Ce présent rapport des travaux pratiques sur étude des glucides simple renferme

deux parties de notre manipulation : Analyse qualitative des sucres et Etude de

microdosage du glucose par l’Acide Dinitrosalicylique.
Les glucides sont essentiels au métabolisme humain, ils constituent une source
majeure d’énergie. Lorsqu’ils sont digérés, les glucides se décomposent en
glucose, qui est ensuite utilisé par les cellules pour produire de l’énergie via la
glycolyse. De plus, les glucides jouent un rôle crucial dans le fonctionnement du
cerveau, en fournissant du glucose nécessaire à son activité.
La première partie s’articule autour de l’étude quantitative : Microdosage du
glucose par l’Acide Dinitrosalicylique. Son principe met à profil le pouvoir
réducteur du glucose pour former un complexe coloré. Elle consiste à
l’établissement de la courbe d’étalonnage et au dosage des solutions inconnues
X1, X2, et du jus de coco. Cette approche permet une mesure approfondie de la
quantité du glucose présente dans l’échantillon analysé.
La deuxième parie est focalisé sur l’analyse qualitative des sucres dont les
méthodes basées sur le pouvoir réducteur des glucides et réactions de colorations
caractéristique. Cette manipulation a pour objectif de nous permettre
d’approfondir nos compréhensions sur les propriétés, les réactions et les méthodes
d’analyse des sucres.
Nous allons présenter les matériels et méthodes ; les résultats ; interprétations de
ces résultats de nos travaux pratiques et une conclusion sera tirée.

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I. ETUDES QUANTITATIVE : Microdosage du glucose par l’acide
Dinitrosalicylique.
1- MATERIELS ET SOLUTIONS

 Matériels
 Tubes à essai
 Pipettes automatiques
 Béchers
 Bain-marie
 Spectrophotométrie et ses cuves

 solutions

 Solution de glucose à 2/l

 Solution de DNS
 De l’eau distillée
 Solution de jus de coco
 Deux solutions inconnues X1 et X2
 Le réactif de DNS(pour 100ml)
o 1g d’acide 3.5-dinitrosalicylique
o 20ml de solution de NaOH à 2,0N
o 30g de Tartrate double de sodium-potassium
o eau distillée q.s.p. 100ml
 Eau distillée
 Solution à doser

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 2- Méthode
Préparation de la gamme d’étalonnage
A partir de la solution de glucose de concentration 2g/l ou 0.2%, on prépare dans
des tubes à essai 1ml des solutions aux dilutions indiquées dans le tableau.
Tubes Témoin 1/5 1/10 1/20 1/25 1/50
Glucose (ml) 0 0,2 0 0,1 0 0,05 0,04 0,02
Eau distillée 1 0,8 0 0,9 0 0,95 0,96 0,98
(ml)
Volume total 1 1 1 1 1 1
(ml)
Concentration 0 0,40 0,2 0 0,10 0,08 0,04
(g/l)
Glucose mère [𝐶] = 2𝑔/𝑙 ;
𝐶𝑖𝑉𝑖 = 𝐶𝑓𝑉𝑓 avec 𝑉𝑓 = 𝑉𝑖 + 𝑉𝑒 ⇒ 𝑉𝑒 = 𝑉𝑓 − 𝑉𝑖
𝑉𝑖 = 0.20
𝐶𝑖𝑉𝑖
Et 𝐶𝑓 = exemple pour 𝑇1/5 {𝑉𝑒 = 1 − 0.20 = 0.80
0.20𝑥2
𝑉𝑓
𝐶𝑓 = = 0.4
1

Dans cette préparation a été ajouter trois tubes à essai portant X1 ; X2 et J

dans lesquels nous avons ajouté 1 ml des solutions inconnues X1 ; X2 et du
jus de coco préalablement obtenu par défécation.

Dosage

Dans l’ensemble de la préparation, on a ajouté 1ml du réactif DNS à chaque

tube. Nous avons agité l’ensemble des tubes et porter les tous à ébullition
(100°C) pendant 5minutes. La réaction est arrêtée dans un bain d’eau
glacée. On a ajouté 10ml d’eau distillée à chaque tube, puis agiter. La
densité optique(D.O) est lue à 540nm après 20 minutes environ.

