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Electrophorese PDF
Electrophorese PDF
1. Dfinition:
Llectrophorse est une mthode de sparation de particules charges
lectriquement par migration diffrentielle sous laction dun champ lectrique.
2. Du champ lectrique:
E= v/
3. Courants liquidiens.
3.1 Courants dlectro-endosmose.
Dans les conditions exprimentales, le support se charge ngativement, une
couche mobile de charge positive se forme dans le solvant, au contact du support
et entrane globalement la phase liquide vers la cathode (-).
Schma 4
Ce courant acclre ou ralentit la migration suivant quelles migrent vers la
cathode ou vers lanode. Il peut tre plus puissant que les forces lectriques:
des protines charges ngativement peuvent globalement migrer vers la
cathode.
Constitu dun mtal (Ag) en contact avec une solution sature dun sel trs peu
soluble de
ce mtal (AgCl) contenant un lectrolyte anions communs au sel
(KCl).
Schma 4
Le potentiel dlectrode= 0.
Les potentiels entre lectrode et solution= 0 puisque la mobilit de K et Cl sont
identiques.
2.3 Rsultats.
Convention:
Vm= Vint - Vext < 0
Pour que les potentiels dactions apparaissent en positif (ngativation de la face
externe).
Mesure: ordre de grandeur:
Schma 5
Globule rouge: -10mV.
Fibre musculaire: -80 -100mV.
Fibre nerveuse: -70mV.
Argument contre:
-Le calcul de V pour K donne 5mV dcart.
+
Pompe sodium-potassium:
Schma 8
ATPase membranaire utilise lnergie libre de lhydrolyse dune molcule dATP
pour transporter:
-3 ions Na du milieu intra-cellulaire vers lextrieur.
+
Il existe un flux passif compens par la pompe sodium-potassium.
Il ny a pas dtat dquilibre mais rgime permanent quilibre les flux.
Rgime permanent consomme de lnergie.
Rq: Diffrents canaux ioniques de la membrane:
-Pompe sodium-potassium.
-Canaux ioniques slectifs lectro-sensible.
Schma 12
La rsistance membranaire tant plus faible que la rsistance axoplasmique, le
courant est progressivement vid de laxoplasme (1mm).
Schma 13
Entre les lectrodes exploratrices, il existe une caractristique de ce que lon
appelle llectrotonus physique.
Des lignes de courants existent.
Ces courants qui traversent la membrane modifient son potentiel. Sous lanode
(+), la valeur absolue du potentiel de repos est augmente; cest linverse sous la
cathode (-).
Il existe un point o dans cet espace, le potentiel de la membrane nest pas
modifi:
Schma 14
La dpolarisation est plus faible sous la cathode que lhyperpolarisation sous
lanode (chute de potentiel plus grande).
Le point o le potentiel nest pas modifi est plus proche de la cathode.
On a tenu compte de la rsistance non linaire de la membrane.
Ceci est expliqu par la possibilit que le courant appliqu par les lectrodes ne
va pas directement dune lectrode lautre mais quil peut traverser la
membrane dont la rsistance nest ni nulle ni infinie.
R= f(G)
Avec G la conductance pour les ions.
maintenant ln( [ X ]e / [ X ]i ) en -ln ( [ X ]i / [ X ]e ) et galement ln en log (ln= 2,3.log ),
e
LECTROPHYSIOLOGIE CELLULAIRE
2. Le potentiel daction. Propagation.
1. Gnralits:
Modifications rapides propages du potentiel transmembranaire conscutives
une excitation supra-liminaire.
Son existence caractrise les cellules dites excitables, intrt pour les cellules
du tissus nerveux et musculaire.
Schma 17
1. Dpolarisation.
La stimulation provoque louverture des canaux sodium. Les ions Na
+
2. Repolarisation.
Les canaux sodium se ferment donc le sodium ne rentre plus.
Les canaux potassium souvrent: les ions K sortent pour compenser lentre du
+
Schma 21
Chronaxie (1909-Lapicque): dure dune onde rectangulaire de courant dune
intensit de deux rhobase:
-notion arbitraire.
Rq: Les variations dexcitabilit vont conditionner le sens de propagation des PA.
Seule la pointe se propage; prpotentiel
et postpotentiel sont des phnomnes
locaux.
4. Propagation.
Caractristiques essentielles de la pointe, qui apparat selon le mode tout ou
rien.
4.3 Clrit.
Dpend du diamtre (plus le diamtre est grand et plus la clrit est
importante), de prsence de myline (si myline, la vitesse est plus grande).
But partir:
-de la mesure des potentiels en diffrents points.
-de lanalyse des lments physiques, lectronique qui explore la cration de ces
potentiels partir dun ensemble de courants locaux.
