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Université Mohamed Khider de Biskra

Faculté des sciences exactes et sciences de la


nature et de la vie.
Département de sciences de la
nature et de la vie
Filière biologie et physiologie végétal

Synthèse de Compilation
Spécialité : Biologie et physiologie végétale
Groupe : 01

Présenté et soutenu par :


Guettaf Ghofrane Zohra
Abbassi Ikram

Le: 19/03/2024

Titre de thème
Rôle des hormones végétales dans la
régulation du développement des
organes floraux.

Année universitaire : 2023-2024


Sommaire :

Liste des figures

Abréviation

I- Chapitre 1

Introduction……………………………………………………………………….……………1

Matériels et méthodes………………………………………………….………………………3

Résultat…………………………………………………………………………………………5

Discussion……………………………………………………………………………………...6

Conclusion……………………………………………………………………………………..8

Résumer……………………………………………………………………………………..…9

Référence……………………………………………………………………………………..10
Liste des figures

Figure1…………………………………………………………………………………………5

Figure2…………………………………………………………………………………………5
Figure3…………………………………………………………………………………………8
Abréviation
AAI : acide asetic Indole-3
ABA : acide abscisic
ADN : Acide désoxyribonucléique
AG : acide gebberllic
ARN : Acide ribonucléique
DNASE : Désoxyribonucléase
RT_PCR : transcription inversée/ réaction en chaîne par polymérase.
CSIR : conseil de la recherche scientifique et industrielle.
IHBT : institut de technologie des bioressources himalayennes
Chapitre 1
Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

Introduction

Pendant l'induction et le développement de la fleur, ont suggéré que l'initiation de la


fleur pourrait être supprimée par les gibbérellines, tandis qu'une autre étude menée par Hu et
al. Le safran (Crocus sativus L.) est une monocotylédone appartenant à la plante. (2030) ont
suggéré des accumulations plus élevées de GA et de la famille des Iridacées et poussent
comme une plante vivace sans tige en Iran, en Espagne, une régulation négative de GA2ox,
un inhibiteur de la voie de GA, suggérant un rôle positif de GA dans la promotion de la
floraison. Ainsi, davantage d’études sont nécessaires pour suggérer le rôle exact de l’AG dans
la régulation de la floraison du safran. L’ABA est une autre hormone végétale importante dont
le rôle est suggéré dans la floraison. Diverses études utilisant des mutants ABA suggèrent un
effet négatif sur la floraison chez Arabidopsis (Wang et al., 2013 ; She et al. 2016). Bien que
le mode d'action exact de AllA dans la régulation de la floraison ne soit pas connu, l'ABA
contrôle la diminution de la transcription du gène Locus T (FT) via GIGANTEA (GI),
CONSTANS (CO) et SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS 1 (SOCI)
(Riboni et al 2014 Martignages et al., 2020). Un rôle négatif de l'ABA sur l'induction de la
floraison a été suggéré chez le safran (Hu et al. 2020 Henan-Morata et al., 2021).

Grèce, Inde, Italie et Népal. En raison de sa composition chromosomique triploïde, cette


plante se reproduit de manière asexuée en se nourrissant de bulbes et produit une progéniture
stérile (Esmaeill ei al., 2011). L’élément le plus précieux du safran est la fleur, qui possède six
tépales, trois étamines et trois stigmates. La stigmatisation est utilisée comme épice, colorant
et agent aromatisant dans les industries agroalimentaires et cosmétiques (Gohari et al, 2013).
La floraison du safran est très complexe et régulée par divers facteurs externes et internes. La
floraison est l'étape la plus importante du développement de la plante de safran, qui est
directement liée au rendement et à la productivité des cultures. Des facteurs externes,
principalement la température, ont été suggérés comme étant un régulateur majeur contrôlant
la floraison du safran. Malgré la température, d'autres réseaux de régulation contrôlent
également la floraison, notamment les phytohormones. Les hormones végétales sont un
facteur important qui aide à transmettre des signaux de l'intérieur ou de l'extérieur de la plante
et contribue au processus de floraison (Conti, 2017). Compte tenu de l'importance de la
floraison dans la production de safran, plusieurs études ont été menées pour comprendre le