3- RESULTATS
Les résultats sont consignés dans le tableau ci-dessous
Tubes T0 T1/50 T1/25 T1/20 T1/10 T1/5 X1 X2 J
D.O 0 0,016 0,037 0,05 0,267 0,380 0,127 0,098 0,165
Cf 0 0,40 0,20 0,10 0,08 0.04
D.O : densité optique de chaque tube
Cf : Concentration finale

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Courbe étalon : (Voir papier millimétré)

Courbe d’étalonnage

Détermination des concentrations X1 X2 et jus de coco

On a déterminé graphiquement la concentration des solutions X1 X2 et du jus de
coco dilué au 1/10.

𝑋1 = 0,255 𝑔/𝑙 ; 𝑋2 = 0,1995 𝑔/𝑙 ; 𝐽𝑐 (1/10) = 0,33𝑔/𝑙

𝐶𝑖 𝑉𝑖 = 𝐶𝑓 𝑉𝑓 Donc 𝐶𝑖 = 𝐶𝑓 𝑉𝑓 /𝑉𝑖
𝐶𝑖 (𝑗𝑢𝑠) = 0,12 ∗ 10 ∗ 10−3 / 10−3 = 3,3𝑔/𝑙
Tubes X1 X2 Jc
Concentration (g/l) 0,255 0,1995 3,3

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 4- INTERPRETATION
Plus le glucose est concentré, plus la solution est colorée et plus la DO de la
solution est grand. A chaud en milieu alcalin, il Ya réduction de l’acide -3,5-
dinitrosalicyclique est réduit en acide -3- amino-5-Nitrosalicyclique qui. Qui
joue le rôle d’oxydant, le glucose étant réducteur.

 Réaction de réduction de l’acide -3,5- dinitrosalicyclique en acide -3-

amino-5-Nitrosalicyclique

 Le glucose, quant à lui, est oxydé en divers produits d’oxydation :

Glucose → produit oxydant + ne-.
L’intensité de coloration est proportionnelle à la concentration du
glucose.

II. ANALYSE QUALITATIVE DES SUCRES

1- Méthodes basées sur le pouvoir réducteur des glucides.
a) Réaction du Miroir d’Argent

 Matériels et réactifs
 Tube à essai
 5 ml de la solution de nitrate d’argent à 5%
 1 ml d’Ammoniaque à 50%
 3m de Solution du glucose à 0.2%
 Bain-marie

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  Méthode
Dans un tube à essai très propre, on met 5 ml d’une solution de nitrate d’argent à
5% et on ajoute avec précaution 0.5m d’ammoniaque à 50% ; il apparait un
précipité. On ajouter 0.5ml de l’ammoniaque pour faire disparaitre le précipité.
Dans ce dernier, on ajoute 3ml de solution de glucose à 0.2% et on chauffe
légèrement le tube.
 Résultats et interprétation
Avant chauffage, la solution est incolore. Apres quelques minutes de chauffage,
il se dépose sur la paroi une couche d’argent métallique provenant de la réduction
par le glucose de l’ion Ag+ du nitrate en métal Ag.
Le réactif de Tollens est une complexe diamine argent de formule[𝐴𝑔(𝑁𝐻3 )2 ]+ .
Lorsqu’on ajoute du glucose (dextrose), l’argent oxyde le glucose en acide
carboxylique. En même temps, l’ion argent est réduit en métal argent suivant la
réaction suivante :

𝐶6 𝐻12 𝑂6 + 3𝑂𝐻− 𝐶6 𝐻12 𝑂7 + 2𝐻2 𝑂 + 2𝑒 −

2[𝐴𝑔(𝑁𝐻3 )2 ]+ + 2𝑒 − 2𝐴𝑔 + 4 𝑁𝐻3
Chaud
𝐶6 𝐻12 𝑂6 + 2[𝐴𝑔(𝑁𝐻3 )2 ]+ + 3𝑂𝐻 − 𝐶6 𝐻12 𝑂7 + 2𝐻2 𝑂 + 2𝐴𝑔 + 4 𝑁𝐻3

Glucose Nitrate d’argent ammoniacal Gluconate dépôt d’argent métallique

b) Réaction avec la Liqueur de Fehling

 Matériels et réactifs
 Tube à essai
 2m de solution de sulfate cuivrique à 2,5%
 2m de solution de tartrate sodico-potassique à 10%
 2ml de solution de soude à 5%
 5ml de solution de glucose à 0.2%
 Bain-marie
 Méthode
Dans un tube à essai, on met 2ml de solution de sulfate cuivrique à 2,5% et on
ajoute 2ml de solution à 10% de tartrate sodico-potassique en suite 2ml de solution
de soude à 5% puis 5ml de solution de glucose à 0.2%. Le tout est porté à
l’ébullition.