Principe de la mesure:
Schma 28
lectrode de surface.
Oesophagien.
Endocavitaire.
2. Electrocardiographie.
Excitabilit, conduction, automatisme, contractilit.
2.1 Rappels.
On distingue:
Tissu nodal: Noeud sinusal auriculaire (Keith et Flack). Noeud
auriculoventriculaire (Tawara). Le tronc et les branches du faisceau de His, le
rseau Purkinje.
Conditionne lactivit du coeur.
laboration et conduction de linflux.
Le tissu myocardique dont la fonction essentielle est la contraction.
Vp= (K/r )
2 S . U
K
Le potentiel cr par un feuillet est identique au potentiel cr par un diple de
moment S perpendiculaire au feuillet orient de la face ngative vers la face
positive.
grande distance, un feuillet est assimilable un diple.
3.3 Cas dune fibre au repos ou totalement excite.
Schma 34
Chaque feuillet est assimilable un diple.
Ces deux diples sont gaux en module, ils ont mme direction et sont de sens
opposs.
Le potentiel en P est nul.
Il en est de mme pour une fibre totalement active (dpolarise).
grande distance, une fibre en voie dactivation est assimilable un diple au
front dactivation orient de la zone active vers la zone de repos.
En 1, le point P voit sapprocher un diple avec le ple plus en premier, mais il voit
aussi le ple moins du deuxime diple. Mais, le diple dactivation est plus
proche donc le potentiel total est positif.
En 2, P voit les ples moins des deux diples dont le potentiel cr en P est
ngatif.
En 3, P voit sloigner le ple plus du diple de restauration, donc le potentiel est
positif.
Schma 38
1e hypothse:
Si le point de mesure est plac loin du coeur, lensemble du coeur pourra tre
considr comme un diple.
Diple dont le moment est variable dans le temps selon ltat dactivation.
Macroscopiquement.
Lactivation dbute au niveau du noeud sinusal tissu musculaire auriculaire.
Pour les ventricules, elle dbute au niveau du noeud de Tawara, se propage dans
le septum par le tronc et par les branches
du faisceau de His lensemble des
ventricules.
Le moment quivalent varie au cours du cycle cardiaque (module, direction, sens).
2e hypothse:
Lorigine du vecteur diple est fixe au cours du cycle cardiaque= centre
lectrique du coeur.
Pour le ventricule:
Lextrmit du vecteur diple quivalent dcrit une courbe
Vectocardiogramme.
La position moyenne axe lectrique.
Schma 39
3e hypothse:
Les pointes R, L et F (drivations des membres) sont considres comme les
sommets dun triangle quilatral dont le centre de gravit est le centre
lectrique du coeur.
Schma 40
R: paule droite.
L: paule gauche.
F: Abdomen.
Consquences:
Schma 41
Soit U R , U L et U F les trois vecteurs unitaires:
UR
+ UL + UF = 0
V R,L,F = K M
. U
R,L ,F
V R -V L + V F =
K M
( UR + UL
U
+ F
)= 0
chaque instant, la somme gomtrique des potentiels est nulle (0: centre
potentiel de rfrence).
chaque
instant, la valeur du potentiel
en R, L, F est gale la projection du
UR
vecteur diple sur les axes , UL , UF .
Schma
45
U
UL R = 2 U R cos 30= 2( 3 /2)= 3
D1= 3 .K. M
. U
R,L
Lutilisation
utilise selon Golberger (facteur 3/2).
de aV R , est
5. lectrocardiogramme.
5.1 Formegnrale.
Schma 47
P: Activation auriculaire.
QRS: Complexe dactivation ventriculaire.
T: Onde T restauration des ventricules.
Rq: Pas de restauration auriculaire.
Rgle:
Les 6 drivations reprsentent les variations au cours du temps dans projection
du vecteur M
sur les 6 axes de Bailey.
Schma 48
lectrocardiogramme:
Drivation frontale= projection du courant (quivalent)
Schma 49
Amplitude maximale de variation en D2.
Symtrie en V L axe lectrique 60.
Schma 50
Schma51
Ondes > 0:
Le front dactivation sapproche.
Rq: Squence de dpolarisation.
Schma 52
Schma 53
Phase 1: Le vecteur sloigne de la drivation 2.
Phase 2: Cette tendance est ensuite inverse.
Phase 3: Le vecteur se dplace en direction de D2.
puis phase 4: Ce mouvement sinverse.
Phase 5: Mouvement dloignement de 2.
Phase 6: Ce mouvement sinverse.
Thorie Einthoven.
Difficilement applicable.
Elle reste vraie sur le plan quantitatif.
La transition lectrique: cest le changement de polarit du complexe QRS dans
le plan horizontal (plan form par les drivations prcordiales (V1 V6)).