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Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

processus, la majorité certains d'entre eux visaient à comprendre l'influence de la température


sur la floraison du safran mais seulement quelques-uns sur l'effet des hormones (Molina et al.,
2005ıç Molina et al., 2003b, Henau Morata et al., 2021 ; Juvid et al. 2022), L’influence des
hormones sur le processus de floraison du safran est en partie explorée. Par conséquent,
démêler le réseau hormonal dans l’induction et la formation des fleurs de safran présente un
grand intérêt en ce qui concerne son utilisation pour une floraison maximisée.

et vield. Hormones végétales, acide gibbérellique (GA), acide abscissique (ABA),

la cytokinine, l'éthylène et l'auxine sont connus pour réguler une série de processus de
développement tels que la germination des graines, la croissance des plantes, la sénescence, la
floraison, etc. Il y a toujours eu un dilemme sur le rôle exact des hormones végétales dans la
régulation du processus de floraison, par exemple, GA a été positivement corrélé à Bowering
dans plusieurs espèces végétales comme Arabidopsis, le tabac, le radis, etc. (Gallegu Gitullo
et al. 2007 ; Porri et al., 2012 ; Jung et al., 2030 ; Füknzawa et al. 2021),

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Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

Matériels et méthodes :
Matériel végétal:
Des bulbes de safran (Crocus sativus L) cultivés dans le domaine du CSIR-IHBT, ont
été utilisés pour l'étude. Les bulbes ont été plantés en octobre 2020 et récoltés en avril 2021.
Après la récolte, les bulbes ont été séchés à l'air et triés en fonction de leur poids . Des cormes
d’un poids compris entre 10 et 12 g, considérés comme compétents pour fleurir, ont été
utilisés pour l’expérimentation. Au total, 20 bulbes par traitement ont été utilisés pour chaque
stade de développement. Différents tissus de la plante de safran, à savoir les feuilles, les
racines, les bulbes et les tissus floraux (stigmates, étamines et tépales), ont également été
collectés séparément pour l'expression des gènes uf spécifiques aux tissus.
Traitement hormonal :
Pour comprendre le rôle des hormones impliquées dans l'induction de la floraison, des
bulbes de 10 à 12 g ont été traités avec une solution hormonale d'IAA (05 mg/l ou 2,85 µm),
d'ABA (0,5 mg/1 ou 1,89 µm), du GA (0,5 mg/l ou 1,44 µm) et de la kinétine (0,5 mg/l ou
2,32 µm) ont été préparés dans de l'eau distillée, et les bulbes ont été plongés dans une
solution puis infiltrés pendant 2 h sous vide. L'échantillon témoin a été immergé uniquement
dans de l'eau distillée pendant la même durée; les bulbes ont été essuyés avec un tissu, séchés,
puis conservés à 25°C pour une induction florale dans l'obscurité pendant 90 jours. Des
échantillons ont été collectés pour une analyse morphologique et de l'expression génique des
bourgeons apicaux après 45 jours (étape 1) et 90 jours (étape 2) de traitement. 3 répétitions
biologiques pour chaqun ont été utilisées pour l'étude. Les échantillons ont été récoltés.
congelé dans l'azote liquide et conservé -80°C jusqu'à utilisation ultérieure. Pour étudier le
rôle des hormones dans la formation des fleurs, des bulbes compétents en floraison (10-12 g)
qui ont été stockés à 25°C pendant 3 mois dans une chambre de croissance (juin-août) et qui
contiennent déjà une initiation florale ont été utilisés . expérience. Début septembre, après des
traitements hormonaux exogènes (IAA, ABA, GA et kinétine), les bulbes ont été conservés à
15/20°C pendant la nuit et le jour

respectivement, avec un cycle lumière/obscurité de 8/16 h pour l’émergence des fleurs dans la
chambre de croissance. Des échantillons ont été collectés à 45 jours d'intervalle à la mi-
octobre (stade III) et à la fin novembre (stade IV), lorsque les fleurs émergeaient et étaient
visibles. Analyse histochimique et morphologique: Les tissus des bourgeons apicaux à 45
jours du stade de développement des gros bulbes ont été fixés rapidement dans une solution

