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Cellule de Nageotte
Mode dutilisation

1. Description de la cellule de Nageotte

Caractristiques de la cellule de Nageotte

Quadrillage total constitu de 40 bandes

Les dimensions d'une bande :
L : 10 mm
l : 0,25 mm
H : 0,50 mm
Chaque bande a un volume de 1,25 l

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2. Les principales utilisations de la cellule de Nageotte

La cellule de Nageotte sert essentiellement au comptage des lments figurs contenus dans
les liquides biologiques dont la densit cellulaire est habituellement faible : LCR, urine

3. Manipulations qui prcdent le comptage

3.1. Avant de charger la cellule

.De la mme faon que lon procde avec un hmatimtre (Thoma ou Malassez) les
bords de la cellule (l o reposeront les bords de la lamelle) doivent tre humects avec
un tout petit peu de liquide afin dassurer une bonne adhsion de la lamelle : la ma-

nire la plus efficace et la plus pratique consiste le faire laide dun doigt dont lextrmit a
t trs lgrement humidifi avec de leau ou de la salive.

.Placer une lamelle plane sur la cellule puis appuyer lgrement pour assurer sa
bonne adhsion entre la lamelle et les bords de la cellule
.Poser la cellule sur une surface bien horizontale (par exemple la platine du microscope).

3.2. Introduire le liquide analyser dans la cellule

.Homogniser la suspension cellulaire analyser

.Lintroduire laide dune pipette Pasteur (ou quivalent) en la laissant pntrer par
capillarit : la totalit de la surface dlimite par les rigoles doit tre recouverte par
la suspension et la suspension ne doit pas dborder dans les rigoles

.Le dlai dattente avant de procder au comptage ne doit tre :

.ni trop court (environ 10 min. sont ncessaires pour que les cellules compter puissent
sdimenter suffisamment)
.ni trop long (pour viter un dbut de desschement de la prparation).

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Si on craint un desschement : placer la prparation lhorizontale lintrieur dune

chambre humide

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4.Compter les lments cellulaires. Procder au calcul de leur nombre par l

Voir la technique Liquide cphalo-rachidien. Examen cytologique

4.1. Avant de faire le comptage

4.1.1. faire une observation lobjectif x10 non seulement pour reprer le quadrillage
mais aussi pour vrifier que les cellules compter sont rparties de faon homogne ; si lhomognit est juge insuffisante il faut tout recommencer,
cest--dire charger une nouvelle cellule de Nageotte partir de la suspension
rhomognise.

4.1.2. passer lobjectif x40 pour effectuer le comptage

4.2. Le comptage des lments

Il est recommand de compter les lments (leucocytes, hmaties, autres lments
ventuels) contenus dans 4 bandes au moins, cest--dire les lments contenus
dans 1,25 x 4 = 5 l
Remarques :
4.2.1. Il peut tre ncessaire de diluer le liquide si le manipulateur considre que les lments sont trop nombreux pour pouvoir raliser un comptage prcis.
Attention : ne pas oublier le facteur de dilution au moment du calcul.

4.2.2. Un nombre lev dhmaties peut gner le comptage des leucocytes. On peut contourner la difficult de la faon suivante :
.dtruire les hmaties en diluant au 1/2 le liquide analyser dans une solution
dacide actique 0,5 pour cent (0,5 ml dacide actique pur dans 100 ml deau) puis
procder au comptage des leucocytes

Attention : ne pas oublier le facteur de dilution au 1/2 au moment de calculer le nombre de

leucocytes.

4.2.3. Le comptage des lments qui chevauchent le ct de 2 bandes contigus :

ne compter que ceux qui chevauchent lun des 2 cts : par exemple le ct droit

4.3. Le calcul du nombre dlments

Soit :
V le volume de comptage (V = 5 l si on a compt les lments dans 4 bandes)
n le nombre dlments (hmaties ou leucocytes) contenus dans ce volume V
d la dilution du liquide introduit dans la cellule
Le nombre N dlments (hmaties ou leucocytes) par l de liquide se calcule de la

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faon suivante :
N = (n / V) x d
1e exemple :
.liquide non dilu : d = 1

n = 72

2e exemple :
.liquide dilu au donc d = 4

V = 5 l (volume de 4 bandes)

n = 550

N = 14/l

V = 5 l (volume de 4 bandes)

N = 440/l

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5. Nettoyage aprs usage : cellule et lamelle plane

.Immersion pendant 10 15 minutes dans un bain deau de javel dilu

.Rinage leau du robinet puis leau distille
.Essuyage : linge fin ou papier absorbant non pelucheux (genre Sopalin ) sans frotter
.Laisser scher lair libre durant quelques minutes
.Ranger labri des poussires.

Fin.

Le 20 juin 2008

Joseph Cuziat