leur grande
majorité : 25 prélèvements sur 31 étaient de légèrement trouble à trouble.
Deux urines étaient d’aspect purulent.
De façon plus intéressante, on constate une modification de la valeur du pH des
urines en présence des différentes espèces d’Aerococcus.
En effet, 27 urines sur les 31 étudiées avaient un pH alcalin ≥ 6. L’association
d’Aerococcus à d’autres espèces bactériennes ne semble pas avoir d’importance, puisque
dans 14 cas sur 27, la culture était pure, et elle était associée dans 13 cas sur 27.
Cette observation est intéressante à noter car elle pourrait être utile dans la pratique
quotidienne de la microbiologie au laboratoire. En effet, on sait que les espèces
d’Aerococcus poussent mal sur les milieux utilisés en pratique quotidienne au laboratoire
pour l’ensemencement des urines. La mise en évidence d’une urine de pH ≥ 6 lors de la
réalisation de la cytochimie urinaire doit nous conduire à ensemencer une gélose
enrichie au sang, en supplément des milieux d’orientation utilisés en routine.
En effet les espèces d’Aerococcus poussent mieux sur ce type de milieu et leur mise en
évidence pourrait ainsi être facilitée.
4.1.Aerococcus urinae
21 souches ont été testées au CNR-Strep, les autres par galerie ATB strep (4) ou par
antibiogramme en boite MH (1) au laboratoire du CH de Cahors.
• Tétracyclines :
2 souches sur 26 ont été trouvées résistantes aux tétracyclines, ce qui témoigne
d’une bonne sensibilité de l’espèce à cette famille d’antibiotiques.
Une bonne sensibilité (55 souches sur 56 avec une CMI ≤ 2 mg/l) avait déjà été
décrite par Skov en 2001 [40], sous réserve d’une possible influence de
l’incubation sous CO2 qui pourrait conduire à surestimer la sensibilité. Murray en
2008 [31] trouvait une CMI à 1mg/l pour la souche testée.
• Choix d’un traitement adapté : il semble donc aux vues de ces résultats, que les
options thérapeutiques des infections peu sévères à Aerococcus urinae
comprennent l’utilisation des pénicillines.
150
Dans les cas plus sévères, comme les endocardites par exemple, l’association à la
gentamicine permettra une synergie d’action bénéfique pour la prise en charge du
patient. Enfin dans les cas l’allergie à la pénicilline, l’utilisation de vancomycine
associée à la gentamicine représente la meilleure alternative.
Cependant, ces observations ne reposent que sur des données in vitro, très peu
d’expériences in vitro ayant eu lieu, et il faut donc ne pas les considérer comme
des consensus officiels et nuancer en fonction de l’évolution de chaque patient.
4.2.Aerococcus viridans
• Aminosides : 3 souches ont été trouvées avec une résistance de bas niveau à la
gentamicine et la kanamycine, et une avait une résistance de plus haut niveau à
ces antibiotiques. Comme pour Aerococcus urinae, il est décrit pour Aerococcus
viridans une résistance naturelle de bas niveau aux aminosides [12, 17, 21].
Mais ceux-ci, en cas de résistance de bas niveau, peuvent toujours être utilisés en
association aux β lactamines pour une action synergique.
4.3.Aerococcus sanguinicola
Parmi nos cinq souches testées, toutes étaient sensibles aux β lactamines, aux
macrolides, à la tétracycline, à la rifampicine et aux glycopeptides. On retrouve une
résistance de bas niveau aux aminosides testés (gentamicine et kanamycine).
153
Facklam en 2003 [44] avait également retrouvé une sensibilité des 15 souches testées à
la pénicilline (CMI=0,03mg/L), l’amoxicilline (CMI=0,03mg/l), les C3G
(CMI≤0,25mg/l), l’érythromycine(CMI≤0,25mg/l) , la tétracycline (CMI=2mg/l), la
rifampicine (CMI=2mg/l), la vancomycine (CMI≤0,25mg/l) et le linezolide
(CMI=2mg/l).
Il mettait également en évidence une résistance à la ciprofloxacine (9 souches sensibles
CMI=1 mg/l, 1 souche intermédiaire CMI=2 mg/l et 5 souches résistantes CMI=4 mg/l)
et la lévofloxacine (9 souches sensibles CMI=1 mg/l, 1 souche intermédiaire CMI=4
mg/l et 5 souches résistantes CMI≥8 mg/l), mais pas la sparfloxacine (15 souches
sensibles CMI=1 mg/l) généralement considérée comme plus active sur les cocci gram
positif. Ces molécules n’ont pas été testées sur nos cinq souches.
8
nombre de patients
0
3-10 11-50 51-100 > 100
CRP mg/l
Il faut noter que parmi les valeurs de CRP les plus élevées obtenues, 3 (84, 156 et 253
mg/l) étaient associées à un contexte infectieux supplémentaire (broncho pneumopathie
ou post opératoire immédiat).
Il ne semble pas y avoir de relation entre la valeur de la CRP et l’association ou
non d’Aerococcus à d’autres uropathogènes en culture.
De même, le nombre sanguin de globules blancs est variable chez les patients :
seuls 9 d’entre eux sur 21 a une leucocytémie supérieure à 10000/mm3, sans influence
apparente de l’association à un autre germe au niveau urinaire.
Les infections à Aerococcus ne semblent donc pas être associées à un syndrome
inflammatoire élevé. Ceci pouvant être relié à l’âge moyen des patients atteints, dont le
système immunitaire peut être diminué physiologiquement et au fait que l’infection est
le plus souvent locale.
156
Enfin, chez deux de nos patients, Aerococcus urinae a été identifié à différentes
reprises dans des ECBU prélevés à plusieurs mois d’intervalle, ce qui confirme sa
capacité à générer des infections urinaires persistantes ou récidivantes [27].
Il ne faut donc pas négliger la présence d’Aerococcus au niveau urinaire, ceci d’autant
plus que, comme le décrit Christensen en 1996 [29], on retrouve un point de départ
urinaire chez la plupart des patients atteints d’affections plus graves à Aerocoocus. Dans
notre cas, ce point d’appel n’a pu être mis en évidence que dans un cas sur les deux
bactériémies. On est cependant en droit de penser qu’une infection urinaire négligée à
Aerococcus peut conduire dans certains cas à une bactériémie et éventuellement une
endocardite chez des patients possédant des facteurs de risque, principalement urinaire
ou cardiaque.
CONCLUSION
Nous avons vu dans ce travail que, même si des progrès ont déjà été réalisés en
matière d’identification des espèces d’Aerococcus, il est encore nécessaire d’améliorer
celle-ci via le développement des bases de données des galeries et automates, en
attendant de nouvelles méthodes de type MALDI-TOF.
Ce développement ne peut passer que par une collaboration avec les laboratoires de
microbiologie hospitaliers, qui en envoyant les souches et les profils obtenus lors des
identifications en routine, alimentent et augmentent les bases de données fournisseur.
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