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Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

de paraformaldéhyde à 4 %. Ils ont été déshydratés avec une série d'éthanol (10 % à 100 %).
Et ils ont été colorés avec 0,05 % d’éosine et remplacés progressivement par Histo-Clear.
Ensuite, ils ont été incorporés dans de la paraffine et coupés en tranches à une épaisseur de 7 à
10 µm avec le système rotatif automatique Thermo Scientific HM 355S.

microtome. Les échantillons coupés ont été photographiés au microscope optique Leica
DM2000 (Javelle et al., 2011). Sélection de gènes pour l'étude :
Afin d'étudier les gènes impliqués dans la régulation de la floraison, nous avons sélectionné
des gènes précédemment rapportés soit dans le safran, soit dans d'autres plantes. En bref, les
gènes intégrateurs floraux comprenant les FT, TFL1, LFY et le répresseur floral SVP ainsi
que les gènes homéotiques floraux (APATELLA, PISTILLATA, SEPATELLA, DROOPING
LEAF, etc.) ont été obtenus à partir d'une base de données interne et en ligne et utilisé pour
l’étude.La liste de gènes étudiés, leur source et les références utilisées dans le présent travail
ont été répertoriés dans( le tableau supplémentaire S1).

Extraction d 'ARN ET PRÉPARATION D'ADN:


L'ARN total a été extrait des tissus apicaux à l'aide du kit Spectrum Plant Total RNA
(Sigma-Aldrich) conformément aux instructions du fabricant. Des portions d'ARN à 10 mg
ont été traitées avec de la DNase I sans RNase (Thermo Fisher), et des portions de 2 mg ont
ensuite été utilisées dans la préparation d'ADNc. L'ADNc a été préparé en utilisant un kit de
synthèse d'ADNc verso (Thermo Fisher) conformément aux instructions du fabricant.
L'analyse de l'expression a été réalisée par RT-PCR.
RT-PCR et conditions d'amplification:
Une PCR en temps réel (RT-PCR) a été réalisée pour quantifier l'expression de gènes à
l'aide d'amorces spécifiques à un gène (tableau supplémentaire S2). Les réactions ont été
réalisées à l’aide de 3 répétitions biologiques et de 3 répétitions techniques sur la machine de
PCR en temps réel Applied Biosystems. Les données de réaction analysées en temps réel
étaient la moyenne des triples biologiques et techniques. Les conditions de PCR étaient les
suivantes : 2 min à 50°C, 95°C pendant 3 min, suivi de 40 cycles de 15 s à 95°C, 15 s à 55°C
et 45 s à 72°C. La tubuline a été utilisée comme contrôle interne.

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Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

Resultats :
pour étudier l'effet et le rôle des hormones sur l'induction des fleurs de safran Les
follicules dormants ont été traités avec différentes hormones (GA, ABA, IAA, et kinétine) ont
été analysés pour l'induction florale et les résultats suivants ont été obtenus :
1. Les bulbes de safran traités avec de l'AG et de l'ABA ont montré une induction florale
inhibée. ( Figure 1A ).
2. L'IAA et la kinétine ont favorisé l'induction florale et la croissance des bourgeons apicaux.
(Figure 1A) .
3. L'ABA et l'IAA ont affecté négativement la formation des fleurs, provoquant une atrophie
florale. (Figure 2) .
4. L'AG et la kinétine ont accéléré la formation des fleurs, mais n'ont pas montré de différence
majeure dans le développement des fleurs par rapport au contrôle.( Figure 2 ).
5. Il est intéressant de noter que I'AG a inhibé l'induction florale mais n'a pas affecté la
formation florale.( Figure 2).

FIGURE 1 .Caractéristiques morphologiques FIGURE 2.Modifications morphologiques lors de la


du bourgeon apical du safran lors des phases formation des fleurs du safran après traitements
hormonaux. Les bulbes déjà fleuris début septembre ont
d'induction florale après les traitements
été traités avec différentes hormones et échantillonnés
hormonaux après 45 jours
(mi_octobre) et 90 jours (fin novembre).

