Les Techniques Chromatographiques

I- Généralités
I-1- Introduction

La chromatographie
- est un procédé de séparation d’un mélange homogène.
- c’est une méthode d’analyse de 1e plan pour
l’identification et la quantification des composés d’une
phase gazeuse ou liquide (solide?!!)
Dans toutes les méthodes chromato, les séparations
sont fondées sur la distribution des solutés entre 2 phases:
- une phase stationnaire, établit des liaisons +/- fortes
avec les molécules à séparer;
- une phase mobile (ou éluant), décroche les molécules
retenues sur la phase stationnaire. -2-

PHASE MOBILE
(gaz ou liquide)

Sortie
Entrée
du soluté
du soluté
PHASE STATIONNAIRE
(solide ou liquide immobile)

Schéma d’un système

chromatographe φm échantillon

Syst. d’injection
φst

Syst. de séparation

Syst. de détection

Chromatogramme
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-1-
 L’opération de partage des constituants à séparer entre
les 2φ se trouve répétée automatiquement un très grand
nombre de fois pour chaque espèce (A, B ….) et de façon
continue permettant l’exploitation de ≠ce même minime du
coefficient de distribution des espèces entre les 2 φ.

 Dans le mouvement des espèces à séparer, alors que

la φm tend à les entrainer, la φst tend à les retenir d’autant
plus fortement que les interactions mises en jeu sont plus
intenses, nombreuses et plus énergétiques :

les analytes ont pour la plus part des vitesses de

déplacement ≠ tes et < à celle de φm ; et la possibilité de
séparation d’où la notion de rétention.
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 La φ st peut être déposé soit :

 dans une colonne et la φ percole celle-ci à débit

m
constant : c’est la chromatographie sur colonne. (1)

 en couche mince sur un plan (plaque de verre, film

plastique, papier…) et la φm se déplace par capillarité:
c’est la chromatographie planaire. (2)

-2-
-3-
-4-
c’est la chromatographie
d’adsorption

Adsorption Absorption

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-5-
 I-3- Intérêts de la chromatographie

L’efficacité de cette technique analytique de

séparation dépasse de très loin celle de tous les autres
procédés.

Possibilité d’étudier des quantités infimes

d’échantillon, de ≈ du ng.

résultats reproductibles.

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II- Classification des techniques chromatographiques

Ces méthodes regroupent des techniques très variées

qui peuvent être classées selon 3 modalités différentes :

 Classification selon la nature physique des φ.

 Classification selon le phénomène mis en œuvre.
 Classification selon le procédé opératoire.

19

-6-
II- 1- Classification selon la nature physique des phases

• La φm est un fluide, donc soit liquide soit un gaz (soit un

fluide supercritique).
• La φst est soit un solide soit un liquide.

La combinaison de ces possibilités conduit à :

la chromatographie liquide –liquide (LLC)
la chromatographie liquide – solide (LSC); Tswett
la chromatographie gaz – solide (GSC ou GC)
la chromatographie gaz – liquide (GLC ou GC)
la cromatographie supercritique (SPC)
20

On distingue:
 La chromatographie en phase gazeuse (CPG): la φ est
m
un gaz (gaz vecteur), et les solutés sont introduits dans la
colonne :
 directement s’il s’agit d’un éch. gazeux.
 ou après volatilisation dans la chambre d’injection
chauffée s’il s’agit d’un éch. liq (après dil. ou dissolution
dans un solvant adéquat).

 La chromatographie en phase liq (CPL) ; la φ m est :

 un solvant
 Un mélange “ complexe de solvants de grande pureté.

la φm est introduite dans la colonne à un débit donné

par un syst. de pompage.
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 La chromatographie en φ supercritique (CPS) : ): la φ m

est un fluide supercritique (cond. > à Pc et Tc, pt. où les
frontière entre l’état gaz et l’état liq n’existe plus.

II- 2- Classification selon le phénomène

chromatographique
 la nature
de la φst utilisée
 la structure

On distingue :
 La chromato. d’adsorption : φst solide (LSC ou GSC)

rattaché à la chromato. d’affinité → les propriétés

d’adsp. sont spécifique/ famille de composés. 22

-7-
 La chromato. de partage : φst liquide non miscible
avec la φm (liq ou gaz) → (LLC ou GLC)

 Coef. de partage

 La chromato. d’échange d’ion (IEC) : φst porte des

groupements foctionnels acides ou basiques :
 séparer des composés ionisés
(ou ionisable)

R-X et R-X sont des phases stationnaires.

A - : un groupement anionique
C + : un groupement cationique.
M et B : les constituants du mélange. 23

-8-
 Quel facteur est-il privilégié dans les ≠ principes
chromatographiques afin de séparer les composés constituants
un mélange?

 La chromat. de partage : la solubilité dans un solvant liq.

 La chromato. d’exclusion : la taille et la forme.
 La chromato. d’adsp : la polarité.
 La chromato d’échange d’ions : la charge électrique.
 La chromato. d’affinité:  de structures particulières
ce

permettant d’établir des liaisons spécifiques ou la présence

de groupements d’atomes formant des sites particuliers
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II- 3- Classification selon les procédés utilisés

Selon le conditionnement de la φst, on distingue

• La chromatographie sur colonne


• La chromatographie sur papier

• La chromatographie sur couche mince

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-9-
 Selon les modalités de migration de la φm, on distingue:

 La chromato. par développement: les solutés restent sur

la φst après séparation.

 La chromato. d’élution : les substances à séparer sont

entrainés hors de la φst .

Conclusion
 les méthodes chromatographiques sont diverses mais ils
ont des principes communs : distribution du soluté entre 2 φ.
 le renouvellement continue de la φm remet en cause cet
équilibre et entraine une succession d’autres  .
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III-4- La relation des principales techniques

chromatographiques avec la polarité des φ
φst
Chromato

ionique
ionique

polaire Chromato liq

Chromato
gazeuse

Chromato
liq φ
non polaire inversée

φm
non polaire polaire ionique
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III-5- Catalogue des techniques

a-
Chromatographie

en φ gazeuse en φ liq

sur colonne de surface

φ inversées
normale CP
ou φ greffées CCM

échange paires échange

adsp partage
d’ions d’ions de ligands exclusion
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