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  Résultat et interprétation
Il apparait d’abord un précipité jaune-rougeâtre, devenant ensuite rouge. C’est un
précipité d’oxyde cuivrique Cu2O provenant de la réduction par le glucose de
l’hydroxyde cuivrique Cu(OH)2 maintenu en solution par tartrate sodico-
potassique.
Au cours de la réaction entre la liqueur de Fehling et le glucose, les ions cuivrique
II oxyde le glucose pour donner le gluconate libérant ainsi des électrons qui sont
captés par le cuivre qui se réduit en cuivre I. ce dernier se combine à l’oxygène
ionisé pour donner un précipité insoluble d’oxyde de cuivre I (Cu2O) de couleur rouge brique
selon l’équation :

Glucose + 3OH Gluconate + 2H2O + 2e- I

2Cu2+ +2OH- + 2e- Cu2O + H2O II

Glucose + 2Cu2+ + 5OH- Gluconate + Cu2O + 3H2O

Précipité rouge brique

C- Réduction de l’acide Picrique.

 Matériel et réactifs
 Tube à essai
 2ml du glucose à 0.2%
 2ml de solution alcaline de picrate de Na
 0.5 ml de solution saturée de carbonate de Na
 Méthode
Dans un tube à essai, on introduit Tube à essai ; 2ml du glucose à 0.2% ;
2ml de solution alcaline de picrate de Na ; 0.5 ml de solution saturée de
carbonate de Na. Le tout est mis dans un bain-marie boulant quelques
minutes.
 Résultats et interprétation
Nous avons obtenu une coloration rouge brune intense
Le glucose en solution alcaline et sous l’effet de la chaleur s’oxyde en gluconate
libérant ainsi les protons et les électrons. Ces électrons sont ensuite captés par
l’acide picrique qui est réduit en acide picramique qui donne à la solution une
couleur rouge brune selon l’équation suivante :
𝐴𝑐𝑖𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑟𝑖𝑞𝑢𝑒 + 𝐶6 𝐻12 𝑂6 𝐴𝑐𝑖𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑟𝑎𝑚𝑖𝑞𝑢𝑒 + 𝐶6 𝐻12 𝑂7
Glucose Acide gluconique

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 2- Réactions de coloration caractéristiques : Réaction de Molisch
 Protocole expérimentale

Nous avons ajouté à 5ml de solution de glucose à 0,2% 1ml de solution alcoolique
d’ α-naphtol à 1%. On a versé ensuite cette solution (glucose + s. alcoolique d’α-
naphtol) dans un tube contenant 2ml d’acide sulfurique pur lentement.

 Résultats et interprétation

Il se forme un anneau vert entre le liquide marron et blanc

La réaction entre l’acide sulfurique et l’eau est une réaction exothermique. En

milieu acide concentré et à chaud, le glucose se transforme en dérivé
hydroxyméthylfurfural par cyclisation et déshydratation. Ce dérivé se condense
avec deux molécules d’α-naphtol pour donner un anneau de pourpre de couleur
violette qui apparait à l’interface des deux liquides.
 Réactions

Suite à ces réaction, on note que pour les réactions (réaction du miroir
d’argent, de la liqueur de Fehling et réduction de l’acide picrique)
mettant en évidence les propriétés réductrices du glucose, les tubes se
chauffent après chauffage au bain-marie donc elles sont sont endothermique.
Tandis que pour les réactions de coloration (réaction de Molisch), le tube se
chauffe après une légère agitation sans être mit au bain-marie donc elle est
exothermique.

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 CONCLUSION
Au terme de notre manipulation nous confirmons que le glucose est un ose
réducteur et nous sommes capables de mettre en évidence cela. De plus on a
déterminé la concentration en glucose des solutions inconnues X1, X2 et du jus
de coco. Le jus de coco est très concentré en glucose vu le nombre de fois qu’on
l’a dilué. Par l’exemple du jus de coco nous allons contrôler notre alimentation en
teneur de glucide pour éviter certaines maladies comme le diabète, obésité. La
technique du dosage du glucose est utile dans les industries agro-alimentaires pour
contrôler la concentration du glucose dans leur production. Nous comprenons
aussi que le glucose est utile dans l’extraction d’argent métallique à partir du
nitrate d’argent ammoniacal. Ces résultats contribuent à approfondir notre
compréhension des glucides simples, notamment le glucose dans le contexte de la
biochimie et de la physiologie.