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Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

Discussion

La floraison est un processus de développement important qui détermine la productivité des


plantes. Le processus de floraison chez les plantes est contrôlé par divers facteurs
environnementaux tels que la lumière, la photopériode, la vernalisation et les hormones .
Parmi eux, les hormones végétales sont l'un des facteurs importants qui transmettent des
signaux de l'intérieur ou de l'extérieur de la plante et jouent un rôle crucial dans la régulation
du processus de floraison . Les hormones sont présentes en quantités infimes, et il est difficile
de déterminer leur contenu endogène et leur corrélation dans la régulation d'un processus. Par
conséquent, les traitements exogènes sont couramment utilisés pour étudier leur effet sur
plusieurs processus de dévellopemet végétal.
Dans notre étude, nous avons constaté que les hormones affectent de manière différentielle
l'induction dans le safran.ABA inhibe l'induction et la formation des fleurs:

L'ABA agit de manière antagoniste à l'AG dans divers processus de développement, y


compris la floraison (Vanstraelen et Benková, 2012 ; Liu et Hou, 2018). Il a un effet négatif
sur l'initiation des fleurs chez Arabidopsis (Wang et al., 2013). Cependant, l'ABA favorise la
floraison chez Litchi chinensis (Cui et al., 2013). Il est démontré que la suppression de la
floraison par l'ABA est médiée par l'expression de gènes de type FT, SVP et FLC
(Martignago et al., 2020). L'effet de l'ABA sur les géophytes, y compris le safran, n'a pas été
étudié ; la plupart des études portent plutôt sur la sénescence des feuilles. Comme la floraison
du safran.
L'AG est la classe d'hormones qui est la mieux documentée dans le processus de floraison
de l'Arabidopsis. Il améliore le processus de floraison de la plante ArabidopsisMutasa-
Göttgens et Hedden, 2009), mais, d'autre part, limite la floraison de plusieurs espèces vivaces
(Boss et Thomas, 2002 ; Garmendia et al., 2019). GA régule la floraison chez Arabidopsis en
favorisant l'expression des gènes LFY et FT (Moon et al., 2003 ; King et al., 2008). Cette
étude a révélé que GA régule les processus d'induction et de développement des fleurs du
safran de différentes manières. GA réprime le processus d'initiation des fleurs et favorise le
processus de développement des fleurs dans le safran. Nos résultats sont conformes aux
conclusions de Renau-Morata et al. (2021), qui ont également prédit par quantification interne
de l'AG que l'AG pourrait inhiber l'induction florale dans le safran. Contrairement à cela

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Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

cependant, l'étude de Hu et al. (2020) a suggéré un rôle positif de l'AG dans la promotion de
l'induction florale dans le safran.
Les Auxines (IAA) sont un autre groupe de phytohormones bien connues qui régulent
divers aspects de la croissance et du développement des plantes (William et al., 2006 ;
Spaepen et al., 2007 ; Spaepen et Vanderleyden, 2011). Il a été constaté que l'IAA joue un
rôle crucial dans le développement du gynoecium de l'Arabidopsis (Nemhauser et al., 2000).
Notre étude montre que l'IAA est capable d'initier la floraison en activant les gènes
d'induction de la floraison FT3 et LFY et en supprimant les gènes suppresseurs de fleurs
TFL1-2 du saffron . Mais il ya un autre résultats qui montré une tenuer en auxine AIA3
relativement faible (0,5-1,4 mg/kg) dans tous les organes aériens du faidherbia albida. Ces
teneurs avoisinent celles obtenues par Vassal (2001) sur Acacia radiana (1,8mg/kg).
Cependant, Alexandre et al. (2005) obtinrent des teneurs en auxine plus élevées dans les
feuilles d’Acacia senegal (4 mg/kg).

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Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

Conclusion

Les résultats de l'étude ont été résumés à la figure 3. En conclusion, l'ABA


négativement et la cytokinine régulent positivement à la fois l'induction de la floraison et la
formation de fleurs, tandis que l'AG et l'IAA ont un effet inverse sur les différents stades du
développement. Ces hormones régulent l'expression des gènes, principalement des gènes
intégrateurs floraux (FT et LFY) et répresseurs (SVP et TFL1-2), pendant l'induction des
fleurs. De plus, pendant la formation des fleurs, ils régulent l'expression des gènes
homéotiques floraux (PISTILLATA, SEPETALLA et DL).De plus, les résultats peuvent être
utilisés pour induire une floraison in vitro dans le safran. De plus, la façon dont ces hormones
parlent au cours du processus est un domaine à explorer qui approfondira les connaissances de
la régulation de la floraison.
Ce qui suit a également été trouvé à la fin d’une autre étude sur Faidherbia albida a
mis en évidence une synthèse hormonale variable dans les organes aériens pendant la saison
des pluies, avec des niveaux d'hormones et une évolution différents dans chaque organe. Cela
suggère que les hormones peuvent avoir un impact sur le comportement des plantes, avec la
possibilité d'obtenir plus d'informations grâce à l'échantillonnage de la saison sèche.

FIGURE 3 Résumé de l'effet des hormones sur le


processus de floraison, la régulation des gènes et leur
effet à différents stades de développement de la floraison
du safran. Brièvement, L'ABA régule négativement à la
fois l'induction et la formation des fleurs, tandis que la
kinétine favorise les deux.

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Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

:‫ملخص‬
‫ اكتشفنا أنها تلعب دورا هاما‬،)‫كجزء من دراسة الهرمونات النباتية على تطور ونمو النباتات (األعضاء الزهرية للنباتات‬
‫ تخضع‬.‫ نفس الهرمون بتركيزات مختلفة له تأثيرات فسيولوجية عديدة على األنسجة أو األعضاء النباتية‬.‫في تعديل النمو‬
‫ الهرمونات هي معدالت النمو التي تزيد أو‬.‫النباتات لظواهر النمو والتمايز والتطور التي تؤثر عليها خالل دورة حياتها‬
. ‫تقلل من نمو النبات‬
Résumer :
Dans le cadre de l'étude des hormones végétales sur le développement et la croissance des
plantes (organes floraux des plantes), nous avons découvert que ces dernières jouent un rôle
important dans la modification de la croissance. Une même hormone à différentes
concentrations a plusieurs effets physiologiques sur un tissu ou un organe végétal. Les plantes
subissent des phénomènes de croissance, de différenciation et de développement qui les
affectent au cours de leur cycle de vie. Les hormones sont des taux de croissance qui
augmentent ou diminuent le développement du plante .
Summary:
As part of the study of plant hormones on the development and growth of plants (floral organs
of plants), we discovered that they play an important role in modifying growth. The same
hormone at different concentrations has several physiological effects on a tissue or plant
organ. Plants undergo growth, differentiation and development phenomena which affect them
during their life cycle. Hormones are growth rates that increase or decrease plant development

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Rôle des hormones végétales dans la régulation du développement des organes floraux.

Réferances :

Article 1:
Les hormones régulent le processus de floraison du safran différemment selon le stade de
développement.
Auteurs :
Deepika Singh¹, Sahiba Sharma¹, Joel Jose-Santhi¹², Diksha Kalia¹² et Rajesh Kumar Singh¹²*
Instituts :
Division de biotechnologie, Conseil de la recherche scientifique et industrielle (CSIR) -
Institut de technologie des bioressources de l'Himalaya, Palampur, HP, Inde, Académie de
recherche scientifique et innovante (ACSIR), Ghaziabad, Inde.

Article 2 :
Teneurs en hormones dans les tissus des organes aériens de Faidherbia albida (Del) A.
Chevalier en saison pluvieuse .

Auteurs:
Sékeyoba Léopold NANEMA*, Rasmata NANA,Badoua BADIEL, Bibata KONATE,Memti
Mberdoum NGUINAMBAYE et Zoumbiéssé TAMINI .

Institus :
Laboratoire Biosciences, Equipe d’Ecophysiologie Végétale, Université de Ouagadougou, 03
BP 7021Ouagadougou 03, Burkina Faso.

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